Replicación de

ADN
IB 1 0 1 4 F U N DA M E NTO S DE B IO LO G ÍA M O L EC ULA R
Etapa 1. ¿Que sucede? Enzimas Enzimas
Desenrolla En una secuencia palindrómica se abre la cadena de eucariotes procariotes
miento de AND para desnaturalizarse Helicasa Helicasa
la doble Helicasa romper puentes de H de…BN y desenreda SSB SSB
hélice Se unen las SSB

Etapa 2.
Formación
de
horquillas
de
replicación

Etapa 3. Se une a la cadena sencilla formar un primer o AND polimerasa ARN polimerasa
Síntesis de segment ode ARN unas 12 bases alfa o primase
AND nuevo Extender sintetizar o polimerizar AND AND polimerasa Polimerasa III
(replicación Polimerasa/exonucleasa/reparación/corrección epsilon
Liberar la tension de AND cuando se desenrolla Topoisomerasa girasa

Lider, sentido leading se lee de 3 a 5 se sintetiza de 5

a3
Lagging, antisentido, retrasada, rezagada. Fragmento
de Okazaki
 Remover los FEN 1 (flap Polimerasa I
fragmentos de ARN endonuclease 1)
Sella r y ligar ligasa ligasa
espacio
Terminar los Telomerasa ------
cromosomas
4) Se obtienen dos
hebras hijas de
ADN.
Semiconservativ
as
Replicación: flujo de información
Replicación del
ADN
El proceso fundamental para la vida.
Permite que una célula, y los organismos enteros
puedan reproducirse.
Al duplicarse o replicarse, el ADN debe “copiarse”
para trasmitir la información genética de manera
completa y libre de errores.
La maquinaria que replica el ADN debe tener la
capacidad de repararlo.
REPLICACIÓN
DEL ADN Mecanismos
Replicación se refiere
a la
de replicación
Separación de las
hebras de la El modelo deWatson y Crick de la
doble cadena y estructura sugería el mecanismo
Polimerización de replicación.
de las nuevas
Debido a que las cadenas son
cadenas
complementarias, cada una
complementarias puede servir como plantilla para
generar nuevas moléculas
completas de ADN.
Mecanismos
de replicación
Posibles mecanismos de
replicación:

◦ Semiconservativo
◦ Conservativo
◦ Disperso
Ciclo celular.( Interfase-mitosis) Fase S: se sintetizan histonas
adicionales y se lleva a cabo
la replicación del ADN.
AND laxo histonas
Etapas de la replicación
1) Desenrrollamiento de la doble hélice (desnaturalización).
2) Formación de horquillas o burbujas de replicación
donde se desenrrolla la hélice.
3) Síntesis nuevas cadenas de ADN usando la cadena madre
como plantilla, por apareamiento de bases.
4) Se obtienen dos hebras hijas de ADN.
Semiconservativas.
 Elementos de la Replicación: Enzimas

Helicasas: Desenrrollamiento del DNA Ligasa de ADN

Sella los espacios entre los
fragmentos de ADN.

Single-Stranded Binding Proteins (SSBs): Topoisomerasas:

Previenen que ocurra renaturalización del DNA durante la replicación Liberan la torsion que ocurre al
desenrrollarse el DNA.
Primasa de ARN:
Síntesis de primers de RNA
Polimerasa de ADN
◦ Polimerización de dNTPs.
Etapa 1:
Desenrrollamiento
Helicasas rompen los puentes
de hidrógeno entre los pares
de bases de ADN para
permitir la replicación.
Requiere de ATP.
La estructura desenrrollada
es estabilizada por acción de
las proteínas de únion a la
cadena sencilla (SSB). Single stand binding
Etapa 2:
Horquilla de
replicación
El complejo de la ADN
polimerasa se une al ADN de
cadena sencilla.

La polimerización de ADN es
asimétrica.
◦ Ocurre en ambas direcciones.
◦ Ambas hebras se replican
simultáneamente.
Horquilla de replicación
Las polimerasas sintetizan DNA Hay 2 cadenas la líder
◦ 5´3´ direction la retrasada
Etapa 3: Síntesis de ADN
Recordemos la direccionalidad del ADN:
◦ 5’ – contiene el grupo fosfato.
◦ 3’ – se encuentra el azúcar.

La polimerización ocurre en dirección de 5’  3’, es decir se

van agregando los dNTPs (nucléotidos) de uno en uno al 3’-
OH.
◦ En la reacción se pierden 2 grupos fosfato, haciéndola
esencialmente irreversible.
◦ El dNTP correspondiente es “elegido” de acuerdo a lo
“indicado” por la cadena complementaria.
Polimerasas de ADN

ADN polimerasas son las enzimas que

polimerizan los nucleótidos para formar la
cadena de ADN.
◦ En bacterias hay 5 tipos de polimerasas.
◦ En eucariotas hay al menos 14 tipos.
 Las ADN polimerasas no pueden sintetizar ADN de novo, sólo
pueden agregar nucleótidos a una cadena ya existente, por lo
tanto:
◦ Requieren una plantilla (cadena complementaria).

Polimerasas ◦ Una secuencia iniciadora a la cual se le van agregando los

nucleótidos (partidor, cebador, iniciador o primer), generalmente

de ADN una cadena corta de ARN.

El primer provee un extremo 3’-OH libre para que la ADN

polimerasa pueda comenzar a agregar nucleótidos a la cadena.
◦ Polimerasa a o primasa sintetiza el primer
Replicación
semidiscontinua
Dado que la síntesis de ADN
solo puede ocurrir en
dirección de 5’  3’ existe un
problema en replicar una de
las cadenas de ADN.

La polimerasa de” ADN “lee la

plantilla de ADN en dirección
3’ a 5’.
Replicación semidiscontinua
Una cadena crece en la dirección que va abriendo la
horquilla  cadena líder.

La otra cadena crece alejándose de la horquilla 

cadena atrasada.

¿Cómo se lleva a cabo la síntesis en la cadena retrasada,

si la enzima sólo funciona en dirección 5’  3’?
Cadena líder
Es la cadena que se replica de manera
continua y en dirección hacia la horquilla
de replicación.

Una vez creado el primer, la replicación

procede de manera continua hasta se llega
a otra horquilla de replicación.
 Cadena atrasada
El modo de síntesis de ADN para esta
cadena es discontinuo.
◦ Ocurre en pequeños segmentos de 1000-
2000 nucleótidos para para bacterias y 100-
200 nts para eucariotas.

La replicación ocurre en dirección opuesta

a la horquilla de replicación.
◦ Pero sigue siendo en dirección 5’3’

Los segmentos de ADN

generados de esta manera
se conocen como
fragmentos de Okazaki.
Reiji Okazaki
Cadena atrasada

Ocurre en cuatro pasos generales:

1. Síntesis del primer (iniciador).
2. Elongación.
3. Remoción del iniciador.
4. Ligado del espacio entre fragmentos.
Cadena atrasada
Síntesis del primer:
◦ En bacterias: primasa (ARN polimerasa)
◦ En eucariotas: polimerasa α.

Elongación: Se sintetizan de 100 a 2000 nts (dependiendo del organismo) en dirección 5’3’.
◦ En bacterias polimerasa III.
◦ En eucariotas: polimerasa ε.
Cadena atrasada
Remoción del iniciador:
◦ Se requiere de una enzima que pueda romper enlaces fosfodiester.
◦ Endonucleasa: corta el ADN en regiones cercanas a los extremos. Pueden ser altamente específicas.
◦ Exonucleasa: quitan nucleótidos de los extremos de una secuencia de ADN de uno a uno.
◦ En bacterias la polimerasa I remueve el iniciador por actividad exonucleasa.
◦ En eucariotas la enzima FEN-1 (flap endonuclease 1) elimina el iniciador de ARN por actividad endonucleasa.
Cadena atrasada
Llenado del espacio del primer:
◦ Procariotas: polimerasa I.
◦ Eucariotas: polimerasa ε.

Ligación: Formación de nuevos enlaces fosfodiéster para unir los

fragmentos por medio de la enzima ligasa.
◦ Ligasa no puede unir ARN con ADN.
Problema del enrrollamiento del ADN
Al separarse las hebras de ADN para iniciar
la replicación se genera torsión en el resto
de la doble cadena.
◦ Se adquiere superenrrollamiento positivo.

Girasa de ADN es una topoisomerasa tipo II

que libera la tensión generada en el ADN
durante la replicación de ADN bacterial
para evitar el supernerrollamiento.

https://www.youtube.com/watch?v=ljS84V8uYN8
Resultado de la replicación: 2 cadenas de
ADN
En las horquillas de replicación se
Resultado: 2 cadenas de AND
van formando las nuevas cadenas
semiconservativas que formarán un
de ADN

Cromosoma
Hay multiples horquillas de
replicación en un
cromosoma
Video recomendado
https://www.youtube.com/watch?v=YqjbmrQcyfM