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Genetica Molecular Esquema

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ESQUEMA GENÉTICA MOLECULAR. 2º BACH. BIOLOGÍA. I.E.S. MIGUEL DE CERVANTES. MÓSTOLES.

CURSO 2008-09

El ADN es el depositario de la información genética. Historia

1928. Griffith sus experimentos con neumococos demuestran que una sustancia o “factor transformante” hacía patógenas a las bacterias inocuas. 1944. Avery, McLeod y McCarty el factor transformante podría ser el ADN 1952. Hershey y Chase demostraron en experimentos con fagos marcados que el factor transformante es el ADN. 1865. Los “factores hereditarios” de Mendel son los genes actuales 1909. Johannsen define GEN a la unidad de transmisión genética. 1948. Beadle y Tatum: hipótesis “un gen-un enzima”. Un fragmento de ADN o gen lleva información para la síntesis de un enzima. Actualmente: “un gen-una cadena polipeptídica”. Definición actual de GEN: es un fragmento de ADN que lleva codificada la información para la síntesis de una determinada cadena polipeptídica. Genes de procariotas Todo el ADN lleva información para sintetizar proteínas El gen codificador de cada proteína se compone de una secuencia continua de nucleótidos No repetitivo Genes de eucariotas Un 10% o menos lleva información para sintetizar proteínas Las secuencias codificadoras de los genes no son continuas. Un gen se compone de exones (secuencias codificadoras) e intrones (no codificadoras) Casi la mitad del ADN es altamente repetitivo. Parece que le da estabilidad.

Evolución del concepto de gen

Los genes GENÉTICA MOLECULAR Diferencias de los genes de procariotas y eucariotas

1970. Francis Crack enuncia el Dogma Central de la Biología Molecular Reúne las funciones del ADN y ARN Comprende los procesos de replicación, trascripción, retrotranscripción y traducción. Dogma Central de la Biología Molecular

Transcripción Replicación

Traducción

ADN

ARN-m

Proteínas

Retrotranscripción

¿Qué es?

R E P L I C A C I Ó N D E L A D N

Es el proceso de autoduplicación del ADN por el cual, una molécula de ADN materno, da lugar a dos moléculas hijas identicas entre si y a la de ADN materno. ¿Para qué? Ocurre porque la información genética debe ser copiada y duplicada para que la reciban las células hijas en la división celular. ¿Dónde? Tiene lugar en el núcleo celular de las células eucariotas y en el citoplasma de las procariotas. ¿Cuándo? En la fase de síntesis (S) de la interfase del ciclo celular. ¿Cómo es? Semiconservativa (hipótesis de Watson y Crack, 1953, demostrada mediante el experimento de Messelson y Stahl, 1958). Dice que cada una de las cadenas del ADN materno sirve de molde para la síntesis de una cadena complementaria. El resultado es que cada ADN hijo conserva una cadena original del ADN materno y la otra es de nueva síntesis. 1) Separación de las 2 cadenas complementarias, desenrollamiento y apertura de la doble hélice: las de la Con enzimas (helicasas, topoisomerasas, proteínas SSB) que rompen los puentes de H, separan y estabilizan las cadenas. Comienza en los “orígenes de replicación” El proceso de separación es bidireccional. Se forman “burbujas de replicación” que se extienden formando “horquillas de replicación” en forma de Y. ETAPAS DE LA REPLICACIÓN 2) Síntesis de las nuevas cadenas de ADN: Por el enzima ADN polimerasa, que tiene como funciones: Leer la secuencia de las hebras molde en sentido 3’ 5’. Seleccionar el NTP (nucleótido trifosfato) complementario e hidrolizarlo en NMP (nucleótido monofosfato) y 2 PPi Incorporar el NMP a la cadena hija en crecimiento mediante enlace fosfodiéster. La cadena nueva crece en sentido 5’ 3’ El enzima ARN polimerasa sintetiza un fragmento de ARN (cebador o primer) y sobre él la ADN polimerasa alarga la cadena. La síntesis es bidireccional y, en parte, discontinua: síntesis continua en la hebra conductora o líder y síntesis discontinua en la hebra retardada que se forma a trozos según se va abriendo (fragmentos de Okazaki) y que se unen después por ligasas. 3) Corrección de errores: Durante la replicación: la ADN polimerasa es autocorrectora, a medida que va colocando los nucleótidos va corrigiendo errores. Corrección postrreplicativa: después de la replicación, un complejo multienzimático recorre la cadena recién formada, se eliminan los nucleótidos mal emparejados, la ADN pol. regenera la secuencia correcta y un enzima ligasa une los extremos.
Célula procariota Diferencias en la replicación Célula eucariota Al estar menos replegado no es tan complejo el Necesitan un desempaquetamiento previo por tener desempaquetamiento previo a la replicación. estructuras más complejas y mayor cantidad de ADN. Poseen 3 ADN polimerasas distintas Más tipos de ADN polimerasas. Un solo punto de inicio u origen de replicación y 2 Muchos orígenes y horquillas de replicación para acelerar horquillas de replicación. el proceso. Fragmentos de Okazaki tienen de 1000 a 2000 nucleótidos. Fragmentos de Okazaki menores en extensión, de 100 a 200 nucleótidos. Al ser el ADN circular no se produce acortamiento por no Al ser el ADN lineal se acorta el extremo de las hebras en haber telómeros. cada ciclo al eliminarse el ARN cebador y el enzima telomerasa los completa.

Es… el proceso de copia de la información genética de un fragmento de ADN o gen al ARN en sus distintos tipos. El lugar de la célula… donde ocurre es el núcleo de las eucariotas y el citoplasma en procariotas. Los elementos necesarios son… Nucleótidos trifosfato libres o NTP (ATP, GTP, UTP y CTP)
Un fragmento de ADN como molde, ese gen lleva la información para la síntesis de una proteína. Enzimas: ARN polimerasas o transcriptasas de distintos tipos. ARN pol reconoce y se une a una zona de ADN, el “promotor” situado unos 30 nucleótidos antes del gen a transcribir. ARN pol comienza a deslizarse por la cadena de ADN y hace que se vaya desenrollando. ARN pol lee el ADN en sentido 3’ 5’ y la síntesis se realiza en sentido 5’ 3’ La síntesis es asimétrica, solo se transcribe una de las dos cadenas, no siempre la misma. ARN pol coloca los nucleótidos complementarios uniéndolos con enlace fosfodiéster La síntesis termina al llegar ARN pol a una zona del gen llamada región terminadora El nuevo ARN se libera y el ADN se enrolla de nuevo.

T R A N S C R I P C I Ó N

Separación de las dos cadenas de ADN, solo en la zona del gen a transcribir.

INICIACIÓN

ELONGACIÓN O ALARGAMIENTO DE LA CADENA

LAS ETAPAS DE LA TRANSCRIPCIÓN SON…

Transcripción propiamente dicha (solo lo veremos (solamente para el ARN mensajero) TERMINACIÓN

Salida del ARNm al citoplasma a través de los poros nucleares para ser leído y que se lleve a cabo la traducción

SPLICING: MADURACIÓN O PROCESAMIENTO (solo ocurre en eucariotas)

Consiste en la eliminación de ciertas secuencias y modificación de los extremos 3’ y 5’ Enzima “ribonucleasa pequeño nuclear” corta los intrones, los enrolla en lazos y se eliminan. Los exones o secuencias codificantes, se unen para dar la cadena de ARNm definitiva. En el extremo 3’ se añade una “cola” de poli-A y en el 5’ una “caperuza o cabeza” de un nucleótido especial (7 metil guanosina trifosfato)

C Ó D I G O G E N É T I C O

Traducción es la formación de proteínas. Es el proceso por el cual la información genética contenida en el ARNm se traduce en proteínas. Tiene lugar en el citoplasma, en los polirribosomas o polisomas (ribosomas + ARNm) La traducción a proteínas necesita un “diccionario”: la información transcrita en el ARNm está codificada, hay que descifrarla y el “diccionario” es el CÓDIGO GENÉTICO. ES el “diccionario” que traduce la secuencia de bases nitrogenadas (o nucleótidos) en una secuencia concreta de a.a. de una proteína. El código genético más usual emplea codones: el mensaje genético original es la secuencia de bases del ADN y sus palabras
se llaman codógenos. El mensaje copiado o transcrito es la secuencia de bases del ARNm; sus palabras se llaman codones. El descifrado del código genético lo inició el español Severo Ochoa en 1961. Las “palabras” o codones determinan el tipo y colocación de los a.a. en la cadena polipeptídica y la “frase” define una proteína. ES TRIPLE… cada a.a. está codificado por 3 bases (3 nucleótidos). VR 4,3 = 43 = 64 ALGUNAS CARACTERÍSTICAS IMPORTANTES DEL CÓDIGO GENÉTICO… LOS CODONES SON CONSECUTIVOS Y NO SOLAPANTES… se siguen unos a otros y no comparten bases nitrogenadas. SIN COMAS… la lectura de los tripletes se realiza de forma continua "sin comas" o sin que existan espacios en blanco. ES DEGENERADO… para cada a.a. existen en general más de un codón que lo codifica. HAY “CODONES SIN SENTIDO O DE TERMINACIÓN” (UGA, UAG, UAA) que finalizan la síntesis. El codón AUG es el “CODÓN MAYÚSCULA O DE INICIACIÓN” que codifica para el a.a. metionina. ES UNIVERSAL… en todos los organismos los mismos codones determinan los mismos a.a. Solo existen algunas excepciones en unos pocos tripletes en bacterias.

+

T R A D U C C I Ó N

Consiste en… la síntesis de las proteínas, según las ordenes del mensaje genético del ADN, para lo cual los a.a. deben situarse en el orden
que viene definido por el tipo y la secuencia de los codones del ARNm. Papel de los diferentes tipos de ARN: El mensaje transcrito es leído por los ribosomas (ARNr) y los a.a. son transportados al lugar de síntesis por moléculas de ARNt y se van uniendo en el orden que indica el ARNm.

E T A P A S D E L A T R A D U C C I Ó N

1º) ACTIVACIÓN DE LOS AMINOÁCIDOS: Para cada uno de los 20 a.a. estructurales existe, al menos, un ARNt y un enzima específico. El enzima y el a.a. más ATP forman un complejo y se libera pirofosfato (PPi) El complejo se une a su ARNt específico quedando activado y se libera el enzima. Al conjunto del a.a. y su ARNt se le llama complejo de transferencia. a.a. + aminoacil-ARNt-sintetasa + ATP a.a.-aminoacil-ARNt-sintetasa + AMP + PPi + ARNt aminoacil-ARNt-sintetasa + aminoacil-ARNt (complejo de transferencia) 2º) TRADUCCIÓN PROPIAMENTE DICHA: Iniciación de la síntesis: el ARNm se une al ribosoma (1º a la subunidad menor y luego a la mayor) y va llamando a los complejos de transferencia en el orden de codones. El ARNm lee en sentido 5’ a 3’. El primer a.a. que se sitúa es la metionina, por ser el primer codón el AUG o codón de iniciación. Elongación de la cadena polipeptídica: entra un nuevo complejo de transferencia que se acopla al codón siguiente. Se forma el enlace peptídico entre la metionina y el nuevo a.a. sale del ribosoma el ARNt de la metionina y se produce la “1ª translocación ribosomal” (se desplaza un puesto-un codón- el ARNm, con lo que sale del ribosoma el primer codón AUG y entra un 3º. El 2º pasa a ocupar el lugar peptidil –P- y el 3º el lugar aminoacil -A-) Terminación de la síntesis: viene informada por el triplete sin sentido o codón de terminación UAA, UAG o UGA. Un mismo ARNm puede ser leído por varios ribosomas a la vez, constituyendo un polisoma. A medida que se sintetiza, la cadena adopta estructura secundaria y después terciaria. 3º) ASOCIACIÓN DE VARIAS CADENAS POLIPEPTÍDICAS Y A VECES DE GRUPOS PROSTÉTICOS: Tras finalizar la traducción unas proteínas son activas y otras no. Unas necesitan eliminar algunos a.a. (en general se separa el a.a. metionina), otras (los enzimas) se unen a iones, coenzimas o a otras cadenas polipeptídicas para poder ser funcionales.

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