UNIVERSIDAD DE SAN CARLOS DE GUATEMALA

CENTRO UNIVERSITARIO DEL NOROCCIDENTE

CUNOROC- MEDICINA
BIOLOGÍA

REPLICACIÓN DEL ADN

• Genoma es la base hereditaria de todo organismo vivo. Es una
secuencia larga de ADN que proporciona el juego completo de
información genética portada por el organismo. El genoma se divide
en varias moléculas de ADN distintas, que son los cromosomas.

• Cromosoma es la división física en varias moléculas de ADN distintas.

Está formado por varios genes; por lo tanto el genoma se divide en
genes.

• Gen es la secuencia de ADN que codifica para al menos un ARN o

polipéptido como producto final
ADN: Formado por dos bases púricas (A y G) y dos
bases pirimidínicas (T y C).

ADN

Esqueleto
azúcar-
fosfato
• Reglas de Chargaff:
• La cantidad total de nucleótidos de pirimidina (T, C) siempre es
igual a la cantidad de nucleótidos de purinas ( A, G).
• Es decir TCA G
• La cantidad de A es igual a la cantidad de T y la de C a la de G.
Por lo que la A es complementaria con la T y la C con la G.
Complementariedad de bases.
• Dos cadenas en una doble hélice, donde una cadena de ADN
porta toda la información para la síntesis de una segunda cadena
complementaria.
• El orden de bases en una de las cadenas de ADN
determina los ARN y las proteínas codificadas por el
ADN.

• Las bases pueden cambiar por mutación lo que

proporciona la base molecular de la EVOLUCIÓN.
• Hélice bicatenaria de 20 Å (20x 10-10 m) de diámetro,
compuesto por dos cadenas simples de ADN que se
mantienen juntas mediante enlaces de hidrógeno entre
bases de cada cadena.

• La hélice de ADN da un giro cada 34 Å con 10 pares de bases

por cada giro. El par de bases A-T tiene doble enlace y G-C
tiene triple enlace.

• En un cromosoma único humano puede haber varios

millones de pares de bases. Los puentes de hidrógeno
estabilizan la estructura tridimensional de ADN.
• Las dos cadenas monocatenarias corren de manera antiparalela una a
la otra. El esqueleto con carga negativa corresponde a grupos azúcar y
fosfatos que se repiten y se orientan hacia el exterior y las bases que
contienen nitrógeno se quedan en el interior. Polaridad de la
cadena.
5´ 3’
3’ 5´
• La estructura tridimensional del ADN presenta dos surcos que corren
en espiral a lo largo de la longitud de la molécula de ADN. Estos
surcos se producen por el ángulo de los enlaces que se forma entre
las bases y el azúcar
• Un surco mayor (22 Å de ancho)
• Un surco menor (12 Å de ancho)
• Las histonas; Son proteínas básicas, es decir, con carga positiva a pH
fisiológico, que se encuentran en el núcleo de eucariotas asociadas
estrechamente al DNA mediante interacción electrostática. Gracias a
esa interacción el DNA se empaqueta o compacta en gran medida,
enrollándose alrededor de las histonas en forma de nucleosomas.
Hay 5 tipos principales de histonas, llamadas H1, H2A, H2B, H3 y H4.
SEMICONSERVATIVA Y BIDIRECCIONAL

• La replicación es semiconservativa y bidireccional:

• La replicación sigue un modelo semiconservativo
donde cada hélice consta de una cadena original
(parental) de ADN y una cadena hija recién sintetizada
de ADN.
• La replicación es bidireccional ya que se inicia en un
origen de replicación y procede en ambas direcciones.
 PROCESO DE REPLICACIÓN
• Alrededor de 3,000 nucleótidos añadidos por minuto en las células
eucariotas.
• La enzima que lleva a cabo la replicación del ADN es la ADN polimerasa,
esta enzima tiene unos requerimientos específicos para trabajar, que le
imponen restricciones:
1. Sólo añade nucleótidos en la dirección 5’ 3’.
2. Necesita para poder empezar a copiar y unir nucleótidos un molde de
ADN.
3. Necesita un pequeño trocito de ARN al cual unir los nucleótidos, ya
que ella no puede empezar a unir los nucleótidos sin tener una pequeña
cadena ya formada
4. Utiliza nucleótidos trifosfato
 FRAGMENTOS DE OKAZAKI
• Dadas las necesidades de esta enzima y sabiendo que la molécula de
ADN está formada por dos hebras antiparalelas, se plantea un
problema en la cadena de ADN que va en la dirección 5’ 3’, porque
aquí la enzima estaría trabajando en la dirección contraria, y sin
embargo, se observa que las dos hebras se van replicando.
• La solución se estableció, en 1968, por Okazaki de unos fragmentos
constituidos por unos 50 nucleótidos de ARN y entre 1.000 y 2.000
nucleótidos de ADN, denominados fragmentos de Okazaki.

• Así se podía explicar cómo se copia esta cadena, siendo de forma

discontinua en la dirección 5’ 3’ y la otra cadena de forma continua.
También quedaba solucionado el problema de que la enzima
necesitara una cadena de ARN a la cual unir los nucleótidos.
PROCESO
• Existe una secuencia de nucleótidos en el ADN llamada origen de
replicación que actúa como señal de iniciación. En eucariotas hay
múltiples orígenes de replicación.

• Al origen de replicación lo une un complejo proteico llamado ORC

(complejo de origen de replicación), teniendo varios orígenes de
replicación y por lo tanto varios fragmentos a replicar que se llaman
replicones.
• Las cadenas de ADN están unidas por puentes de hidrógeno, que
debemos romper para facilitar la separación de las cadenas para ser
copiadas, esta separación la lleva a cabo las enzimas helicasas.

• Como el desenrollamiento de la doble hélice da lugar a

superenrollamientos en el resto de la molécula, capaces de detener el
proceso, se hace preciso la presencia de las enzimas topoisomerasas
que eliminen las tensiones en la fibra.
• A continuación, para evitar que las dos hebras vuelvan a reunirse y
formar los puentes de hidrógeno se colocan unas proteínas llamadas
proteínas de unión a cadena simple que estabilizan las cadenas
sencillas.

• Como ninguna ADN-polimerasa puede actuar sin cebador, interviene

primero una ARN polimerasa (primasa) que si lo puede hacer,
sintetiza un corto fragmento de ARN de unos 10 nucleótidos
denominado primer que actúa como cebador.
• Después interviene la ADN polimerasa III/α, que a
partir del cebador comienza a sintetizar en dirección
5’ 3’ una hebra de ADN partir de nucleótidos
trifosfato.
• La energía necesaria para el proceso es aportada por
los propios nucleótidos que pierden dos de sus
fósforos.
• Esta nueva hebra se sintetiza en el sentido que se
abre la horquilla de replicación, es de crecimiento
continuo y se denomina hebra conductora.
• A continuación interviene la ADN polimerasa I,δ,ε, que, primero,
gracias a su función exonucleasa, retira los segmentos de ARN, y que
luego, gracias a su función polimerasa, rellena los huecos con
nucleótidos de ADN.
• Finalmente la ADN ligasa unirá los dos extremos, tanto en la cadena
continua como los sucesivos fragmentos de Okazaki que se van
formando en la cadena discontinua.

• www.youtube.com/watch?v=YqjbmrQcyfM
REPLICACION

• Cuando se observa cómo se produce la replicación se ve que la

cadena continua va más rápida que la discontinua, esto es debido a
que cada vez que se forma un fragmento de Okazaki hay que realizar
todo este proceso como si se comenzara la síntesis de nuevo,
formando el primer y el resto de pasos, sin embargo, en la continua
solo se realizará una vez
ADN POLIMERASAS
• Se encuentran en el centro de la maquinaria de replicación.

Añade nucleótidos de manera

secuencial en el extremo 3´de la
Actúa en procesos de cadena de ADN existente
reparación del ADN
ADN POLIMERASAS
EUCARIONTES/PROCARIONTES
EUCARIONTES • Requieren un extremo 3´cebador,
• ALFA: síntesis de ADN nuclear, asociada una cadena corta de ARN. El
a primasa cebador es el ARN porque éste
• BETA: alarma??? tiene más tendencia al error y
• GA MA: replicación en mitocondrias
puede detectarse y eliminarse por
• DELTA: polimeriza ADN en núcleo,
repara y corrige la ADN polimerasa.
• EPSILON: polimeriza ADN en núcleo, • Todas añaden nuevos nucleótidos
repara y corrige
al extremo 3´del cebador y así
PROCARIONTES sintetizan ADN en dirección 5´ 3´.
• TIPO 1: revisa y corrige • Requieren una cadena molde que
• TIPO 2: señal de alarma?? copiar de ADN.
• TIPO 3: realiza la replicación de ambas
cadenas
CADENA ANTIPARALELAS
• Las dos cadenas son antiparalelas, para sintetizar ambas cadenas
complementarias en la dirección 5´ 3´, las dos cadenas de ADN
nuevas deben producirse en direcciones opuestas:
• Una cadena líder donde el ADN hijo se produce de manera continua
en dirección 5´ 3´.
• Una cadena retrasada donde el ADN se sintetiza de manera
discontinua.
• Cadena retrasada cada segmento en la cadena retrasada se
conoce como fragmento de Okazaki, se sintetiza en la dirección 5´--
3´.
 ADN HELICASA
• ADN helicasa es la enzima que separa ambas cadenas de ADN para
que comience la replicación. La replicación se inicia en orígenes y está
regulada por el ciclo celular. Debe gastarse energía que procede de la
hidrólisis del ATP, para abrir las dos cadenas.
• Las helicasas son multiméricas suelen ser hexaméricas (formadas por
6 moléculas idénticas).
PROTEÍNAS DE UNIÓN A CADENA SIMPLE

• Las proteínas de unión a cadena simple, se unen con rapidez al ADN

monocatenario, generado por la acción de las helicasas para impedir
que se forme otra vez el dúplex durante la replicación.
• Las proteínas de unión a cadena simple, aseguran que la burbuja de
replicación permanezca abierta detrás de la helicasa que está
avanzando.
TOPOISOMERASAS
• Las topoisomerasas son enzimas que cambian la topología del ADN al
romper de manera transitoria una cadena de ADN o ambas y pasar la
o las cadenas a través de la brecha. Desempeñan un papel clave al
permitir que las helicasas sigan avanzando ya que el proceso de
desenrrollamiento del ADN crea tensión por torsión delante de la
horquilla en forma de enrrollamiento excesivo o superenrrollamiento
positivo.
• El resultado neto de la actuación de las topoisomerasas es un cambio
en la magnitud del superenrrollamiento del ADN. La acción continua
de las topoisomerasas asegura que el superenrrollamiento producido
por la horquilla no se acumule.
PRIMASAS
• Las primasas son ARN polimerasas especializadas que crean
cebadores para las ADN polimerasas.
• En eucariotas la primasa se encuentra formando un complejo de 4-10
unidades. La síntesis de la cadena líder y la retrasada están
coordinados.
• Los fragmentos de Okazaki en eucariotas están formados por 100-150
bases de longitud.
PINZAS DESLIZANTES

• Pinzas deslizantes sirven para atar las

ADN polimerasas firmemente a las
plantillas de ADN. Forman estructuras en
forma de anillo que rodean al ADN y se
unen a la ADN polimerasa misma, lo que
fija la polimerasa a la plantilla
LA REPLICACION DEPENDE:
a)La exactitud del emparejamiento de bases.
Aproximadamente se produce una base errónea por cada 105 pares de
bases replicadas; en el genoma humano 3,000 millones de pares de bases
da un resultado de 30,000 errores en cada división celular lo cual es
bastante por lo que las ADN polimerasas que tienen mecanismos de
“corrección de pruebas”.
b) La capacidad de corrección de errores.
La corrección de pruebas depende de la actividad de la exonucleasa 3´
5´ que efectúa excisión selectiva de pares de bases mal emparejadas en el
sitio activo de la polimerasa; el resultado es la disminución de 300 errores
por cada división celular en el genoma humano.
• Existen otros mecanismos de reparación que corrigen errores que se han
dejado pasar en la corrección de pruebas.
GRACIAS