CAPÍTULO 8 - Desarrollo de Linfocitos T

Universidad Científica del Sur Ciencias de la Salud
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KUBY. Inmunología, 8e
CAPÍTULO 8: Desarrollo de linfocitos T
OBJETIVOS DE APRENDIZAJE
OBJETIVOS DE APRENDIZAJE
Después de revisar este capítulo, será capaz de:
1. Resumir los eventos principales que transforman una célula madre hematopoyética en un linfocito T naïve maduro.
2. Describir los microambientes del timo donde sucede cada etapa del desarrollo de los linfocitos T.
3. Describir los cambios en la expresión de CD4, CD8 y TCR que ocurren durante el desarrollo de los linfocitos T.
4. Definir y describir la importancia y la base de las selecciones positiva y negativa. Articular la relación entre la selección positiva y la restricción de
MHC, así como la relación entre la selección negativa y la tolerancia central.
5. Describir el modelo de afinidad de la selección y reconocer que hay otras perspectivas sobre cómo se logra las selecciones positiva y negativa.
6. Reconocer la variedad de los linfocitos T que se generan en el timo y articular una comprensión básica de los eventos que conducen al
desarrollo de cada linaje, particularmente los linajes CD4+, CD8+ y TREG.
Timocitos en la corteza del timo. [CNRI/Science Source.]
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CAPÍTULO 8: Desarrollo de linfocitos T, Page 1 / 40
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desarrollo de cada linaje, particularmente los linajes CD4+, CD8+ y TREG.
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Timocitos en la corteza del timo. [CNRI/Science Source.]
Los organismos están expuestos a un universo de patógenos notablemente diverso y generan un conjunto de variadas estrategias para involucrarlos.
Cada uno de los millones de linfocitos T y B que circulan en el cuerpo expresa un receptor de antígeno novedoso y único. Los linfocitos T generan
estos receptores a través de reordenamientos del ADN a medida que maduran en el timo, un órgano en nuestra cavidad torácica que es necesario y
está dedicado al desarrollo de los linfocitos T a partir de los precursores que llegan desde la médula ósea. Las células que entran en el timo aún no se
han comprometido a convertirse en linfocitos y no expresan receptores específicos del antígeno. Sin embargo, las células que abandonan el timo son
linfocitos T maduros funcionales que expresan receptores de linfocitos T (TCR, Tcell receptors) únicos y específicos, que son tanto tolerantes a lo
propio como restringidos a MCH propio.
TÉRMINOS CLAVE
Timocito
Corteza tímica
Médula tímica
Timocitos doble negativos (DN)
Receptor de células preT (preTCR)
Timocitos doble positivos (DP)
Restricción MHC
Autotolerancia
Selección positiva
Selección negativa
Apoptosis
está dedicado al desarrollo de los linfocitos T a partir de los precursores que llegan desde la médula ósea. Las células que entran en el timo aún no se
han comprometido a convertirse en linfocitos y no expresan receptores específicos del antígeno. Sin embargo, las células que abandonan el timo son
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linfocitos T maduros funcionales que expresan receptores de linfocitos T (TCR, Tcell receptors) únicos y específicos, que son tanto tolerantes a lo
propio como restringidos a MCH propio.
TÉRMINOS CLAVE
Timocito
Corteza tímica
Médula tímica
Timocitos doble negativos (DN)
Receptor de células preT (preTCR)
Timocitos doble positivos (DP)
Restricción MHC
Autotolerancia
Selección positiva
Selección negativa
Apoptosis
Modelo de afinidad de selección
Timocitos positivos simples (SP)
Células epiteliales del timo cortical (cTEC)
Células epiteliales tímicas medulares (mTEC)
Compromiso de linaje
Linfocitos T Reguladores (linfocitos TREG)
¿Cómo generamos un grupo tan diverso de linfocitos T que también son autorrestringidos y autotolerantes? Esta pregunta ha intrigado a los
inmunólogos durante décadas e inspiró y requirió ingenio experimental. Las innovaciones han dado sus frutos y, aunque nuestra comprensión aún
no es exhaustiva, ahora tenemos una apreciación fundamental de las notables estrategias empleadas por el timo, el cunero de linfocitos T inmaduros
o timocitos, para producir un repertorio de linfocito T funcional, seguro y útil.
En este capítulo describimos estas estrategias, dividiendo nuestra discusión sobre el desarrollo de los linfocitos T en dos fases: desarrollo temprano
de los timocitos, durante el cual se genera una población de TCR+ de linfocitos T inmaduros increíblemente diversa, y eventos de selección que
dependen de las interacciones de los TCR para dar forma a esta población, de modo que sólo las células restringidas a lo propio y que sean tolerantes
a lo propio dejarán el timo para poblar la periferia (figura de panorama general 8–1). El desarrollo temprano de los timocitos es, en gran medida,
independiente del receptor de los linfocitos T, y los transporta a través de varias etapas no comprometidas de CD4− CD8− (doble negativo, DN) a los
linfocitos T comprometidos, etapas de linfocitos T que expresan el receptor, CD4+ CD8+ (doblepositivo, DP). Los eventos específicos en esta fase
temprana incluyen los siguientes:
1. Compromiso de los precursores hematopoyéticos al linaje de linfocitos T,
2. Iniciación de los reordenamientos del gen que codifica para receptor de antígeno, y
3. Expansión de las células que han reorganizado con éxito uno de sus genes que codifican para receptor de linfocitos T (un proceso llamado
selección β).
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DE PANORAMA GENERAL
1. Compromiso de los precursores hematopoyéticos al linaje de linfocitos T, Universidad Científica del Sur Ciencias de la Salud
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2. Iniciación de los reordenamientos del gen que codifica para receptor de antígeno, y
3. Expansión de las células que han reorganizado con éxito uno de sus genes que codifican para receptor de linfocitos T (un proceso llamado
selección β).
FIGURA 8–1
DE PANORAMA GENERAL
Desarrollo de linfocitos T en el timo
Los precursores de los linfocitos T de la médula ósea viajan al timo a través del torrente sanguíneo, se desarrollan hasta linfocitos T maduros y se
exportan a la periferia, donde pueden experimentar activación y diferenciación inducidas por el antígeno en células efectoras y células de memoria.
Cada etapa del desarrollo ocurre en un microambiente específico del timo y se caracteriza por eventos intracelulares específicos y marcadores
distintivos de la superficie celular. a) El timo es un órgano rodeado por una cápsula fibrosa que encierra múltiples lóbulos, cada uno de los cuales está
separado en dos regiones principales: la corteza externa y la médula interna. b) Los timocitos entran al timo a través de los vasos sanguíneos en la
unión corticomedular y luego viajan hacia la corteza, proliferando primero en la región justo debajo de la cápsula (la corteza subcapsular). A medida
que maduran, emigran de la corteza a la médula y finalmente salen a través de los vasos en la unión corticomedular. c) Este esquema resume la
progresión del desarrollo con más detalle. Los timocitos más inmaduros, CD4− CD8− (doble negativo, DN) pasan a través de varias etapas (DN1DN4),
durante las cuales se comprometen con el linaje de los linfocitos T y comienzan a reorganizar los loci génicos del receptor de linfocitos T (TCR, Tcell
receptor). Aquellos que reorganizan con éxito su cadena β del TCR proliferan, inician la reorganización de las cadenas α del TCR y se convierten en
timocitos CD4+ CD8+ (doble positivo, DP), que dominan el timo. Los timocitos DP experimentan las selecciones negativa y positiva en la corteza tímica.
Los timocitos seleccionados positivamente continúan madurando y migrando a la médula, donde están sujetos a otra ronda de selección negativa a
los antígenos propios que incluyen proteínas específicas del tejido. Los linfocitos T maduros expresan CD4 o CD8 (sólo positivo, SP) y dejan el timo con
el potencial de iniciar una respuesta inmune. Aunque la mayoría de los timocitos se convierten en linfocitos convencionales linfocitos T CD8+ o CD4+
TCRαβ, algunos timocitos se desarrollan en otros linajes celulares, incluidas las células dendríticas linfoides, los linfocitos T TCR γδ, los linfocitos T
asesinos naturales (NKT, natural killer T), los linfocitos T reguladores (TREG, regulatory T) y los linfocitos intraepiteliales (IEL, intraepithelial
lymphocytes), cada uno de los cuales tiene una función distinta (consúltese el texto y las figuras 8–3 y 8–5 para obtener detalles adicionales). [Parte (a)
José Luis Calvo/Shutterstock]
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La segunda fase 6:56 PdeYour
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los linfocitos T depende en gran medida de las interacciones del receptor de los linfocitos T y hace que estos
alcancen la madurez + + + o CD8+ (sólo positivo, SP). Los eventos incluyen:
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1. Selección positiva: selección para aquellas células cuyos receptores de linfocitos T muestran respuesta a MHC propio,
TCRαβ, algunos timocitos se desarrollan en otros linajes celulares, incluidas las células dendríticas linfoides, los linfocitos T TCR γδ, los linfocitos T
asesinos naturales (NKT, natural killer T), los linfocitos T reguladores (TREG, regulatory T) y los linfocitos intraepiteliales (IEL, intraepithelial
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lymphocytes), cada uno de los cuales tiene una función distinta (consúltese el texto y las figuras 8–3 y 8–5 para obtener detalles adicionales). [Parte (a)
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La segunda fase del desarrollo de los linfocitos T depende en gran medida de las interacciones del receptor de los linfocitos T y hace que estos
alcancen la madurez desde la etapa CD4+ CD8+ a la etapa CD4+ o CD8+ (sólo positivo, SP). Los eventos incluyen:
1. Selección positiva: selección para aquellas células cuyos receptores de linfocitos T muestran respuesta a MHC propio,
2. Selección negativa: selección contra aquellas células cuyos receptores de linfocitos T se unen demasiado fuerte a las combinaciones de
péptido/MHC propio, y
3. Compromiso de linaje: compromiso de los timocitos con los linajes de las células efectoras, incluidas las poblaciones de CD4+ auxiliares o CD8+
citotóxicas, así como los linfocitos T reguladores CD4+.
Comprender el desarrollo de los linfocitos T ha sido un desafío tanto para los estudiantes como para los inmunólogos. Es útil tener en cuenta el
propósito central del proceso: generar una gran población de linfocitos T que expresen una amplia gama de especificidades de los receptores que
interactúen con los complejos MHC/péptidos propio, pero que no reaccionen contra ellos.
DESARROLLO TEMPRANO DE LOS TIMOCITOS

El desarrollo de los linfocitos T se produce en el timo, el órgano linfoide primario en nuestra cavidad torácica (véase capítulo 2). Los timocitos se
producen a lo largo de nuestra vida, aunque después de la pubertad el timo se contrae (involuciona) y produce menos y menos linfocitos T con el
tiempo.
El desarrollo comienza con la llegada de pequeñas cantidades de precursores de los linfocitos inmaduros que migran desde la médula ósea, a través
de la sangre y hacia el timo, donde proliferan, se diferencian y se someten a procesos de selección que reducen sus números en 95%, pero generan
una población diversa de linfocitos T CD4+ y CD8+ naïves.
La identidad precisa de los precursores de las células de la médula ósea que dan lugar a los linfocitos T todavía se debate. Sin embargo, está claro que
estos precursores se dirigen al timo a través de los receptores de quimiocina y son multipotentes. Incluso después de su llegada, los precursores de
los timocitos, también conocidos como progenitores asentados en el timo (TSP, thymussettling progenitors), conservan el potencial de dar lugar a los
linfocitos
CAPÍTULO B, 8:
células asesinas
Desarrollo de naturales (NK, natural killer), células dendríticas (DC, dendritic cells) y algunas otras células mieloides. Estas células
linfocitos T, Page 5se/ 40
comprometen
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• Notice del desarrollo de los linfocitos T (consúltese la figura
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panorámica 8–1).
de la sangre y hacia el timo, donde proliferan, se diferencian y se someten a procesos de selección que reducen sus números en 95%, pero generan
una población diversa de linfocitos T CD4+ y CD8+ naïves.
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La identidad precisa de los precursores de las células de la médula ósea que dan lugar a los linfocitos T todavía se debate. Sin embargo, está claro que
estos precursores se dirigen al timo a través de los receptores de quimiocina y son multipotentes. Incluso después de su llegada, los precursores de
los timocitos, también conocidos como progenitores asentados en el timo (TSP, thymussettling progenitors), conservan el potencial de dar lugar a los
linfocitos B, células asesinas naturales (NK, natural killer), células dendríticas (DC, dendritic cells) y algunas otras células mieloides. Estas células se
comprometen completamente con el linaje de los linfocitos T sólo al final de la etapa DN2 del desarrollo de los linfocitos T (consúltese la figura
panorámica 8–1).
El compromiso de las células madre con el linaje de los linfocitos T depende de Notch, un receptor. Notch regula varias decisiones durante el
desarrollo de los linfocitos T, incluida la elección temprana de convertirse en un linfocito T o B. Cuando una versión constitutivamente activa de
Notch1 (una de nuestras versiones de Notch) se sobreexpresa en las células madre hematopoyéticas, se desarrollan linfocitos T en lugar de linfocitos B
en la médula ósea. Recíprocamente, cuando se efectúa deleción del gen que codifica para Notch1 entre precursores hematopoyéticos, se desarrollan
células B más que células T en el timo.
La importancia de Notch en el compromiso de los linfocitos T también fue subrayada por un sistema in vitro para estudiar el desarrollo de los
linfocitos T. Se sabía que las células madre de la médula ósea se desarrollaban en linfocitos B, no en linfocitos T, cuando se cultivaban en las células
estromales de apoyo que crecían en una placa. A principios de la década de 2000, JC ZúñigaPflücker y colaboradores modificaron las células
estromales transfectándolas con el ligando Notch. Esto fue precisamente lo que se necesitaba para apoyar el desarrollo de células madre
hematopoyéticas (HSC, hematopoietic stem cells) en el linaje de los linfocitos T (figura 8–2). Este sistema de ensayo ha sido invaluable para definir las
interacciones que controlan el desarrollo temprano de los linfocitos T y ha ayudado a los investigadores a revelar, por ejemplo, que el factor de
transcripción GATA3 es un participante clave en el compromiso de los linfocitos T mediadas por Notch (consúltese el capítulo 2 para obtener más
información sobre los reguladores transcripcionales del desarrollo de las células sanguíneas).
FIGURA 8–2
Desarrollo de los linfocitos T a partir de las células madre hematopoyéticas en las células estromales de la médula ósea que
expresan el ligando Notch. Los investigadores pueden inducir el desarrollo linfoide a partir de las células madre hematopoyéticas in vitro,
utilizando una combinación de líneas de células estromales, citocinas solubles y factores de crecimiento, como se indica. Los investigadores
descubrieron que la señalización de Notch era la clave para inducir el desarrollo del linaje de los linfocitos T en lugar de B. Después de transfectar la
línea celular estromal con un gen que codifica el ligando de Notch (Notch1), los precursores linfoides adoptaron el linaje de los linfocitos T. De lo
contrario, se desarrollarían en linfocitos B.

utilizando una combinación de líneas de células estromales, citocinas solubles y factores de crecimiento, como se indica. Los investigadores
descubrieron que la señalización de Notch era la clave para inducir el desarrollo del linaje de los linfocitos T en lugar de B. Después de transfectar la
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línea celular estromal con un gen que codifica el ligando de Notch (Notch1), los precursores linfoides adoptaron el linaje de los linfocitos T. De lo
contrario, se desarrollarían en linfocitos B.
Los timocitos progresan a través de cuatro etapas doble negativo
El desarrollo de los linfocitos T está elegantemente organizado, espacial y temporalmente. Las diversas etapas del desarrollo tienen lugar en distintos
microentornos dentro del timo; estos microentornos proporcionan señales unidas a la membrana y solubles que regulan la maduración. Después de
llegar al timo desde la médula ósea a través de los vasos sanguíneos en el límite corticomedular, los precursores de los linfocitos T encuentran
ligandos Notch, que se expresan abundantemente por el epitelio tímico. Los precursores de los linfocitos T luego viajan a la corteza tímica externa,
donde proliferan y comienzan a expresar sus receptores de linfocitos T. De estas, las que sobreviven a los rigurosos procesos de selección maduran y
migran hacia la médula tímica antes de salir por donde llegaron, en la unión corticomedular (consúltese la figura panorámica 8–1).
Durante el tiempo que tardan las células en desarrollarse hasta la madurez en el timo (1 a 3 semanas), los timocitos pasan por una serie de etapas
definidas por cambios en su fenotipo de superficie (consúltese la figura panorámica 8–1c). Los linfocitos T más tempranas carecen de CD4 y CD8
detectables y, por tanto, se les denomina células doble negativo (DN, doublenegative). Los linfocitos T DN se pueden dividir en cuatro
subconjuntos, DN1DN4, en función de la presencia o ausencia de otras moléculas de la superficie celular, incluido el cKit (CD117), el receptor del
factor de crecimiento de las células madre; CD44, una molécula de adhesión; y CD25, la cadena α del receptor de la interleucina (IL, interleukin)2
(cuadro 8–1 y figura de panorama general 8–3).
CUADRO 8–1
Desarrollo de timocitos doble negativo
Fenotipo Ubicación Descripción
DN1 cKit (CD117)++, De la médula ósea al Migración al timo

CD44+, CD25de timo
− linfocitos
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DN2 cKit (CD117)++, Corteza subcapsular Reorganización de las cadenas γ, δ y β TCR; compromiso de linaje de linfocitos T
CD44+, CD25+
detectables y, por tanto, se les denomina células doble negativo (DN, doublenegative). Los linfocitos T DN se pueden dividir en cuatro
subconjuntos, DN1DN4, en función de la presencia o ausencia de otras moléculas de la superficie celular, incluido el cKit (CD117), el receptor del
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factor de crecimiento de las células madre; CD44, una molécula de adhesión; y CD25, la cadena α del receptor de la interleucina (IL, interleukin)2
(cuadro 8–1 y figura de panorama general 8–3).
CUADRO 8–1
Desarrollo de timocitos doble negativo
Fenotipo Ubicación Descripción
DN1 cKit (CD117)++, De la médula ósea al Migración al timo
CD44+, CD25− timo
DN2 cKit (CD117)++, Corteza subcapsular Reorganización de las cadenas γ, δ y β TCR; compromiso de linaje de linfocitos T
CD44+, CD25+
DN3 cKit (CD117)+, Corteza subcapsular Expresión de preTCR; selección β

CD44−, CD25+
DN4 cKit (CD117)low/−, De la corteza Proliferación, exclusión alélica del locus de la cadena β; comienza el reordenamiento del
CD44−, CD25− subcapsular a la corteza locus de la cadena α; se convierte en timocito DP
FIGURA 8–3
DE PANORAMA GENERAL
Cambios en la expresión y función del receptor de linfocitos T a través del desarrollo de los linfocitos T
Los timocitos DN1 y DN2 no expresan ninguna proteína receptora de los linfocitos T en su superficie. El preTCR se ensambla durante la transición de
la etapa de desarrollo de DN2 a DN3, cuando una cadena β del TCR reorganizada con éxito se dimeriza con la cadena preTα no variante. Al igual que el
dímero de TCR αβ maduro, el preTCR está asociado no covalentemente con el complejo CD3. El ensamblaje exitoso de este complejo resulta en
señales intracelulares en la etapa DN3 que inducen una variedad de procesos, que incluyen la maduración de la etapa DP y el reordenamiento de la
cadena α del TCR. Una vez que un timocito ha reorganizado con éxito una cadena α del TCR (en transición entre las etapas DN4 y DP), esta cadena se
dimeriza con la cadena β de TCR, reemplazando la cadena preTα y generando un TCR αβ maduro. El TCR αβ expresado por los timocitos DP también
forma complejos con CD3 y puede generar señales que conducen a una selección positiva o negativa (diferenciación o muerte, respectivamente),
dependiendo de la afinidad de su interacción con los complejos MHC/péptido que encuentra en la corteza tímica y la médula. Aunque el complejo TCR
αβ/CD3 expresado por las células SP T maduras es estructuralmente el mismo que el expresado por los timocitos DP, las señales que genera son
distintas. Responde al compromiso de alta afinidad no muriendo, sino iniciando la proliferación celular, la activación y la expresión de las funciones
efectoras. Las señales de baja afinidad generan señales de supervivencia. La base para las diferencias en la consecuencia de las señales generadas por
los complejos DP y SP TCR es aún desconocida.
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Los progenitores 6:56enPelYour
asentados timo IP
se is en la etapa de desarrollo DN1 (cKit++ CD44+ CD25−). Aunque aún son múltiples, reciben señales
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encuentran
de Notch apenas entran en el entorno tímico y comienzan a restringirse al linaje de los linfocitos T. Viajan a la corteza, donde proliferan y ganan la
++ + +
expresión de CD25, convirtiéndose en timocitos DN2 (cKit CD44 CD25 ). Durante esta etapa crítica de desarrollo, los genes para las cadenas TCR γ, δ
y β comienzan a reorganizarse (consúltese el capítulo 6). El locus de la cadena α de TCR, sin embargo, permanece inaccesible para la maquinaria de la
αβ/CD3 expresado por las células SP T maduras es estructuralmente el mismo que el expresado por los timocitos DP, las señales que genera son
distintas. Responde al compromiso de alta afinidad no muriendo, sino iniciando la proliferación celular, la activación y la expresión de las funciones
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efectoras. Las señales de baja afinidad generan señales de supervivencia. La base para las diferencias en la consecuencia de las señales generadas por
los complejos DP y SP TCR es aún desconocida.
Los progenitores asentados en el timo se encuentran en la etapa de desarrollo DN1 (cKit++ CD44+ CD25−). Aunque aún son múltiples, reciben señales
de Notch apenas entran en el entorno tímico y comienzan a restringirse al linaje de los linfocitos T. Viajan a la corteza, donde proliferan y ganan la
expresión de CD25, convirtiéndose en timocitos DN2 (cKit++ CD44+ CD25+). Durante esta etapa crítica de desarrollo, los genes para las cadenas TCR γ, δ
y β comienzan a reorganizarse (consúltese el capítulo 6). El locus de la cadena α de TCR, sin embargo, permanece inaccesible para la maquinaria de la
recombinasa y aún no se reorganiza. En la etapa DN2 tardía, los precursores de los linfocitos T se comprometen completamente con el linaje de los
linfocitos T y reducen la expresión tanto de cKit como de CD44.
Las células en transición de las etapas DN2 a DN3 (cKit+ CD44− CD25+) continúan reorganizando sus cadenas TCR γ, TCR δ y TCR β y toman la primera
decisión importante en el desarrollo de los linfocitos T: si unirse al linaje de los linfocitos T TCR γδ o TCRαβ. Esos linfocitos T DN3 que reorganizan con
éxito su cadena β, normalmente se comprometen con el linaje de linfocitos T TCRαβ, pierden la expresión de CD25, detienen la proliferación y entran
en la etapa de desarrollo DN4 (cKitlow/–CD44− CD25−), los cuales maduran directamente en los timocitos CD4+ CD8+ DP.
CONCEPTOS CLAVE
Los progenitores de los leucocitos no comprometidos ingresan al timo desde la médula ósea. Las interacciones del ligando Notch/Notch son
necesarias para el compromiso en linfocitos T.
Los linfocitos T inmaduros se denominan timocitos, y progresan a través de varias etapas de desarrollo definidas, en términos generales, por
la expresión de los correceptores CD4 y CD8.
Los primeros timocitos no expresan CD4 ni CD8 y entran en el timo en la unión corticomedular. Maduran más en la corteza tímica, y luego
finalizan su maduración en la médula tímica; salen como células maduras por donde entraron, a través de la unión corticomedular.
Los timocitos CD4− CD8− (DN) avanzan a través de cuatro etapas de desarrollo (DN1DN4) definidas por la expresión de CD44, CD25 y cKit.
Durante estas etapas, proliferan y reorganizan los genes β, δ y γ del receptor de linfocitos T (TCR, Tcell receptor).
Los timocitos expresan receptores de linfocitos T α β o γδ
Los vertebrados generan dos amplias categorías de linfocitos T: las que expresan las cadenas α y β TCR y las que expresan las cadenas γ y δ de TCR. Los
linfocitos TCRαβ son los participantes dominantes en la respuesta inmune adaptativa en órganos linfoides secundarios. Sin embargo, los linfocitos
TCRγδ también desempeñan un papel importante, particularmente en la protección de los tejidos de nuestra barrera para las infecciones externas.
Ambos tipos de células se generan en el timo, pero ¿cómo un linfocito toma la decisión de convertirse en una o en la otra? En gran medida, la elección
de convertirse en un linfocito T αβ o γδ está determinada por la rapidez con la que los genes que codifican cada una de las cuatro cadenas de
receptores se reorganizan con éxito.
Recuerde del capítulo 6 que los genes TCR se generan al mezclar (reorganizar) los segmentos V y J (y a veces D). El reordenamiento de los loci β, γ y δ
comienza durante la etapa DN2. Para que una célula se convierta en T αβ, esta debe generar una cadena de proteína TCR β, un evento que depende de
un solo reordenamiento V(D)J en la estructura. Para convertirse en una célula γδ, sin embargo, un timocito debe generar dos proteínas funcionales
que dependen2023819
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reorganización separados en la estructura. Por tanto, la probabilidad favorece el evento único y, de hecho, los
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CAPÍTULO 8: Desarrollo de linfocitos T,
linfocitos T tienen al menos tres veces más probabilidades de convertirse en linfocitos TCRαβ que en linfocitos TCRγδ. Page 9 / 40
La generación de linfocitos T TCRγδ también está regulada en el desarrollo. Los linfocitos TCRγδ son los primeros linfocitos T que surgen como una
avalancha durante el desarrollo fetal, y brindan una función protectora muy importante, quizás incluso antes del nacimiento. Por ejemplo, los
de convertirse en un linfocito T αβ o γδ está determinada por la rapidez con la que los genes que codifican cada una de las cuatro cadenas de
receptores se reorganizan con éxito.
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Recuerde del capítulo 6 que los genes TCR se generan al mezclar (reorganizar) los segmentos V y J (y a veces D). El reordenamiento de los loci β, γ y δ
comienza durante la etapa DN2. Para que una célula se convierta en T αβ, esta debe generar una cadena de proteína TCR β, un evento que depende de
un solo reordenamiento V(D)J en la estructura. Para convertirse en una célula γδ, sin embargo, un timocito debe generar dos proteínas funcionales
que dependen de dos eventos de reorganización separados en la estructura. Por tanto, la probabilidad favorece el evento único y, de hecho, los
linfocitos T tienen al menos tres veces más probabilidades de convertirse en linfocitos TCRαβ que en linfocitos TCRγδ.
La generación de linfocitos T TCRγδ también está regulada en el desarrollo. Los linfocitos TCRγδ son los primeros linfocitos T que surgen como una
avalancha durante el desarrollo fetal, y brindan una función protectora muy importante, quizás incluso antes del nacimiento. Por ejemplo, los
estudios muestran que los linfocitos T γδ son necesarios para proteger a los ratones muy jóvenes contra el patógeno protozoario que causa la
coccidiosis. Sin embargo, la producción de linfocitos T γδ disminuye después del nacimiento, y la población de linfocitos T TCRγδ representa sólo
0.5% de todos los linfocitos T maduros en la periferia de un animal adulto (figura 8–4).
FIGURA 8–4
Evolución temporal de la aparición de timocitos γδ y timocitos αβ durante el desarrollo fetal del ratón. El gráfico muestra el porcentaje
de células en el timo que son doble negativo (CD4− CD8−) y tienen el receptor de linfocitos T γδ (línea negra) o son doble positivo (CD4+ CD8+) y tienen el
receptor de linfocitos T αβ (línea azul). Los fetos de animales generan más linfocitos T γδ que linfocitos T αβ, pero la proporción de linfocitos T γδ
generada disminuye drásticamente después del nacimiento. Esta dominación temprana de los linfocitos TCR γδ puede tener un valor adaptativo: una
gran parte de los mismos expresan especificidades de TCR nodiversas para proteínas patógenas comunes y pueden montar una defensa rápida antes
de que el sistema inmunitario adaptativo más tradicional se haya desarrollado por completo.
La mayoría de los linfocitos TCRγδ son muy diferentes en cuanto al fenotipo y la función de los linfocitos TCRαβ convencionales. La mayoría no
atraviesa la etapa de DP del desarrollo de los timocitos y, en cambio, deja el timo como linfocitos T DN (CD4− CD8−) maduros. Muchos emergen del timo
con la capacidad de segregar citocinas, la cual es ganada por la mayoría de los linfocitos TCRαβ sólo después de encontrar antígeno en los tejidos
linfoides secundarios. Además, la población de linfocitos T TCRγδ, en su conjunto, expresa receptores que no son tan diversos como los linfocitos T
TCRαβ. Al parecer, también reconocen antígenos no convencionales, incluidos los lípidos asociados con las moléculas de MHC no convencionales.
Muchas residen a largo plazo en la piel y los tejidos de la mucosa y se unen a las células inmunes innatas para proporcionar una primera línea de
ataque contra los microbios invasores, así como la respuesta al estrés celular.
Para el resto de este capítulo, nos centraremos en el desarrollo de los linfocitos T TCRαβ, que constituyen la gran mayoría de los linfocitos T en el
cuerpo y se generan continuamente, incluso después de la pubertad, cuando el timo reduce su tamaño considerablemente.
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timocitos maduran en linfocitos T que expresan TCR αβ o γδ. Los timocitos que reorganizan con éxito los genes de los receptores δ y γ
maduran al linaje TCRγδ, y los que reorganizan con éxito el gen del receptor β se comprometen con el linaje TCRαβ.
Muchas residen a largo plazo en la piel y los tejidos de la mucosa y se unen a las células inmunes innatas para proporcionar una primera línea de
ataque contra los microbios invasores, así como la respuesta al estrés celular. Universidad Científica del Sur Ciencias de la Salud
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Para el resto de este capítulo, nos centraremos en el desarrollo de los linfocitos T TCRαβ, que constituyen la gran mayoría de los linfocitos T en el
cuerpo y se generan continuamente, incluso después de la pubertad, cuando el timo reduce su tamaño considerablemente.
CONCEPTOS CLAVE
Los timocitos maduran en linfocitos T que expresan TCR αβ o γδ. Los timocitos que reorganizan con éxito los genes de los receptores δ y γ
maduran al linaje TCRγδ, y los que reorganizan con éxito el gen del receptor β se comprometen con el linaje TCRαβ.
La mayoría de los timocitos se convierten en linfocitos TCRαβ. Sin embargo, los linfocitos TCRγδ son los primeros linfocitos T que maduran
durante el desarrollo fetal y pueblan la periferia en varias oleadas tempranas.
Los linfocitos TCRγδ y TCRαβ son funcionalmente distintos. La mayoría de los linfocitos TCRγδ tienen una diversidad de receptores y
especificidad de antígeno limitadas. Son muy importantes en la primera respuesta a los patógenos en las superficies de la mucosa y de la piel.
Los linfocitos T TCRαβ tienen especificidades, rangos anatómicos y funciones diversas.
Los timocitos DN se someten a la selección β, lo que resulta en la proliferación y diferenciación
Los timocitos doble negativos (DN, doublenegative) que han reorganizado con éxito sus cadenas TCR β son valiosos y se identifican y expanden a
través de un proceso conocido como selección β (consúltense las figuras panorámicas 8–1 y 8–3). Este proceso involucra una proteína que se expresa
de forma única en esta etapa de desarrollo: una glicoproteína invariante de 33 kDa conocida como la cadena preTα. La preTα actúa como un
sustituto de la cadena α real del TCR, que aún no se ha reorganizado, y se ensambla con una cadena β traducida y reorganizada con éxito, así como
con las proteínas del complejo CD3. Este complejo TCR/CD3 inmaduro se conoce como el receptor de células preT (preTCR) (véase la figura
panorámica 8–3) y actúa como un sensor al iniciar una ruta de transducción de señales. La señalización de que el complejo preTCR se inicia depende
de muchas de las mismas quinasas específicas de los linfocitos T utilizadas por un TCR maduro (que se analiza en el capítulo 10). Aún no está claro si
se une o no a los ligandos. De hecho, poco o nada del complejo se expresa en la superficie celular, y algunos estudios sugieren que el ensamblaje
exitoso del complejo puede ser suficiente para activar los eventos de señalización. Otros plantean la posibilidad de que el preTCR realmente
interactúe con los complejos MHC/péptido, aunque con menor afinidad que las combinaciones de TCRαβ maduras. Como aprenderá en el capítulo 9,
los linfocitos B también expresan un complejo receptor inmaduro (el preBCR) que está codificado por genes distintos, pero es completamente
análogo al preTCR.
La señalización preTCR en la etapa DN3 dispara la siguiente secuencia de eventos:
1. Maduración a la etapa DN4 (cKitlow/–CD44−CD25−).
2. Proliferación rápida en la corteza subcapsular del timo.
3. Supresión de la reorganización adicional de los genes de la cadena β del TCR, lo que resulta en la exclusión alélica del locus de la cadena β.
4. Desarrollo a la etapa CD4+ CD8+ doble positivo (DP, doublepositive).
5. Cese de la proliferación.
6. Iniciación del reordenamiento de la cadena α del TCR.
Es importante tener en cuenta que la fase proliferativa antes del reordenamiento de la cadena α mejora considerablemente la diversidad del receptor
al generar clones de células con el mismo reordenamiento de la cadena β del TCR. Cada una de las células dentro de un clon puede reorganizar un gen
de la cadena α diferente, generando así una población aún más diversa que si la célula original se hubiera reorganizado en los loci de las cadenas β y α
antes de la proliferación. El reordenamiento del gen de la cadena α del TCR no comienza hasta que los timocitos doble positivos dejan de proliferar.
La mayoría de los linfocitos T reorganizan y expresan con éxito una cadena TCR β de sólo uno de sus dos alelos TCR β. Una vez que se genera una
proteína TCR β, la reorganización en el otro alelo se apaga, un fenómeno conocido como exclusión alélica. Los detalles de los mecanismos
responsables de la exclusión alélica aún están siendo investigados. Sin embargo, las señales de retroalimentación negativa de un complejo TCRβ/pre
Tα ensamblado con éxito desempeñan claramente un papel. Las señales parecen alterar la accesibilidad del locus del gen a la actividad de RAG y
también pueden regular a la baja la expresión de RAG [recuerde del capítulo 6 que RAG1 y RAG2 son enzimas que catalizan la recombinación V(D)J].
Otros eventos, incluido el estallido proliferativo que sigue a la selección β y diluye los niveles de proteína RAG, también pueden desempeñar un papel.
Los niveles de
CAPÍTULO 8: RAG continúan
Desarrollo cambiando
de linfocitos T, después de la selección β. Se restauran tras la ráfaga proliferativa y permiten que se produzca un
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de un dímero TCRαβ ensamblado con éxito. Curiosamente, la exclusión
alélica en el locus de la cadena α del TCR no es tan eficiente como lo es en el locus de la cadena β de TCR. Un porcentaje significativo de linfocitos T
expresa dos cadenas de proteínas TCR α diferentes.
La mayoría de los linfocitos T reorganizan y expresan con éxito una cadena TCR β de sólo uno de sus dos alelos TCR β. Una vez que se genera una
proteína TCR β, la reorganización en el otro alelo se apaga, un fenómeno conocido como exclusiónUniversidad Científica
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los mecanismos
Ciencias de la Salud
responsables de la exclusión alélica aún están siendo investigados. Sin embargo, las señales de retroalimentación
Access Provided by: negativa de un complejo TCRβ/pre
Tα ensamblado con éxito desempeñan claramente un papel. Las señales parecen alterar la accesibilidad del locus del gen a la actividad de RAG y
también pueden regular a la baja la expresión de RAG [recuerde del capítulo 6 que RAG1 y RAG2 son enzimas que catalizan la recombinación V(D)J].
Otros eventos, incluido el estallido proliferativo que sigue a la selección β y diluye los niveles de proteína RAG, también pueden desempeñar un papel.
Los niveles de RAG continúan cambiando después de la selección β. Se restauran tras la ráfaga proliferativa y permiten que se produzca un
reordenamiento de TCRα. Disminuyen una vez más después de la expresión de un dímero TCRαβ ensamblado con éxito. Curiosamente, la exclusión
alélica en el locus de la cadena α del TCR no es tan eficiente como lo es en el locus de la cadena β de TCR. Un porcentaje significativo de linfocitos T
expresa dos cadenas de proteínas TCR α diferentes.
Una vez que un timocito doble positivo (DP, doublepositive) joven reordena y expresa con éxito una cadena α del TCR, esta tiene la oportunidad de
asociarse con la cadena β TCR ya producida, tomando el lugar de la cadena α preTCR sustituta, que ya no se expresa activamente (véase figura
panorámica 8–3). En este punto, el timo ha logrado varios “objetivos”: los precursores de células hematopoyéticas se han expandido en la corteza
subcapsular, comprometidos con el linaje de los linfocitos T, y han reorganizado un conjunto de genes TCR. Cada linfocito también ha “elegido”
convertirse en un linfocito T TCRαβ o TCRγδ. La población de TCRαβ ahora expresa tanto CD4 como CD8, está lista para la segunda etapa del
desarrollo de los linfocitos T: la selección.
CONCEPTOS CLAVE
Los timocitos que reorganizan con éxito la cadena β del TCR se detectan mediante un proceso llamado selección β. La selección β se inicia
mediante el ensamblaje de la proteína TCR β con una cadena sustitutiva invariante de TCR y las proteínas complejas CD3, que forman el pre
TCR.
La señalización previa a TCR da como resultado un compromiso con el linaje TCRαβ, otro estallido de proliferación, maduración hasta la etapa
de desarrollo de DP e inicio de la reorganización de TCRα.
SELECCIONES POSITIVA Y NEGATIVA
Los timocitos CD4+ CD8+ (DP) son pequeños, no proliferantes, dominan la corteza tímica, y comprenden más de 80% de las células en el timo en su
totalidad. Significativamente, son la primera subpoblación de timocitos que expresan un complejo TCRαβ/CD3 de superficie completamente maduro
y, por tanto, son los principales objetivos de la selección del timo (consúltese la figura panorámica 8–1). La selección tímica conforma profundamente
el repertorio de TCR de los timocitos DP, en función de la afinidad de sus receptores de linfocitos T por los MHC/péptidos que encuentran cuando
navegan por las superficies de las células epiteliales tímicas.
¿Por qué es necesaria la selección tímica? La propiedad más distintiva de un linfocito T maduro es que su TCR reconoce los antígenos peptídicos sólo
cuando se combina con moléculas de MHC propias. Este es un fenómeno conocido como restricción de MHC, y fue uno de los descubrimientos
inmunológicos más importantes del siglo XX. La otra propiedad distintiva de la población de linfocitos T maduros es que es ampliamente tolerante a
los complejos de MHC propio/péptido propio. A pesar de que los linfocitos T deben reconocer el MHC propio con cierta afinidad, no inician una
respuesta al MHC propio/péptido propio, un fenómeno conocido como autotolerancia.
Dado que el reordenamiento del gen TCR es un proceso aleatorio y que los TCR generados son únicos para cada célula, la probabilidad de que
cualquier TCR dado muestre la autorrestricción y la autotolerancia es baja. Los eventos de selección que ocurren en el timo filtran efectivamente la
gran población de timocitos DP recién generados para aquellas pocas células cuyos TCR tienen ambas propiedades.
Se requieren dos procesos de selección distintos:
Selección positiva, que selecciona para aquellos timocitos que tienen receptores capaces de unirse a las moléculas de MHC propias con baja
afinidad, lo que resulta en una restricción de MHC.
Selección negativa, que selecciona contra los timocitos que tienen receptores con alta afinidad por complejos de MHC/péptido propios, lo que
resulta en autotolerancia.
La gran mayoría de los timocitos DP (~ 98%) nunca cumplen con los criterios de selección y mueren por apoptosis dentro del timo (figura de
panorama general 8–5). La mayor parte de la muerte por timocitos DP (~ 95%) ocurre entre los timocitos que fallan en la selección positiva porque
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porcentaje de
CAPÍTULO 8: células (2 a 5%)
Desarrollo se elimina
de linfocitos T, por selección negativa. Sólo de 2 a 5% de los timocitos DP salen del timo como linfocitos T maduros.
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FIGURA 8–5
Selección negativa, que selecciona contra los timocitos que tienen receptores con alta afinidad por complejos de MHC/péptido propios, lo que
resulta en autotolerancia.
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La gran mayoría de los timocitos DP (~ 98%) nunca cumplen con los criterios de selección y mueren por apoptosis dentro del timo (figura de
panorama general 8–5). La mayor parte de la muerte por timocitos DP (~ 95%) ocurre entre los timocitos que fallan en la selección positiva porque
sus receptores no reconocen específicamente las moléculas de MHC propias, un proceso conocido como muerte por abandono. Un pequeño
porcentaje de células (2 a 5%) se elimina por selección negativa. Sólo de 2 a 5% de los timocitos DP salen del timo como linfocitos T maduros.
FIGURA 8–5
DE PANORAMA GENERAL
Selecciones positiva y negativa de los timocitos en el ratón
La selección tímica implica múltiples interacciones de los timocitos DP y SP con células estromales del timo cortical y medular, así como células
dendríticas y macrófagos. La selección da como resultado una población de linfocitos T maduros que es tanto MHC propio restringida como
autotolerante. Los timocitos DP que expresan nuevos dímeros de TCR αβ exploran los complejos MHC/péptido expresados por las células epiteliales
del timo cortical (cTEC, cortical thymic epithelial cells), así como por las células dendríticas (CD, dendritic cells) corticales y los macrófagos. La gran
mayoría de los timocitos DP mueren en la corteza por abandono debido a su incapacidad para unirse a las combinaciones de MHC/péptido con
suficiente afinidad. El pequeño porcentaje cuyos TCR se unen a MHC/péptido con alta afinidad, particularmente en la superficie de las CD, mueren por
eliminación clonal (selección negativa). Aquellos timocitos DP cuyos receptores se unen a MHC/péptido con afinidad baja a intermedia se seleccionan
positivamente y maduran a linfocitos T positivos (CD4+ o CD8+). Estos migran a la médula, donde se exponen a las células epiteliales tímicas medulares
AIRE+ (mTEC, medullary thymic epithelial cells), que expresan antígenos específicos del tejido y también pueden mediar en la selección negativa. Las
células dendríticas medulares pueden adquirir antígenos de los mTEC y también mediar en esta selección.

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Las selecciones positiva y negativa garantizan que estos linfocitos T maduros expresen TCR con baja afinidad por los complejos MHC propio/péptido
propio, siempre que se presenten en el timo. Por otro lado, no hay garantía de que estos linfocitos T maduros expresen receptores que sean útiles
ante cualquier infección. De hecho, la capacidad del sistema inmunitario adaptativo para responder a una infección depende completamente de la
apuesta de que al menos uno de los millones de linfocitos T que sobreviven a la selección tímica con un TCR generado al azar se unirá y reaccionará al
menos uno de los MHC/combinaciones de péptidos extraños generados por una célula presentadora de antígeno (APC, antigenpresenting cell). Esta
es una apuesta que ha dado buenos resultados en nuestra historia evolutiva.
En esta sección, describimos brevemente la evidencia experimental de la participación del timo en la restricción de MHC. También describimos lo que
se sabe actualmente sobre los procesos de selecciones positivos y negativos, así como los modelos desarrollados para explicar lo que se conoce como
la “paradoja tímica”.
Los timocitos “aprenden” la restricción de MHC en el timo
La evidencia inicial del papel del timo en la selección del repertorio de los linfocitos T provino de los experimentos con ratones quiméricos realizados
por R. M. Zinkernagel y colaboradores. Recuerde que Zinkernagel ganó el Premio Nobel por demostrar que los linfocitos T maduros están restringidos
por el MHC (es decir, necesitan reconocer el antígeno en el contexto del MHC de su hospedero para responder; consulte el recuadro de experimento
clásico 7–4). Sin embargo, él y sus colaboradores tenían curiosidad por saber cómo los linfocitos T se “restringían” como tales. Consideraron dos
posibilidades: 1) o bien el linfocito T y la APC simplemente debían tener tipos MHC coincidentes (es decir, un linfocito T de la cepa “A” tenía que ver una
célula presentadora de antígeno de la cepa “A”); o 2) los linfocitos T, independientemente de su propio tipo de MHC, “aprendieron” el tipo de MHC de
su hospedero en algún momento durante el desarrollo. Zinkernagel y colaboradores pensaron que tal aprendizaje podría tener lugar en el timo, el
cunero de linfocitos T. Para determinar si se podía “enseñar” a los linfocitos T a reconocer el MHC hospedero, extrajeron el timo de los ratones F1
(timectomizado) e irradiaron (A × B) para que no tuvieran un sistema inmunitario funcional (figura 8–6). Luego reconstituyeron las células
hematopoyéticas con una infusión intravenosa de células de médula ósea (A × B) F1, pero reemplazaron el timo con uno de un ratón de tipo B. (Para
estar seguros de que el injerto del timo no contenía ningún linfocito T maduro, lo irradiaron antes del trasplante.)
FIGURA 8–6
Demostración experimental de que el timo selecciona para la maduración sólo aquellos linfocitos T cuyos receptores de linfocitos
T reconocen el antígeno presentado en los linfocitos blanco con el haplotipo del timo. Los ratones de control (A × B) F1 infectados con
LCMV producen
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demuestra que estos linfocitos T están restringidos a las moléculas del MHC expresadas por la cepa A (H2a) y cepa B (H2b). Para determinar la
participación del timo en la especificidad de la restricción de los linfocitos T, los investigadores injertaron timectomizados e irradiaron letalmente (A ×
B) ratones F1 (H2a/b) con una cepa B (H2b) del timo, luego lo reconstituyeron con (A × B) F1 células de la médula ósea. Después de la infección con
FIGURA 8–6
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Demostración experimental de que el timo selecciona para la maduración sólo aquellos linfocitos T cuyos receptores de linfocitos
T reconocen el antígeno presentado en los linfocitos blanco con el haplotipo del timo. Los ratones de control (A × B) F1 infectados con
LCMV producen linfocitos T maduros que pueden matar tanto las células infectadas de la cepa A como las células infectadas de la cepa B, lo que
demuestra que estos linfocitos T están restringidos a las moléculas del MHC expresadas por la cepa A (H2a) y cepa B (H2b). Para determinar la
participación del timo en la especificidad de la restricción de los linfocitos T, los investigadores injertaron timectomizados e irradiaron letalmente (A ×
B) ratones F1 (H2a/b) con una cepa B (H2b) del timo, luego lo reconstituyeron con (A × B) F1 células de la médula ósea. Después de la infección con
LCMV, se analizaron las células citotóxicas CD8+ (CTL) del ratón reconstituido para determinar su capacidad de destrucción de la cepa A marcada con
51Cr o los linfocitos blanco de la cepa B infectadas con LCMV. Sólo se lisaron los linfocitos blanco de la cepa B, lo que sugiere que el timo injertado con
H2b había seleccionado para la maduración sólo aquellos linfocitos T que podían reconocer el antígeno combinado con las moléculas de H2b MHC.
En este sistema experimental, los progenitores de linfocitos T de la médula ósea (A × B) F1 maduraron dentro de un timo que expresa únicamente
moléculas MHC
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CAPÍTULO 8: Desarrollo de linfocitos T,
se desarrollaron? O, dado que expresaron ambos MHC A y B, ¿podrían reconocer los haplotipos MHC A y B? Para responder a esta pregunta, los
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investigadores infectaron a los ratones quiméricos con el virus de la coriomeningitis linfocítica (LCMV, lymphocytic choriomeningitis virus; el antígeno)
y extrajeron los linfocitos T maduros inmunizados para ver qué linfocitos blanco (APC) infectadas con LCMV podían matar. Probaron estos linfocitos T
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En este sistema experimental, los progenitores de linfocitos T de la médula ósea (A × B) F1 maduraron dentro de un timo que expresa únicamente
moléculas MHC del haplotipo B en sus células estromales. ¿Serían estos linfocitos T (A × B) F1 ahora MHC restringidos al haplotipo B del timo en el que
se desarrollaron? O, dado que expresaron ambos MHC A y B, ¿podrían reconocer los haplotipos MHC A y B? Para responder a esta pregunta, los
investigadores infectaron a los ratones quiméricos con el virus de la coriomeningitis linfocítica (LCMV, lymphocytic choriomeningitis virus; el antígeno)
y extrajeron los linfocitos T maduros inmunizados para ver qué linfocitos blanco (APC) infectadas con LCMV podían matar. Probaron estos linfocitos T
contra APC infectadas de ratones de la cepa A y de la cepa B. Como se muestra en la figura 8–6, los linfocitos T de los ratones quiméricos sólo podrían
lisar los linfocitos blanco infectados con LCMV de ratones de la cepa B. Por tanto, el haplotipo MHC del timo en el que se desarrollan los linfocitos T
determina su restricción de MHC. Los linfocitos T “aprendieron” a qué MHC se les restringe durante sus primeros días en el timo. Aunque antes nos
referimos a este proceso como “educación de linfocitos T”, ahora sabemos que es la consecuencia de un proceso de selección brutal.
CONCEPTOS CLAVE
Los timocitos DP son la subpoblación más abundante en el timo y son las primeras células que expresan un TCR αβ maduro. Navegan por el
córtex del timo y son objetivos de selecciones tanto positiva como negativa, la cual es responsable de la restricción de MCH propio y la
tolerancia propia, respectivamente.
Zinkernagel y colaboradores demostraron que la selección tímica positiva es responsable de la restricción del MCH propio mediante el
trasplante de ratones que expresan un conjunto de proteínas MHC con un timo que manifiesta un grupo distinto de proteínas MHC. Los
linfocitos T que se desarrollaron en estos ratones sólo restringieron al MHC expresado por el timo.
Los linfocitos T experimentan selecciones positiva y negativa
En el timo, los timocitos sondean las superficies de múltiples tipos de células, incluidas las células epiteliales del timo cortical y medular, las
dendríticas e incluso los linfocitos B. La mayoría de estas expresan altos niveles de moléculas MHC de clase I y clase II en su superficie. Estas moléculas
de MHC propias presentan péptidos propios, que se derivan de proteínas intracelulares y/o extracelulares que se degradan en el curso normal del
metabolismo celular. Los timocitos DP se someten a las selecciones positiva y negativa, dependiendo de las señales que reciben cuando encuentran
combinaciones de MHC propio/péptido propio con sus TCR. Las células epiteliales del timo cortical proporcionan señales únicas que median la
selección positiva y varios tipos de células diferentes, incluidas las células epiteliales medulares, las células dendríticas y los linfocitos B, son capaces
de mediar en la selección negativa.
Un modelo para el desarrollo de los timocitos que proporciona un marco particularmente útil para comprender las selecciones positiva y negativa se
conoce como el modelo de la afinidad de la selección (consúltese la figura 8–5). Aunque sabemos que algunos aspectos de este modelo son
demasiado simplistas, sus principios fundamentales siguen siendo relevantes y un excelente punto de partida para una comprensión más sofisticada
de la selección del timo. Brevemente, el modelo establece que los timocitos DP tienen uno de los tres destinos que dependen de la afinidad de sus
nuevos receptores de linfocitos T para las combinaciones de MHC/péptido propio que encuentran. Si sus TCR recién generados no se unen a ninguno
de los MHC/péptido propio que encuentran en las células estromales, morirán por abandono. Si se unen con demasiada fuerza a los complejos
MHC/péptido propio con los que se encuentran, se seleccionarán negativamente y, finalmente, se destruirán. Si se unen con una afinidad baja, “justo
la correcta” a los complejos MHC/péptido propio, serán seleccionados positivamente y madurarán a la etapa de desarrollo de un solo positivo
(SP). Aquí, revisamos los orígenes del modelo y discutimos algunas de las modificaciones que han sido sugeridas por datos recientes. Consulte el
recuadro de experimento clásico 8–1 para obtener información experimental que respalde este modelo proveniente de los primeros ratones
transgénicos TCR.
RECUADRO 8–1
EXPERIMENTO CLÁSICO: Los conocimientos sobre la selección tímica del primer ratón transgénico TCR han superado la prueba
del tiempo
A fines de la década de 1980, Harald von Boehmer y colaboradores publicaron una serie de experimentos seminales que proporcionaron evidencia
directa y convincente de la influencia de las interacciones de los receptores de los linfocitos T en las selecciones positiva y negativa. Reconocieron
que para entender cómo funcionaban las selecciones positiva y negativa, tendrían que ser capaces de rastrear y comparar el destino de los
timocitos con las especificidades definidas de los receptores de linfocitos T. Pero, ¿cómo podría uno hacer eso si cada uno de los cientos de
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Desarrollo expresan
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uno de los primeros ratones transgénicos TCR.
Los animales transgénicos se fabrican inyectando un gen bajo el control de un promotor definido en un óvulo fertilizado (un cigoto; véase capítulo
del tiempo
A fines de la década de 1980, Harald von Boehmer y colaboradores publicaron una serie de experimentos seminales
Access Provided by: que proporcionaron evidencia
directa y convincente de la influencia de las interacciones de los receptores de los linfocitos T en las selecciones positiva y negativa. Reconocieron
que para entender cómo funcionaban las selecciones positiva y negativa, tendrían que ser capaces de rastrear y comparar el destino de los
timocitos con las especificidades definidas de los receptores de linfocitos T. Pero, ¿cómo podría uno hacer eso si cada uno de los cientos de
millones de timocitos normales expresan un receptor diferente? Los investigadores decidieron desarrollar un sistema en el que todos los timocitos
expresaran un receptor de linfocitos T de especificidad conocida, y de ese modo generaron uno de los primeros ratones transgénicos TCR.
Los animales transgénicos se fabrican inyectando un gen bajo el control de un promotor definido en un óvulo fertilizado (un cigoto; véase capítulo
20). El gen, o muchas copias del gen, se incorporarán al azar en el genoma del cigoto. Por tanto, el gen estará presente en todas las células del ratón
que se desarrollan a partir de ese cigoto; sin embargo, sólo las células que pueden activar el promotor expresarán el gen.
El equipo de Von Boehmer desarrolló los primeros animales transgénicos TCR mediante el aislamiento de los genes TCR α y TCR β totalmente
reorganizados de una línea de linfocitos T CD8+ madura que se sabía que era específica para un antígeno expresado sólo en ratones machos (el
antígeno “HY”) en el contexto de las moléculas de H2Db MHC de clase I (figura 1). Generaron una construcción genética que incluía ambos genes
reorganizados bajo el control de un promotor específico de los linfocitos T e inyectaron esto en un cigoto de ratón. Dado que los transgenes del
receptor ya se habían reorganizado, se reprimieron otros reordenamientos del gen TCR en los ratones transgénicos (debido al fenómeno de la
exclusión alélica; consúltese el texto y el capítulo 6); por tanto, un porcentaje muy alto de los timocitos en los ratones transgénicos expresaron las
combinaciones de αβ TCR específicas para HY/H2Db. (Resulta que no todos los timocitos expresaron esta combinación de TCR. ¿Por qué no?
Recuerde que la exclusión alélica no funciona bien para el locus de la cadena α de TCR en particular.)
La elección de las especificidades del equipo fue muy inteligente. Debido a que todos los timocitos expresaron una especificidad de TCR antígeno
antimasculino, los investigadores pudieron comparar directamente el fenotipo de los timocitos autorreactivos y los monocitos activadores no
autorizables simplemente comparando los ratones machos y hembras en la misma camada. Debido a que se conocía la restricción MHC del TCR,
también podían observar la influencia del haplotipo MHC en el desarrollo de los timocitos simplemente criando a los ratones con otras cepas
consanguíneas.
En la figura 1 se muestra una comparación de la expresión de CD4+ versus CD8+ entre los timocitos en ratones H2Db macho frente a las hembras.
Los datos primarios de una de las primeras publicaciones se muestran en la figura 2 y representan datos de citometría de flujo de expresión de los
timocitos CD4 y CD8. El perfil citométrico de flujo (véase capítulo 20) de un timo de tipo natural típico se muestra en la figura 2a y se puede usar para
comparación. En este perfil, el estado de expresión de CD8 de una célula se muestra en el eje x, y el estado de expresión de CD4, en el eje y. Los datos
se cuantifican en la esquina superior derecha del perfil. Como puede ver, más de 80% de los timocitos normales son DP, de 10% a 15% son positivos
para CD4, 3% a 5% son células positivas para CD8, y sólo un pequeño porcentaje de las células son DN. ¿En qué se diferencian los fenotipos CD4
frente a CD8 de los ratones transgénicos HY TCR macho y hembra (figura 2b), y ¿qué nos dice esto?
Los timocitos en ratones hembras se encuentran en todas las etapas de desarrollo: DN, DP y SP. De hecho, parece que tienen una gran cantidad de
timocitos CD8+ SP maduros. Volveremos a esto en breve. Los ratones machos, sin embargo, tienen pocos timocitos DP transgénicos antiHY TCR.
Estos datos muestran que en un entorno en el que los timocitos DP se exponen al antígeno para el que son específicos (en este caso, el antígeno HY
masculino), se eliminan. Este resultado fue totalmente consistente con el concepto de selección negativa y mostró que las células autorreactivas se
eliminaron del repertorio en desarrollo, tal vez en la etapa de DP. Sin embargo, los ratones ofrecieron ideas sobre muchos más aspectos de la
selección tímica.
La evidencia del papel de las interacciones TCR en la selección positiva, por ejemplo, provino de un experimento diferente en el que los
investigadores preguntaron qué pasaría si el elemento restrictivo “correcto”, H2Db, no estuviera presente en el ratón. Para hacer esto, realizaron
retrocruzamientos de sus ratones transgénicos TCR a ratones que expresaban un haplotipo H2 diferente, un ratón H2Dd. (Para aquellos que
quieran repasar su genética, determine qué cruzamientos haría para hacer esto, e incluya un plan para evaluar el genotipo de sus ratones.) La
figura 2c muestra el fenotipo CD4 frente a CD8 de los timocitos transgénicos HY TCR de los ratones hembras H2Db/d y ratones H2Dd. ¿Qué
encontraron?
Las hembras H2Dd no tenían linfocitos T maduros, lo que indica que, en ausencia del haplotipo MHC al que se restringía el TCR, los timocitos no
podían madurar más allá de la etapa DP. Estos datos proporcionaron evidencia directa de la necesidad de una interacción TCR/MHC propia para
que ocurra la maduración de los timocitos (selección positiva).
Estos experimentos “simples” también revelaron una tercera característica del desarrollo tímico e iniciaron una controversia que aún hoy resuena.
Vuelva a la figura 2b y observe los datos del ratón hembra. A diferencia de los timocitos de tipo natural, que típicamente incluyen de 3 a 5% de
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en el transgénico TCR antiHY eran células CD8+ maduras. ¿Qué significa esto? Recuerde que la
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Estos datos mostraron que la especificidad de restricción MHC del TCR (en este caso, una restricción para la clase I) influyó en su elección de linaje
CD4 frente a CD8. En otras palabras, los resultados sugirieron que los timocitos con nuevos TCR que se unían preferentemente a la clase II se
Las hembras H2Dd no tenían linfocitos T maduros, lo que indica que, en ausencia del haplotipo MHC al que se restringía el TCR, los timocitos no
podían madurar más allá de la etapa DP. Estos datos proporcionaron evidencia directa de la necesidad de una interacción TCR/MHC propia para
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que ocurra la maduración de los timocitos (selección positiva).
Estos experimentos “simples” también revelaron una tercera característica del desarrollo tímico e iniciaron una controversia que aún hoy resuena.
Vuelva a la figura 2b y observe los datos del ratón hembra. A diferencia de los timocitos de tipo natural, que típicamente incluyen de 3 a 5% de
linfocitos T CD8+, 46% de los timocitos en desarrollo en el transgénico TCR antiHY eran células CD8+ maduras. ¿Qué significa esto? Recuerde que la
línea de linfocitos T de la que provinieron originalmente los genes de los TCR era una línea de linfocitos T CD8+, restringida a MHC de clase I (H2Db).
Estos datos mostraron que la especificidad de restricción MHC del TCR (en este caso, una restricción para la clase I) influyó en su elección de linaje
CD4 frente a CD8. En otras palabras, los resultados sugirieron que los timocitos con nuevos TCR que se unían preferentemente a la clase II se
convertirían en linfocitos T maduros CD4+ SP, y los timocitos con TCR que se unían preferentemente a la clase I se desarrollarían en linfocitos T
maduros CD8+ SP.
Las conclusiones fundamentales de este conjunto de experimentos ahora clásico han superado la prueba del tiempo y han sido respaldadas por
muchos otros experimentos igualmente inteligentes: 1) La selección negativa de las células autorreactivas resulta en su eliminación en la etapa DP y
más allá. (Más tarde, quedó claro que el promotor que controlaba estos primeros transgenes HY TCR permitía una expresión anterior a la normal
del TCR, lo que daba como resultado la eliminación de las células autorreactivas en un punto de desarrollo anterior a lo habitual. Los experimentos
ahora indican que la selección negativa puede ocurrir en múltiples etapas, no sólo la DP sino también las etapas iniciales de desarrollo de SP.) 2) La
selección positiva implica una interacción de baja afinidad entre el TCR de los timocitos y las interacciones de MCH/péptido propio. 3) El
compromiso con el linaje CD4 frente a CD8 se determina por la preferencia del TCR para MHC clase I frente a la clase II. Precisamente, como ocurre
este último evento, se genera una intensa controversia (véase el texto).
REFERENCIA
von Boehmer H, Teh H and Kisielow P. 1989. The thymus selects the useful, neglects the useless and destroys the harmful. Immunology Today.10:57.
FIGURA 1
Demostración experimental de que la selección negativa de timocitos requiere tanto antígeno propio como MHC propio, y la
selección positiva requiere MHC propio. En este experimento, se generaron transgénicos H2Db masculinos y femeninos inyectando transgenes
TCR específicos para el antígeno HY más la molécula Db MHC en los cigotos. El antígeno HY se expresa sólo en los machos. Los ratones H2Dd también
se generaron mediante retrocruzamiento de estos transgénicos en una cepa H2d (por ejemplo, BALB/c). El análisis FACS de los timocitos de los
transgénicos mostró que los linfocitos T CD8+ maduros que expresan el transgén estaban ausentes en los ratones H2Db machos, pero aparecían en
los ratones H2Db hembras, lo que sugiere que los timocitos que se unen con alta afinidad a un antígeno propio (en este caso el antígeno HY en los
ratones machos), se eliminan durante el desarrollo tímico. Los resultados también muestran que los timocitos DP, pero no los CD8+, se desarrollan en
ratones hembras H2Dd, que no expresan el MHC propio apropiado. Estos hallazgos indican que la selección positiva y la maduración requieren
interacciones de MHC propio. [Datos de Von Boehmer H. y Kisielow P. Selfnonself discrimination by T cells. Science. 1990;248:1369.]

los ratones H2Db hembras, lo que sugiere que los timocitos que se unen con alta afinidad a un antígeno propio (en este caso el antígeno HY en los
ratones machos), se eliminan durante el desarrollo tímico. Los resultados también muestran que los timocitos DP, pero no los CD8+, se desarrollan en
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ratones hembras H2Dd, que no expresan el MHC propio apropiado. Estos hallazgos indican que la selección positiva y la maduración requieren
interacciones de MHC propio. [Datos de Von Boehmer H. y Kisielow P. Selfnonself discrimination by T cells. Science. 1990;248:1369.]
FIGURA 2
Datos primarios de los experimentos resumidos en la figura 1. La tinción relativa con un anticuerpo antiCD8 se muestra en el eje x, y la
tinción relativa con un anticuerpo antiCD4 aparece en el eje y. Los fenotipos DP, DN, CD4 SP y SP CD8 se dividen en cuadrantes y los porcentajes se
dan por cuadrante. a) Fenotipo CD4 frente a CD8 de un timo natural. b) CD4 frente a fenotipo CD8 de timocitos de HY TCR transgénicos H2b macho y
hembra. c) Fenotipo CD4 frente a CD8 de timocitos desde HY TCR transgénico H2b/d y H2d/d hembra. [Reimpreso con permiso de American Association
for the Advancement of Science, from Harald von Boehmer and Pawel Kisielow, Science, Selfnonself discrimination by T cells. Science. 1990, June 15;
248(4961):1369–1373, Figura 1. Permiso transferido a través de Copyright Clearance Center, Inc.]
Las células estromales tímicas incluyen células epiteliales corticales y medulares, tipos múltiples de células dendríticas y linfocitos B tímicos.
Desempeñan roles esenciales en las selecciones positiva y negativa y deben formar parte de nuestra visualización de los eventos de selección tímica.
Los timocitos DP jóvenes están en contacto íntimo con estas células estromales y, a medida que migran a través del timo, “recorren” los muchos
complejos MHC/péptidos propios que se muestran en las superficies de las células estromales. Además de expresar altos niveles de proteínas MHC de
clase I y clase II, algunas células estromales tienen la capacidad de generar y presentar péptidos únicos, una característica que analizaremos en breve.
Algunos extienden procesos largos que entran en contacto con muchos timocitos en desarrollo. Algunos también expresan ligandos estimulantes,
incluidos CD80 (B71) y CD86 (B72) (véase capítulo 10).
CONCEPTOS CLAVE
Los timocitos DP tienen uno de los tres destinos dependiendo de la afinidad de su TCR para los complejos de MCH/péptido propio expresados
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tímico.
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mayoría de los timocitos mueren porque no se unen a MHC/péptido con suficiente afinidad (un fallo en la selección positiva o la muerte por
abandono). Algunos (2 a 5%) mueren porque se unen a los MHC/péptidos con alta afinidad (selección negativa). Un porcentaje igualmente
pequeño de timocitos madura con éxito al unirse a MHC/péptidos con la afinidad intermedia correcta (selección positiva).
complejos MHC/péptidos propios que se muestran en las superficies de las células estromales. Además de expresar altos niveles de proteínas MHC de
clase I y clase II, algunas células estromales tienen la capacidad de generar y presentar péptidos únicos, una característica que analizaremos en breve.
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Algunos extienden procesos largos que entran en contacto con muchos timocitos en desarrollo. Algunos también expresan ligandos estimulantes,
incluidos CD80 (B71) y CD86 (B72) (véase capítulo 10).
CONCEPTOS CLAVE
Los timocitos DP tienen uno de los tres destinos dependiendo de la afinidad de su TCR para los complejos de MCH/péptido propio expresados
por las células del estroma tímico.
La mayoría de los timocitos mueren porque no se unen a MHC/péptido con suficiente afinidad (un fallo en la selección positiva o la muerte por
abandono). Algunos (2 a 5%) mueren porque se unen a los MHC/péptidos con alta afinidad (selección negativa). Un porcentaje igualmente
pequeño de timocitos madura con éxito al unirse a MHC/péptidos con la afinidad intermedia correcta (selección positiva).
Aunque el modelo de afinidad de selección no explica todos los aspectos de las selecciones negativa y positiva, sigue siendo un punto de
partida útil para comprender estos procesos.
La selección positiva garantiza la restricción de MHC
En la corteza tímica, los timocitos generados CD4+ CD8+ primero exploran las superficies de las células epiteliales del timo cortical (cTEC, cortical
thymic epitelial cells), que son únicas en su capacidad para mediar en la selección positiva. Si un timocito DP expresa un TCR que reconoce un
complejo MHC/péptido propio en la superficie de cTEC, experimentará una selección positiva, proceso que induce tanto la supervivencia como la
diferenciación de los timocitos DP. Sorprendentemente, más de 90% de los timocitos CD4+ CD8+ nunca comprometen el MHC péptidos que encuentran
con sus TCR. O bien no han generado una combinación funcional de TCRαβ, o la combinación no se une a los complejos de MHC/péptido con
suficiente afinidad. Estas células han “fallado” la prueba de selección positiva, no reciben señales de supervivencia a través de sus TCR y, en un plazo
de 3 a 4 días, experimentan una forma de apoptosis denominada muerte por abandono.
Se piensa que las interacciones TCR/MHC/péptido propio que inician la selección positiva son al menos tres veces más bajas en intensidad que las
interacciones que inician señales de selección negativas (figura 8–7). Todavía no entendemos completamente cómo las señales de TCR de selección
positiva de baja afinidad inician un programa de maduración. La proteína de señalización, Themis, se expresa específicamente por los timocitos y
parece ser necesaria para la selección positiva. Es probable que la comprensión de su papel conduzca a una interpretación más completa de las
señales que inducen la maduración de los timocitos DP.
FIGURA 8–7
Relación entre la afinidad de los TCR y la selección. Esta figura ilustra esquemáticamente la asociación entre el destino de los timocitos y la
afinidad de su TCR por los complejos de MHC/péptido propios que encuentran en el timo. Menos de 5% de los timocitos producen TCR que se unen a
los complejos de MHC/péptido con alta afinidad. La mayoría de estos serán eliminados por selección negativa. Algunos (con afinidad relativamente
alta) se convertirán en linfocitos T reguladores y en otros tipos de células especializadas. Más de 90% de los timocitos generan TCR que no se unen a
los complejos MHC/péptido o lo hacen con una afinidad muy baja. Estos mueren por abandono. Menos de 5% genera TCR que se unen con la afinidad
intermedia correcta a los complejos de MHC/péptido propios. Estos sobrevivirán y madurarán en linfocitos T CD4+ y CD8+.

los complejos de MHC/péptido con alta afinidad. La mayoría de estos serán eliminados por selección negativa. Algunos (con afinidad relativamente
alta) se convertirán en linfocitos T reguladores y en otros tipos de células especializadas. Más de 90% de los timocitos generan TCR que no se unen a
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los complejos MHC/péptido o lo hacen con una afinidad muy baja. Estos mueren por abandono. Menos de 5% genera TCR que se unen con la afinidad
intermedia correcta a los complejos de MHC/péptido propios. Estos sobrevivirán y madurarán en linfocitos T CD4+ y CD8+.
Aunque la importancia de las células epiteliales del timo cortical en este proceso está establecida, la base molecular de su capacidad única para
mediar en la selección positiva también sigue siendo un misterio interesante. Trabajos recientes muestran que su maquinaria de presentación de los
antígenos es única y genera una variedad distinta de péptidos, que pueden tener características que mejoran la interacción de baja afinidad con el
TCR.
¿Cuál es el valor adaptativo de la selección positiva? ¿Por qué no evolucionamos a un sistema que selecciona negativamente, pero deja intacto el
repertorio de receptores de los linfocitos T? Algunos han sugerido que la reducción del repertorio es importante para aumentar la eficiencia de la
selección negativa, así como para aumentar la eficiencia de las respuestas de los linfocitos T periféricos. Sin una selección positiva, el sistema estaría
saturado de una gran cantidad de células que rara vez reconocerán algo, lo que reduce enormemente la probabilidad de que un linfocito T encuentre
“su” antígeno en un tiempo razonable. Esta es una especulación coherente; sin embargo, la selección positiva también puede ofrecer ventajas más
sutiles que a menudo han inspirado la discusión en este campo.
CONCEPTOS CLAVE
Las células epiteliales del timo cortical (cTEC, cortical thymic epithelial cells) median la selección positiva.
Las señales de afinidad baja/intermedia entre los timocitos DP y los péptidos MHC propios en cTEC producen una selección positiva, lo que
desencadena un programa de maduración que envía las células a la médula e inicia su compromiso con los linajes positivos únicos de CD4+ o
CD8+. La selección positiva requiere la molécula de señalización específica de los timocitos, Themis.
La gran mayoría de los timocitos (más de 90%) no interactúan con ningún MHC/péptidos propios expresados por el epitelio tímico y mueren
por abandono.
La selección negativa (tolerancia central) asegura la autotolerancia
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Los timocitos 2023819 6:56 P Your IPcon receptores de alta afinidad para combinaciones de MHC propio/péptido propio son potencialmente
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y es responsable de la tolerancia central. Los errores en el proceso de selección
negativa generan una serie de trastornos autoinmunes, incluida la diabetes tipo 1 (consúltese el Enfoque clínico, recuadro 8–2).
por abandono.
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La selección negativa (tolerancia central) asegura la autotolerancia
Los timocitos CD4+ CD8+ autorreactivos con receptores de alta afinidad para combinaciones de MHC propio/péptido propio son potencialmente
peligrosos para un organismo, y muchos de ellos mueren por selección negativa en el timo. La selección negativa se define ampliamente como
cualquier proceso que libera un repertorio de clones autorreactivos y es responsable de la tolerancia central. Los errores en el proceso de selección
negativa generan una serie de trastornos autoinmunes, incluida la diabetes tipo 1 (consúltese el Enfoque clínico, recuadro 8–2).
RECUADRO 8–2
ENFOQUE CLÍNICO: ¿De qué modo los linfocitos T que causan la diabetes tipo 1 escapan a la selección negativa?
Tenemos una amplia apreciación del dolor causado por la enfermedad autoinmune y su progresión clínica. También hemos adquirido una
comprensión más profunda de los mecanismos detrás de la tolerancia inmune, pero aún sabemos poco sobre los orígenes precisos de los
trastornos autoinmunes. Indiscutiblemente, la causa principal de la enfermedad autoinmune es el escape de los linfocitos autorreactivos (linfocitos
B, linfocitos T o ambos) de la selección negativa. Sorprendentemente, se sabe poco sobre las razones de este escape, o la especificidad y el fenotipo
de los linfocitos escapados que causan incluso trastornos mejor caracterizados, como la diabetes tipo 1 (T1D, type 1 diabetes), la esclerosis múltiple
(MS, multiple sclerosis), la artritis reumatoide (RA, rheumatoid arthritis) y el lupus sistémico eritematoso (SLE, systemic lupus erythematosus).
El trabajo reciente en una cepa de ratón diabético no obeso (NOD, nonobese diabetic), que es marcadamente susceptible a la diabetes tipo 1, arrojó
luz sobre las características de los linfocitos T autorreactivos que causan la enfermedad, y reveló algunas razones interesantes para su escape de la
tolerancia central. T1D es una enfermedad autoinmune causada por los linfocitos T que destruyen los linfocitos beta de los islotes productores de
insulina en el páncreas. Muchos de los linfocitos T autorreactivos realmente reconocen un péptido específico de la propia proteína de la insulina.
Cuando Emil Unanue y colaboradores examinaron la fina especificidad de los linfocitos T que se habían infiltrado en las células de los islotes en
ratones propensos a la diabetes, encontraron dos tipos de células: los linfocitos T que podían responder al péptido de la insulina generado a través
de las vías de procesamiento intracelular de MHC de clase II por las células dendríticas (linfocitos T “tipo A”), y una población inesperada de
linfocitos T que respondieron al péptido de la insulina sólo si se agregaron de forma exógena a las moléculas del MHC de clase II en células
dendríticas (linfocitos T “tipo B”). Los investigadores especularon que la combinación de MHC/péptido de la insulina procesada de forma endógena
y el complejo del MHC/péptido insulina formado de modo exógeno difieren en la conformación (forma) y, por tanto, pueden activar diferentes
especificidades de los receptores de los linfocitos T.
Estas observaciones también sugirieron una razón elegante y precisa para el escape de los linfocitos T autorreactivos del timo. Las células
dendríticas en el páncreas, pero no en otros tejidos, parecen tener la capacidad única de formar MHC de clase II/péptidos insulina a partir de
fuentes exógenas, probablemente porque se encuentran en un entorno repleto de insulina extracelular secretada por las células del islote beta. Las
células epiteliales medulares tímicas o las células dendríticas no tendrían esta capacidad y, por tanto, los linfocitos T “tipo B” se filtrarían a través
del proceso de selección negativa en el timo.
Las causas del escape de los linfocitos T “tipo A” son menos claras. Estas son autorreactivas a los procesos convencionales de complejos de
insulina/MHC de clase II, que están presentes en las células medulares tímicas. ¿Quizá las células de tipo A expresaron una afinidad demasiado baja
para los péptidos de la insulina/MHC clase II en el timo, pero se inspiraron en los altos niveles de insulina y las señales inflamatorias en un islote
diabético? ¿Quizás escaparon a la selección negativa porque el nivel de expresión del péptido de la insulina en el epitelio medular era demasiado
bajo en la cepa de ratón NOD? De hecho, los datos recientes tanto de ratones como de humanos sugieren que el nivel de expresión de la insulina
influye significativamente en la progresión de la enfermedad y en la eficacia de la selección negativa en el timo.
Otro estudio reciente indica que el mimetismo biológico podría desempeñar un papel en la activación de los escapes autorreactivos. Se demostró
que los péptidos procesados a partir de los microbios lácteos y de las aves de corral comunes son altamente homólogos a un péptido de la insulina,
y muy potentes para activar los linfocitos T específicos de esta.
Comprensiblemente, la mayoría de las terapias actuales para la enfermedad autoinmune se centran en inhibir la causa secundaria pero más
próxima de la misma: la activación periférica de los linfocitos T y B autorreactivos que escaparon de la selección negativa. Sin embargo, al definir
también las razones moleculares para el escape de los linfocitos autorreactivos, podemos encontrar formas aún mejores de tratar los fallos de la
tolerancia inmunológica.
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produce mediante un proceso conocido como deleción clonal, donde las interacciones TCR de alta afinidad
inducen directamente la apoptosis. La deleción clónica de los timocitos DP está mediada por una variedad de tipos de células presentes en el timo. Se
sabe que las mismas interacciones que activan los linfocitos T maduros [acoplamiento de TCR de alta afinidad junto con las señales coestimuladoras
(véase el capítulo 10)] inducen la apoptosis en los linfocitos T DP inmaduros. Las células dendríticas tímicas y los macrófagos, que se encuentran en
próxima de la misma: la activación periférica de los linfocitos T y B autorreactivos que escaparon de la selección negativa. Sin embargo, al definir
también las razones moleculares para el escape de los linfocitos autorreactivos, podemos encontrar formas aún mejores de tratar los fallos de la
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tolerancia inmunológica.
La mayoría de la selección negativa se produce mediante un proceso conocido como deleción clonal, donde las interacciones TCR de alta afinidad
inducen directamente la apoptosis. La deleción clónica de los timocitos DP está mediada por una variedad de tipos de células presentes en el timo. Se
sabe que las mismas interacciones que activan los linfocitos T maduros [acoplamiento de TCR de alta afinidad junto con las señales coestimuladoras
(véase el capítulo 10)] inducen la apoptosis en los linfocitos T DP inmaduros. Las células dendríticas tímicas y los macrófagos, que se encuentran en
múltiples áreas del timo, tienen claramente las características ideales para mediar en la selección negativa, pero de manera interesante, también lo
hacen las células epiteliales del timo medular (mTEC, medullary thymic epithelial cells), que expresan altos niveles de los ligandos
coestimuladores CD80 y CD86. Por tanto, las células, tanto en la corteza como en la médula, tienen el potencial de inducir una selección negativa, la
cual se produce en ambos microambientes (consúltese la figura panorámica 8–5). ¿Por qué las señales TCR fuertes causan la muerte de los linfocitos T
inmaduros, pero la proliferación y diferenciación de los linfocitos T maduros (véase figura panorámica 8–3) sigue siendo un área activa de
investigación?
¿Cómo eliminamos los timocitos reactivos a antígenos específicos del tejido?
Como se explicó en el capítulo 7, casi todas las células son capaces de presentar péptidos propios con MHC en sus superficies. Sin embargo, sólo una
fracción de los tipos de células (timocitos, células epiteliales del timo cortical y medular, células dendríticas, linfocitos B y otras células presentadoras
de antígenos) residen en el timo. ¿Cómo establecemos la tolerancia a los antígenos específicos del tejido (CST, tissuespecific antigens), como la
insulina o la proteína básica de la mielina?
Esta pregunta molestó a los inmunólogos durante mucho tiempo. Por un tiempo, asumimos que otros mecanismos de tolerancia en la periferia se
encargaban de la autorreactividad a las autoproteínas específicas del tejido, pero las investigaciones a fines de la década de 1990 nos sorprendieron a
todos y revelaron que el timo tenía una capacidad extraordinaria para expresar y presentar proteínas sobre todo el cuerpo. Bruno Kyewski y
colaboradores demostraron que esta capacidad era una característica única de las células epiteliales del timo medular (mTEC, medullary thymic
epithelial cells). Diane Mathis, Christophe Benoist y colaboradores continuaron demostrando que los mTEC expresan una proteína única, AIRE, que
permite que los mTEC procesen y presenten proteínas que normalmente sólo se encuentran en órganos específicos.
Este descubrimiento ocurrió mientras estudiaban las bases moleculares de la autoinmunidad mediante el examen de enfermedades humanas.
Rastrearon una mutación que causó el síndrome de poliendocrinopatía autoinmune 1 (APS1, autoimmune polyendocrinopathy syndrome 1; también
conocido como APECED; consúltese el capítulo 18) en este gen, y lo llamaron AIRE por “regulador autoinmunitario”. El título del artículo que anunció
su descubrimiento, “Proyección de una sombra propia inmunológica dentro del timo por la proteína AIRE”, describió acertadamente su poderosa
función.
El mecanismo de acción de AIRE ahora se comprende mejor. No se une directamente al ADN; más bien, se une a las marcas epigenéticas en las histonas
asociadas con la cromatina cerrada. AIRE luego recluta los factores de transcripción a estos promotores de genes silenciados, lo que permite que la
ARN polimerasa obtenga acceso. Estudios recientes indican que AIRE no es el único regulador de la transcripción en mTEC que controla la expresión
de los antígenos específicos de tejido (TSA, tissuespecific antigens). Los miembros de la familia FEZ de las proteínas dedos de zinc pueden jugar un
papel similar.
Por tanto, los mTEC desempeñan un papel particularmente importante y único en la selección de nuestro repertorio de linfocitos T en desarrollo y la
eliminación de los linfocitos T que podrían iniciar una variedad de enfermedades autoinmunes específicas del tejido. Otras células estromales tímicas,
incluidas las células dendríticas y los linfocitos B, también son capaces de desencadenar la deleción clonal (véase la figura panorámica 8–5). Al
presentar proteínas propias involucradas en la presentación de los antígenos y la función de los linfocitos B, eliminan el repertorio de linfocitos T que
podrían reaccionar contra las células inmunitarias en sí mismas. Finalmente, las células dendríticas migratorias también tienen el potencial de
exponer los linfocitos T en desarrollo a las autoproteínas que han procesado fuera del timo y reducir la probabilidad de que los linfocitos T
autorreactivas escapen a la deleción clonal.
Aunque las cTEC también tienen la capacidad de mediar en la selección negativa, pero no suelen ser tan eficientes como las células dendríticas o mTEC
para inducir la deleción clonal. Sin embargo, las cTEC pueden desempeñar un papel en la prevención del desarrollo ulterior de los timocitos
inmaduros autorreactivos, como se explica a continuación.
Otros mecanismos de tolerancia central
Se han propuesto otros mecanismos de selección negativa tímica que no necesariamente implican la muerte celular. Incluyen el paro clonal, donde se
evita que maduren los timocitos que expresan receptores de linfocitos T autorreactivos; la anergia clonal, donde las células autorreactivas se
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TCR α. Cada uno de estos mecanismos tiene algún apoyo experimental, pero la deleción clonal es probablemente el mecanismo más común
responsable de la selección negativa tímica. La generación de los linfocitos T reguladores a partir de los timocitos autorreactivos puede considerarse
para inducir la deleción clonal. Sin embargo, las cTEC pueden desempeñar un papel en la prevención del desarrollo ulterior de los timocitos
inmaduros autorreactivos, como se explica a continuación.
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Otros mecanismos de tolerancia central
Se han propuesto otros mecanismos de selección negativa tímica que no necesariamente implican la muerte celular. Incluyen el paro clonal, donde se
evita que maduren los timocitos que expresan receptores de linfocitos T autorreactivos; la anergia clonal, donde las células autorreactivas se
inactivan, más bien se eliminan; y la edición clonal, donde las células autorreactivas tienen una segunda o tercera posibilidad de reorganizar un gen
TCR α. Cada uno de estos mecanismos tiene algún apoyo experimental, pero la deleción clonal es probablemente el mecanismo más común
responsable de la selección negativa tímica. La generación de los linfocitos T reguladores a partir de los timocitos autorreactivos puede considerarse
de importancia entre los mecanismos de la tolerancia central y se discutirá en breve.
Superantígenos
Superantígenos, proteínas virales o bacterianas que se unen simultáneamente al dominio Vβ de un receptor de linfocitos T y a la cadena α de una
molécula MHC de clase II (fuera del surco de unión al péptido), inducen la activación de todos los linfocitos T maduros que expresan esa particular
familia de cadenas Vβ (véase figura 10–7). Los superantígenos también se expresan en el timo de los ratones y los humanos e influyen en la
maduración de los timocitos. Debido a que imitan las interacciones TCR de alta afinidad, los superantígenos inducen la deleción clonal de todos los
timocitos DP cuyos receptores poseen dominios Vβ dirigidos por el superantígeno. Sin embargo, debido a que continuamente generamos linfocitos T
con una amplia gama de especificidades de receptores de linfocitos T, esta pérdida no parece tener consecuencias clínicas importantes.
CONCEPTOS CLAVE
Las interacciones TCR/MHC/péptido de alta afinidad dan como resultado una selección negativa, generalmente al iniciar la apoptosis de las
células de los timocitos reactivos (deleción clonal).
Las células epiteliales del timo medular (mTEC, medullary thymic epithelial cells) expresan el factor de transcripción AIRE, que es en gran parte
responsable de su capacidad única para expresar antígenos específicos del tejido.
Las células presentadoras de antígeno tímico, incluidas las células dendríticas y los linfocitos B, también son capaces de mediar en la selección
negativa tanto en la corteza como en la médula del timo.
La paradoja de la selección: ¿por qué no eliminamos todas las células que seleccionamos positivamente?
Una comprensión completa del proceso de las selecciones positiva y negativa requiere una apreciación de la siguiente paradoja: si la selección positiva
permite que sobrevivan sólo los timocitos reactivos con moléculas de MHC propias, y la selección negativa elimina los timocitos reactivos con MHC
propio, entonces, ¿cómo los linfocitos T escapan a la selección y maduran? Otros factores deben operar para evitar que estos dos procesos
dependientes de MHC eliminen todo el repertorio de los linfocitos T restringidos por MHC.
El modelo más directo y avanzado para explicar la paradoja de las selecciones positiva y negativa dependientes de MHC es el modelo de la afinidad de
la selección, que se introdujo anteriormente.* Este modelo afirma que las diferencias en la fuerza de las señales mediadas por los TCR recibidas por
los timocitos que experimentan las selecciones positiva y negativa determina el resultado de la interacción. Los timocitos doble positivos que reciben
señales de baja afinidad se seleccionan positivamente, los que reciben señales de alta afinidad (autorreactivos) se seleccionan negativamente y los
que no reciben ninguna señal mueren por abandono (figura 8–8; véase la figura panorámica 8–5).
FIGURA 8–8
Soporte experimental para el papel de la afinidad de TCR en la selección tímica. Las poblaciones de timocitos fetales aún no se han
sometido a las selecciones positiva y negativa y pueden manipularse fácilmente para estudiar el desarrollo y la selección de los linfocitos T positivos
únicos (CD4+ CD8− y CD4− CD8+). a) Descripción del procedimiento experimental para el cultivo in vitro de órganos del timo fetal (FTOC, fetal thymic
organ culture). Los timos fetales se cultivan en un disco de filtro en la interfaz entre el medio y el aire. Los reactivos añadidos al medio son absorbidos
por los timos. En este experimento, se agrega el péptido al medio de FTOC de los ratones knockout para TAP1 (TAP1−), que son incapaces de formar
complejos de péptido/MHC de clase I a menos que el péptido se agregue exógenamente al medio de cultivo. b) El desarrollo y la selección de CD8+ CD4−
de los linfocitos T restringidos dependientes de la interacción de TCR péptido/MHC clase I. Los ratones utilizados en este estudio fueron transgénicos
para las cadenas
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OTI,
YourqueIPreconocen un péptido de la ovoalbúmina cuando se asocia con MHC de clase I; la proporción de linfocitos T
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CAPÍTULO Desarrolloende
desarrollan linfocitos
estos timosT, Page
es más alta de lo normal porque todos los timocitos en el ratón expresan la especificidad restringida por24la/ 40
clase I del MHC. Diferentes péptidos/complejos MHC interactúan con el TCR a través de diferentes afinidades. La variación del péptido agregado a
FTOC de los ratones OTI+/TAP1− reveló que los péptidos que interactúan con afinidades bajas (fila intermedia) dieron como resultado una selección
únicos (CD4 CD8 y CD4 CD8 ). a) Descripción del procedimiento experimental para el cultivo in vitro de órganos del timo fetal (FTOC, fetal thymic
organ culture). Los timos fetales se cultivan en un disco de filtro en la interfaz entre el medio y el Universidad
aire. Los reactivos añadidos
Científica al medio
del Sur son absorbidos
por los timos. En este experimento, se agrega el péptido al medio de FTOC de los ratones knockout para
Access TAP1by:(TAP1−), que son incapaces de formar
Provided
complejos de péptido/MHC de clase I a menos que el péptido se agregue exógenamente al medio de cultivo. b) El desarrollo y la selección de CD8+ CD4−
de los linfocitos T restringidos dependientes de la interacción de TCR péptido/MHC clase I. Los ratones utilizados en este estudio fueron transgénicos
para las cadenas α y β del TCR OTI, que reconocen un péptido de la ovoalbúmina cuando se asocia con MHC de clase I; la proporción de linfocitos T
CD8+ que se desarrollan en estos timos es más alta de lo normal porque todos los timocitos en el ratón expresan la especificidad restringida por la
clase I del MHC. Diferentes péptidos/complejos MHC interactúan con el TCR a través de diferentes afinidades. La variación del péptido agregado a
FTOC de los ratones OTI+/TAP1− reveló que los péptidos que interactúan con afinidades bajas (fila intermedia) dieron como resultado una selección
positiva, y niveles de las células CD4CD8+ que se aproximaron a los observados en ratones OTI+/TAP1+. Los péptidos que interactúan con afinidades
altas (fila inferior) causan una selección negativa, y aparecen menos linfocitos T CD4CD8+.
¿Cómo se ha probado esta hipótesis? Kristin Hogquist y colaboradores idearon uno de los mejores modelos experimentales para examinar la
conexión entre la afinidad de los TCR y la selección tímica. Generaron un ratón transgénico que expresaba el TCR OTI, cuya especificidad
péptido/MHC era precisamente conocida: se unía a un péptido específico de ovoalbúmina de pollo (OVA, ovalbumin) en el contexto de la molécula de
MHC H2Kb clase I. La afinidad del TCR OTI por una variedad de péptidos que diferían en la secuencia también era conocida y variaba de baja a alta.
Para determinar la influencia de la afinidad en el desarrollo de los linfocitos T, los investigadores aprovecharon dos herramientas inmunológicas
adicionales: 1) el sistema de cultivo de órganos tímicos fetales (FTOC, fetal thymic organ culture), donde se puede seguir el desarrollo tímico in vitro
(véase figura 8–8a), y 2) los ratones defectuosos en el procesamiento de los antígenos de MHC clase I. En este experimento en particular, los
investigadores usaron ratones mutantes con deleción para TAP1 (TAP1), que no pueden cargar sus moléculas MHC de clase I con péptido (véase
capítulo 7). Las células en estos ratones mutantes expresan MHC clase I en sus superficies, pero estas moléculas de MHC están “vacías” y no mantienen
su forma. Sin embargo, se pueden cargar con los péptidos exógenos, que estabilizan su conformación. Por tanto, al incubar los órganos tímicos
fetales de estos ratones mutantes con péptidos de elección, los investigadores pudieron controlar con precisión el tipo de complejo péptido/MHC con
el que se encontrarían los linfocitos T en desarrollo.
¿Qué encontraron los investigadores? Primero, como se esperaba, los timocitos en los cultivos de órganos tímicos fetales OTI+/TAP1+ de control se
seleccionaron positivamente y maduraron, con predominio en células CD8+. ¿Por qué linfocitos T CD8+? Recuerde que los timocitos transgénicos TCR
OTI expresan un receptor restringido a MHC de clase I. En los cultivos de órganos tímicos fetales normales (TAP1+), las moléculas de MHC de clase I
están ocupadas
Downloaded por una variedad
2023819 de autopéptidos.
6:56 P Your Los timocitos OTI+ que se enlazan en las combinaciones de MHC de clase I/péptido con una
IP is 34.211.3.223
CAPÍTULO 8: Desarrollo
afinidad apropiada de linfocitos
(intermedia) T, Debido a que reconocen el MHC de clase I, maduran específicamente en linfocitos T CD8+ (consúltese
maduran. Page 25el/ 40
recuadro de experimento clásico 8–1).
En segundo lugar, y también como se esperaba, los linfocitos T maduros CD8+ no se desarrollaron en los cultivos de los órganos tímicos OTI+/TAP1−.
el que se encontrarían los linfocitos T en desarrollo.
¿Qué encontraron los investigadores? Primero, como se esperaba, los timocitos en los cultivos deAccess
órganos tímicos
Provided by: fetales OTI+/TAP1+ de control se
seleccionaron positivamente y maduraron, con predominio en células CD8+. ¿Por qué linfocitos T CD8+? Recuerde que los timocitos transgénicos TCR
OTI expresan un receptor restringido a MHC de clase I. En los cultivos de órganos tímicos fetales normales (TAP1+), las moléculas de MHC de clase I
están ocupadas por una variedad de autopéptidos. Los timocitos OTI+ que se enlazan en las combinaciones de MHC de clase I/péptido con una
afinidad apropiada (intermedia) maduran. Debido a que reconocen el MHC de clase I, maduran específicamente en linfocitos T CD8+ (consúltese el
recuadro de experimento clásico 8–1).
En segundo lugar, y también como se esperaba, los linfocitos T maduros CD8+ no se desarrollaron en los cultivos de los órganos tímicos OTI+/TAP1−.
Sin TAP1 no hay un MHC de clase I normal y, por tanto, los timocitos OTI+ no tienen nada que activar y no recibirán una señal TCR. Mueren por
abandono (véase figura 8–8b, fila superior).
Los investigadores ahora podrían realizar los experimentos clave, agregar diferentes péptidos al sistema y observar lo que les sucedió a los timocitos.
Cuando agregaron un péptido de baja afinidad al cultivo OTI+/TAP1−, el MHC clase I fue capaz de cargarse con el péptido y asumir una conformación
normal (consúltese la figura 8–8b, fila central). Se produjo una selección positiva y los linfocitos T CD8+ se desarrollaron con éxito. La adición de los
péptidos que se sabía que generaban interacciones TCR OTI/MHC de alta afinidad dio lugar no a una selección positiva, sino a la eliminación de
células DP en los cultivos de órganos tímicos OTI+/TAP1− (véase figura 8–8b, fila inferior). Curiosamente, las bajas concentraciones de péptidos de alta
afinidad también indujeron selección positiva, aunque las células que se desarrollaron no eran completamente funcionales. Estos resultados y
muchos otros proporcionaron un claro apoyo para el modelo de la afinidad, mostrando que la fuerza de la interacción TCR/MHC/péptido, de hecho,
influye en el destino celular.
El sistema OTI sigue siendo útil para abordar otras preguntas y suposiciones acerca de las selecciones positiva y negativa. Por ejemplo, ha permitido a
los investigadores estimar el rango de afinidades de TCR que definen resultados de selección positivos frente a negativos. Tal parece que la selección
negativa se produce en afinidades tres veces más altas que las que inducen la selección positiva.
El sistema OTI también ha sido valioso en los esfuerzos para rastrear el comportamiento de los timocitos vivos que experimentan selecciones positiva
y negativa (figura 8–9 y video 8–9v). Se registraron los movimientos de los timocitos y sus huellas se muestran en rojo en la figura. En ausencia del
péptido OVA, los timocitos que expresan el TCR OTI migran entre las células dendríticas (amarillas), hacen contactos breves y continúan (véase la
figura 8–9, izquierda). En presencia del péptido OVA (por el cual tienen una alta afinidad), los timocitos OTI disminuyen la velocidad y mantienen el
contacto con la célula dendrítica (véase figura 8–9, derecha). Estas observaciones confirman satisfactoriamente los supuestos de que la selección
negativa es el resultado de una interacción sostenida APC/timocitos. Estos y otros estudios sobre las interacciones de los timocitos con las cTEC
también revelan que la selección positiva se realiza mediante contactos TCR sorprendentemente breves y quizás acumulativos.
FIGURA 8–9
Imágenes de timocitos DP en vivo sometidos a la selección en el timo. Esta figura está tomada de videos de timocitos vivos (rojos), ya que
sondean células dendríticas (amarillas) en la corteza del tejido tímico. Estos timocitos son específicos para el péptido OVA, que está presente en los
timos filmados a la derecha, pero no a la izquierda. Sus recorridos son rastreados y mostrados en rojo. Los timocitos específicos de OVA disminuyen la
velocidad y se comprometen a interacciones a largo plazo con las células dendríticas (derecha), mientras que los timocitos que no encuentran su
péptido de alta afinidad establecen breves contactos y luego se mueven (izquierda). Las interacciones a largo plazo conducen finalmente a la muerte
de los timocitos (selección negativa) y los contactos cortos con las células dendríticas y las células epiteliales del timo cortical (no marcadas) conducen
a la maduración y la selección positiva. [Reimpreso con permiso de American Association for the Advancement of Science, from Melichar HJ, et al.,
2013. Distinct temporal pattern of T cell receptor signals during positive versus negative selection in situ. Science Signaling 6:ra92, Figura 4. Permiso
transmitido a través de Copyright Clearance Center, Inc.]

de los timocitos (selección negativa) y los contactos cortos con las células dendríticas y las células epiteliales del timo cortical (no marcadas) conducen
a la maduración y la selección positiva. [Reimpreso con permiso de American Association for the Advancement of Science, from Melichar HJ, et al.,
Access Provided by:
2013. Distinct temporal pattern of T cell receptor signals during positive versus negative selection in situ. Science Signaling 6:ra92, Figura 4. Permiso
transmitido a través de Copyright Clearance Center, Inc.]
CONCEPTOS CLAVE
El modelo de afinidad para la selección de los timocitos proporciona una explicación elegante para la paradoja de la selección del timo.
Los ratones transgénicos receptores de los linfocitos T, incluido el sistema OTI, proporcionan soporte para el modelo de la afinidad de la
selección de los timocitos.
Un modelo alternativo puede explicar la paradoja de la selección tímica
Philippa Marrack, John Kappler y colaboradores ofrecieron cuidadosamente una posibilidad alternativa para explicar la “paradoja tímica”, es decir,
por qué no seleccionamos negativamente todas las células que seleccionamos positivamente. Estos investigadores avanzaron el modelo peptídico
alterado, el cual sugiere que las células epiteliales del timo cortical, que inducen una selección positiva, producen péptidos únicos y distintos de
aquellos producidos por los linfocitos tímicos que inducen una selección negativa. Por tanto, los timocitos seleccionados en estos complejos
péptido/MHC únicos no se seleccionarán automáticamente de forma negativa cuando ellos exploren la médula y otras células de selección negativa.
Aunque los primeros experimentos no apoyaron este modelo, los avances en nuestra capacidad para analizar los péptidos presentados en las
superficies celulares en detalle sugieren que el modelo tiene mérito. Las células epiteliales del timo cortical, de hecho, procesan los péptidos de
manera diferente, y presentan una serie diferente de péptidos a los linfocitos T en desarrollo. Recuerde que los péptidos son procesados
intracelularmente por proteasomas (véase figura 7–13). Curiosamente, el proteasoma expresado por las células epiteliales del timo cortical
(timoproteasoma) tiene un componente único. Los cTEC también expresan una versión única de la proteasa de catepsina. Estas características, juntas,
permiten a los cTEC producir una población de péptidos que ninguna otra célula puede generar.
Los modelos de péptidos y afinidad alterados no son de ninguna manera mutuamente excluyentes. Las investigaciones han establecido firmemente
que la afinidad juega un papel importante en la distinción entre selecciones positiva y negativa. El hecho de que la corteza también produce péptidos
novedosos sugiere que la evolución favoreció múltiples formas de garantizar la generación de un grupo diverso de linfocitos T, la mejor respuesta a
un universo de antígenos y patógenos en continua evolución.
CONCEPTOS CLAVE
Dos modelos para la selección del timo, el modelo de la afinidad y el modelo peptídico alterado, están respaldados por evidencia experimental
y pueden funcionar juntos.
Las células epiteliales del timo cortical (cTEC, cortical thymic epithelial cells) expresan un sistema de proteasoma distinto que produce y
presenta un conjunto único de péptidos para la selección positiva.

CAPÍTULO
¿Ocurren 8:selecciones
Desarrollo de positivas
linfocitos T, y negativas en la misma etapa de desarrollo o en secuencia? Page 27 / 40
Estrictamente interpretado, el modelo de afinidad asume que las selecciones tanto positiva como negativa, operan exactamente en la misma
población objetivo (timocitos DP) y en el mismo microambiente del timo (la corteza tímica). Sin embargo, aunque la selección positiva ocurre en la
Los modelos de péptidos y afinidad alterados no son de ninguna manera mutuamente excluyentes. Las investigaciones han establecido firmemente
que la afinidad juega un papel importante en la distinción entre selecciones positiva y negativa. El hecho de que la corteza también produce péptidos
Access Provided by:
novedosos sugiere que la evolución favoreció múltiples formas de garantizar la generación de un grupo diverso de linfocitos T, la mejor respuesta a
un universo de antígenos y patógenos en continua evolución.
CONCEPTOS CLAVE
Dos modelos para la selección del timo, el modelo de la afinidad y el modelo peptídico alterado, están respaldados por evidencia experimental
y pueden funcionar juntos.
Las células epiteliales del timo cortical (cTEC, cortical thymic epithelial cells) expresan un sistema de proteasoma distinto que produce y
presenta un conjunto único de péptidos para la selección positiva.
¿Ocurren selecciones positivas y negativas en la misma etapa de desarrollo o en secuencia?
Estrictamente interpretado, el modelo de afinidad asume que las selecciones tanto positiva como negativa, operan exactamente en la misma
población objetivo (timocitos DP) y en el mismo microambiente del timo (la corteza tímica). Sin embargo, aunque la selección positiva ocurre en la
corteza, la selección negativa puede ocurrir en una variedad de etapas y sitios de desarrollo (ilustrado en la figura panorámica 8–5). Las células
dendríticas son particularmente buenas para mediar la deleción clonal y se encuentran en todos los microambientes del timo, incluida la corteza.
Como hemos discutido anteriormente, las células epiteliales del timo cortical pueden detener o anergizar los timocitos DP autorreactivos. Los
timocitos DP que se seleccionan positivamente viajan a la médula y se convierten en timocitos SP semimaduros. Estos pueden ser eliminados
clonalmente por múltiples células en la médula, incluidos los linfocitos B, las células dendríticas y las células epiteliales medulares, el único tipo de
célula que expresa los antígenos propios específicos del tejido.
Ahora se sabe que la migración de los timocitos seleccionados positivamente a la médula depende de la expresión del receptor de quimioquinas CCR7,
que se induce mediante la señalización de TCR. Curiosamente, aunque los timocitos de ratones deficientes en CCR7 no pueden migrar de la corteza a
la médula, todavía maduran y encuentran su camino fuera del timo. Sin embargo, tienen una tendencia a causar autoinmunidad, una observación
que, una vez más, subraya la importancia central de la médula en la eliminación de las células autorreactivas y específicas del tejido del repertorio de
los linfocitos T.
CONCEPTOS CLAVE
La selección negativa puede ocurrir tanto en la corteza como en la médula y está mediada por múltiples tipos de células en la corteza y la
médula.
La selección positiva se produce en la corteza. Los timocitos seleccionados positivamente regulan el receptor de quimioquinas CCR7, lo que les
permite migrar desde la corteza tímica a la médula tímica. Los timocitos semimaduros, en transición de la etapa DP a la etapa SP de desarrollo,
pueden seleccionarse negativamente por los antígenos específicos del tejido presentados por las células epiteliales medulares.
* Tenga en cuenta que una versión similar de esta hipótesis también se conoce como la hipótesis de la avidez. La avidez y la afinidad tienen
significados distintos, que pueden diferir para distintos investigadores. En aras de la simplicidad, consideramos que la afinidad significa la fuerza de
interacción entre el TCR y su ligando MHC/péptido. Para una discusión más matizada de las diferencias entre afinidad y avidez y su influencia en el
desarrollo tímico, vea la revisión de Klein et al., enumerada en la sección Referencias de este capítulo.
COMPROMISO DE LINAJE
Mientras que los timocitos se analizan en función de la afinidad TCR para los antígenos propios, también se les guía en sus decisiones de linaje.
Específicamente, un timocito doble positivo seleccionado positivamente debe decidir si unirse al linaje de linfocitos T citotóxicos CD8+ o al linaje de
linfocitos T auxiliares CD4+. El compromiso de linaje requiere cambios en la organización genómica y la expresión génica que resultan en 1)
silenciamiento de un gen correceptor (CD4 o CD8) así como 2) expresión de genes asociados con una función específica de linaje. Los inmunólogos
continúan debatiendo los mecanismos celulares y moleculares precisos responsables del compromiso de linaje. Revisaremos las perspectivas más
actuales.
Varios modelos han sido propuestos para explicar el compromiso de linaje

Cuando los primeros
©2023 McGraw estudios
Hill. All Rightscon ratones transgénicos
Reserved. con
Terms of Use TCR revelaron
• Privacy Policy que la afinidad
• Notice por el MHC de clase I frente a la clase II dictaba el destino de
• Accessibility
CD8+ frente a CD4+ de los timocitos en desarrollo (consúltese el cuadro de experimento clásico 8–1), los investigadores avanzaron dos modelos
simples y verificables para explicar cómo se “adaptan” los linfocitos T en desarrollo a su TCR preferente para las MHC clase I o las MHC clase II con su
linfocitos T auxiliares CD4+. El compromiso de linaje requiere cambios en la organización genómica y la expresión génica que resultan en 1)
silenciamiento de un gen correceptor (CD4 o CD8) así como 2) expresión de genes asociados con una función específica de linaje. Los inmunólogos
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continúan debatiendo los mecanismos celulares y moleculares precisos responsables del compromiso de linaje. Revisaremos las perspectivas más
actuales.
Varios modelos han sido propuestos para explicar el compromiso de linaje
Cuando los primeros estudios con ratones transgénicos con TCR revelaron que la afinidad por el MHC de clase I frente a la clase II dictaba el destino de
CD8+ frente a CD4+ de los timocitos en desarrollo (consúltese el cuadro de experimento clásico 8–1), los investigadores avanzaron dos modelos
simples y verificables para explicar cómo se “adaptan” los linfocitos T en desarrollo a su TCR preferente para las MHC clase I o las MHC clase II con su
expresión de correceptor.
En el modelo instructivo, el compromiso conjunto TCR/CD4 y TCR/CD8 generan señales únicas que inician directamente programas de desarrollo
distintos (figura 8–10a). Por ejemplo, si un timocito genera aleatoriamente un TCR con una afinidad por las moléculas del MHC de clase I, el TCR y el
CD8 se unirán a una molécula del MHC de clase I y generarán una señal que inicia específicamente un programa que silencia la expresión de CD4 y la
expresión inducida de genes específicos para la función del linaje de linfocitos T citotóxicos. Del mismo modo, el compromiso de TCR/CD4 generaría
una señal única que inicia el silenciamiento de CD8 y el programa de desarrollo de linfocitos T auxiliares.
FIGURA 8–10
Modelos propuestos de compromiso de linaje, la decisión de los timocitos doble positivos para convertirse en CD4+ auxiliares o en
linfocitos T CD8+ citotóxicos. a) De acuerdo con el modelo instructivo, la interacción de un correceptor con la molécula MHC para la cual es
específica resulta en una regulación negativa del otro correceptor. b) De acuerdo con el modelo estocástico, la regulación descendente de CD4 o CD8
es un proceso aleatorio. c) Según el modelo de señalización cinética, la decisión de comprometerse con el linaje CD4 o CD8 se basa en la continuidad
de la señal TCR que recibe un timocito. La selección positiva da como resultado una regulación negativa de CD8 en todos los timocitos. Esto no alterará
la intensidad de una señal TCR/CD4/MHC clase II, y las células que reciben esta señal continuarán desarrollándose hasta el linaje CD4 SP. Sin embargo,
la regulación descendente de CD8 disminuye (interrumpe) una señal de TCR/CD8/MHC clase I, una experiencia que envía una célula hacia el linaje CD8.
Se requieren señales IL7 para “sellar” el compromiso del linaje CD8.
Un modelo alternativo, conocido como el modelo estocástico, propuso que un timocito seleccionado positivamente regula a la baja CD4 o CD8
(figura 8–10b). Sólo aquellas células que expresan el correceptor “correcto”, las que pueden coinvolucrar al MHC con el TCR, generan una señal de
TCR lo suficientemente fuerte como para sobrevivir y madurar. En este modelo, el compromiso conjunto de TCR/CD4 y TCR/CD8 no siempre genera
señales distintas.
Downloaded Desafortunadamente,
2023819 6:56 P Your IPlos estudios que siguieron las consecuencias de estos desajustes confundieron a los investigadores al
is 34.211.3.223
CAPÍTULO
proporcionar8:evidencia
Desarrollo
ende linfocitos
apoyo T, modelos. Claramente eran demasiado simplistas.
de ambos Page 29 / 40
Otros experimentos desafiaron algunas de las suposiciones en las que se basaron estos primeros esfuerzos, e indicaron que la fuerza y la duración de
la señal del receptor/correceptor de los linfocitos T que experimenta un timocito juega un papel más importante en la determinación del destino
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Un modelo alternativo, conocido como el modelo estocástico, propuso que un timocito seleccionado positivamente regula a la baja CD4 o CD8
(figura 8–10b). Sólo aquellas células que expresan el correceptor “correcto”, las que pueden coinvolucrar al MHC con el TCR, generan una señal de
TCR lo suficientemente fuerte como para sobrevivir y madurar. En este modelo, el compromiso conjunto de TCR/CD4 y TCR/CD8 no siempre genera
señales distintas. Desafortunadamente, los estudios que siguieron las consecuencias de estos desajustes confundieron a los investigadores al
proporcionar evidencia en apoyo de ambos modelos. Claramente eran demasiado simplistas.
Otros experimentos desafiaron algunas de las suposiciones en las que se basaron estos primeros esfuerzos, e indicaron que la fuerza y la duración de
la señal del receptor/correceptor de los linfocitos T que experimenta un timocito juega un papel más importante en la determinación del destino
celular que su especificidad para la clase MHC I o clase II. Al inhibir la señalización del TCR, los investigadores podrían convencer a las células que
normalmente se comprometen con el linaje CD4 de convertirse en células CD8+. Al mejorar la señalización del TCR, los investigadores podrían
convencer a las células restringidas por MHC de clase I para que se conviertan en CD4+. Este modelo de fuerza de señal representó un avance en
nuestra comprensión, pero no incorporó todos los datos.
Alfred Singer y colaboradores han propuesto un modelo que tiene el respaldo experimental más sólido hasta la fecha. El modelo de señalización
cinética incorpora datos históricos, nuestra mejor comprensión de los cambios en la expresión de CD8 durante la selección positiva, así como los
avances recientes en la comprensión de la complejidad del silenciamiento génico de los receptores de circuitos (figura 8–10c). Brevemente, propone
que los timocitos se comprometen con el linaje de linfocitos T CD4+ si reciben una señal continua en respuesta al compromiso TCR/correceptor, pero
con el linaje CD8 esto pasa si se interrumpe la señal TCR. Ahora sabemos que todos los timocitos CD4+ CD8+ regulan a la baja los niveles superficiales
de CD8 en respuesta a la selección positiva. Dada esta respuesta, sólo los linfocitos T restringidos por MHC de clase II mantendrán la interacción
continua TCR/CD4/MHC de clase II y, por tanto, desarrollarán el linaje de CD4. Sin embargo, con la pérdida de la expresión de CD8, los linfocitos T
restringidos por MHC de clase I perderán la capacidad de mantener las interacciones TCR/CD8/MHC de clase I. Singer y colaboradores proporcionan
evidencia de que estos timocitos, interrumpidos por su compromiso TCR/correceptor, son posteriormente rescatados por la IL7, una citoquina clave
que promueve la diferenciación en el linaje CD8+.
CONCEPTOS CLAVE
Los timocitos DP seleccionados positivamente deben decidir si se convierten en linfocitos T CD4+ auxiliares o en linfocitos T CD8+ citotóxicos.
Este proceso, denominado compromiso de linaje, depende de la cinética de la señalización del TCR experimentada por los timocitos DP.
Los timocitos cuyo TCR interactúa preferentemente con (está restringido a) MHC clase II generan una señal continua que inicia un programa de
desarrollo de linfocitos T auxiliares CD4+.
Los timocitos cuyo TCR interactúa preferentemente (está restringido a) MHC clase I no pueden generar una señal continua porque los niveles
superficiales del correceptor CD8 están regulados por disminución en todas las células en respuesta a la selección positiva. Esta reducción o
interrupción en la señalización inicia un programa de desarrollo de CD8 que se aplica mediante una estimulación adicional en presencia de IL
7.
Factores de transcripción ThPOK y Runx3 regulan el compromiso de linaje
ThPOK y Runx3 han tomado protagonismo como factores de transcripción requeridos para el compromiso de CD4 y CD8, respectivamente. Tanto Th
POK como Runx3 actúan, al menos en parte, al suprimir los genes involucrados en la diferenciación del otro linaje. ThPOK activa la expresión de CD4 e
inhibe aquella de los genes que regulan la diferenciación de CD8, incluidos los genes que codifican CD8 y Runx3. Recíprocamente, Runx3 activa la
expresión de CD8 e inhibe la de los genes que codifican CD4 y ThPOK. La secuencia de eventos y el reparto completo de jugadores que regulan el
compromiso de linaje a nivel genómico todavía están bajo investigación; claramente hay más por venir.
CONCEPTOS CLAVE
Los factores de transcripción ThPOK y Runx3 desempeñan funciones clave en la célula auxiliar CD4+ y el compromiso de las células citotóxicas
CD8+, respectivamente. Trabajan en parte regulándose recíprocamente entre sí.
Los timocitos doble positivos pueden comprometerse con otros tipos de linfocitos
Las
©2023pequeñas
McGraw poblaciones de timocitos
Hill. All Rights Reserved.DP también
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• Privacy tipos•de
Policy linfocitos
Notice T, incluidos los linfocitos TNK, los linfocitos T reguladores y
• Accessibility
los linajes de linfocitos intraepiteliales (IEL, intraepithelial lymphocyte). Las células NKT desempeñan un papel en la inmunidad innata (consúltese el
capítulo 4) y expresan un TCR que incluye una cadena α de TCR invariante (Vα14). El TCR de las células NKT (a veces denominadas células invariantes o
Los factores de transcripción ThPOK y Runx3 desempeñan funciones clave en la célula auxiliar CD4+ y elCientífica
Universidad compromisodel Sur Ciencias
de las de la Salud
células citotóxicas
CD8+, respectivamente. Trabajan en parte regulándose recíprocamente entre sí. Access Provided by:
Los timocitos doble positivos pueden comprometerse con otros tipos de linfocitos
Las pequeñas poblaciones de timocitos DP también dan lugar a otros tipos de linfocitos T, incluidos los linfocitos TNK, los linfocitos T reguladores y
los linajes de linfocitos intraepiteliales (IEL, intraepithelial lymphocyte). Las células NKT desempeñan un papel en la inmunidad innata (consúltese el
capítulo 4) y expresan un TCR que incluye una cadena α de TCR invariante (Vα14). El TCR de las células NKT (a veces denominadas células invariantes o
iNKT) interactúa no con el MHC clásico, sino con la molécula relacionada CD1, la cual presenta glicolípidos, no péptidos (véase capítulo 7), y se expresa
no por el epitelio, sino por los timocitos DP mismos. Los linfocitos intraepiteliales (IEL, intraepithelial lymphocytes), la mayoría de los cuales es
CD8+, también tienen características de células inmunes innatas y tejidos de barrera de patrulla. Los linfocitos T reguladores (linfocitos TREG), un
subconjunto de CD4+ discutido con mayor detalle más adelante en este capítulo, apagan las reacciones inmunitarias adaptativas. Estos tres tipos de
células pueden desarrollarse a partir de los timocitos DP en respuesta a las interacciones del TCR de alta afinidad autorreactivas; las mismas
interacciones, de hecho, que median la selección negativa. Qué determina si un timocito experimenta una selección negativa o una vía de desarrollo
alternativa sigue siendo un tema de mucho interés.
CONCEPTOS CLAVE
Para un pequeño porcentaje de timocitos, las interacciones de TCR de alta afinidad no conducen a la eliminación, sino al desarrollo de linajes
celulares especializados, incluidas las células NKT, IEL y los linfocitos T CD4+ reguladores.
SALIDA DEL TIMO Y MADURACIÓN FINAL

Se tarda menos de 3 días para que un timocito DP recién formado madure a la etapa SP, si se selecciona de manera positiva. Las células SP pasan un
periodo más largo (de 4 a 12 días) en la médula, explorando la superficie de las células epiteliales y dendríticas en busca del antígeno propio, antes de
que se le dé permiso para abandonar el timo.
La base celular y molecular para la salida de los timocitos fue desconocida hasta que los investigadores obtuvieron una mejor comprensión de las
moléculas que regulan la migración celular. Como se mencionó anteriormente, un grupo de investigadores descubrió que los timocitos no pudieron
ingresar a la médula si eran deficientes para el receptor de quimioquinas CCR7. Sin embargo, estas células aún podían abandonar el timo
directamente de la corteza, lo que indica que al menos otro receptor controla la salida del timo. La identidad de este receptor se descubrió cuando los
investigadores encontraron que pocos linfocitos T, si alguno, salían del timo en un ratón inactivado para el receptor 1 de la esfingosina 1fosfato
receptor 1 (S1P receptor 1 o S1P1). Ahora sabemos que los timocitos maduros regulan al alza el receptor 1 de S1P como parte del programa de
desarrollo iniciado por selección positiva. El receptor 1 de S1P interactúa con su ligando, S1P, en la unión corticomedular, lo que facilita la salida de
los timocitos hacia el espacio perivascular y el torrente sanguíneo.
Las observaciones actuales indican que estas etapas finales de la maduración intratímica están controladas por la siguiente cascada de eventos: las
señales TCR de selección positiva regulan el Foxo1, un factor de transcripción que controla la expresión de varios genes relacionados con la función de
los linfocitos T. El Foxo1 regula la expresión de Klf2 que, a su vez, regula al alza el receptor 1 de S1P. Foxo1 también regula al alza tanto el receptor de
IL7 (IL7R, IL7 receptor), que ayuda a mantener la supervivencia de los linfocitos T maduros, como el CCR7, receptor de quimioquinas que dirige el
tráfico de linfocitos T maduros a los ganglios linfáticos.
Las células recién maduras que salen del timo se conocen como emigrantes tímicos recientes (RTE, recent thymic emigrants). Los RTE se pueden
distinguir de la mayoría de los linfocitos T naïves periféricos debido a que sus niveles de expresión de varias proteínas de superficie (por ejemplo, los
marcadores de maduración HSA y Qa2, así como IL7R) son más parecidos a los de sus antecesores de los timocitos inmaduros que sus descendientes
de los linfocitos T completamente maduros. Resulta curioso que los emigrantes tímicos recientes todavía no están maduros funcionalmente: no
proliferan ni secretan citocinas de forma tan vigorosa como la mayoría de los linfocitos T naïves en respuesta a la estimulación del receptor de
linfocitos T. Aunque la investigación está en curso, los estudios sugieren que la maduración de los RTE se completa con las interacciones
dependientes tanto de MHC como de no MHC en el tejido linfoide secundario.
Los investigadores están particularmente interesados en comprender el comportamiento de los RTE porque son una fuente importante de linfocitos T
maduros en individuos que son linfopénicos (es decir, tienen un grupo reducido de linfocitos funcionales), incluidas las personas que se han
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nacidos ancianos.
CONCEPTOS CLAVE
proliferan ni secretan citocinas de forma tan vigorosa como la mayoría de los linfocitos T naïves en respuesta a la estimulación del receptor de
linfocitos T. Aunque la investigación está en curso, los estudios sugieren que la maduración de los RTE se completa con las interacciones
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dependientes tanto de MHC como de no MHC en el tejido linfoide secundario.
Los investigadores están particularmente interesados en comprender el comportamiento de los RTE porque son una fuente importante de linfocitos T
maduros en individuos que son linfopénicos (es decir, tienen un grupo reducido de linfocitos funcionales), incluidas las personas que se han
sometido a quimioterapia, recién nacidos y ancianos.
CONCEPTOS CLAVE
Los timocitos que maduran inician un programa celular que mejora su supervivencia y regulan al alza los receptores que facilitan su migración
desde el timo y a través de la sangre.
La salida de los timocitos SP del timo depende de la expresión del receptor 1 de la esfingosina 1fosfato (receptor 1 S1P) y su interacción con
S1P en la unión corticomedular.
Los timocitos maduros que acaban de abandonar el timo se conocen como emigrantes tímicos recientes. Todavía no son óptimamente
funcionales y se someten a una fase postímica de maduración en el tejido linfoide secundario que las licencia completamente como linfocitos T
naïves.
OTROS MECANISMOS QUE MANTIENEN LA AUTOTOLERANCIA

Como hemos visto, la selección negativa de los timocitos puede eliminar un repertorio de linfocitos T en desarrollo de las células que expresan una
alta afinidad por los autoantígenos ubicuos y, gracias a la actividad de AIRE, por los antígenos específicos del tejido. Sin embargo, la selección
negativa en el timo (tolerancia central) no es perfecta. Los linfocitos T autorreactivos se escapan, ya sea porque tienen una afinidad demasiado baja
para inducir la deleción clonal, o porque no han explorado la combinación “correcta” de antígeno/MHC específica del tejido. El cuerpo ha desarrollado
varios mecanismos para evitar la autoinmunidad, incluido lo que se ha convertido en un foco importante de interés para los inmunólogos: el
desarrollo tanto en el timo como en la periferia de un fascinante grupo de células conocidas como linfocitos T reguladores.
Los linfocitos TREG regulan negativamente las respuestas inmunes
Los linfocitos T reguladores (linfocitos TR E G) inhiben la proliferación de otras poblaciones de linfocitos T, tanto directa como indirectamente,
suprimiendo eficazmente las respuestas inmunes autorreactivas. Expresan el CD4 de superficie, así como el CD25, la cadena α del receptor de IL2. Sin
embargo, los linfocitos TREG (TREG) se identifican más definitivamente por su expresión de un regulador transcripcional maestro, FoxP3, la cual es
necesaria y suficiente para inducir la diferenciación al linaje TREG.
Muchos TREG se desarrollan en el timo y parecen representar un destino alternativo para los linfocitos T autorreactivos. Como hemos visto, la mayoría
de los timocitos que expresan receptores con alta afinidad por el antígeno propio mueren por selección negativa. Sin embargo, una pequeña fracción
se compromete con el linaje de los linfocitos T reguladores y deja el timo para patrullar el cuerpo y frustrar las reacciones autoinmunes.
Lo que determina si un timocito autorreactivo muere o se diferencia en un linfocito TREG todavía no se entiende completamente. Los timocitos que
experimentan señales de TCR fuertes, pero no demasiado fuertes, parecen más propensos a comprometerse con el linaje TREG que a sufrir apoptosis
(véase figura 8–7). Sin embargo, otros factores, como las diferencias sutiles en el estado de maduración o las diferencias estocásticas en el estado de
la cromatina, también pueden influir. Aunque todos los tipos de células presentadoras de antígenos, incluidas las mTEC y las células dendríticas,
pueden mediar en el desarrollo de los linfocitos TREG, algunos estudios sugieren que los TREG se encuentran con estas células en un nicho
microambiental único, que puede proporcionar a los precursores de TREG las citocinas necesarias (IL2 e IL15) para sobrevivir y completar la
maduración.
Los linfocitos TREG desarrollados en el timo se denominan linfocitos Tímicos o tTREG. Las células periféricas o pTREG se desarrollan a partir de los
linfocitos T maduros convencionales expuestos al antígeno en el contexto de las citocinas TGFβ e IL10 (véanse los capítulos 10 y 13). Aunque los
linfocitos TTREG y pTREG reprimen las respuestas inmunes, también pueden adoptar distintas funciones inhibitorias en diversos tejidos.
Los estudios en animales muestran que los miembros de la población de FoxP3+ TREG inhiben el desarrollo de las enfermedades autoinmunes como la
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inducida experimentalmente, la encefalitis alérgica experimental y la diabetes autoinmune. La supresión por estas
células reguladoras es específica del antígeno porque depende de la activación a través del receptor de los linfocitos T. La forma exacta en que los
TREG eliminan las respuestas aún se debate, aunque probablemente lo hagan a través de una variedad de medios: inhibiendo directamente la
capacidad de las células presentadoras de antígenos para activar los linfocitos T, matando los linfocitos T, inhibiendo de forma indirecta la actividad
Los linfocitos TREG desarrollados en el timo se denominan linfocitos Tímicos o tTREG. Las células periféricas
Universidad o pCientífica
TREG se desarrollan a partir de
del Sur Ciencias delos
la Salud
linfocitos T maduros convencionales expuestos al antígeno en el contexto de las citocinas TGFβ Access
e IL10Provided by:
(véanse los capítulos 10 y 13). Aunque los
linfocitos TTREG y pTREG reprimen las respuestas inmunes, también pueden adoptar distintas funciones inhibitorias en diversos tejidos.
Los estudios en animales muestran que los miembros de la población de FoxP3+ TREG inhiben el desarrollo de las enfermedades autoinmunes como la
enfermedad inflamatoria intestinal inducida experimentalmente, la encefalitis alérgica experimental y la diabetes autoinmune. La supresión por estas
células reguladoras es específica del antígeno porque depende de la activación a través del receptor de los linfocitos T. La forma exacta en que los
TREG eliminan las respuestas aún se debate, aunque probablemente lo hagan a través de una variedad de medios: inhibiendo directamente la
capacidad de las células presentadoras de antígenos para activar los linfocitos T, matando los linfocitos T, inhibiendo de forma indirecta la actividad
de los linfocitos T, secretando citocinas inhibitorias IL 10 y TGFβ, y/o agotando el entorno local de citocinas estimulantes como la IL2 (figura 8–11).
Consulte el capítulo 14 para obtener una descripción de un experimento que demostró que los TREG utilizan más de un método para inhibir las
respuestas autorreactivas.
FIGURA 8–11
Cómo los linfocitos T reguladores (TR E G) inactivan los linfocitos T tradicionales. Algunos posibles mecanismos de la actividad TREG se
ilustran en este esquema. Todos estos pueden contribuir a reprimir las respuestas inmunes in vivo. 1) Privación de citocinas: los TREG expresan niveles
relativamente altos de los receptores de IL2 de alta afinidad y pueden competir por las citocinas que los linfocitos T activados necesitan para
sobrevivir y proliferar. 2) Inhibición de citocinas: los TREG secretan varias citocinas, incluidas la IL10 y el TGFβ, que se unen a los receptores en los
linfocitos T activados y reducen la actividad de señalización. 3) Inhibición de las células presentadoras de antígenos: los TREG pueden interactuar
directamente con las células presentadoras de antígenos que expresan el MHC de clase II e inhiben su maduración, lo que las deja menos capaces de
activar los linfocitos T. 4) Citotoxicidad: los TREG también pueden mostrar la función citotóxica y matar las células secretando perforina y granzima.
La existencia de linfocitos T reguladores que suprimen las respuestas inmunes tiene implicaciones clínicas. El agotamiento o la inhibición de los
linfocitos TREG antes de la inmunización puede mejorar las respuestas inmunes a las vacunas convencionales. La eliminación de los linfocitos T que
suprimen las respuestas a los antígenos tumorales también puede facilitar el desarrollo de la inmunidad antitumoral. A la inversa, aumentar la
actividad supresora de las poblaciones reguladoras de linfocitos T podría ser útil en el tratamiento de las enfermedades alérgicas o autoinmunes. La
capacidad de aumentar la actividad de las poblaciones de linfocitos T reguladores también podría ser útil para suprimir el rechazo de los órganos y
tejidos. La inmunoterapia reguladora de linfocitos T se ha convertido recientemente en una realidad en los ensayos clínicos. Los investigadores
actualmente están probando la efectividad de TREG en la prevención de la enfermedad de injerto contra hospedero (GvHD, graftversushost disease)
después del trasplante de médula ósea, y los médicos esperan usarlos pronto para reprimir la respuesta inmune que causa la diabetes tipo 1.
CONCEPTOS CLAVE
Una fracción de los timocitos que experimentan interacciones TCR de alta afinidad no mueren por selección negativa, sino que se desarrollan
en linfocitos T reguladores FoxP3+ (linfocitos TREG), que inhiben las respuestas de los linfocitos T fuera del timo. Estas células requieren la
ayuda de las citocinas, incluidas la IL2 y la IL15, para completar su maduración.
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desarrollan en el timo se denominan linfocitos TREG tímicos. Los linfocitos T reguladores que se diferencian
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• Privacy y la ubicación
• Noticede ambas poblaciones de TREG se superponen, aunque pueden
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tener distintas responsabilidades en diferentes tejidos.
capacidad de aumentar la actividad de las poblaciones de linfocitos T reguladores también podría ser útil para suprimir el rechazo de los órganos y
Universidad
tejidos. La inmunoterapia reguladora de linfocitos T se ha convertido recientemente en una realidad Científica
en los ensayos del Sur
clínicos. Losinvestigadores
actualmente están probando la efectividad de TREG en la prevención de la enfermedad de injerto Access
contra hospedero
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después del trasplante de médula ósea, y los médicos esperan usarlos pronto para reprimir la respuesta inmune que causa la diabetes tipo 1.
CONCEPTOS CLAVE
Una fracción de los timocitos que experimentan interacciones TCR de alta afinidad no mueren por selección negativa, sino que se desarrollan
en linfocitos T reguladores FoxP3+ (linfocitos TREG), que inhiben las respuestas de los linfocitos T fuera del timo. Estas células requieren la
ayuda de las citocinas, incluidas la IL2 y la IL15, para completar su maduración.
Los linfocitos T reguladores que se desarrollan en el timo se denominan linfocitos TREG tímicos. Los linfocitos T reguladores que se diferencian
en la periferia se llaman linfocitos TREG periféricos. La función y la ubicación de ambas poblaciones de TREG se superponen, aunque pueden
tener distintas responsabilidades en diferentes tejidos.
Los TREG inhiben las respuestas inmunitarias de varias maneras. Generan citocinas (IL10 y TGFβ) que inhiben las células inmunes y también
pueden matar los linfocitos T activados directamente.
Los mecanismos periféricos de tolerancia también protegen contra los timocitos autorreactivos
Aunque el timo filtra el repertorio de linfocitos T en desarrollo de manera notablemente eficiente, no es perfecto. Los linfocitos T autorreactivos se
escapan. El cuerpo ha evolucionado varios otros mecanismos para manejar al fugitivo autorreactivo en la periferia. Brevemente, muchos antígenos
permanecen “ocultos” de los linfocitos T autorreactivos porque sólo un subconjunto de células (APC profesionales) expresan las moléculas
coestimuladoras necesarias para iniciar la respuesta inmune. Los linfocitos T naïves autorreactivos que pueden ver una combinación de
MHC/autopéptido en una célula presentadora de antígeno no profesional no recibirán las señales coestimuladoras correctas y, por tanto, no se
dividirán ni diferenciarán. Por ejemplo, si un timocito específico para un péptido producido por una célula renal se escapó del timo, no se activaría a
menos que ese péptido se presentara por primera vez en una célula presentadora de antígeno profesional. Las células renales no expresan los
ligandos coestimuladores requeridos para activar un CD4+ o un linfocito T CD8+. Las interacciones de alta afinidad con combinaciones de
MHC/péptido en células que no expresan los ligandos coestimuladores también pueden conducir a la anergia de los linfocitos T, otro mecanismo de
tolerancia periférica que se describe con más detalle en el capítulo 10. Las consecuencias clínicas de los fallos de la tolerancia central y periférica se
discuten en el capítulo 16.
CONCEPTOS CLAVE
Los mecanismos de tolerancia central no eliminan todos los linfocitos T autorreactivos del repertorio de linfocitos T en desarrollo. Los
mecanismos que imponen la tolerancia de los linfocitos T en la periferia (tolerancia periférica) proporcionan una copia de seguridad
importante (consúltese el capítulo 10).
Los linfocitos T reguladores contribuyen a la tolerancia de los linfocitos T periféricos, al igual que el requisito estricto de las interacciones
coestimuladoras para activar un linfocito T. La estimulación sólo puede ser proporcionada por células presentadoras de antígenos
profesionales, cuya actividad está altamente regulada.
CONCLUSIÓN
Los linfocitos T maduros tienen un repertorio de TCR diverso que es tolerante a los antígenos propios, pero restringido al MCH propio. Logran este
equilibrio al pasar una serie de rigurosas pruebas en el timo, que recuerdan los procesos de selección natural en la evolución. Los linfocitos T en
desarrollo (timocitos) surgen de los precursores de CD4−CD8− multipotentes que migran desde la médula ósea al timo, donde las señales de Notch los
comprometen con el linaje de los linfocitos T. Los timocitos inmaduros proliferan, regulan al alza CD4 y CD8, y experimentan generadores aleatorios
de receptores de linfocitos T, generando así un grupo grande y diverso de timocitos DP, cada uno de los cuales expresa un TCR distinto.
El destino de un timocito DP depende de la afinidad de este TCR por los complejos de autopéptidos/MHC que encuentra mientras navega a las células
estromales en los dos microambientes principales del timo: la corteza y la médula. Si un timocito DP no se une a los complejos péptidos/MHC con
suficiente afinidad,
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el destino de la gran mayoría (> 90%) de los timocitos DP. Si un timocito DP se une a complejos de
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CAPÍTULO afinidadde
Desarrollo intermedia, se somete a una selección positiva y se le otorga permiso para viajar desde la corteza a la médula, para
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completar la maduración a un linaje CD4 o CD8 de un solo positivo (SP). Si un timocito DP se une a complejos de péptido/MHC con una afinidad muy
alta, sufre una selección negativa.
comprometen con el linaje de los linfocitos T. Los timocitos inmaduros proliferan, regulan al alza CD4 y CD8, y experimentan generadores aleatorios
de receptores de linfocitos T, generando así un grupo grande y diverso de timocitos DP, cada uno de los cuales expresa un TCR distinto.
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El destino de un timocito DP depende de la afinidad de este TCR por los complejos de autopéptidos/MHC que encuentra mientras navega a las células
estromales en los dos microambientes principales del timo: la corteza y la médula. Si un timocito DP no se une a los complejos péptidos/MHC con
suficiente afinidad, muere por abandono; es el destino de la gran mayoría (> 90%) de los timocitos DP. Si un timocito DP se une a complejos de
péptido/MHC con afinidad intermedia, se somete a una selección positiva y se le otorga permiso para viajar desde la corteza a la médula, para
completar la maduración a un linaje CD4+ o CD8+ de un solo positivo (SP). Si un timocito DP se une a complejos de péptido/MHC con una afinidad muy
alta, sufre una selección negativa.
La selección positiva está mediada exclusivamente por las interacciones entre los timocitos y las células epiteliales del timo cortical (cTEC, cortical
thymic epithelial cells). Sin embargo, la selección negativa puede estar mediada por múltiples linfocitos tanto en la corteza como en la médula, y puede
apuntar a los timocitos en las etapas DP y SP. Es importante destacar que sólo las células epiteliales del timo medular (mTEC, medullary thymic
epithelial cells) tienen la capacidad de presentar los antígenos expresados por otros tejidos y son responsables de eliminar los linfocitos T
autorreactivos específicos de los tejidos del repertorio. Los mecanismos que eliminan los linfocitos T autorreactivos durante el desarrollo (tolerancia
central) no son infalibles y se refuerzan en la periferia mediante una variedad de mecanismos, incluida la actividad de los linfocitos T reguladores.
Algunos linfocitos T reguladores surgen en el timo en respuesta a las interacciones de TCR de alta afinidad, una excepción a la “regla” de que las
interacciones de alta afinidad conducen a la selección negativa.
El desarrollo de los timocitos seleccionados positivamente para el linaje CD4+ o CD8+ también está determinado por la señalización TCR, y se explica
mejor por el modelo de señalización cinética del compromiso de linaje. Los timocitos CD4+ y CD8+ que sobreviven a las selecciones positiva y negativa
pueden migrar del timo al torrente sanguíneo y completar su maduración en la periferia.
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RECURSOS EN LÍNEA
https://www.youtube.com/watch?v=08H5CmDaRjU Este es uno de los maravillosos tutoriales escritos a mano. Incluye información muy básica
sobre la progresión celular y no entra en detalles sobre los procesos de selección, pero es un buen video para principiantes.
https://youtu.be/9E_UxnC_L2o Una encantadora animación en 3D del desarrollo de los linfocitos T generada como parte del Proyecto de un
maestro por Janice Yau (también se encuentra en http://janiceyau.com/research.html). Esto es de la Universidad de Toronto para el Programa de
Graduados en Comunicaciones Biomédicas de Mississauga, donde se pueden encontrar otros videos de distintos procesos biológicos.
www.bio.davidson.edu/courses/movies.html Una lista completa de animaciones reunidas, y en muchos casos generadas, por individuos
asociados con Davidson College. Véase Desarrollo y Selección de Linfocitos T (http://www.bio.davidson.edu/courses/Immunology/Flash/Main.html).
(Requiere FLASH).
PREGUNTAS DE ESTUDIO
Haga click para ver las respuestas
1. Cada una de las siguientes afirmaciones es falsa en una o más formas. Corríjalas (y explique su corrección [s]).
a. Los ratones knockout que carecen de moléculas MHC de clase I no producen timocitos maduros CD4+.
b. La selección β inicia la selección negativa.
c. La selección negativa a antígenos específicos del tejido ocurre sólo en la corteza del timo.
d. La mayoría de los timocitos maduran con éxito al linaje de linfocitos T CD4+ o CD8+.
e. Los precursores de los linfocitos T expresan tanto CD4 como CD8 y primero entran en la médula de un timo.
f. Los timocitos que se unen a los complejos péptido/MHC con alta afinidad se seleccionan positivamente.
g. Los timocitos DN progresan a través de varias etapas distinguidas por cambios en la expresión de la inmunoglobulina y CD25.
h. Todos los timocitos con receptores de linfocitos T autorreactivos se someten a la selección negativa.
i. Los linfocitos T reguladores ayudan a mantener la tolerancia central.
j. El compromiso con el linaje de los linfocitos T CD4+ está regulado por Runx3.
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2. Llene los espacios en 6:56 P Your
blanco: IP is 34.211.3.223
los precursores de los timocitos entran al timo en la unión __________. Se requieren interacciones con __________
ligandos para comprometerse con el linaje de los linfocitos T. Si se seleccionan positivamente, los timocitos DP viajan desde la corteza del timo a la
__________. La regulación al alza de __________ les permite abandonar el timo y entrar en la circulación.
3. Mientras que la mayoría de los linfocitos T en nuestros cuerpos expresan un TCR αβ, hasta 5% de los linfocitos T expresan el TCR γδ en su lugar.
h. Todos los timocitos con receptores de linfocitos T autorreactivos se someten a la selección negativa.
i. Los linfocitos T reguladores ayudan a mantener la tolerancia central. Access Provided by:
j. El compromiso con el linaje de los linfocitos T CD4+ está regulado por Runx3.
2. Llene los espacios en blanco: los precursores de los timocitos entran al timo en la unión __________. Se requieren interacciones con __________
ligandos para comprometerse con el linaje de los linfocitos T. Si se seleccionan positivamente, los timocitos DP viajan desde la corteza del timo a la
__________. La regulación al alza de __________ les permite abandonar el timo y entrar en la circulación.
3. Mientras que la mayoría de los linfocitos T en nuestros cuerpos expresan un TCR αβ, hasta 5% de los linfocitos T expresan el TCR γδ en su lugar.
Explique la diferencia entre estos dos tipos de células, en términos de desarrollo y reconocimiento de antígenos.
4. Tiene un antiCD4 marcado con fluoresceína y un antiCD8 marcado con ficoeritrina. Utiliza estos anticuerpos para teñir timocitos y células de los
ganglios linfáticos de los ratones normales y de ratones knockout para RAG1. En los formularios a continuación, dibuje las gráficas de clasificación
de células activadas por fluorescencia (FACS) que usted esperaría.
5. ¿Qué etapas del desarrollo de los linfocitos T (DN1, DN2, DN3, DN4, DP, CD4 SP o CD8 SP) se verían afectadas en ratones con las siguientes
modificaciones genéticas? Justifica tus respuestas.
a. Ratones que no expresan MHC clase II.
b. Ratones que no expresan AIRE.
c. Ratones que no expresan la cadena α de TCR.
6. Se tiñen los timocitos con anticuerpos antiCD3 conjugados con ficoeritrina (PE; rojo) y con anticuerpos de cadena β antiTCR conjugados con
isocianato de fluoresceína (FITC; verde). La mayoría de las células se tiñen con ambas. Sin embargo, encuentras una proporción de células que no
se tiñen con ningún anticuerpo. También encuentras una pequeña población que se tiñe con antiCD3, pero no con anticuerpos antiTCR β. ¿Qué
poblaciones de timocitos podrían representar cada una de estas poblaciones?
7. Usted inmuniza un ratón H2k con ovoalbúmina de pollo (una proteína contra la cual el ratón generará una respuesta inmune) y aísla un linfocito T
maduro de CD4+ específico para un péptido de ovoalbúmina. Se clonan los genes αβ TCR de esta línea celular y se utilizan para preparar ratones
transgénicos con el haplotipo H2k o H2d.
a. ¿Qué enfoque puede utilizar para distinguir los timocitos inmaduros de los timocitos CD4+ maduros en los ratones transgénicos?
6. Se tiñen los timocitos con anticuerpos antiCD3 conjugados con ficoeritrina (PE; rojo) y con anticuerpos de cadena β antiTCR conjugados con
isocianato de fluoresceína (FITC; verde). La mayoría de las células se tiñen con ambas. Sin embargo, encuentras una proporción de células que no
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se tiñen con ningún anticuerpo. También encuentras una pequeña población que se tiñe con antiCD3, pero no con anticuerpos antiTCR β. ¿Qué
poblaciones de timocitos podrían representar cada una de estas poblaciones?
7. Usted inmuniza un ratón H2k con ovoalbúmina de pollo (una proteína contra la cual el ratón generará una respuesta inmune) y aísla un linfocito T
maduro de CD4+ específico para un péptido de ovoalbúmina. Se clonan los genes αβ TCR de esta línea celular y se utilizan para preparar ratones
transgénicos con el haplotipo H2k o H2d.
a. ¿Qué enfoque puede utilizar para distinguir los timocitos inmaduros de los timocitos CD4+ maduros en los ratones transgénicos?
b. ¿Los timocitos de un ratón transgénico TCR de origen H2k tienen una proporción de timocitos CD4+ que es más alta, más baja o la misma que
en un ratón de tipo natural?
c. ¿Los timocitos de un ratón transgénico TCR de origen H2d tienen una proporción de timocitos CD4+ que es más alta, más baja o la misma que
en un ratón de tipo natural? Especula y explica tu respuesta.
d. Usted encuentra una manera de “hacer” el epitelio medular de un ratón transgénico TCR H2k exprese y presente el péptido de la ovoalbúmina
para el cual su linfocito T es específico. ¿Cómo se vería el perfil de CD4 frente a CD8 de un timo transgénico TCR en estos ratones?
e. También encuentra una manera de “hacer” que el epitelio cortical exprese este péptido de ovoalbúmina en su dímero MHC de clase II. ¿Cómo
podría ser el perfil CD4 frente a CD8 de este timo transgénico TCR?
8. En sus experimentos con ratones quiméricos clásicos, Zinkernagel tomó la médula ósea de un ratón de un haplotipo MHC (ratón 1) y el timo de un
ratón de otro haplotipo MHC (ratón 2), y los trasplantó en un tercer ratón, que fue timectomizado e irradiado letalmente. Luego inmunizó a este
ratón reconstituido con el virus de la coriomeningitis linfocítica (LCMV, lymphocytic choriomeningitis virus) y examinó la actividad de los linfocitos
T maduros aislados del bazo y los ganglios linfáticos del ratón.
Él estaba especialmente interesado en ver si los linfocitos T CD8+ maduros en estos ratones podrían matar linfocitos blanco infectados con LCMV
con el haplotipo MHC del ratón 1, 2 o 3. Los resultados de dos experimentos utilizando ratones C57BL/6 de H2b y ratones BALB/c de H2d como
donantes de médula ósea y timo, respectivamente, se muestran en el siguiente cuadro.
Lisis de linfocitos blanco infectados con LCMV
Donante de médula Donante de Receptor irradiado con rayos x

Experimento H 2d H 2k H 2b
ósea timo timectomizado
A C57BL/6 (H2b) BALB/c (H2d) C57BL/6 × BALB/c + − −
B BALB/c (H2d) C57BL/6 (H2b) C57BL/6 × BALB/c − − +
a. ¿Por qué no se lisaron los linfocitos blanco H2b en el experimento A, pero se lisaron en el experimento B?
b. ¿Por qué los linfocitos blanco H2k no se lisaron en ninguno de los experimentos?
9. Tienes un clon CD8+ CTL (de un ratón H2k) con un receptor de linfocitos T específico para el antígeno HY. Se clonan los genes αβ TCR de esta línea
celular clonada y se utilizan para preparar ratones transgénicos con el haplotipo H2k o H2d.
a. ¿Cómo pueden distinguir los timocitos inmaduros de los timocitos CD8+ maduros en los ratones transgénicos?
b. Para cada uno de los siguientes ratones transgénicos, indique con (+) o (−) si el ratón tendría timocitos CD8+ maduros e inmaduros dobles
positivos que portan el receptor de linfocitos T transgénicos: hembra H2k, macho H2k, hembra H2d, macho H2d.
c. Explica tus respuestas para los transgénicos H2k.
d. Explica2023819
Downloaded tus respuestas
6:56 para los transgénicos
P Your H2d.
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10. ParaMcGraw
©2023 demostrar
Hill.experimentalmente
All Rights Reserved.la selección
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Usetimo positivo,
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Policy analizaron los timocitos de ratones H2b normales, que tienen
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una supresión del gen H2E de clase II, y de ratones H2b en los que se había eliminado el gen H2A de clase II.
b. Para cada uno de los siguientes ratones transgénicos, indique con (+) o (−) si el ratón tendría timocitos CD8+ maduros e inmaduros dobles
positivos que portan el receptor de linfocitos T transgénicos: hembra H2k, macho H2k, hembra H2d, macho H2d.
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c. Explica tus respuestas para los transgénicos H2k.
d. Explica tus respuestas para los transgénicos H2d.
10. Para demostrar experimentalmente la selección del timo positivo, los investigadores analizaron los timocitos de ratones H2b normales, que tienen
una supresión del gen H2E de clase II, y de ratones H2b en los que se había eliminado el gen H2A de clase II.
a. ¿Qué moléculas de MHC encontrarías en las células presentadoras de antígenos de los ratones H2b normales?
b. ¿Qué moléculas de MHC encontrarías en las células presentadoras de antígenos de los ratones H2b knockout para H2A?
c. ¿Esperaría encontrar linfocitos T CD4+, linfocitos T CD8+ o ambas en cada tipo de ratón? ¿Por qué?
11. Desea determinar el porcentaje de varios tipos de timocitos en una muestra de células del timo de ratón utilizando el método de
inmunofluorescencia indirecta.
a. Primero tiñe la muestra con antiCD3 de cabra (anticuerpo primario) y luego con inmunoglobulina anticabra marcada con FITC de conejo
(anticuerpo secundario), que emite un color verde. El análisis de la muestra teñida por citometría de flujo indica que 70% de las células están
teñidas. Con base en este resultado, ¿cuántas de las células del timo en su muestra están expresando receptores de unión a antígeno en su
superficie? ¿Estarían todos expresando el mismo tipo de receptor? Explica tu respuesta. ¿Cuáles son las células no teñidas que quedan?
b. Luego, se separan las células CD3+ con el clasificador de células activadas por fluorescencia (FACS, fluorescence activated cell sorter) y se
restauran. En este caso, el anticuerpo primario es antiCD4 de hámster, y el anticuerpo secundario es antihámster inmunoglobulina marcada
con PE de conejo, que emite un color rojo. El análisis de las células CD3+ teñidas muestra que 80% de ellas están teñidas. A partir de este
resultado, ¿puede determinar cuántos linfocitos TC están presentes en la muestra? Si es así, ¿cuántos linfocitos TC hay? Si no, ¿qué
experimento adicional realizaría para determinar la cantidad de linfocitos TC que están presentes?
PREGUNTAS DE ENFOQUE CLÍNICO
1. La susceptibilidad a las enfermedades autoinmunes a menudo tiene una base genética y se ha relacionado con muchos loci de genes diferentes.
Identifique dos genes que podrían estar involucrados en una mayor susceptibilidad a las enfermedades autoinmunes. Explique su razonamiento.
2. La susceptibilidad a muchas enfermedades autoinmunes se ha relacionado con las variantes del gen MHC. Uno de los mejores ejemplos de dicho
enlace lo proporciona la esclerosis múltiple (MS, multiple sclerosis), una enfermedad autoinmune humana causada por los linfocitos T
autorreactivos cuya actividad, al final, daña las vainas de mielina que rodean a las neuronas. La susceptibilidad a la MS se ha asociado
sistemáticamente con variantes en el gen HLADR2. Aunque este enlace fue reconocido por primera vez en 1972, todavía no entendemos
completamente la base de esta susceptibilidad. En un artículo de revisión reciente se ofreció una perspectiva sobre las razones del vínculo entre
las variaciones de MHC y la enfermedad autoinmune. Los autores afirman: “Los mecanismos que subyacen a la asociación de MHC en la
enfermedad autoinmune no se entienden claramente. Una visión de larga data sugiere una ruptura en la tolerancia inmunológica a los antígenos
propios a través de la presentación aberrante de clase II de los péptidos propios o extraños a los linfocitos T autorreactivos. Por tanto, parece
probable que los alelos específicos del MHC de clase II determinen la orientación de los autoantígenos particulares que dan como resultado
asociaciones específicas de la enfermedad”. (Fernando MM, et al. 2008. Defining the role of the MHC in autoimmunity: a review and pooled analysis.
PLoS Genetics. 4 :e1000024).
a. Parafrasea esta perspectiva, usando tus propias palabras. ¿Qué, específicamente, podrían entender los autores por “presentación de clase II
aberrante... a los linfocitos T autorreactivos”?
b. (Pregunta avanzada). Aunque esta especulación tiene algún mérito, no resuelve todas las preguntas. ¿Por qué? Plantea una pregunta que
inspire esta explicación o no responda.
c. (Pregunta muy avanzada). Ofrezca una adición a la explicación (o una alternativa) que ayude a resolver la pregunta que se formuló
anteriormente.


CAPÍTULO 8 - Desarrollo de Linfocitos T

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Universidad Científica del Sur ­ Ciencias de la Salud

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KUBY. Inmunología, 8e

CAPÍTULO 8: Desarrollo de linfocitos T

Después de revisar este capítulo, será capaz de:

Timocitos en la corteza del timo. [CNRI/Science Source.]

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Timocitos en la corteza del timo. [CNRI/Science Source.]

Timocitos doble negativos (DN)

Receptor de células pre­T (pre­TCR)

Timocitos doble positivos (DP)

Timocitos doble negativos (DN)

Receptor de células pre­T (pre­TCR)

Timocitos doble positivos (DP)

Modelo de afinidad de selección

Timocitos positivos simples (SP)

Células epiteliales del timo cortical (cTEC)

Células epiteliales tímicas medulares (mTEC)

Linfocitos T Reguladores (linfocitos TREG)

1. Compromiso de los precursores hematopoyéticos al linaje de linfocitos T,

Desarrollo de linfocitos T en el timo

DESARROLLO TEMPRANO DE LOS TIMOCITOS

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Los timocitos progresan a través de cuatro etapas doble negativo

Fenotipo Ubicación Descripción

DN1 c­Kit (CD117)++, De la médula ósea al Migración al timo

Fenotipo Ubicación Descripción

DN1 c­Kit (CD117)++, De la médula ósea al Migración al timo

CD44+, CD25− timo

DN3 c­Kit (CD117)+, Corteza subcapsular Expresión de pre­TCR; selección β

CD44−, CD25− subcapsular a la corteza locus de la cadena α; se convierte en timocito DP

Los timocitos expresan receptores de linfocitos T α β o γδ

Los timocitos DN se someten a la selección β, lo que resulta en la proliferación y diferenciación

La señalización pre­TCR en la etapa DN3 dispara la siguiente secuencia de eventos:

1. Maduración a la etapa DN4 (c­Kitlow/–CD44−CD25−).

2. Proliferación rápida en la corteza subcapsular del timo.

4. Desarrollo a la etapa CD4+ CD8+ doble positivo (DP, double­positive).

6. Iniciación del reordenamiento de la cadena α del TCR.

SELECCIONES POSITIVA Y NEGATIVA

Se requieren dos procesos de selección distintos:

Selecciones positiva y negativa de los timocitos en el ratón

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Los timocitos “aprenden” la restricción de MHC en el timo

Los linfocitos T experimentan selecciones positiva y negativa

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La selección positiva garantiza la restricción de MHC

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La selección negativa (tolerancia central) asegura la autotolerancia

Downloaded CD4+ CD8+ autorreactivos

La selección negativa (tolerancia central) asegura la autotolerancia

¿Cómo eliminamos los timocitos reactivos a antígenos específicos del tejido?

Otros mecanismos de tolerancia central

Otros mecanismos de tolerancia central

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Un modelo alternativo puede explicar la paradoja de la selección tímica

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¿Ocurren selecciones positivas y negativas en la misma etapa de desarrollo o en secuencia?

Varios modelos han sido propuestos para explicar el compromiso de linaje

Varios modelos han sido propuestos para explicar el compromiso de linaje

Factores de transcripción Th­POK y Runx3 regulan el compromiso de linaje

SALIDA DEL TIMO Y MADURACIÓN FINAL

OTROS MECANISMOS QUE MANTIENEN LA AUTOTOLERANCIA

Universidad Científica del Sur Ciencias de la Salud

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Receptor de células preT (preTCR)

Receptor de células preT (preTCR)

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DN1 cKit (CD117)++, De la médula ósea al Migración al timo

DN1 cKit (CD117)++, De la médula ósea al Migración al timo

DN3 cKit (CD117)+, Corteza subcapsular Expresión de preTCR; selección β

La señalización preTCR en la etapa DN3 dispara la siguiente secuencia de eventos:

1. Maduración a la etapa DN4 (cKitlow/–CD44−CD25−).

4. Desarrollo a la etapa CD4+ CD8+ doble positivo (DP, doublepositive).

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Factores de transcripción ThPOK y Runx3 regulan el compromiso de linaje

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