TEMA 10 – LA GENÉTICA MOLECULAR

1. LA NATURALEZA DE LA INFORMACIÓN GENÉTICA:

EXPERIMENTOS DE GRIFFITH:
Aportó la primera prueba de que el ADN es portador de la información genética. Infectó unos ratones con
dos cepas de la bacteria Streptococcus pneumoniae:

• Cepa S (con cápsula, virulenta) → los mataba.

• Cepa R (sin cápsula, inocua) → sobrevivían.
➢ Al infectarles con la cepa S inactivada con calor → sobrevivieron.
➢ Combinación de bacterias muertas de la cepa S y bacterias vivas de la cepa R → los mataba.
➢ Conclusión → cepa S transformaba a la cepa R en virulenta.

EXPERIMENTO DE AVERY:
Inoculó a los ratones con la cepa R no virulenta + extracto de células de la cepa S +
Enzimas que Enzimas que Enzimas que Enzimas que Enzimas que
destruyen azúcares y destruyen lípidos y destruyen ARN y destruyen proteínas destruyen ADN y
células tipo R células tipo R células tipo R y células tipo R células tipo R
Muere Muere Muere Muere Vive

• Cepa R solo se transforma en cepa S virulenta cuando el ADN está presente.

• El ADN es el material genético.

BEADLE Y TATUM PAULING, SANGER E INGRAM HERSEY Y CHASE

Demostraron que el ADN de un virus que parasita
Hipótesis “Un gen, Hipótesis “Un gen, una proteína.”
bacterias era la molécula que se introducía en la
una enzima.”
célula bacteriana para la reproducción viral.

ESTRUCTURA DE LOS GENES:

Gen → fragmento de ADN localizado en una región concreta de un cromosoma, que construye una unidad
de información genética.

• Función → almacenar, expresar y transmitir la información genética.

• Estructura:
o Secuencia estructural.
▪ Secuencias codificantes → exones.
▪ Secuencias no codificantes → intrones.
o Secuencia reguladora de la expresión.
Diferencias genéticas entre procariotas y eucariotas:

• Procariotas → con un ADN circular. Algunas bacterias contienen plásmidos.

• Eucariotas → mayor parte del ADN en el núcleo, aunque mitocondrias y cloroplastos contienen
fragmentos propios de ADN. Sus genes están compuestos de exones e intrones.
Dogma central de la biología → establece que el flujo de información genética, que se encuentra en el
ADN, se basa en los procesos de replicación, transcripción y traducción.

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 2. LA REPLICACIÓN:
Replicación del ADN → proceso por el cual, a partir de una molécula de ADN progenitora, se sintetizan
dos moléculas hija, que son una copia idéntica a la molécula original.

• Tiene lugar en la fase S del ciclo celular. En el citoplasma de procariotas. En el núcleo, matriz
mitocondrial y estroma de los cloroplastos en eucariotas.
• Doble hélice debe desenrollarse y cada cadena servir de molde para construir la cadena
complementaria.

2.1 – HIPÓTESIS SOBRE LA REPLICACIÓN DEL ADN:

Hipótesis conservativa
Tras la replicación, una de las
moléculas contiene las dos cadenas
originales, y la otra, las dos
cadenas sintetizadas de nuevo.
Hipótesis dispersiva
Las dos moléculas resultantes de la
replicación son moléculas híbridas
(contienen fragmentos del ADN
original y del ADN recién sintetizado).
Hipótesis semiconservativa
Cada cadena de la molécula
de ADN progenitora sirve de
molde para la síntesis de
una nueva cadena.

Meselson y Stahl cultivaron la bacteria E. coli en un medio con 15N

(isótopo del 14N con mayor densidad), que se incorporó a las cadenas de
ADN que se iban sintetizando. Las bacterias cultivadas tenían un ADN con
una densidad superior a lo normal.

• Cada molécula doble hélice de ADN 1ªGeneración con 14N y 15N → descarta modelo conservativo.
• En moléculas ADN 2ª y 3ª Generaciones no había rastro de 15N → descarta modelo dispersivo.
• Único modelo compatible con resultados → modelo semiconservativo.

2.2 – REPLICACIÓN EN PROCARIOTAS:

• Bidireccional → ocurre en las dos direcciones; las dos cadenas que forman la cadena de ADN son
antiparalelas y ambas se replican.
• Semiconservativo → cada molécula de ADN resultante tiene una cadena vieja y otra de nueva
síntesis.
• Semidiscontinuo → continuo y discontinuo.

INICIACIÓN → apertura y desenrollamiento de la doble hélice.

• Replicación se inicia en un punto del ADN circular de las bacterias → oriC.

• Se produce una burbuja de replicación en la que las 2 hebras de ADN se van separando en
sentidos opuestos formando estructura en forma de “Y” → se originan 2 horquillas de replicación.
Proceso controlado por enzimas y proteínas:

• Helicasas → rompen los puentes de H entre los desoxirribonucleótidos abriendo la doble hélice.
• Girasas y topoisomerasas → evitan las tensiones producidas por la tensión de las hebras (evitan
el superenrollamiento).
• Proteínas SSB / proteínas de unión a cadena sencilla → se unen a cada hebra de ADN y evitan
que ambas se vuelvan a unir.

ELONGACIÓN → síntesis de dos nuevas cadenas de ADN.

ADN polimerasas → se encargan de hacer copias de cada hebra de ADN.

• Características:
o Incapaces de desenrollar el ADN.
o Sintetizan en dirección 5’→3’.
o Necesitan un extremo 3’ -OH libre.
o Algunas tienen actividad exonucleasa 3’→5’.

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 • Tipos:
o ADN polimerasa I → proceso de eliminación de cebadores y unión de fragmentos Okazaki.
Tiene actividad exonucleasa 5’→3’.
o ADN polimerasa II → corrección de errores y apoyo a la ADN polimerasa III.
o ADN polimerasa III → síntesis de ADN.

ARN polimerasa (primasa) → coloca al principio de la cadena un pequeño fragmento de ARN (cebador)
al extremo 3’ -OH libre, que tendrá que ser eliminado después.
ADN ligasa → une los diferentes fragmentos de Okazaki mediante enlaces fosfodiéster (necesita aporte E).
Replisoma → conjunto de enzimas, proteínas y ADN encargados del proceso de la replicación.

1. La ARN polimerasa coloca el cebador en el extremo 3’ -OH libre. La ADN polimerasa III recorre la hebra
molde en sentido 3’→5’ y se sintetiza de manera continua (hebra continua) en sentido 5’→3’.
2. La cadena antiparalela 5’→3’ no se puede replicar de manera continua, por lo que la ADN polimerasa III
sintetiza pequeños fragmentos de ADN en dirección 5’→3’ (fragmentos Okazaki), que se unirán para formar
una hebra discontinua y cada uno necesitará su ARN cebador.
3. La ADN polimerasa I elimina los cebadores y rellena los huecos con ADN complementario al molde y la ADN
ligasa une los fragmentos Okazaki.

TERMINACIÓN:
1. Eliminación del cebador (relleno de hueco y ligado de fragmentos de ADN).
2. Actúa la ADN polimerasa I con función exonucleasa 5’→3’, eliminando un nucleótido del extremo 5’ del
cebador. A continuación, añade nucleótidos al extremo 3’ del ADN.
3. Finalmente, actúa la ADN ligasa, con gasto de energía, para formar el enlace fosfodiéster entre los dos
fragmentos de ADN.

2.3 – REPLIACIÓN EN EUCARIOTAS:

Semejanzas Diferencias
Es semiconservativa. Proceso + lento, el genoma es mucho mayor y el ADN está asociado a
histonas que han de duplicarse.
Es bidireccional. Hay numerosos orígenes de replicación (replicón).
Es semidiscontinua. Existen 5 ADN polimerasas (α, β, γ, δ, ε).
Necesita ADN polimerasa (cebadores). Los fragmentos de Okazaki son + pequeños.
La síntesis de la hebra discontinua queda incompleta en el extremo.

MECANISMOS DE CORRECIÓN DE ERRORES EN LA REPLICACIÓN DEL ADN:

Corrección de pruebas → llevada a cabo por ADN polimerasas con función exonucleasa 3’→5’. Tras
cada polimerización revisan el nucleótido anterior y si es incorrecto lo sustituyen por el adecuado.
Corrección posreplicativa → Hay una cadena nueva y una antigua. Las secuencias GATC de la cadena
vieja tienen A metilada, mientras que en la nueva tardan un tiempo en metilarse.

• La enzima endonucleasa elimina el error cortando el fragmento de ADN que lo contiene.

• La ADN polimerasa rellena el hueco.
• La ADN ligasa une los fragmentos.

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 3. LA TRANSCRIPCIÓN:
Transcripción → proceso de síntesis de una cadena de ARN complementaria a una cadena de ADN que
actúa como molde. Proceso catalizado por enzima ARN polimerasa, que sintetiza el ADN en sentido 5’→3’.

• Todos los ARN se sintetizan a partir de nucleótidos trifosfato por reacciones catalizadas por
enzimas ARN polimerasas.
• La cadena de ARN que se forma es complementaria → en ARN no aparecerá la base timina, será
sustituida por uracilo.
• Resultado es un ARN transcrito primario → en algunos casos será ARNm y en otros sufrirá
proceso de maduración.
• En el citoplasma de procariotas. En el núcleo, matriz mitocondrial y estroma de los cloroplastos en
eucariotas.

3.1 – TRANSCRIPCIÓN EN PROCARIOTAS:

INICIACIÓN:
Inicio de la transcripción en promotores (formados por secuencias cortas en el ADN que son reconocidas
por la ARN polimerasa).

• Promotor situado 35 nucleótidos antes del inicio de la transcripción → región -35, TTGACA.
• Promotor situado 10 nucleótidos antes del inicio TP.→ región -10 (secuencia Pribnow), TATAAT.
• Primer nucleótido que se transcribe → +1, es una purina.
La ARN polimerasa, junto con el Factor σ, reconoce al promotor y se
une a él, creando la burbuja de transcripción.
ELONGACIÓN:
Una vez añadida la ARN polimerasa al promotor, la enzima desenrolla el ADN creando la burbuja de
transcripción. La ARN polimerasa avanza leyendo en dirección 3’→5’ del ADN, mientras sintetiza ARN
en dirección 5’→3’.
Cadena no molde / cadena con
sentido / cadena codificante / +

Cadena molde / cadena sin sentido /

cadena no codificante / -

TERMINACIÓN:
Estrategias de terminación según la intervención del “factor r (rho)”:

• Terminación rho-dependiente → factor rho se une a la secuencia específica del ARN que se está
elongando y se desplaza por el transcrito hacia la ARN polimerasa. Cuando la alcanza, separa el
ARN del ADN y libera la molécula de ARN.
• Terminación rho-independiente → depende de las secuencias específicas del ADN, que
consisten en una región rica en C y G. Hacen que el ARN transcrito se doble sobre sí mismo
formando una horquilla de estructura secundaria, que causa que la polimerasa se detenga.
Los ARN transferentes necesitan un proceso de maduración en procariotas; el ARN mensajero no.

3.2 – TRANSCRIPCIÓN EN EUCARIOTAS:

• ARN polimerasa I → en el núcleo, responsable de la transcripción del ARN ribosómico.
• ARN polimerasa II → transcribe los ARN mensajeros.
• ARN polimerasa III → transcribe el ARN transferente y el ARN 5S.

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INICIACIÓN:
Hay promotores con secuencias reguladores definidas:

• A -25 nucleótidos del inicio de la transcripción → caja TATA.

• A -80 nucleótidos del inicio de la transcripción → CAAT.
• A -120 nucleótidos del inicio de la transcripción → secuencia rica en C y G.
Existen secuencias potenciadoras muy alejadas del gen (para que se transcriba +); y secuencias
silenciadoras (para que se transcriba -).
Los factores generales de la transcripción se unen a la ARN polimerasa para formar un complejo de
iniciación cerrado.
ELONGACIÓN:
Se produce la fosforilación de la ARN polimerasa, que sufre un cambio conformacional y deja de estar
fuertemente unida al promotor. Se separa del complejo de iniciación y continúa con la transcripción del gen.
La ARN polimerasa avanza sobre la cadena molde del ADN en dirección 3’→5’ y sintetiza la cadena de
ARN en dirección 5’→3’.
El transcrito contiene la información codificante (exones) y no codificante (intrones); la información está
fragmentada y dispuesta de forma discontinua. Posteriormente se eliminan los intrones y se unen los
exones.
*Adición caperuza o CAP.

TERMINACIÓN:
No hay señales de terminación exactas. Una vez separado el ARN, se modifica el extremo 3’ mediante
poliadenilación (incorporación de una cadena de nucleótidos de adenina, llamada cola poli-A). Este
ARNm quedará preparado para su exportación al citoplasma.
MADURACIÓN:
Los transcritos eucariotas sufren modificaciones en el proceso de maduración postranscripcional.

• Consiste en la eliminación de intrones y unión de exones mediante el mecanismo splicing o de

“corte y empalme”. Este proceso está catalizado por ribozimas.
• Además, en la elongación, se añade una caperuza o CAP* de 7-metilguanosina trifosfato al
extremo 5’ del ARNm. Ayuda al ribosoma a encontrar el inicio de la traducción y protege al ARN del
ataque de las nucleasas.
• En el extremo 3’ del ARNm se añade una cola poliA.

3.3 – TRANSCRIPCIÓN INVERSA:

Transcripción inversa (retrotranscripción) → proceso en el que a partir de ARN se sintetiza ADN.

• Se da en retrovirus como el VIH.

• La enzima retrotranscriptasa o transcriptasa inversa es capaz de sintetizar ADN usando como
molde la cadena de ARN.
Transcripción en PROCARIOTAS Transcripción en EUCARIOTAS
En citoplasma de las células. En el núcleo, matriz mitocondrial, estroma cloroplastos.
1 ARN polimerasa. 3 ARN polimerasa.
Secuencias de la iniciación: TTGACA y TATAAT. Secuencia de la iniciación: caja TATA.
Transcripción continua (genes continuos). Transcripción discontinua (exones e intrones).
ARNm resultante en la terminación se emplea para la Los precursores de ARN necesitan un proceso de
traducción. maduración.
ARNm contienen información para sintetizar varias ARNm codifica la información correspondiente a una sola
proteínas diferentes. cadena polipeptídica.

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 4. LA TRADUCCIÓN:
Traducción → proceso por el cual, a partir de la información contenida en el ARNm, se sintetiza una
cadena polipeptídica (proteína). Tiene lugar en los ribosomas, donde se produce la unión de aa.

4.1 – CÓDIGO GENÉTICO:

Código genético → define la conversión de secuencias de nucleótidos a secuencias de aminoácidos.
Utiliza 64 combinaciones diferentes de 3 nucleótidos (codones). Características:

• Código casi universal.

• Se basa en combinaciones de 3 nucleótidos (codones / tripletes).
• Es un código degenerado, hay más tripletes que aa. Los tripletes sinónimos son codones
distintos que codifican un mismo aa.
o Tripletes con sentido → codifican aa.
o Sin sentido → no codifican aa → codones de terminación: UAA, UAG, UGA.
• Codón de inicio → AUG (codifica el aa metionina).
• Es un código sin solapamientos → cada 3 bases se corresponden con un aa.

4.2 – FUNCIÓN DEL ARNt EN LA TRADUCCIÓN:

Brazo anticodón → tiene un triplete de bases complementarias al codón del ARNm que
determina el aa que se unirá a la cadena polipeptídica.
Brazo aceptor → extremo 3’ termina en la secuencia ACC, el ARNt se unirá a un aa
para formar un aminoacil-ARNt. Las enzimas aminoacil-ARNt sintasas (específicas
para cada aa) catalizan dicha unión.
Brazo T → implicado en el reconocimiento y unión del ARNt al ribosoma.
Brazo D → implicado en el reconocimiento y unión del ARNt al aminoacil-ARNt sintasa.

4.3 – FASES DE LA TRADUCCIÓN:

INICIACIÓN → intervienen factores de iniciación y GTP.
Comienza la formación del complejo de iniciación:

• Unión del ARNm a la subunidad pequeña del ribosoma → codón de inicio AUG en región
determinada de la subunidad ribosomal. Destaca la caperuza o CAP del ARNm y la señal de
iniciación en región 5’ UTR (antes del codón de inicio).
• Unión del metionil-ARNt gracias a la complementariedad de bases entre su anticodón y el codón
de inicio.
• Incorporación de la subunidad grande del ribosoma al complejo.
Ribosomas están formados por dos subunidades:

• Sitio A → centro aminoacilo.

• Sitio P → centro peptidilo.
ELONGACIÓN → intervienen factores de elongación y GTP.

• Se une un aminoacil-ARNt al sitio A del ribosoma, según la secuencia del triplete correspondiente.
• Se forma el enlace peptídico entre los 2 aa. Proceso catalizado por peptidil-transferasa, que
provoca la traslocación de la metionina desde el sitio P hasta el A.
• El ARNt que ha transferido el aa es liberado del ribosoma. El ribosoma avanza tres nucleótidos en
dirección 5’→3’ del ARNm. Se sitúa el ARNt que lleva la cadena naciente en el sitio P.
A medida que el ARNm es leído por un ribosoma, puede ser traducido por varios ribosomas a la vez
(polisomas).

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TERMINACIÓN → intervienen los factores de terminación y GTP.

• ARNm queda situado en el sitio A correspondiente a un codón de terminación.

• Los codones de terminación no son reconocidos por ningún aminoacil-ARNt, pero sí por los
factores de terminación, que provoca la liberación de:
o La subunidad mayor del ribosoma.
o La subunidad menor del ribosoma.
o El ARNm.
o La cadena polipeptídica.

TRADUCCIÓN EN PROCARITAS → Además del codón de inicio, existe

una secuencia previa de nucleótidos conocida como Shine-Dalgarno.

Modificación postraduccional → glucosilación, adición de lípidos, unión al grupo prostético, plegamiento

y eliminación del péptido señal.

5. REGULACIÓN DE LA EXPRESIÓN GÉNICA.

5.1 – REGULACIÓN DE LA TRANSCRIPCIÓN:
Modelo de regulación cis/trans → se basa en la presencia en los genes de secuencias reguladoras
(elementos cis), a las que se unen de manera específica proteínas reguladoras (elementos trans).

• Reguladores positivos → activan la transcripción de los genes.

• Reguladores negativos → inhiben la transcripción de los genes.
Regulación transcripcional en procariotas → operones:
Operones → conjuntos de genes, situados en la misma región del cromosoma, que codifican proteínas
diferentes pero implicadas en procesos biológicos relacionados.

• Tipos de operones:
o Inducibles → normalmente están inactivos, se activan cuando es necesario.
o Represibles → normalmente están activos, se inactivan cuando es necesario.
• Elementos del operón:
o Genes estructurales.
o Genes reguladores → codifican la síntesis de proteínas represoras (represor).
o Promotor → secuencia a la que se une la ARN polimerasa iniciando la transcripción.
o Operador → secuencia a la que se une el represor, impidiendo la transcripción.
Operón lactosa en E.coli: Operón Trp:

Regulación transcripcional en eucariotas → remodelación de la cromatina:

La regulación de la transcripción desempeña un papel importante en la diferenciación celular.
En eucariotas, la regulación cis/trans tiene un componente adicional de regulación relacionado con la
estructura del ADN en forma de cromatina (barrera para el acceso de la maquinaria transcripcional).
Existen complejos de remodelación de la cromatina, capaces de modificar su estructura y permitiendo o no
la activación de los genes.