LOS GENES Y SU

FUNCIÓN
 DNA y genes
◼ El mensaje genético está escrito en la molécula de DNA en forma
de secuencia de bases nitrogenadas.

◼ El mensaje genético se transmite de una generación a la siguiente

mediante la REPLICACIÓN del DNA

◼ El mensaje genético se expresa en los caracteres biológicos del

organismo mediante la TRANSCRIPCIÓN y la TRADUCCIÓN.

◼ En sentido amplio, un gen es un fragmento de DNA que contiene

una información cuya expresión determina algún aspecto concreto
del funcionamiento del organismo.
 DNA como
material genético
◼ Los experimentos de Griffith,
Avery, McLeod y McCarthy
(primer mitad del siglo XX)
confirmaron el ADN como la
molécula portadora de la
información genética.

◼ Conclusión: una sustancia

química procedente de una
célula es capaz de transformar
genéticamente otra célula
 Experimento de Griffith (1928)
◼ Utilizó dos cepas de Streptococus pneumoniae: cepa S (smooth),
con colonias de superficie lisa y letales para los ratones y cepa R no
encapsulada (rough), con colonias rugosas y que no mataban a los
ratones.
◼ Las cepas S muertas por calor son también inofensivas, excepto
cuando se las mezcla con cepa R vivas que producen una infección
fatal. Además en los ratones infectados se encuentran células vivas
con cápsulas características de la cepa S.
◼ Conclusión: una sustancia química procedente de una célula S
muerta es capaz de transformar genéticamente las cepas R vivas y
hacerlas letales.
◼ Ese factor que Griffith no supo cual era, fue reconocido más tarde
por Avery, Mc Leod y Mc Carthy (1944) como el ADN.
 Replicación del DNA
◼ Watson y Crickexpusieron la idea
inicial de sobre el mecanismo de la
replicación.

◼ Las dos cadenas del DNA se

separarían y, frente a cada una de
ellas, se colocarían los nucleótidos
complementarios formándose el
enlace fosfodiéster para dar lugar a
una molécula completa.

◼ Cada nueva molécula de ADN

tiene una hebra original y una
hebra nueva.
 Replicación del DNA
◼ Según la hipótesis de Watson y Crick (1953) la
replicación del DNA sería semiconservativa.

◼ Sin embargo a priori habrían dos posibilidades:

 Replicación conservativa.
 Replicación semiconservativa.

Semiconservativa
Conservativa
 Experimentos de Meselson y Sthal
◼ Meselson y Sthal (1958) realizaron un experimento con
cultivos de bacterias que demostraron que la replicación
del DNA es semiconservativa
 Mecanismo replicación
▪ La replicación o duplicación del DNA requiere:
▪ Un DNA molde.
▪ Desoxirribonucleósidos trifosfato de A, T, G y C.
▪ Energía (la proporcionan los dNTP)
▪ Las enzimas siguientes:
• Girasas o topoisomerasas. Eliminan tensiones en las dos hebras
de ADN al desespiralizarse.
• Helicasas: Separan las dos hebras del DNA.
• Proteínas SSB. Estabilizan el DNA monocatenario en la replicación.
• DNA polimerasas. Añaden nucleótidos.
• Primasa. Sintetiza el RNA cebador.
• Ligasa. Forma enlaces ester entre los fragmentos adyacentes.
El problema del superenrrollamiento
 ADN polimerasas
◼ Catalizan la adición de
nucleótidos (dNTP) uno a uno al
extremo 3’ de una cadena,
siempre en dirección 5’→3’.
◼ El enzima necesita un cebador
(hebra a la que añadir dNTP).
◼ La enzima va añadiendo los
nucleótidos (dirección 5´→ 3´) al
extremo 3´ del cebador conforme
va recorriendo la hebra molde
(3´→ 5´).
◼ En procariotas se han descrito la
Pol I, Pol II y Pol III.
 ADN polimerasas

◼ Las DNA pol son enzimas procesivas: avanzan

sobre la hebra molde sin soltarse mientras
catalizan la adición de nucleótidos al extremo 3’
de la otra hebra.
◼ Las enzimas que catalizan el proceso de
replicación sólo unen nucleótidos en sentido
5’→3’ es por esto que ambas cadenas, al ser
antiparalelas, deben de replicarse de manera
diferente.
 ADN polimerasas
◼ Además, las enzimas no pueden formar cadenas de nuevo, sólo
pueden elongar cadenas, es por esto que toda nueva cadena de
ADN comienza por un fragmento de ARN, el primer o cebador, pues
el ARN sí puede sintetizarse de nuevo. Este primer será
posteriormente eliminado.

◼ Las DNA polimerasas

tienen varios centros
activos: uno para la
actividad polimerasa y otros
para desempeñar una
acción exonucleasa (rompe
enlaces fosdodiéster).

Vídeo explicando la
replicación del ADN
 Replicación del DNA en procariotas
◼ En experimentos con procariotas se comprueba que la
replicación es bidireccional, semidiscontinua y tiene un
único origen de replicación (ORI C en Escherichia coli).
 Horquilla de replicación
Horquillas observadas
5’ 3’

3’ 5’

Ninguna polimerasa añade

Punto de nucleótidos en estos puntos
inicio
5’ 3’
3’ 5’ 3’
5’
3’ 5’

Origen de
Crecimiento Crecimiento
replicación
continuo discontinuo
5’ 3’

5’
3’
 Horquilla de replicación
◼ Las helicasas desenrollan el ADN y las proteínas SSB
mantienen las dos hebra separadas.
◼ La tensión generada al desenrollar la doble hélice se
reduce por las topoisomerasas que introducen cortes
en la molécula de ADN.
◼ La cadena lider se sintetiza de forma continua.
◼ La cadena retrasada se sintetiza de forma discontinua.
◼ El descubrimiento de los fragmentos de Okazaki
(pequeños fragmentos de RNA con 1000-2000
nucleótidos de DNA unidos al extremo 3’) dieron la
pista sobre como se replica la hebra retrasada.
Horquilla de replicación
 Horquilla de replicación
◼ La primasa sintetiza los ARN cebadores y a
continuación la ADN pol III forma pequeños fragmentos
de ADN unidos a este ARN.
◼ Finalmente, en ambas cadenas la ADN pol I elimina los
ARN cebadores y rellena los huecos con
desoxirribonucleótidos.
◼ Una ligasa une los fragmentos de ADN.
◼ La síntesis de las dos cadenas, conductora y retardada,
se produce de forma simultánea en cada horquilla de
replicación.
Replisoma
Primasa
Replisoma

1. Topoisomerasa
2. Helicasa
3. Proteínas ssb
4. Primasa
5. DNA pol III
6. DNA pol I
7. Ligasa
 Replicación en eucariotas
◼ Los nucleosomas son un obstáculo para el avance de la
replicación.
◼ Los octámeros de histonas de la cromatina han de
desmontarse y duplicarse para volver a ensamblarse
sobre el DNA replicado.
◼ Además para compensar la mayor longitud de las
moléculas de DNA hay múltiples orígenes de la
replicación.
◼ Las enzimas DNA pol son más complejas y los
fragmentos de Okazaki menores (100-200 nucleótidos)
que en procariotas.
Horquillas de replicación
 Replicación en eucariotas
Hebra conductora Origen de la replicación Origen de la replicación

Hebra
Horquilla
retardada
de replicación

Hebra
retardada

Burbujas de replicación

Nucleosomas
Hebra
conductora
Nuevos
nucleosomas
 Fidelidad de la replicación
◼ La DNA pol III tiene un sistema de corrección de error:
 Actividad exonucleasa 3’→ 5’ que elimina el nucleótido introducido
de manera errónea.
 La tasa de errores inicial de incorporación de nucleótidos es de:
1/10.000, mientras que la tasa de error real durante la síntesis de las
nuevas cadenas: 1/1.000.000.000
◼ Si tras la replicación se detecta un error de apareamiento:
 Las endonucleasas reconocen el error y rompen el enlace
fosfodiéster
 La DNA pol I elimina el nucleótido incorrecto y añade el correcto
 La DNA ligasa sella la muesca
◼ Los errores no originados en la replicación también se reconocen
y se corrigen.
 Concepto de Gen
◼ En sentido amplio, un gen es un fragmento de DNA
que contiene información cuya expresión determina
algún aspecto concreto del funcionamiento celular.

◼ En sentido más restringido, un gen es un fragmento de

DNA que determina la síntesis de una molécula de RNA
o una proteína.
 Genes estructurales
 Genes reguladores:
 Genes estructurales y reguladores
◼ Genes Estructurales: producen proteínas cuya acción
se manifiesta en caracteres del organismo. Supone la
transcripción y la traducción del gen.

◼ Genes reguladores: Su expresión no produce

directamente ningún carácter del organismo, sino que
regulan los procesos de replicación, transcripción o
traducción.
 Pueden producir rRNA, tRNA o moléculas de RNA que se unen
a segmentos del DNA regulando su acción.
 También pueden producir proteínas reguladoras que se unen a
segmentos del DNA regulando su acción.
 Dogma central de la Biología
Molecular

Transcripción Traducción
Replicación

DNA RNA PROTEÍNAS

Transcripción
inversa

(Retrovirus)
 TRANSCRIPCIÓN

◼ Consiste en la síntesis
de ARN a partir de
ADN.

◼ El enzima implicado
es la RNA polimerasa.
 Síntesis de RNA
◼ La primera síntesis del RNA “in vitro” fue lograda por
Severo Ochoa, lo que le valió el premio Nobel en 1959.

◼ La enzima descubierta por

Ochoa, la Polinucleótido
fosforilasa, no es la encargada
de la transcripción “in vivo”
◼ La ARN polimerasa fue
descubierta en 1960 por
Hurwizt y Weis.
 Mecanismo de la transcripción

◼ La síntesis de RNA requiere:

 Un DNA molde
 Ribonucleótidos trifosfato de A, U, G y C
 Energía (la producen los rNTP)
 RNA polimerasa (enzima procesiva)
 Transcripción en procariotas
Promotor ARN-polimerasa

5’ 3’
3’ 5’

Iniciación
5’ 3’
3’ 5’
ARN

Elongación
5’ 3’
3’ 5’
Terminador

Finalización
5’ 3’
3’ 5’

ARN transcrito completo

 Transcripción en procariotas
◼ La RNApol reconoce la señal de iniciación (para ello
se une a una proteína llamada el “factor sigma” o la
subunidad )
◼ La RNApol sintetiza el RNA en dirección 5’→3’.
◼ Al final del gen la secuencia de terminación provoca la
liberación de la RNApol de la hebra molde.
◼ Los RNAm procariotas suelen ser policistrónicos
(un RNAm lleva información para fabricar varias
proteínas)
RNAm en procariotas
DNA
 Imágenes de la Transcripción

◼ Transcripción simultánea de genes por varias moléculas

de RNA polimerasa.
 Transcripción en eucariotas
◼ Existen 3 tipos de RNA polimerasas:
 RNA Pol I → transcribe los genes rRNA
 RNA Pol II → sintetizan mRNA
 RNA Pol III → sintetiza los tRNA y el rRNA 5S
◼ Para la transcripción del DNA han de desmontarse los
nucleosomas (histonas pueden tener papel regulador).

◼ Los RNAm son monocistrónicos.

◼ El RNAm ha de procesarse (maduración)
◼ Los genes estructurales poseen intrones (secuencias
que han de ser procesadas)
RNA mono y policistrónico
Maduración del RNAm eucariota
◼ Adición de la “caperuza” al extremo 5’.
 Se añade una guanosina trifosfato invertida y metilada en el N 7
(m7 Gppp), que lo protege de una degradación prematura (por
enzimas exonucleasas) y constituye la señal de inicio en la síntesis
de proteínas.
◼ Adición de la cola poli-A al extremo 3’.
 Se añade una cola de 150/200 nucleótidos de ácido poliadenílico
También es un estabilizador frente a las exonucleasas.
◼ Se eliminan los intrones: “Splicing”.
 Son secuencias transcritas pero que no contienen información
para la síntesis de proteínas.
 Maduración del RNA en eucariotas
Promotor Unidad de transcripción

5’ 3’
Iniciación
3’ 5’

ARN

ARN-polimerasa

5’ 3’
3’ 5’

m7-Gppp

Elongación Capucha 5'

5’ 3’
3’ 5’

m7-Gppp
 Maduración del RNA en eucariotas
5’ 3’
Finalización 5’
3’

PoliA-polimerasa

m7-Gppp

Capucha 5'
OH

ARN heterogéneo
nuclear

Cola de poli-A
OH
Maduración RNAm: Splicing

◼ El RNA se une a unas proteínas

(Ribozimas: snRNP) que hacen que
el intrón adopte forma de bucle.
◼ El RNA se escinde enzimáticamente
(con pérdida de los intrones) y se
suelda de nuevo.
 Maduración del RNA en eucariotas
Maduración 5’ 3’
Exón 1 Intrón Exón 2

Proteína

RNPpn

Espliceosoma

5’ 3’

Los snRNP son

RIBOZIMAS: moléculas
de RNA unidas a
proteínas que catalizán
reacciones químicas.
Intrón

Exón 1 Exón 2
ARNm 5’ 3’
 Splicing

◼ Hibridación DNA-RNAm
 Transcripción

ARNpolimerasa

T A C G A A C C G T T G C A C A T C
A U G C U U G G C A A C G U G

1- Iniciación: Una ARN-polimerasa comienza la síntesis del precursor del ARN a

partir de unas señales de iniciación que se encuentran en elADN.
 Transcripción

ARNpolimerasa

T A C G A A C C G T T G C A C A T C
A U G C U U G G C A A C G U G

m-GTP

2. Alargamiento: La síntesis de la cadena continúa en dirección 5'→3'. Después

de 30 nucleótidos se le añade al ARN una cabeza (caperuza o líder)de
metil-GTP en el extremo 5‘ con función protectora.
 Transcripción

poliA-polimerasa

m-GTP A U G C U C G U G U A G A A A A A

ARNm precursor

3- Finalización: Una vez que la enzima (ARN polimerasa) llega a la región

terminadora del gen finaliza la síntesis del ARN. Entonces, una poliA-polimerasa
añade una serie de nucleótidos con adenina, la cola poliA, y el ARN, llamado
ahora ARNm precursor, se libera.
 Transcripción

Cabeza cola
ARNm AAAAAA
mpraedcurrosor AUG UAG

4. Maduración (cont.): El ARNm precursor contiene tanto exones como intrones. Se

trata, por lo tanto, de un ARNm no apto para que la información que contiene sea
traducida y se sintetice la correspondiente molécula proteica. En el proceso de
maduración un sistema enzimático reconoce, corta y retira los intrones y las
ARN-ligasas unen los exones, formándose el ARNm maduro.
Diferencias entre Transcripción y Replicación

◼ La transcripción es selectiva: únicamente se

transcriben algunas regiones del DNA.
◼ En la transcripción se copia una sola hebra del DNA,
la hebra molde. Hay genes que se transcriben de una
hebra y otros, de la contraria.
◼ La transcripción es reiterativa: un gen puede
transcribirse muchas veces.
 Traducción
◼ Consiste en la síntesis de proteínas según las
instrucciones del mRNA.
◼ La clave del proceso es descifrar la
información contenida en la secuencia de
nucleótidos del mRNA para determinar la
secuencia de aminoácidos de la proteína.
◼ El código que relaciona la secuencia de bases
del mRNA con la secuencia de aas en las
proteínas es el código genético.
 El código genético

◼ CRICK demostró que los aas están codificados

por tripletes de tres bases nitrogenadas en la
cadena de RNAm; son los codones.
◼ El código genético es universal.
◼ Existen 64 codones, dado que solamente hay
20 aas, se deduce que varios tripletes
codificarán para un mismo aa: se dice que el
código genético está degenerado.
Código genético
Ejemplo de codificación de un péptido con 6 aas.
 TRADUCCIÓN
◼ En la traducción intervienen:
 Los ribosomas,
 El RNAm y el RNAt,
 Los aminoácidos
 Diversos enzimas: Las aminoacil-tRNA sintetasas y la ribozima
peptidiltransferasa.
 Formación de los aminoacil-ARNt
◼ Son resultado de la unión de los aminoácidos al RNAt

Aminoacil-RNAt

Activación del aminoácido:

aa + ATP aa-AMP + Ppi
Transferencia del aminoácido activado:
1º FASE aa-AMP + tRNA aa-tRNA + AMP

2º FASE
 Mecanismo de la traducción
◼ El proceso de traducción consta de 3 fases:
 Fase de iniciación: el RNAm se une con la
subunidad menor del ribosoma sobre el codón de
iniciación (AUG). También se une el RNAt-Met y
posteriormente la subunidad mayor del ribosoma.
 Fase de elongación: el ribosoma avanza sobre el
RNAm recorriéndolo en sentido 5’- 3’ y la cadena
polipeptídica se va alargando.
 Fase de terminación: cuando el ribosoma encuentra
un codón de terminación se desprende la cadena
polipeptídica y se separan las subunidades del
ribosoma y el RNAm.
 Mecanismo de la traducción
◼ En los ribosomas pueden distinguirse tres sitios activos
o locus:
 Locus P (centro peptidil): Se coloca el primer Aminoacil-tRNA.
 Locus A (centro aceptor): Se sitúan los siguientes Aminoacil-
tRNA.
 Locus E (centro de salida): Se sitúa el tRNA a punto de
liberarse del ribosoma.
◼ El movimiento de las 2 subuds. del ribosoma necesita
energía obtenida con la hidrólisis del GTP.
◼ En cambio, los enlaces peptídicos se realizan sin
consumo de energía por la adecuada situación espacial
de los aminoácidos.
◼Iniciación: La subunidad pequeña del ribosoma se une a la región líder del ARNm y el
ARNm se desplaza hasta llegar al codón AUG, que codifica el principio de la proteína. Se les
une entonces el complejo formado por el ARNt-metionina (Met). La unión se produce entre el
codón del ARNm y el anticodón delARNt que transporta la metionina (Met).

Subunidad menor del ribosoma

P A
5’ AAAAAAAAAAA 3’

A U G C AA U G C U UA C G A U AG

U AC Codón

Anticodón
ARNt ARNm

1er aminoácido
Elongación I: A continuación se une la subunidad mayor del ribosoma. El complejo ARNt-
glutamima (Gln) [ARNt-Gln] se sitúa enfrente del codón correspondiente (CAA). El centro
activo del ribosoma al que se une el complejo ARNt-Gln se le llama región aminoacil (A).

Subunidad menor del ribosoma

P A
5’ AAAAAAAAAAA 3’

A U G CAA U G C U UA C G A U AG
UAC G UU

(i)
Elongación II: Se forma el enlace peptídico entre el grupo carboxilo de la metionina
(Met) y el grupo amino del segundo aminoácido, la glutamina (Gln). La formación de este
enlace la cataliza la peptidiltransferasa

P A ARNm
5’ AAAAAAAAAAA 3’

A U G C A A UG C U U A C G A U AG
UAC G UU
Elongación III: El ARNt del primer aminoácido, la metionina (Met) se libera.

P A ARNm
5’ AAAAAAAAAAA 3’

A U G CAA U G C U UA C G A U AG
GUU
Elongación IV: El ribosoma avanza sobre la molécula de ARNm quedando sobre el siguiente
triplete.

P A ARNm
5’ AAAAAAAAAAA 3’

A U G C A A UG C U UA C G A U AG
GUU
Elongación V: Entrada del complejo ARNt-Cys, correspondiente al tercer aminoácido, la
cisteína (Cys).

P A ARNm
5’ AAAAAAAAAAA 3’

A U G C A A UG C U UA C G A U AG
GUUAC G
Elongación VI: Unión del péptido Met-Gln (Metionina-Glutamina) a la cisteína (Cys).

P A ARNm
5’ AAAAAAAAAAA 3’

A U G C A A UG C U UA C G A U AG
GUUAC G
 Elongación VII: Se libera el ARNt correspondiente al segundo aminoácido, laglutamina
(Glu).

P A ARNm
5’ AAAAAAAAAAA 3’

A U G C A A UG C U UA C G A U AG
ACG

(i)
Elongación VIII: ElARNm corre hacia la otra posición, quedando el
complejo ARNt3-Cys-Glu-Met en la región peptidil del ribosoma.

P A ARNm
5’ AAAAAAAAAAA 3’

A U G C A A UG C U UA C G A U AG
ACG
Elongación IX: Entrada del complejo ARNt-Leu correspondiente al 4º aminoácido, la
leucina.

P A ARNm
5’ AAAAAAAAAAA 3’

A U G C A A UG C U UA C G A U AG
ACG

A AU

Leu
 Elongación X: El RNAt-Leu se une al codon UUA.

P A ARNm
5’ AAAAAAAAAAA 3’

A U G C A A UG C U UA C G A U AG
A C G A AU
Elongación XI: Unión del péptido Met-Gln-Cys con el 4º aminoácido, la leucina (Leu).
Liberación del ARNt de la Cisteina. El ARNm se desplaza a la 5ª posición

ARNm P A
5’ AAAAAAAAAAA 3’

A U G C A A UG C U UA C G A U AG
A AU
Elongación XII: Entrada del ARNt de la arginina, el 5º aminoácido, la
arginina (ARNt-Arg).

ARNm P A
5’ AAAAAAAAAAA 3’

A U G C A A UG C U UA C G A U AG
A AU
GCU
Elongación XIII: Unión del péptido Met-Gln-Cys-Leu con el 5º aminoácido, la
arginina (Arg). Liberación del ARNt de la leucina (Leu). El ARNm se desplaza a
la 6ª posición, se trata del un codón de finalización o de stop.

ARNm P A
5’ AAAAAAAAAAA 3’

A U G CAA U G C U UA C G A U AG
GCU

Arg-Leu-Cys-Gln-Met
Finalización I: Liberación del péptido o proteína. Las subunidades del ribosoma se disocian
y se separan del ARNm.

ARNm P A
5’ AAAAAAAAAAA 3’

A U G CAA U G C U UA C G A U AG
GCU

Arg-Leu-Cys-Gln-Met
 Finalización II: Después unos minutos los ARNm son digeridos por las enzimasdel
citoplasma.

ARNm
5’ AAAAAAAAAAA 3’
AUGCAAUGCUUACGAUAG
Polirribosomas
Procesamiento de las proteínas

◼ El polipéptido formado ha de sufrir transformaciones

(plegamientos, unión a otros polipéptidos, eliminación de
algunos aas…) hasta convertirse en la proteína
funcional.
◼ La cadena polipétidica puede perder algunos aas del
extremo n-terminal.
 Regulación génica
◼ Los mecanismos de regulación controlan que
genes han expresarse en un momento u otro y en
qué células del organismo.

◼ La regulación de la
expresión génica puede
llevarse a cabo durante la
transcripción o la
traducción, pero lo
normal es que ocurra
durante la transcripción.
 Teoría del Operón

◼ Jacob y Monod describieron un mecanismo de

regulación de la transcripción en procariotas (les valió
el premio Nobel en 1965).

◼ Este modelo se ha mostrado válido para numerosos

genes en todos los organismos, y fue deducido del
estudio la síntesis del triptófano en Escherichia coli.
 Teoría del Operón
◼ Un operón es un grupo de genes estructurales cuya
expresión está regulada por distintos elementos de
control y por genes reguladores. Consta de los
siguientes componentes:

• Genes estructurales
• Promotor
• Operador
• Gen regulador
• Proteína reguladora
• Inductor
 Teoría del Operón
• Genes estructurales: Son genes que codifican la
síntesis de las proteínas implicadas en un mismo
proceso metabólico.

• Promotor: Es una secuencia de nucleótidos del

ADN, a la que se une la ARN polimerasa para
iniciar la transcripción de un gen o un conjunto de
genes.
• Operador: Es una secuencia de nucleótidos
situada entre el promotor y los genes
estructurales.
 Teoría del Operón
• Gen regulador: Es un gen que puede estar situado en
cualquier lugar del cromosoma bacteriano, y codifica la
proteína que actúa como represor. Cuando la proteína
represora se asocia al operador, impide que la ARN
polimerasa se pueda unir al ADN, y con ello, imposibilita la
transcripción.

• Proteína reguladora: Es una proteína también

codificada por un gen regulador y, que como su propio
nombre indica, al unirse al operador, regula la
transcripción.

• Inductor: Es una sustancia o compuesto que se une a la

proteína represora para inactivarla y permitir la expresión de
genes.