REPORTE PRÁCTICAS VIRTUALES

ASIGNATURA

NOMBRE Y APELLIDOS: Isaac Mora

PRÁCTICA:

TÍTULO: Curva de crecimiento microbiano

INTRODUCCIÓN

Para estudiar la cinética de crecimiento celular microbiano comúnmente se emplea el modelo teórico
propuesto por Monod, donde establece las constantes cinéticas que especifican el comportamiento de
dicho microorganismo, generalmente de tipo sigmoidal. Muchos investigadores consideran que el
modelo es muy simple y que no siempre permite una correcta representación de los datos de
crecimiento del microorganismo. Así, se han propuesto alternativas de modelos como el de
Zwietering et al. o el de Baranyi, este último cada vez más popular

OBJETIVOS

Analizar las fases de curva de crecimiento microbiano.

MATERIALES

 Ordenador con conexión a internet.

METODOLOGÍA

RESULTADOS

1
 Crecimiento de la bacteria E. coli
8,00
Absorbancia (600nm)

7,00
6,00
5,00
4,00
3,00
2,00
1,00
0,00
0 200 400 600 800 1000 1200 1400
Tiempo (min)

- ¿Cuál es la densidad óptica del cultivo cuando entra en fase estacionaria?

La absorbancia en fase estacionaria es 0.487 en 205 minutos.
- A partir de un cultivo de E. coli, se preparan diferentes suspensiones
celulares en las que se determina el número de bacterias/mL y la
absorbancia, obteniéndose la siguiente ecuación: Ln Nº células/ml = 20,688
Abs + 15,387.
Realice una tabla con los cálculos resultantes de número de bacterias/mL
según absorbancia.

Nº bacterias/mL
17,24
17,49
17,95
20,62
25,46
36,48
56,34
97,104
137,03
155,23
164,54
164,75
164,96

2
 164,75
164,54
164,54
164,13
159,99
138,06
129,171
97,104
54,48
15,59
- ¿Cuál es la densidad celular del cultivo en promedio en la fase estacionaria?
La densidad celular del cultivo en promedio en fase estacionaria se da el minuto 564 con
una absorbancia de 7,21.

CUESTIONARIO

3
Actividad 1

¿De qué factores depende la duración de la fase lag de crecimiento microbiano?

Es el período de tiempo durante el que el inóculo bacteriano se adapta a las condiciones

del medio fresco sobre el que se ha sembrado. Se trata de un período de ajuste
metabólico. Su duración depende de varios factores:

 tamaño del inóculo

 estado metabólico previo del inóculo: si el inóculo procede de células en fase

estacionaria de un cultivo anterior, la fase lag es larga. Ello se debe a que los
contenidos en coenzimas y otros metabolitos celulares son bajos, y las células
deben reponerlos en el medio fresco. Si las células están dañadas por algún
agente, el tiempo de esta fase será mayor ya que necesitan reparar estos daños
para luego iniciar el crecimiento. Si las células del inóculo se tomaron de un cultivo
previo en fase logarítmica, el lag será más corto ya que poseen un metabolismo
activo y niveles adecuados de los metabolitos intracelulares.

 medio del que procede el inóculo: si el medio es similar al medio fresco, el lag será
más corto. Si el medio original del inóculo era un medio rico y el medio fresco es
nutricionalmente más pobre, la fase de retardo será más larga ya que las bacterias
necesitarán un tiempo adicional para activar la síntesis de las enzimas biosintéticas
que estaban reprimidas en el medio rico.

 necesidad de neutralizar sustancias tóxicas en el medio fresco.

 diferencia en la temperatura de los medios.

 dilución de metabolitos intracelulares.

Describa qué ocurre en la fase log de crecimiento microbiano.

Al final de la fase lag las células de la población no se encuentran todas en las mismas
condiciones fisiológicas. Por ello, al inicio de la fase de crecimiento las distintas células
comienzan a crecer y duplicarse con un cierto desfasaje respecto de sus compañeras.
Luego, al cabo de un determinado tiempo, el estado de la población se homogeniza y
todas ellas se encuentran duplicándose activamente.

Durante la fase exponencial se da un crecimiento balanceado no restringido durante unas

pocas generaciones (normalmente menos de 10). El tiempo de generación (g) es
característico para cada especie o cepa, en un determinado medio de cultivo: El valor del
tiempo de generación (g) depende de:

4
 composición del medio

 temperatura

 pH

 osmolaridad (tonicidad), etc.

A nivel metabólico describa lo que ocurre en la fase estacionaria.

En la fase estacionaria aún existen reacciones metabólicas, pero el metabolismo general

de la bacteria es sustancialmente diferente al de la fase logarítmica:

 las células son más pequeñas debido a que existe división celular después de que se
haya detenido el incremento de masa.

 el citoplasma se condensa.

 en las bacterias Gram-negativas aumenta el volumen relativo del periplasma.

 el nucleoide se condensa, por sustitución de ciertas proteínas que se unen a ADN.

 la membrana citoplásmica se hace menos fluida.

 suelen ser más resistentes a agentes físicos (temperatura, estrés osmótico) y químicos.

Actividad 2

Estimado estudiante lea el artículo titulado " Actividad bacteriana del extracto
etanólico y del aceite esencial de las hojas de Rosmarinus officinalis sobre algunas
bacterias de interés alimentario"

Lea el artículo y observe las curvas de crecimiento de las bacterias utilizadas en este
estudio, y realice una conclusión sobre el crecimiento de las bacterias en unidad de
tiempo, y de acuerdo a su criterio concluya en qué fase de crecimiento afecta el
extracto o el aceite esencial, compare con varios artículos científicos y qué tipo de
extractos pueden inhibir el crecimiento y que bacteria es más resistente.

En la gráfica del artículo se puede observar que la bacteria con una mayor curva de
crecimiento es Shigella sonnei en donde se evalúa la CIM de los extractos de R. officinalis,
se puede decir que de entre todas las bacterias evaluadas en el documento, la bacteria
más resistente es la Shigella sonnei.

Los extractos o aceites esenciales tienen efecto en la parte final de la fase exponencial o
logarítmica ya que es cuando hacen efecto e inhiben a las bacterias.

5
DISCUSIÓN

Se puede observar como las diferentes graficas observadas en las que se explican el
crecimiento bacteriano concuerdan con dicho proceso, además de que se demuestra la
capacidad de los diferentes extractos que se usan para inhibir el crecimiento microbiano.
Se ve los diferentes factores de los que depende una bacteria para crecer y se observa
detenidamente cada parte del proceso de crecimiento microbiano.

CONCLUSIÓN

Para comprender las etapas de crecimiento microbiano se tiene que observar

detenidamente cada parte del proceso, esto ayuda a explicar cómo funciona dicho proceso
y además nos ayuda a sacar las conclusiones necearías para combatir el crecimiento
microbiano.
BIBLIOGRAFIA

 http://academica-
e.unavarra.es/bitstream/handle/2454/8746/TyCIAA_TFM%20ELIZARI%20RETA.
pdf?sequence=1
 https://www.scielo.sa.cr/pdf/odov/n35/1659-0775-odov-35-32.pdf
 https://microbiologia.net/microbiologia/analisis-crecimiento-microbiano/
 file:///C:/Users/USUARIO_PC/Downloads/15426-Article%20Text-44866-2-10-
20220603%20(1).pdf