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Citlalli Jazmín Arcadia Orozco

Microbiología
Grupo 6B
Dra. Montserrat Santoyo Calderón
INTRODUCCIÓN:
En todos los ambientes naturales habitan múltiples microorganismos de diversos tipos
y actividad fisiológica. En hábitats naturales ocasionalmente podemos encontrar un solo
tipo de microorganismo en una muestra, por consiguiente, se necesita hacer algún
método de aislamiento para dividir y detectar los diversos tipos de microorganismos
presentes. Aislar es separar un tipo de microorganismo a partir de una población
heterogénea de microorganismos.
El objetivo del aislamiento es obtener colonias bien separadas (las colonias se forman
a partir de una sola “unidad formadora de colonias”) de las que se conseguirá un cultivo
puro. Una vez obtenidos los cultivos puros se podrán estudiar las características
macroscópicas, microscópicas, fisiológicas, etc. de un microorganismo en particular.
Hay que tener en cuenta que siempre el aislamiento se da en un medio sólido. El medio
líquido sirve para enriquecer, pero no para aislar. Para tal fin se emplean técnicas de
aislamiento que conduzcan a la obtención de un cultivo puro. De manera general los
métodos de aislamiento incluyen:
1. Separación física de los microorganismos mediante:
a) Diluciones seriadas y siembra por vertido en placa.
b) Siembra por agotamiento.
2. Utilización de medios de cultivo selectivos y diferenciales.
3. Aprovechamiento de características particulares de los microorganismos, tales
como la formación de esporas, el metabolismo anaerobio y/ o facultativo, la
capacidad para utilizar sustratos poco comunes, etc.
Para facilitar el proceso de aislamiento y obtener mejores resultados, frecuentemente
se emplean combinaciones de las técnicas anteriores.

MATERIALES
1. 100 gr de grenetina sin sabor 4. 2 cajas de Petri
2. Cubos de caldo de pollo 5. 1 trozo de alambre delgado
3. 3 litros de agua purificada

METODOLOGÍA
Preparación del medio de cultivo y material
1. Se preparó el medio de cultivo y las cajas de Petri como se indicó en la práctica
No. 1.
2. Se fabricó un asa bacteriológica con el alambre.
Procedimiento metodológico para el aislamiento
1. Se quemó en la flama de la estufa la parte metálica del asa bacteriológica hasta
que cambiara de color al rojo vivo.
2. Se enfrió el asa agitándose cercade la estufa.
3. Se tomó una colonia de las cajas de Petri de la práctica no. 1 y se estrió en el
agar de la caja con cultivo nuevo, todo esto cerca de la estufa.
4. Se realizaron nuevamente los pasos 1 y 2.
5. Se estrió en el agar, arrastrando una porción del primer estriado.
6. De nuevo, se realizaron los pasos 1 y 2.
7. Se estrió en el agar, arrastrando una porción del segundo estriado.
8. Por última vez, se siguieron los pasos 1 y 2.
9. Se estrió en el agar, arrastrando una porción del tercer estriado.
10. Se incubó a temperatura ambiente hasta observar crecimiento microbiano.

RESULTADOS Y DISCUSIÓN

Figura 1. “Cultivo muestra de superficie de cocina”

Figura 2 y 3: “Aislamiento de microrganimos” en caja de Petri con cultivo puro.


Para el aislamiento de microorganismos se llevó a cabo un procedimiento denominado
diseminación en superficie que consiste en básicamente depositar una porción de la
muestra en el medio de cultivo, proceder al estriado y esterilizar el asa, repitiendo los
pasos. La muestra se incubó a temperatura ambiente, favoreciendo el crecimiento de
microorganismos en aproximadamente 72 horas.

Basándose en la morfología de los microorganismos observados de manera


macroscópica, no hay presencia de mohos, suponiendo que fue la falta de humedad la
causa por la cual no hubo crecimiento de ellos.

La morfología que se identificó fue la siguiente:


• Tamaño pequeño • Coloración blanquecina
• Forma semicircular • Margen entero
• Sin elevación, plana.

De acuerdo a la morfología, presuntivamente los microorganismos desarrollados son


bacterias o levaduras, pero no hay certeza en ello ya que para determinar cuál de los
dos tipos es, es necesario realizar diversas pruebas bioquímicas.
Trabajo realizado en conjunto con Paola Alejandra Quintero Gradilla y Aracely Uribe Sánchez.

CONCLUSIÓN
El aislamiento de microorganismos es útil para separar un microorganismo y así poder
analizarlo a fondo.
El objetivo de la práctica fue realizar el aislamiento de un microorganismo, se llevó a
cabo con éxito. El crecimiento se dio en un cultivo puro, que contó con las condiciones
adecuadas para desarrollarse satisfactoriamente. A la vista macroscópica, de acuerdo
a las características observadas, se determinó que presuntivamente se trata de
bacterias o levaduras, pero no hay total certeza de ello ya que se necesitan pruebas
complejas para determinarlo (pruebas bioquímicas).
BIBLIOGRAFÍA.
• Ramírez-Gama, R. M., B. Luna Millán, O. Velásquez Madrazo, L. Vierna García, A.
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Atlante S. R. L. Argentina
• Madigan, M. T., J. M. Martinko y J. Parker. 2003. Brock. Biología de los
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Editorial Médica Panamericana.
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