Dr.

Luis Fernando Rolón

Biología molecular

REPLICACIÓN DEL ADN

Diana Iris Tinoco Ramírez

Alma Delia Valencia Santos
Fernanda Itzel Zamora Robles
 DEFINICIÓN

Es el proceso mediante el cual una molécula de ADN

hace copia de si misma (y, por tanto del cromosoma)

CELULA PROGENITORA

DESCENDENCIA
• Consiste en la formación de dos cadenas de DNA a partir de una, siguiendo
como modelo de copia las dos hebras de la molécula progenitora
• La replicación del DNA es semiconservadora: cada nueva cadena tiene una
hebra del DNA padre y otra hebra de nueva síntesis
 BIDIRRECCIONAL
• La replicación es bidireccional.
• Comenzada en un punto de la molécula de ADN el proceso se desarrolla
hacia los dos extremos de la cadena; en cada lazo, los extremos u
horquillas de replicación avanzan en el proceso de síntesis hasta
completar la copia.
• E.
 SECUENCIAL

• Es ordenada y secuencial. Se inicia en unos puntos fijos del cromosoma, y el

crecimiento de la cadena de DNA se produce de manera simultánea al
desenrollamiento de la doble hélice original. Como otros procesos biosintéticos
utiliza sustratos activados, desoxirribonucleósido 5'-trifosfatos (dNTP).
 INICIO MONOFOCAL Y MULTIFOCAL

• El inicio de la replicación en procariotas es monofocal, comienza siempre en un

punto determinado del cromosoma circular denominado origen (ORI). La
replicación progresa formando dos horquillas de replicación.
• Por el contrario en eucariotas la replicación es multifocal, pues en cada
cromosoma existen múltiples orígenes de replicación (cientos o miles) que dan
lugar a un número doble de horquillas de replicación.
 EUCARIOTAS PROCARIOTAS

• 5 Polimerasas Enzimas que sintetizan (replican) el DNA

• Alfa y beta Principal en replicación E. Coli
DNA polimerasa I (rellena huecos y
• Corrección de pruebas: actividad 3’ 5’ repara)
exonucleotidica. Sustituye bases mal DNA polimerasa II y lll (Función principal
emparejadas (10) por correctas (10); en la síntesis)
mecanismos de reparación adicionales la Añade bases en ambas cadenas en la
reducen hasta 10 dirección 5’ 3’
Requiere un 3’ OH final
 SEMEJANZAS

• Semiconservativa
• Bidireccional
• Semidiscontinua (hebra continua y hebra retardada )
• Participan enzimas Helicasa, Topoisomerasas, Polimerasas, Ligasas etc..
 LA SÍNTESIS DE ADN SE
DESARROLLA EN DIRECCIÓN 5' → 3'

• La dirección en que actúan las enzimas es fija y única de 5' a 3'. Esto determina que la
cadena molde ha de tener la dirección 3'→5', para que la nueva cadena en formación,
complementaria y anti paralela tenga la dirección 5' →3' coincidente con el sistema de trabajo
de la enzima. Al ser la horquilla de replicación bidireccional, el sistema descrito implicaría que
la otra cadena parental 5'→3' debería estar siendo copiada en dirección 3'→5', situación
imposible debido a la limitación de las enzimas sintéticas. Este problema es obviado debido a
que, La síntesis de ADN es semidiscontinua
ELEMENTOS QUE PARTICIPAN
EN LA REPLICACIÓN DEL DNA
 ÍNDICE

• Descripción del complejo primosoma y replisoma

• Función y características de primasa, RNA
cebador, helicasa, proteínas de unión a
DNA de cadena sencilla
• La replicación del DNA se da cuando éste hace una copia de
sí mismo por medio de un enzima que además de ser muy
exacto posee un sistema de reparación de errores.
• En Procariotas. Un lugar origen de replicación: la
separación y la replicación a la vez
• En Eucariotas. DNA es mucho más grande y lineal.
• 1. ADN polimerasas. Enzimas que añaden nucleótidos nuevos al extremo 3’, y sólo a
este extremo.
• 2. Nucleósidos (desoxirribosa y base nitrogenada), que son la forma activa del
nucleótido.
• 3. ATP, que se une a nucleósido en el momento de la polimerización, liberándose un
pirofosfato.
• 4. Cebador, que es un pequeño fragmento de ADN con un 3’ libre, que sirve para que la
polimerasa comience la adición de nucleótidos.
• Primosoma formado por las enzimas primasa, helicasa y
probablemente otros polipéptidos que en conjunto catalizan el inicio
del proceso de replicación del DNA, a través de la síntesis del
primer.
• El replisoma es un mecanismo molecular complejo que lleva a
cabo la réplica del ADN. Comprende varios sub-componentes, cada
uno realiza una función específica durante el proceso de réplica.
• La ARN primasa, es una enzima que sintetiza pequeños fragmentos de ARN sobre la
cadena rezagada en la replicación de DNA, de unos 10 nucleótidos, conocidos como
cebadores, complementarios a la hebra de ADN que se copia durante la replicación.
• RNA cebador
• Pequeña molécula de RNA (aproximadamente 5 nucleótidos), complementaria a una de
las hebras del DNA molde, que sintetiza la primasa durante el proceso de replicación del
DNA.
• La helicasa hace referencia a un grupo de enzimas del tipo proteica-hidrolítica muy
importantes para todos los organismos vivos; también son llamadas proteínas motoras.
Estas se trasladan por el citoplasma celular, convirtiendo energía química en trabajo
mecánico mediante hidrólisis de ATP.
• Proteínas SSB Se unen al ADN como tetrámeros, y estabilizan la estructura de hebra
simple generada por la acción de las helicasas. La replicación es 100 veces más rápida en
presencia de estas proteínas.
ETAPAS DE LA REPLICACIÓN
 ÍNDICE

• Iniciación (Sitio de ORI y horquilla de replicación)

• Elongación/Extensión (Asimetría de la replicación
en ambas hebras, síntesis continua y discontinua.
Fragmentos de okazak y su maduración)
• Terminación (Final de la elongación, replicación de
los telómeros, función, componentes y acción de la
tolomerasa. )
• La replicación es la capacidad de una célula para crear una
copia de ella. Este proceso se lleva a cabo en la etapa S
(Síntesis) del ciclo celular siendo vital para que se lleve a cabo
la división celular.
• De esta manera de una molécula de ADN única, se obtienen dos
o más "clones" de la primera.
 PROTEÍNAS QUE PARTICIPAN

• HELICASA: Se encarga de la separación de las hebras.

• PROTEINCAS DE UNIÓN A CADENA SENCILLA (SSB):
Evita nuevamente la unión de los puentes de hidrogeno
permitiendo que se copien
• TOPOIOMERSAS: Pueden cortar o formar enlaces
fosfodiéster. Topoisomerasas 1 en una hebra y
Topoisomerasas 2 en ambas hebras.
• PRIMASA: Enzima que sintetiza pequeños fragmentos de
ARN (8-10lg)
• RNASA H1: Se encarga de retirar los cebadores de ARN
durante la síntesis de fragmentos de Okazaki.
• FEN1/ RTH1: Se encarga de remover el ribonucleotido 5´.
• LIGASA: Cataliza la formación del enlace fosfodiéster
entre nucleótidos continuos
• TELOMERASA: Actividad de ADN polimerasa dirigida por
ARN. Capaz de sintetizar una secuencia determinada de
ADN
 ADN POLIMERASA

• La ADN polimerasa es la enzima que cataliza la síntesis de la

nueva cadena de ADN a partir de desoxirribonucleótidos y de
la molécula de ADN molde que es la que será replicada. La
enzima copia la cadena de nucleótidos de forma
complementaria (A por T, C por G) para dar a cada célula hija
una copia del ADN durante la replicación.
 PUNTOS DE INICIO

• La replicación empieza en puntos determinados: los

orígenes de replicación. Las proteínas encargadas de dar
inicio reconocen ciertas secuencias de nucleótidos
específicas en esos puntos y facilitan la fijación de otras
proteínas que permitirán la separación de las dos hebras
de ADN formándose una horquilla de replicación.

La cantidad de ADN que se puede sintetizar

a partir de un único origen de replicación se
denomina replicón o unidad funcional de
replicación. En eucarióticos es multifocal
(hay uno cada 20 kb aproximadamente)
 HORQUILLA DE REPLICACIÓN

• Dos horquillas que avanzan en

direcciones opuestas.
• La replicación avanza con una
estructura en forma de horquilla
formándose una burbuja u ojo de
replicación que avanza en dirección
a la región de ADN no duplicado
dejando atrás los dos moldes de
ADN de cadena simple donde se
está produciendo la replicación.
 INICIACIÓN

• Comienza la topoisomerasa con la separación de la doble

hélice del ADN después la helicasa se une a la cadena de
ADN e hidrolizará los puentes de hidrógeno y las proteínas
SSB se encargan de la estabilización del ADN monocatenario
generado por la acción de las helicasas, impidiendo así que el
ADN se renaturalice o forme de nuevo la doble hélice, de manera
que pueda servir de molde.
• Conforme las helicasas avanza se van
generando superenrollamientos en la
doble cadena de ADN por delante de la
horquilla y si éstos no fueran
eliminados, llegado a un punto el
replisoma ya no podría seguir
avanzando. Por eso, las
topoisomerasas se encarga de
eliminarlos cortando una o las dos
cadenas de ADN y pasándolas a través
de la rotura realizada, sellando a
continuación la brecha.
• La primasa sintetiza un cebador para que la ADN
polimerasa pueda comenzar con la síntesis
incorporando los nucleótidos en forma complementaria
a la cadena patrón.
 ELONGACIÓN

• La ADN polimerasa añade nucleótidos uno por uno

complementarios a la cadena molde, a medida que
avanza la horquilla, ayudada por PCNA. Cuando el
avance de dos horquillas adyacentes las lleva a
encontrarse, es decir, cuando dos burbujas se tocan, se
fusionan, y cuando todas se han fusionado todo el
cromosoma ha quedado replicado.
Una vez que la horquilla avanza, aumenta la tensión por delante de la
cadena. Para evitar que esta tensión impida el avance de la horquilla,
las topoisomerasas (I y II) cortarán los enlaces fosfodiéster de la doble
hélice y volverán a unirla, lo que permitirá que se desenrolle una
vuelta si actúa la topoisomerasa I y dos si lo hace la topoisomerasa II.
• En la hebra rezagada, cuando la ADN Pol III hace contacto con el
extremo de otro fragmento de Okazaki contiguo, el cebador de
ARN de éste es eliminado y los dos fragmentos de Okazaki de
ADN recién sintetizado son unidos. Una vez se han juntado
todos se completa la doble hélice de ADN. La eliminación de
cebadores también se da en la hebra conductora, de síntesis
continua, pero debido a que en ésta hay un solo cebador es un
proceso que sólo tiene lugar una vez, mientras que en la hebra
rezagada se dará tantas veces como fragmentos de Okazaki
haya.
 TERMINACIÓN

• Uno de los pasos cruciales en el proceso de

terminación es completar la síntesis de la cadena
retardada y unir los fragmentos de Okazaki.
• El sistema de nucleasas (FEN1/RTH1 + RNasa H1)
encargado de eliminar el cebador de ARN.
• El final de la replicación se produce cuando la
ADN polimerasa III se encuentra con una
secuencia de terminación. Se produce entonces
el desacople de todo el replisoma y la finalización
de la replicación.
 REPLICACIÓN MITOCONDRIAL

• Esta replicación se adapta al lazo D o

lazo de desplazamiento. Las hebras
se diferencian en cuanto a su
densidad (Una ligera (L) y otra
pesada (H)).
• En este existen dos orígenes de
replicación. Se comienza con la hebra
L en dirección unidireccional y avanza
desplazando a la otra y al ir
sintetizada 2/3 comienza la
replicación de la segunda hebra
siendo sintetizada en dirección
 BIBLIOGRAFÍA

• http://
www.biorom.uma.es/contenido/av_bma/apuntes
/T7/t7.htm
• https://
www.uaz.edu.mx/histo/Biologia/Wiki/Replicac
i%C3%B3n_de_ADN.pdf
• http://
www3.uah.es/bioquimica/Tejedor/bioquimic
a_quimica/T22-replica+transcrip.pdf
• file:///C:/Users/PC/Downloads/Biologia.mol