Trabajo Práctico N°1

Microbiología y Parasitología - Año 202 3

Recuperatorio TP N° 1

TEMA: Crecimiento microbiano, nutrición y mecanismos de control.

RECUERDE que para obtener la regularidad de la materia debe aprobar el 100% de los
trabajos prácticos propuestos por la cátedra.

 Razone y resuelva las siguientes actividades.

1. ¿En qué fase esperarías observar la mayor cantidad de endosporas en un cultivo

celular de Bacillus? Justifique su respuesta.
Se podrá observar que la mayor cantidad de endosporas se formará en la fase
estacionaria antes de llegar a la fase de muerte.

2. Un tubo de cultivo de medio tioglicolato inoculado es transparente en todo el

tubo, excepto por el crecimiento denso en el fondo del tubo. ¿Cuál es tu
conclusión? Justifique su respuesta.
Concluimos que en el tubo está creciendo un microorganismo anaerobio estricto
teniendo en cuenta la clasificación “según la disponibilidad de O2”, de tal modo que
en el tubo puede observarse que el mismo solo puede crecer en ausencia de
oxígeno.

3. El agar EMB es un medio utilizado en la identificación y aislamiento de bacterias

patógenas. Contiene proteínas de carne digeridas como fuente de nutrientes
orgánicos. Dos colorantes indicadores, eosina y azul de metileno, inhiben el
crecimiento de bacterias grampositivas y distinguen entre organismos
fermentadores de lactosa y fermentadores sin lactosa. Los fermentadores de
lactosa forman colonias de color verde metálico o púrpura profundo, mientras
que los fermentadores sin lactosa forman colonias completamente incoloras.
Clasifique a este medio en todas sus categorías y justifique.
Clasificación del medio de cultivo según su:
 Origen: es de origen animal, ya que el medio de cultivo solo contiene
proteínas de carne.
 Estado fisco-químico: estado sólido, porque hay masas visibles de colonias
(porque no presenta un agente solidificante)?
 Finalidad: es selectivo y diferencial. Selectivo ya que a partir de los
colorantes eosina y azul de metileno se va a inhibir el crecimiento de
bacterias Gram positivas y a su vez diferencial ya que permite distinguir
bacterias fermentadoras de lactosa de bacterias no fermentadoras.
 Composición: es indefinida ya que no se puede saber la composición exacta
del medio de cultivo.
 4. ¿Por qué es importante medir la transmisión de la luz a través de un tubo de
control con solo caldo en él al realizar medidas de turbidez de cultivos
bacterianos?
Es importante ya que a través de la transmisión de luz que se proyecta en el tubo
que contiene el caldo, en caso de haber presencia de células, estas lo que hacen es
dispersar la luz proyectada y el caldo además se vuelve turbio, es por eso que, ante
mayor número de células presentes, hay mayor dispersión de luz y el caldo es más
turbio. De esta manera se puede estimar la masa celular en relación con la turbidez.

5. Si un cultivo comienza con 50 células, ¿cuántas células estarán presentes

después de cinco generaciones sin muerte celular?
50x25= 1.600
El cultivo que comenzó con 50 células y que ha sufrido cinco generaciones, va a
obtener como resultado 1.600 células.

6. Un pastelero, contamina un pastel con otras 248 células, los microorganismos

sufren una fase Lag de 1,25 horas. Calcula el número de células que habrá en el
pastel tras 9 horas si el tiempo de generación de la bacteria en estas
condiciones es de 0,9 h.
N=N0.2n →N=248.28,61→N=96.899,14

t (9−1,25)→7,75
n= = =8,61
g 0,9 h

7. Utilizando el método de turbidimetría, se evaluó el crecimiento de la bacteria

Pseudomonas spp. en caldo nutritivo. Las condiciones de cultivo fueron de
37°C y agitación de 100 rpm. Cada hora se extrae 1 ml del matraz y se mide la
absorbancia, obteniendo los siguientes resultados:

Tiempo (h) Absorbancia UFC/ml

0 0,5868
1 0,5873
2 0,5873
3 0,6032
4 0,6230
5 0,6438
6 0,6631
7 0,6838
8 0,7036
9 0,7051
10 0,7080
11 0,7114

1 Ing. Farías, Mariana J.

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Microbiología y Parasitología - Año 202 3

Paralelamente, a partir de un cultivo de Pseudomonas, se preparan diferentes

suspensiones celulares en las que se determina el número de UFC/ml y la
absorbancia, obteniéndose siguiente ecuación: Log UFC/ml = 20,52 Abs + 1,871
r = 0,999.
Determinar:

a. Fases de crecimiento.
b. Parámetros de crecimiento en fase exponencial.
c. Ecuación de crecimiento en fase exponencial.
d. Número de generaciones.

8. ¿Cuál de los dos medios seleccionaría para la generación de biomasa de

Salmonella? Justifique su respuesta.

2 Ing. Farías, Mariana J.