CULTIVO PURO Y AISLAMIENTO DE BACTERIAS AEROBIAS

Bacterias aerobias

Bacterias que requieren oxígeno para crecer y sobrevivir.

Organización panamericana de la salud “Bacterias que requieren oxígeno para crecer y sobrevivir.” DeCS/MeSH Descriptores en
la ciencia de salud. Disponible en https://decs.bvsalud.org/es/. Revisado 19 de septiembre de 2023.

Tipos de organismos aerobios

 Aerobios Obligados: Estos requieren oxígeno para la respiración celular aerobia. Utilizan el
oxígeno para oxidar sustratos (tales como grasas y azúcares) para obtener energía.
 Anaerobios Facultativos: Pueden emplear oxígeno, pero también tienen la capacidad de
producir energí­a por medios anaeróbicos.
 Microaerófilos: Emplean oxígeno, pero en cantidades muy bajas.
 Aerotolerantes: Pueden sobrevivir en presencia de oxígeno, pero no lo emplean ya que son
anaeróbicos.
Brunel Jean (2015) “¿Qué son las bacterias aerobias?”. INOCUIDAD. FOOD NEWS LATAM.COM Disponible en
https://www.foodnewslatam.com/inocuidad/4838­%C2%BFqu%C3%A9­son­las­bacterias­aerobias.html. Revisado 19 de
septiembre de 2023.

Ejemplos de bacterias aerobias

­ Bacilos
­ Mycobacterium tuberculosis
­ Nocardia
­ Lactobacillus
­ Pseudomonas
­ Staphylococcus (facultativo)
­ Especies de Enterobacteriaceae (facultativas)
Brunel Jean (2015) “¿Qué son las bacterias aerobias?”. INOCUIDAD. FOOD NEWS LATAM.COM Disponible en
https://www.foodnewslatam.com/inocuidad/4838­%C2%BFqu%C3%A9­son­las­bacterias­aerobias.html. Revisado 19 de
septiembre de 2023.

Cultivos puros

En los ambientes naturales los microorganismos se encuentran usualmente como poblaciones mixtas,
pero si se requiere estudiarlos, caracterizarlos e identificarlos, se necesita tener los como cultivos puros.
Un cultivo puro es aquel en el que todos los microorganismos provienen de una sola célula.
“Obtención de medios puros ”(Internet) Disponible en
http://portal.ucv.ve/fileadmin/user_upload/facultad_farmacia/catedraMicro/10_Obtenci%C3%B3n_de_cultivos_puros.pdf.
Revisado 19 de septiembre de 2023.

Se le denomina cultivo puro al que contiene un solo tipo de microorganismo. Éstos se inician a partir de colonias
aisladas, de manera que todos los individuos cuenten con la misma composición genética.

Senasica. Servicio Nacional de Sanidad, Inocuidad y Calidad Agroalimentaria. (2020). “Aislamiento de bacterias fitopatógenas y
pruebas de patogenicidad [Versión 1.0]”. Revisado 19 de septiembre de 2023.
Aislamiento en cultivos puros

Es la obtención de un cultivo bacteriano puro, extraído de un ambiente a otro mediante técnicas de laboratorio,
con la finalidad de inducir su crecimiento en medios de cultivo artificiales, con el objetivo de realizar su
identificación.

Senasica. Servicio Nacional de Sanidad, Inocuidad y Calidad Agroalimentaria. (2020). “Aislamiento de bacterias fitopatógenas y
pruebas de patogenicidad [Versión 1.0]”. Revisado 19 de septiembre de 2023.

Inmersión del tejido en agua destilada estéril

Es la técnica de aislamiento más utilizada y consta de los siguientes pasos:

1) Seleccionar el tejido vegetal infectado que presente signos o síntomas.

2) Realizar cortes finos en la zona de avance de las lesiones (tejido sano y enfermo) con un bisturí,
previamente desinfestado con etanol al 70 %. Colocar el tejido en un vaso de precipitado o caja Petri
estéril.

3) En condiciones asépticas, desinfestar el tejido con hipoclorito de sodio al 1 % durante 90 s.

4) Enjuagar y decantar tres veces con agua destilada estéril, seccionar nuevamente el tejido en
fragmentos más pequeños y transferirlos a un tubo de ensaye con agua destilada estéril o solución
salina estéril al 0.85 % .

5) Mantener el tubo en agitación o en reposo de 10 a 15 min a temperatura ambiente, para facilitar la

salida de las bacterias del tejido hacia el agua o solución salina para obtener la suspensión bacteriana.
Senasica. Servicio Nacional de Sanidad, Inocuidad y Calidad Agroalimentaria. (2020). “Aislamiento de bacterias fitopatógenas y
pruebas de patogenicidad [Versión 1.0]”. Revisado 19 de septiembre de 2023.

Siembra en cultivos puros

Para obtener un cultivo bacteriano, se debe sembrar por estría cruzada en medio de cultivo de
aislamiento (Agar nutritivo) el inóculo (suspensión bacteriana), o colocar porciones de la muestra (tejido
o material propagativo) sobre el medio de cultivo, para propiciar el desarrollo y multiplicación de las
bacterias. La siembra puede ser de manera directa o con inoculo.
Senasica. Servicio Nacional de Sanidad, Inocuidad y Calidad Agroalimentaria. (2020). “Aislamiento de bacterias fitopatógenas y
pruebas de patogenicidad [Versión 1.0]”. Revisado 19 de septiembre de 2023.

Importancia de aislamiento y cultivo de microorganismos

El aislamiento y la preservación de microorganismos, permiten disponer de material biológico para conocer sus
características morfológicas, requerimientos o condiciones de crecimiento, estudiar sus mecanismos de
patogenicidad, etc. La obtención de cultivos puros de microorganismos fitopatógenos es necesaria para la
investigación e imprescindible para el desarrollo de estrategias de prevención y control de las enfermedades
ocasionadas por éstos.
Muñoz R. Violeta, Cisterna O. Viviana, France I. Andrés. “Aislamiento de microorganismos fitopatógenos” Capitulo 5. Pag. 77. Disponible en
https://biblioteca.inia.cl/bitstream/handle/20.500.14001/6945/NR42411.pdf?sequence=10&isAllowed=y#:~:text=El%20aislamiento%20y%20la
%20preservaci%C3%B3n,sus%20mecanismos%20de%20patogenicidad%2C%20etc. Revisado 19 de septiembre de 2023.