ÁCIDOS NUCLEICOS, TIPOS

REPLICACIÓN REPARACIÓN
ESTRUCTURA Y FUNCIÓN DEL ÁCIDO NUCLEICO

• Los genes no funcionan de modo autónomo, su replicación y función están

controlados por diversos productos de gen.
• En DNA contiene información genética y contiene 4 desoxinucleótidos:
desoxiadenilato, desoxiguanilato, desoxicitidilato, y timidilato se mantiene en forma
polimérica por enlaces 3´,5´-fosfodiéster.
• El contenido informacional reside en la secuencia en la cuál están ordenados
estos monómeros (purina y pirimidina desoxirribonucleótidos)
• El polímero posee una polaridad: un extremo tiene un 5´-hidroxilo o fosfato
terminal y el otro tiene un 3´-fosfato o hidroxilo terminal.
• Las dos cadenas de la hélice bicatenaria se mantienen unidas por medio de enlaces de
hidrógeno entre bases purina y pirimidina de las moléculas lineales respectivas, como de
interacciones de Van der Waals e hidrofóbicas entre los pares de bases adyacentes apilados.

• La formación de pares de bases es muy específica y depende del enlace de hidrógeno de A

con T y de G con C.

La restricción de la formación de
pares de bases (A únicamente forma
para con T , y G sólo puede formar
par con C) explica que en una
molécula de DNA bicatenario el
contenido de A es igual a T, y el de G
es igual al de C.

Un segmento de una cadena de una molécula de

DNA en la cual las bases purina y pirimidina:
guanina (g), citosina (c), timina (t) y adenina (A),
se mantienen juntas mediante un esqueleto
fosfodiéster entre las porciones 2’-desoxirribosilo
fijas a las nucleobases por medio de un enlace N-
glucosídico
• Las dos cadenas de la molécula de doble hélice son antiparalelas, una cadena
corre en dirección 5´ a 3´, y la otra en dirección 3´a 5´.
• En un gen particular la información genética reside en la secuencia de nucleótidos
en una cadena, la cadena plantilla o no codificadora (cadena que se copia
durante la síntesis de RNA).
• A la cadena opuesta se le considera la cadena codificadora porque coincide con la
secuencia del RNA (pero contiene uracilo en lugar de timina) que codifica para la
proteína.
• En el tubo de ensayo el DNA bicatenario puede existir en la menos seis formas( A a
E y Z) . La forma B generalmente se encuentra en condiciones fisiológicas
 LA DESNATURALIZACIÓN
DEL DNA SE USA PARA
ANALIZAR SU ESTRUCTURA
• Se puede dar al aumentar la temperatura o disminuir las cifras de sal
• Hipercromicidad de la desnaturalización: hay un incremento de la
absorbancia óptica de purinas y pirimidinas con la desnaturalización.
• Las cadenas de una molécula de DNA se separan en un rango de
temperatura. El punto medio se llama temperatura de fusión o Tm.
• La Tm está influida por la composición de bases y por la
concentración de sal de la solución.
• El DNA rico en pares GC (3 enlaces de hidrógeno) se fusiona a una
temperatura más alta que el DNA que el rico en pares AT (dos
enlaces de hidrógeno)
LA RENATURALIZACIÓN DEL DNA REQUIERE
COINCIDENCIA DE PARES DE BASES
• Bajo condiciones de temperatura y sal apropiadas (llamado hibridación).
• El índice de reasociación depende de la concentración de las cadenas
complementarias
• Cuando la hibridación se combina con electroforesis en gel con separación
de ácidos nucleicos por tamaño, junto con marcado radiactivo o
fluorescente para ver una señal detectable se denomina
electrotransferencia Southern (DNA/DNA) y Northern (RNA-DNA)
respectivamente
 LA MOLÉCULAS DE DNA
TIENEN SURCOS
• Hay un surco mayor y un surco menor,
donde las proteínas reguladoras
pueden interactuar con átomos
expuestos de los nucleótidos
(mediante interacciones hidrofóbicas y
iónicas específicas).
• Esta unión ocurre sin alterar la
formación de pares de bases del DNA
doble hélice
 EL DNA EXISTE EN FORMAS RELAJADA Y
SUPERENROLLADA
• Las enzimas que catalizan cambios topológicos del
DNA se llaman topoisomerasas, las cuáles pueden
relajar o insertar superhélices usando ATP como
fuente de energía.

EL DNA PROPORCIONA UNA PLANTILLA

PARA REPLICACIÓN Y TRANSCRIPCIÓN

• La estructura bicatenaria del DNA y la

función de plantilla de cada cadena vieja
(anaranjada) sobre la cual se sintetiza una
nueva cadena complementaria (azul).
EL DNA PROPORCIONA UNA PLANTILLA
PARA REPLICACIÓN Y TRANSCRIPCIÓN
• Cuando cada cadena de la molécula de DNA
bicatenario madre se separa en el transcurso de la
replicación , cada una sirve de modo independiente
como una plantilla en la cual se sintetiza una nueva
cadena complementaria.
• Las dos moléculas de DNA bicatenario hijas recién
formadas ,cada una de la cuales contiene una
cadena ( complementaria más que idéntica)de la
molécula de DNA bicatenario madre, a continuación
se separan entre las dos células hijas durante la
mitosis
• Cada célula hija contiene moléculas de DNA con
información idéntica a la que poseía la célula madre,
sin embargo en cada célula hija la molécula de DNA
de la célula madre únicamente se ha
semiconservado.
 LA NATURALEZA QUÍMICA DEL RNA DIFIERE DE LA DEL
DNA
• El RNA es un polímero de purinas y pirimidinas ribonucleótidos unidos por enlaces
3´,5´- fosfodiéster análogos a los que están en el DNA
• Diferencias con el DNA:
• El azúcar es ribosa en lugar de 2´-desoxirribosa del DNA
• En lugar de timina el RNA contiene el ribonucleótido uracilo
• El RNA típicamente existe como una cadena única
• Puesto que el RNA es una cadena única complementaria a sólo una de las dos
cadenas de un gen, su contenido en guanina no necesariamente es igual a
citosina, ni su contenido de adenina es necesariamente igual al de uracilo.
• El RNA es lábil a álcalis por la presencia de un grupo 2´-hidroxilo.
CASI TODAS LAS ESPECIES DE RNA ESTABLE, ABUNDANTE
PARTICIPAN EN ALGÚN ASPECTO DE LA SÍNTESIS DE
PROTEÍNA
• Hay varias clases de RNA: mRNA, rRNA, tRNA
• Ribozimas: peptidil transferasa (cataliza la formación de enlaces
peptídicos en el ribosoma) y ribozimas comprendidas en el empalme
del RNA
• RNA nuclear pequeño (snRNA) no participa en la síntesis de proteína,
pero participa en el procesamiento del RNA.
• Tamaño de 90 hasta 300 nucleótidos.
 RNA MENSAJERO

• RNA mensajero (mRNA)

• Es la de abundancia, tamaño y estabilidad más heterogénea
• En mamíferos la abundancia de RNAm varía en un rango de 10 4 veces
• Transmite la información de un gen hacia la maquinaria sintetizadora de proteína
• mRNA eucarióticos presentan la terminal 5´cubierta por un 7-metilguanosina
trifosfato enlazado a un 2´-O-metil ribonucleósido adyacente en su 5´-hidroxilo por
medio de 3 fosfatos.
• La cubierta participa en el reconocimiento del RNAm por la maquinaria de
traducción, evita el ataque de las 5´-exonucleasas
 RNA M

• El otro extremo del RNAm , 3´hidroxilo terminal tiene un polímero fijo

de residuos adenilato de 20 a 250 nucleótidos de longitud, no
codificante :”cola” poli A, que impide el ataque de 3´-exonucleasas y
facilita también la traducción
• Tanto la “cubierta”como la “cola” de poli A de RNAm se agregan
luego de la transcripción al pre-RNAm.
• El RNAm representa 2 -5% del RNA total de células eucarióticas
 La estructura de la
cubierta fija a la
terminal 5’ de casi
todas las moléculas
de RNA mensajero
eucariótico.
.
Estas modificaciones un 7-metilguanosina
(la cubierta y el grupo trifosfato está fijo en la
terminal 5’ del mRNA , que
metilo) se añaden luego
por lo general también
de que el mRNA se contiene un nucleótido 2’-O-
transcribe desde el metilpurina
DNA.
T RNA

• Longitud: 74 a 95 nt
• También se generan por procesamiento nuclear de una molécula precursora
• Sirve como adaptadora para traducir la información del RNAm hacia aas específicos
• Hay la menos 20 especies de moléculas de tRNA en cada célula por cada uno de
los 20 aa requeridos para formar proteínas.
• La estructura primaria permite plegado y complementariedad intracadena para
generar una estructura secundaria en forma de hoja de trébol
• Contienen 4 brazos principales
T RNA
• El brazo aceptor termina en los
nucleótidos CpCpAOH. Una
enzima nucleotidil transferasa
específica añade estos tres
nucleótidos luego de la
transcripción.
• El aa apropiado para el RNAt se
fija sobre el grupo 3´-OH de la
porción A del brazo aceptor
• Los brazos D,Tψ C extra definen
un tRNA específico
• Los RNAt constituyen 20% del
RNA celular total
 RNA RIBOSÓMICO (R RNA)
• Polisoma: ribosomas más RNAm
• El ribosoma de mamífero contiene 2 subunidades: una de mayor tamaño 60S y
una de menor tamaño 40S
• La subunidad 60S contiene una RNAr 5S, un RNAr 5.8S y un RNAr 28S,
además de más de 50 polipéptidos específicos
• La subunidad 40S contiene un RNAr 18s único y cerca de 30 cadenas
polipeptídicas distintas
• Todas las moléculas de RNAr (excepto el RNAr 5S) se procesan a partir de una
molécula de RNA precursora 45S única en el nucléolo.
• El componente RNAr grande tiene actividad peptidiltransferasa siendo una
ribozima
• Los RNAr (28s + 18S) representan 70% del RNA celular total.
RNA PEQUEÑO

• En células eucarióticas, forman complejos con proteínas para formar

ribonucleoproteínas en el núcleo , citoplasma o ambos.
• Tamaño de 20 a 1000 nt
• Están presentes de 100 000 a 1 000 000 de copias por célula (<=5%
del RNA celular)
RNA NUCLEAR PEQUEÑO (SN RNA)

• Participan en procesamiento de RNAr y RNAm y en la regulación de gen

• U1,U2,U4,U5 yU6 participan en eliminación de intron y procesamiento de
precursores de RNAm hacia RNAm maduro
• El U7 participa en la producción de los extremos 3´correctos del RNAm de
histona, que carece de cola poliA
• El 7SK forma un complejo de ribonucleoproteína denominado P-TEFb que
modula el alargamiento de la transcripción del gen de RNAm por la RNA
polimerasa II
RNA REGULADORES NO CODIFICANTES GRANDES Y
PEQUEÑOS: MICRO-RNA (MIRNA), RNA SILENCIADORES
(SIRNA) Y RNA NO CODIFICANTES LARGOS (LNCRNA)
• RNAnc: grandes (50 a 1000 nt) y pequeños (20 a 22 nt)
• Los RNAnc pequeños: miRNA y siRNA inhiben la expresión de gen
• Tanto los miRNA como los siRNA se hibridan RNA-RNA a sus RNAm objetivo
• Aprox 1000 genes codifican para miRNA en humanos
• RNAnc largos (desde 300 hasta miles de nt de largo)
• > 90% DNA genómico eucarionte es transcrito
• Los RNAnc su rol varía desde contribuir a la estructura de la cromatina hasta la
regulación de la transcripción de gen que codifica para RNAm por la RNA
polimerasa II.
NUCLEASAS ESPECÍFICAS DIGIEREN ÁCIDOS
NUCLEICOS
• Desoxirribonucleasas: degradan DNA
• Ribonucleasas:degradan RNA
• Endonucleasas: producen terminales 5´-hidroxilo y 3´fosforilo
• Endonucleasas de restricción: endonucleasas que reconocen secuencias
específicas en el ADN
• Exonucleasas: hidrolizan un nucleótido únicamente cuando está presente
en una terminal de una molécula y sólo actúan en una dirección (3’->5´o 5´-
>3´)
ORGANIZACIÓN, REPLICACIÓN Y REPARACIÓN
DEL DNA
• Diversos factores como virus, sustancias químicas, luz ultravioleta y radiación
ionizante aumentan el índice de mutación.
• La cromatina está constituída por moléculas de DNA bicatenario, histonas,
proteínas no histonas y una pequeña cantidad de RNA.
• Las proteínas no histona incluyen enzimas de replicación ,reparación de DNA y
proteínas de síntesis, procesamiento y transporte de RNA.
• Histonas :condensan el DNA, regulación de gen
• Nucleosomas: DNA envuelto alrededor de moléculas de histona, son la unidad
organizacional de la cromatina
 NUCLEOSOMAS

• Los nucleosomas contiene 4 tipos de histonas: H2A,

H2B, H3 y H4
• Estas 4 histonas centrales están sujetas al menos a 6
tipos de modificación covalente de modificaciones
posttraduccionales (PTM): acetilación, metilación,
fosforilación, ADP-ribosilación, monoubiquitilación y
sumoilación, que tienen importancia en la estructura y
función de la cromatina.
• H3 y H4 forman un tetrámero que contiene dos
moléculas de cada una
• H2A y H2B forman dímeros
• En condiciones fisiológicas forman el octámero de
histonas (H3-H4) 2 -(H2A-H2B)2
EL NUCLEOSOMA CONTIENE HISTONA Y DNA
• En la cromatina las partículas centrales (nucleosoma) están separadas por
una región de DNA de alrededor de 30bp denominado “enlazador”
 Se muestra la extensión de la aglomeración
de DNA en cromosomas en metafase
(arriba) a DNA dúplex desnudo (abajo).
El DNA cromosomico esta aglomerado y
organizado en varios niveles

Cromatina inactiva: densamente aglomerada y

se denomina heterocromatina: bandas densas,
alto contenido de meC y las histonas con
bajos niveles de PTM activadoras y altos
niveles de PTM represores
Cromatina activa: eucromatina, bandas claras
Heterocromatina: constitutiva (siempre está
condensada, cerca a los centrómeros y
telómeros) y facultativa (a veces está
condensada, pero a veces se transcribe y se
convierte en eucromatina)
• Estructuras de orden superior mantienen condensada la cromatina: fibrilla
de 10 nm y la fibrilla de cromatina de 30 nm
• Algunas regiones de cromatina son “activas” y otras ”inactivas”
• El DNA en cromatina activa contiene grandes regiones (alrededor de 100
000 pb) que son más sensible a la digestión por una nucleasas como la
DNasa I, por falta 5-metildesoxicitidina (meC) en el DNA y modificaciones
covalentes de histona o PTM (fosforilacióm, acetilación,etc).
• Sitios hipersensibles a la Dnasa I son la ubicación de factores de
transcripción
• El centrómero rico en A-T y secuencias repetidas de DNA
• Los centrómeros están unidos por nucleosomas que contienen la variante de histona H3
CENP-A y otras proteínas de unión formando el cinetocoro
• Los extremos son los telómeros que constan de repeticiones ricas en TG cortas (5´-
TTAGGG-3´)
• La telomerasa se encarga de la síntesis de telómero y mantener la longitud del mismo
• El acortamiento del telómero se ha asociado a cáncer y envejecimiento, la enzima
telomerasa se ha convertido en un blanco atractivo
• El genoma haploide de humanos costa de 3 x 109 bp y 1.7 x 107 nucleosomas
LAS REGIONES CODIFICADORAS A MENUDA ESTÁN
INTERRUMPIDAS POR SECUENCIAS INTERPUESTAS
• Casi todas las secuencias codificadoras para un RNAm único están
interrumpidos por intrones (secuencias no codificadoras)
• Casi siempre los intrones son mucho más largos que los exones.
• La función de las secuencias interpuestas o intrones no está del todo
clara.
Las relaciones entre DNa y mRNa
cromosómicos.
La totalidad de DNA haploide
humano de 3 × 109 pares de bases
(bp) esta distribuido entre 23
cromosomas.
Los genes estan agrupados en
estos cromosomas. un gen
promedio tiene 2 × 10 4bp de
longitud, incluso la región
reguladora (areas rojas), que por lo
general esta localizada en el
extremo 5′ del gen
• Más de la mitad del DNA en eucariotas está en secuencias únicas o no repetitivas
• En el DNA de humano, 30% del genoma consta de secuencias repetitivas. Las
secuencias muy repetitivas están presentes en 1 a 10 millones de copias por cada
genoma haploide, suelen estar agrupadas en centrómeros y telómeros del
cromosoma y casi todas son inactivas en el aspecto transcripcional y algunas tienen
una función estructural.
• Las secuencias moderadamente repetitivas están presentes en menos de 1 millón
de copias por genoma haploide, no están agrupadas sino entremezcladas con
secuencias únicas.Se clasifican como LINE o SINE (retrotransposones).De los SINE
en humanos la familia Alu explica 10% del genoma humano.
• Los RNA SINE Alu,B1 y B2 regulan la producción de RNAm (transcripción y
empalme)
SECUENCIAS REPETIDAS DE MICROSATÉLITE
• Constan de 2-6 bp repetidas hasta 50 veces. Generalmente se encuentran como
repeticiones de dinucleótido AC, CG,AT y CA.
• En cualquier locus el número de estas repeticiones puede variar en los dos
cromosomas: heterocigosidad del número de copias.
• Las secuencias de trinucleótido que aumentan de número (inestabilidad de
microsatélites) pueden causar enfermedad.ejm:
• Sd Xfrágil (CGG)inestable
• Corea de Huntington (CAG)
• Distrofia miotónica (CTG)
• Atrofia muscular espinobulbar (CAG)
• Enfermedad de Kennedy (CAG)
• 1% del DNA celular está en las mitocondrias
• Codifica 13 subunidades proteicas de la cadena respiratoria (de un total de
67)
• En humanos las mitocondrias contienen 2 a 10 copias de una pequeña
16kbp molécula de DNAds circular .
• El DNAmt codifica para RNAr y RNAt específicos para mt y 13 proteínas de
la cadena respiratoria.
• En humanos el DNAmt se transmite por herencia no mendeliana materna
• Algunas enfermedades como miopatías, trastornos neurológicos se deben a
mutaciones del DNAmt.
CARACTERÍSTICAS
DEL DNA
MITOCONDRIAL
HUMANO
EL MATERIAL GENÉTICO SE PUEDE ALTERAR Y REORDENAR
OCURRE INTEGRACIÓN CROMOSÓMICA CON
ALGUNOS VIRUS
• Algunos virus bacterianos (bacteriófagos)
se pueden recombinar con el DNA de un
huésped bacteriano. Esta integración es
una forma de recombinación.
• El sitio en el cual el genoma del
bacteriófago se integra puede ser por
DNA homólogo o por DNA no
homólogo(específica para sitio)
• La integración del DNA de un virus
animal hacia el genoma del animal
generalmente no es “específica para
sitio”, sino que despliega preferencias
por sitio.
 LA TRANSPOSICIÓN PUEDE PRODUCIR GENES
PROCESADOS
• Elementos móviles de DNA saltador: retrotransposones familia Alu
• Genes procesados (en moléculas de inmunoglobulina,alfa- globulina): No
tienen intrones, transposición de RNAm procesado y luego acción de
transcriptasa reversa .
• Seudogenes : genes procesados que no codifican proteína funcional
• Conversión de gen: secuencias similares en cromosomas homólogos y no
homólogos pueden parearse y eliminar cualquier secuencia desproporcionada
entre ellas, esto puede llevar a la fijación accidental de una variante en una
familia de secuencias repetidas.
LOS GENES QUE CODIFICAN PARA
INMUNOGLOBULINA SE REORDENAN
• Los genes VL y CL que codifican para las porciones variable y conservada de
la cadena ligera de inmunoglobulina G, están bastante separados en el DNA
de la línea germinal.
• En el DNA de la células plasmática diferenciada los mismos genes VL y CL se
han movido físicamente para acercarse en el genoma y hacia la misma
unidad de transcripción
 LA SÍNTESIS Y REPLICACIÓN DE DNA ESTÁN
CONTROLADAS DE FORMA RÍGIDA
• La replicación
únicamente puede
ocurrir a partir de una
plantilla de DNA
monocatenario (ssDNA)
 ORIGEN DE LA REPLICACIÓN

• Ori: Se forma un complejo de 150 a 250 pb de DNA y multímeros de la proteína de

unión a DNA.
• Esto da lugar al desenrrollado y desnaturalización de una región rica en A+T.
• En levaduras se han identificado ARS (secuencias de replicación aútonoma) que
contiene una secuencia de 11bp llamada elemento de replicación de origen (ORE).
• El ORE se une a un grupo de proteínas formando el complejo de reconocimiento de
origen (ORC)
• El ORE se ubica adyacente a una secuencia rica en A+T de 80 pb fácil de desenrollar
:elemento desenrrollador de DNA (DUE):origen de la replicación en levaduras.
 DESENROLLADO DEL DNA

DNA helicasa. pemite el desenrollado procesivo

del DNA.

Proteínas de unión a DNA monocatenario (SSB) estabilizan

este complejo para el desenrollamiento, evitando el
retemplado prematuro de DNAss a DNAds
 DESENROLLADO DEL DNA
Formación de la horquilla de replicación:
1) DNA helicasa desenrrolla un segmento corto
2) Una primasa inicia la síntesis de primer RNA
3) La DNA polimerasa inicia la síntesis de la cadena hija naciente
4) Las SSB se unen al DNAss y evitan el retemplado prematuro hacia DNAds

Topoisomerasa:
desenrrola la hélice y evita
la tensión de apertura (en
la separación de hebras)
Replicacion de DNA en
E. coli, (los pasos
generales son similares en
eucariotas)
 FORMACIÓN DE LA HORQUILLA DE REPLICACIÓN
• Las DNA polimerasas sólo sintetizan DNA en dirección 5´a 3´ y sólo un tipo participa en la
horquilla de replicación.
• En la cadena adelantada el DNA se sitnetiza de manera continua
• En la cadena retrasada el DNA se sintetiza en fragmentos cortos
• La helicasa se asocia con la primasa forman un complejo móvil llamado primosoma
• Conforme se completa la síntesis de un fragmento de Okasaki y se libera la polimerasa
se sintetiza un nuevo primer

La misma molécula de polimerasa

permanece asociada con la
horquilla de replicación y sintetisa el
siguiente fragmento de Okasaki.
 INICIO Y ALARGAMIENTO DE LA SÍNTESIS DE DNA
• Requiere un primer de RNA de 10 a 200 nt de largo (DNA polα en eucariotas )
• Ataque nucleofílico del 3´-hidroxilo del primer RNA sobre el fosfato del NTP que entra
primero, con separación de pirofosfato (catalizada por DNA polλ y Є en eucariotas)
• La plantilla de DNA dicta cual desoxirribonucleósido trifosfato es complementario
• Estos segmentos de DNA fijos a un primer RNA son los fragmentos de Okasaki.

En mamíferos después de la
formación de muchos fragmentos el
complejo de replicación elimina los
primers RNA, se rellena las brechas
dejadas por su eliminación y luego se
sellan los fragmentos por DNA ligasas
EL COMPLEJO DE DNA POLIMERASA
Varias polimerasas distintas se encargan de la replicación, propiedades:
1) Alargamiento de cadena
2) Procesividad (número de nt añadidos a la cadena naciente antes que la
polimerasa se separe de la plantilla)
3) Corrección de pruebas
 LA REPLICACIÓN MUESTRA POLARIDAD
• Formación de burbujas de replicación
• El genoma de mamífero completo se replica en aproximadamente 9 horas gracias a que la replicación
en estos organismos es bidireccional y la replicación procede desde orígenes múltiples en cada
cromosoma (hasta 100 oris en seres humanos)

• Este proceso de replicación genera burbujas de replicación

• Hay más replicadores y ORC excesivos que los necesarios para replicar el genoma de mamífero
completo dentro del tiempo de una fase S típica.
• Debe haber una separación de las dos cadenas promovida en mamíferos por RPA (prot de replicación
A)
• El complejo MCM hexamérico desenrrolla el DNA eucariótico
• Se introducen “muescas” en la cadena de doble hélice que se está desenrollando
• Las muescas se vuelven a sellar con rapidez y sin requerir ingreso de energía por :enzima de
resellado de muescas DNA topoisomerasa
• El resellado dependiente de ATP: DNA ligasa
RECONSTITUCIÓN DE LA ESTRUCTURA DE
CROMATINA
• La estructura de la cromatina está involucrada en la regulación e inicio de
síntesis de DNA
• El índice de polimerización en eucariotas es más lento por tener cromatina y
nucleosomas.
• El DNA recién replicado se monta con rapidez en nucleosomas y cromosomas
EL DNA SE SINTETIZA DURANTE LA FASE S DEL CICLO
CELULAR

El progreso a través del ciclo celular de

mamífero es monitoreado de continuo
mediante múltiples puntos
de control del ciclo celular.
La integridad del DNA, el cromosoma y la
segregacion del cromosoma se monitorea
de manera continua durante todo el ciclo
celular.
• La célula se prepara para la síntesis de DNA durante G1 y para la mitosis
durante G2.
• La célula regula la síntesis de DNA, hace que ocurra sólo una vez por ciclo
celular y sólo en momentos específicos.
• Todas las células eucariotas presentan ciclinas que rigen la trnasición desde
una fase del ciclo hacia la otra.
• Las ciclinas activan las CDK (proteína cinasas dependientes de ciclina) que
fosforilan sustratos esenciales para la progresión por el ciclo celular.
• La proteína de retinoblastoma Rb es un sustrato para complejo ciclina D –CDK4 y
CDK6
• Rb es un regulador del ciclo celular porque desactiva el factor de transcripción E2F
necesario para la progresión de G1 a S
• La fosforilación de Rb por CDK4 o CDK6 lo inactiva y tiene lugar la progresión del
ciclo celular.
• El oncogen bcl vinculado a linfoma B, parece ser el gen que codifica para ciclina D1
• Varias oncoproteínas producidas por virus DNA establecen como objetivo el gen Rb
para desactivación y división celular inapropiada
• En el transcurso de la fase S el DNA nuclear se replica por completo
una vez y sólo una vez.
• Los orígenes sólo se activan una vez por cada ciclo celular
• Un par dado de cromosomas se replican de manera simultánea y
dentro de una porción fija de la fase S en el momento de cada
replicación.
REPARACIÓN DE DNA DAÑADO

• Todos los organismos tienen mecanismos complejos , conservados

para reparar el DNA dañado
• Las células eucariotas contiene 5 vías principales de reparación del
DNA:
• Reparación por escisión de nucleótido (NER)
• Reparación de errores de emparejamiento (MMR)
• Reparación por escisión de bases(BER)
• Recombinación homóloga(HR)
• Unión de extremo no homólogo(NHEJ)
• En la reparación de roturas bicatenarias de DNA (DBS) los eucariotes
utilizan dos vías: HR y NHEJ para eliminar DBS.
• Durante la fase Go/G1 se usa la vía NHEJ , mientras que durante la fase S
y G2/M se usa HR.
• Los pasos de la reparación del daño del DNA son catalizados por moléculas
evolutivamente conservadas que incluyen detectores de daño de DNA,
transductores y mediadores de reparación del daño.
• Puede haber retraso del ciclo celular, paro del ciclo celular, apoptosis o
senescencia.
TIPOS DE DAÑO DEL DNA
 VÍAS DE
REPARACIÓN
DEL DNA EN
MAMÍFEROS
 MECANISMO DE MÚLTIPLES PASOS DE
REPARACIÓN DE ROTURA BICATENARIA
DE DNA
El DNA dañado puede:
a) ser reparado directamente (reparación de DNA), o,
por medio de vías mediadas por p53, y
dependiendo de la gravedad del daño del DNA y de
los genes activados por p53 inducidos,
b) las células pueden ser detenidas en el ciclo celular
por p21/WAF1, el potente inhibidor del complejo de
cDK-ciclina para permitir que haya tiempo para que
el DNA extensamente dañado sea reparado, o
c) y d) si el daño del DNA es demasiado extenso
como para que se repare, las células pueden entrar
en apoptosis o en senescencia; estos dos
procesos evitan que la célula que contiene ese
DNA dañado alguna vez se divida y, por ende, que
induzca cáncer u otros resultados biológicos
perjudiciales.
LA INTEGRIDAD DEL DNA Y DE CROMOSOMAS SE
MONITOREA DE PRINCIPIO A FIN DEL CICLO CELULAR
• A través de 4 puntos de control: si se detecta problemas en alguno de estos
puntos la progresión por el ciclo se interrumpe en tanto no se repare el daño.
• El gen supresor tumoral p53: papel clave en la verificación del punto de
control de G1 y G2
• p53 es un factor de transcripción de unión a DNA
• Las concentraciones altas de p53 activan la transcripción de genes que
retrasan el ciclo celular como p21 (potente inhibidor de CDK-ciclina) que
puede inhibir con eficiencia la acción de todas las CDK
• La inhibición de las CDK suspenderá la progresión por el ciclo celular.
LA INTEGRIDAD DEL DNA Y DE CROMOSOMAS SE
MONITOREA DE PRINCIPIO A FIN DEL CICLO CELULAR

• Si el daño del DNA no puede ser reparado se induce la apoptosis.

• En este caso p53 induce la activación de un conjunto de genes que inducen la
apoptosis. Las células que carecen de p53 funcional no pasan por apoptosis
en caso de daño del DNA.
• p53 es uno de los genes mutados con mayor frecuencia en cánceres humanos
• Más del 80% de cánceres humanos portan mutaciones de pérdida de función
de p53
 REPARACIÓN DE ADN
INTRODUCCIÓN
• Las células tienen varios mecanismos para prevenir mutaciones, o cambios
permanentes en la secuencia del ADN.
• Durante la síntesis de ADN, la mayoría de las ADN polimerasas "comprueban su
trabajo" y arreglan la mayoría de las bases mal emparejadas en un proceso
llamado corrección.
• Inmediatamente después de la síntesis de ADN, es posible detectar y
reemplazar cualquier base mal emparejada restante en un proceso
llamado reparación de mal apareamiento.
• Si el ADN se daña, se puede reparar por varios mecanismos, que
incluyen reversión química, reparación por escisión y reparación de ruptura
de la doble cadena.
REVISIÓN

• Las ADN polimerasas son las enzimas que forman el ADN en las células.
Durante la replicación (copiado) del ADN, la mayoría de las ADN
polimerasas pueden "revisar su trabajo" con cada base que añaden.
• Si la polimerasa detecta que ha agregado un nucleótido equivocado
(apareado incorrectamente), lo quita y reemplaza enseguida, antes de
continuar con la síntesis de ADN.
Existen mecanismos que utilizan las
células para corregir los errores de
la replicación y reparar daños al
ADN, como:
• La revisión, que corrige errores
durante la replicación del ADN.
• La reparación de mal
apareamiento, que arregla
bases mal emparejadas justo
después de la replicación del
ADN.
• Las vías de reparación de daño
al ADN, que detectan y corrigen
daños durante todo el ciclo
celular.
 REPARACIÓN DE MAL APAREAMIENTO
• Sucede después de que se ha hecho ADN nuevo, función: es eliminar y
reemplazar las bases mal apareadas. La reparación de mal apareamiento
también puede detectar y corregir pequeñas inserciones y delecciones que
suceden cuando las polimerasas "se resbalan" y pierden su lugar sobre el
molde.
• Primero, un complejo proteico (grupo de proteínas) reconoce y se une a la
base mal apareada. Un segundo complejo corta el ADN cerca de la pareja
errónea y otras enzimas cortan el nucleótido incorrecto junto con un
segmento de ADN circundante.
• Luego, una ADN polimerasa reemplaza la sección faltante con los
nucleótidos correctos y una enzima llamada ADN ligasa sella el espacio.
• En eucariontes, los
procesos que permiten
identificar la cadena
original en la reparación
de mal apareamiento
usan el reconocimiento
de mellas (rupturas en las
cadenas sencillas)
presentes solo en el ADN
recién sintetizado
 MECANISMOS DE REPARACIÓN DE DAÑOS AL ADN
• Reversión directa: algunas reacciones químicas que dañan el ADN pueden ser
"deshechas" directamente por enzimas de la célula.
• Reparación por escisión: el daño a una o unas cuantas bases de ADN se suele arreglar
al eliminar (escindir) y reemplazar la región dañada.
- En la reparación por escisión de bases, solo se quita la base dañada.
- En la reparación por escisión de nucleótidos, se elimina una sección de
nucleótidos.
• Reparación de ruptura de la doble cadena: se utilizan dos vías principales, la unión de
extremos no homólogos y la recombinación homóloga, para reparar rupturas en la doble
cadena del ADN (cuando un cromosoma entero se divide en dos pedazos).
 REVERSIÓN DEL DAÑO
• En algunos casos, una célula puede reparar daños en el ADN al simplemente revertir la reacción
química que los causó. El "daño al ADN" suele implicar solo un grupo extra de átomos que se
unen al ADN mediante una reacción química.
• Por ejemplo, la guanina (G) puede sufrir una reacción que añade un grupo metilo (CH3) a un
átomo de oxígeno de la base. Si no se corrige, la guanina que contiene metilo formará pareja con
timina (T) en lugar de citosina (C) durante la replicación del ADN.
• Los seres humanos y muchos otros organismos tienen una enzima que puede quitar el grupo
metilo, y revertir la reacción para regresar la base a su estado normal.
 REPARACION POR ESCISIÓN DE BASE
• Se usa para detectar y eliminar ciertos tipos de bases dañadas. Un grupo de
enzimas llamadas glicosilasas tiene un papel clave en la reparación por escisión de
bases. Cada glicosilasa detecta y elimina un tipo específico de base dañada.
• En la desaminación puede convertir una base citosina en uracilo, una base que suele
encontrarse solo en el ARN. Durante la replicación del ADN, el uracilo formará
pareja con adenina en lugar de guanina (como lo haría si la base todavía fuera
citosina), por lo que un intercambio de citosina por uracilo sin corregir puede causar
una mutación.
• Para evitar tales mutaciones, una glicosilasa de la vía de reparación por escisión de
base detecta y elimina específicamente citosinas desaminadas. Una vez que se
elimina la base, también se elimina la pieza "vacía" del esqueleto de ADN y otras
enzimas llenan y sellan la brecha.
 REPARACIÓN POR ESCISIÓN DE NUCLEÓTIDOS
• Es otra vía que se usa para eliminar y reemplazar bases dañadas. Detecta y
corrige tipos de daño que distorsionan la doble hélice del ADN. Por ejemplo, esta
vía detecta bases que han sido modificadas con grupos químicos voluminosos, como
los que se unen al ADN cuando se expone a las sustancias químicas del humo de
cigarrillos.
• También se utiliza para reparar algún tipo de daño que causa la radiación UV. La
radiación UV puede causar que la citosina y la timina reaccionen con bases vecinas
que también sean C y T, y se forman enlaces que distorsionan la doble hélice y
causan errores en la replicación del ADN.
• El tipo más común de unión, el dímero de timina, se compone de dos bases de
timina que reaccionan entre sí y se unen químicamente.
• Se elimina el nucleótido (o
nucleótidos) con daño junto con
un segmento circundante de
ADN.
• En este proceso una helicasa
(enzima que abre el ADN)
abre el ADN para formar una
burbuja y enzimas que cortan
el ADN quitan el segmento
dañado de la burbuja.
• Una ADN polimerasa
reemplaza el ADN que falta y
una ADN ligasa sella la brecha
en el esqueleto de la cadena
 REPARACIÓN DE ROTURA DE LA DOBLE CADENA
• Algunos factores ambientales, como la radiación de alta energía, causa roturas en la doble
cadena del ADN (rompen cromosoma). Desastres como Chernobyl.
• Las roturas son peligrosas porque pueden perderse grandes segmentos de cromosomas y los
cientos de genes que contienen si la fragmentación no se repara. Dos vías que participan en
la reparación de rotura del ADN de doble cadena son la vía de unión de extremos no
homólogos y la de recombinación homóloga.
Los dos extremos rotos de un cromosoma
simplemente se vuelven a pegar.
Este mecanismo de reparación es
"desordenado" y resulta en la pérdida, o
a veces adición, de unos cuantos
nucleótidos en el sitio de corte.
Por lo tanto, la unión de extremos no
homólogos tiende a producir una
mutación
 RECOMBINACIÓN HOMÓLOGA
• Se utiliza la información del cromosoma homólogo que coincide con la del dañado (o de
una cromátida hermana si el ADN se ha copiado) para reparar la fragmentación.
• En este proceso se acercan los dos cromosomas homólogos y se utiliza la región sin daños
del homólogo o la cromátida como molde para sustituir la región dañada del cromosoma
roto.

La recombinación homóloga es "más limpia"

que la unión de extremos no homólogos y no
suele causar mutaciones

La región dañada se reemplaza por

recombinación,
usando secuencias dañadas del
homólogo
 REVISIÓN DEL ADN Y REPARACIÓN EN ENFERMEDADES
• El cáncer colorrectal hereditario no polipósico (síndrome de Lynch) es causado por
mutaciones en genes que codifican ciertas proteínas que reparan el mal
apareamiento. Ya que las bases emparejadas erróneamente no se reparan en las
células de las personas con este síndrome, las mutaciones se acumulan con mucho
mayor velocidad que en las células de una persona no afectada. Esto puede conducir
al desarrollo de tumores en el colon.
• Xerodermia pigmentosa son extremadamente sensibles a la luz UV. Lo causan
mutaciones que afectan la vía de reparación por escisión de nucleótidos. Cuando la
vía no funciona, los dímeros de timina y otras formas de daño por luz UV no pueden
repararse. Las personas con xerodermia pigmentosa desarrollan quemaduras graves
con solo unos pocos minutos en el sol y cerca de la mitad desarrollará cáncer de piel
a la edad de 10 años a menos que eviten los rayos UV.