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● Conclusión : Mecanismo
de Replicacion del ADN
es Semiconservativo
REPLICACIÓN
EN
PROCARIOTAS
ETAPAS DE
REPLICACIÓN:
Pre-iniciación Elongación
1 2 3 4
iniciación terminación
PREINICIACIÓN
• En el primer evento es tener acceso
al sitio oriC.
• La cual se logra por acción de las
topoisomerasas II.
• la topoisomerasa II, favorece la
formación de topoisómeros
negativos que son los adecuados
para la replicación.
PREINICIACIÓN
• La preiniciación consiste en la separación de las 2 hebras de ADN
en oriC, para formar dos horquillas de replicación.
• Para su formación es necesaria las proteinas DnaA, DnaB, DnaC,
HU, ADN girasa y SSB.
• Las proteínas DnaA se va uniendo a las secuencias de 9
nucleótidos R1-R4 de forma cooperativa.
• De forma que al oriC puedan quedar unidas de 10 a 20 moléculas
de DnaA.
• La proteína HU provoca dobleces de hasta 90° en el ADN,de esta
forma, el ADN se enrolla alrededor del multímero de DnaA.
• Provocando la separación de las dos cadenas en la zona de 13
nucleótidos ricos en AT que se abren de manera secuencial,
primero la mas cerca a R1 y después las otras.
PREINICIACIÓN
• En presencia de la ADN girasa y de SSB, la DnaB que posee actividad de
helicasa procede a alargar la avertura del ADN.
• Las SSB van recubriendo las hebras de ADN.
• De esta manera queda formada un estructura en forma de burbuja o ojal.
• Los extremos del ojal forman las horquillas de replicación.
INICIACIÓN
• Para hacer progresar la horquilla es necesario otro
grupo de proteínas.
• Quedan expuestas una secuencia de 70 nucleótidos,
denominado sitio de ensamblaje del iniciador o PAS.
• El sitio PAS es reconocido por la proteína PriA que se
une a el, y permite la unión posterior de PriB, entonces
se une DnaT.
• Y promueve hacia ese sitio la translocación de un
complejo constituido por DnaB, DnaC, PriC.
• El complejo de 6 proteínas formado se mueve sobre el
ADN en las dos direcciones gracias a actividad de la
helicasa.
INICIACIÓN
• Al complejo se une la DnaG que tiene actividad iniciadora y forma
polirribonucleótidos de aproximadamente 10 unidades de largo, el
ARN iniciador.
• Al conjunto de todas estas proteínas se la denomina complejo
iniciador.
ELONGACIÓN
• Es el proceso por el cual la AND polimerasa añade nucleótidos uno por uno, complementarios
a la cadena molde, a medida que avanza la horquilla, ayudada por PCNA.
• Las topoisomeras I y II cortaran los enlaces fosfodiester de la doble helice y volveran a unirla,
lo que permitira que desenrrolle una vuelta si actua topoisomerasa 1 y dos si actua la
topoisomerasa II.
Terminación
• Al terminar la replicación, las cadenas circulares quedan entrelazadas una
con otra y se requiere un mecanismo llamado descatenarización, en el que
interviene la topoisomerasa II para separarlas.
• En la terminación culmina el proceso de replicación y da como resultado
la separaciones las dos moléculas de ADN hijas. Necesita del concurso de
proteínas especificas, se produce en un sitio fijo.
Fragmentos de okazaki
• Durante la década de 1960, Reiji y Tsuneko Okazaki realizaron
experimentos relacionados con la replicación del ADN en la bacteria
Escherichia coli .
• Son secuencias cortas de nucleótidos de ADN que se sintetizan de forma
discontinua y luego se unen mediante la enzima ADN ligasa para crear
la hebra retrasada durante la replicación del ADN .
Cadena conductora y retardada
• La cadena que se sintetiza en el sentido que avanza la horquilla de replicación se
denomina hebra adelantada, líder o conductora y se sintetiza de forma
continua por la ADN polimerasa.
• Mientras que la que se sintetiza en sentido contrario al avance de la horquilla se
denomina hebra rezagada o retrasada, cuya síntesis se realiza de forma
discontinua o en fragmentos.
Proteinas que participan en la replicación
Helicasa Enzima encargada de separar las dos hebras del ADN mediante la rotura de los puentes de
hidrógeno que se establecen entre las bases nitrogenadas de las dos cadenas del ADN.
topoisomeras Son enzimas isomerasas que actúan sobre la topología del ADN, pueden cortar o formar enlaces
fosfodiéster ya sea una de las hebras (topoisomerasa I) o en las dos (topoisomerasa II) que forman
el ADN.
primasa Es una enzima que sintetiza pequeños fragmentos de ARN de entre 8 y 10 nucleótidos de longitud,
conocidos como cebadores o primers, complementarios a un fragmento del ADN.
ligasa Enzima que cataliza la formación del enlace fosfodiéster entre nucleótidos continuo.
ADN POLIMERASA Son las principales enzimas en este proceso, una característica importante de esta enzima es que
añade los nucleótidos en la dirección 5’ → 3’ siempre y cuando haya un extremo 3’ disponible.
REPLICACIÓN
EN CELULAS
EUCARIOTAS
Origen de la replicación:
Están compuestas por grupos de nucleótidos que solo se repiten una vez o, como
máximo, unas pocas veces en el genoma. Este ADN incluye secuencias que
codifican proteínas (genes) y una gran cantidad de ADN cuya función se
desconoce.
CUADRO DE
DIFERENCIACI
ÓN DE LA
REPLICACIÓN
DE
EUCARIOTAS Y
FIN
GRACIAS POR SU
ATENCIÓN.