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1.

- Un fermentador de 10 litros de medio es inoculado con 500 mL de


inóculo de 4,1 g/L. Se sabe que, si se deja crecer la cepa, al cabo de 6 horas la
biomasa en el fermantador será de 6 g/L.
Determinar:
a) El tiempo de duplicación
b) El tiempo que deberá permanecer la cepa en el fermentador para alcanzar
la misma concentración del inóculo.

2.- Una cepa de moho se dejo crecer en un cultivo de Batch sobre glucosa y se
obtuvo los siguientes resultados:

Calcular:
a) Calcular la velocidad máxima especifica de crecimiento neto
b) Calcular el rendimiento aparente de crecimiento
c) ¿Qué concentración máxima de células se podría esperar si se usaron
150g de glucosa? (Mismo tamaño del inóculo)
3.- Escherichia coli se desarrolla en medio de cultivo a 37° C, se determinó el peso
seco (g/L) a diferentes tiempos:
¿Calcule la tasa específica de crecimiento, tiempo de duplicación?
4. -En el laboratorio se inoculó un matraz que contiene 100 ml de medio de cultivo
X con el microorganismo Y. Se incuba a 37 ºC con agitación y periódicamente se
recogen alícuotas para determinar el número de UFC/ml. Los datos se expresan
en la siguiente tabla:

Tiempo (h) Nº UFC/ml

9:30 1,04 X 106 Identifique:


1. Fases de crecimiento.
10:30 1,07 X 106
2. Constante específica de crecimiento en fase
11:30 1,09 X 106 exponencial.
3. Ecuación de crecimiento en fase exponencial.
12:30 1,16 X 106
4. Número de generaciones.
13:30 1,33 X 106
5. Cosecha máxima (Concentración máxima de
14:30 1,97 X 106 células)

15:30 3,05 X 106

16:30 4,61 X 106

17:30 7,14 X 106

18:30 1,08 X 107

19:30 1,67 X 107

20:30 2,59 X 107

21:30 4,11 X 107

22:30 5,17 X 107

23:30 2,96 X 107

00:30 2,98 X 107

01:30 2,94 X 107


5. Los datos de la fase exponencial de crecimiento de tres microorganismos que
utilizan sacarosa como fuente de carbono son los siguientes:

a) Indique cuál de estos microorganismos crecerá más rápidamente.


Razone la respuesta.

6 ¿Cuál de los dos medios seleccionaría para la generación de biomasa de


Salmonella? Justifique su respuesta

Nº UFC/ml
Tiempo
(h)
Medio BH + glucosa Medio MSB

0 3,12 X 106 4,32 X 105

1 3,07 X 106 4,28 X 105

2 3,09 X 106 4,21 X 105

3 3,63 X 106 4,83 X 105

4 4,60 X 106 8,60 X 105

5 5,80 X 106 1,60 X 106


6 7,22 X 106 3,05 X 106

Nº UFC/ml
Tiempo
(h)
Medio BH + glucosa Medio MSB

7 7,53 X 106 5,68 X 106

8 7,68 X 106 7,66 X 106

9 7,53 X 106 7,59 X 106

10 7,37 X 106 7,52 X 106

11 3,12 X 106 4,32 X 105

7. Utilizando el método de densidad óptica, se evaluó el crecimiento de la bacteria


Pseudomonas spp. en caldo nutritivo. Las condiciones de cultivo fueron de 37°C y
agitación de 100 r.p.m. Cada hora se extrae 1 ml del matraz y se mide la
absorbancia, obteniendo los siguientes resultados:

Tiempo Tiempo
Absorbancia Absorbancia
(h) (h)

0 0,5868 6 0,6631

1 0,5873 7 0,6838

2 0,5873 8 0,7036

3 0,6032 9 0,7051

4 0,6230 10 0,7080

5 0,6438 11 0,7114

Paralelamente, a partir de un cultivo de Pseudomonas, se preparan diferentes


suspensiones celulares en las que se determina el número de bacterias/mL y la
absorbancia, obteniéndose siguiente ecuación: Ln Nº células/ml = 20,715 Abs +
2,875 R2= 0,999.
Identifique:
a) Fases de crecimiento.
b) Constante específica de crecimiento en fase exponencial. 
c) Ecuación de crecimiento en fase exponencial
d) Número de generaciones.
e) Cosecha máxima.

8. Usted inoculó un volumen de una suspensión microbiana en crecimiento en un


medio de cultivo hasta contener 2X10 5 bacterias/ml, se observa que el cultivo
creció sin tener fase Lag hasta llegar a una población de 9 X 10 9 células/ml
después de una incubación durante 6 horas sin entrar en fase estacionaria. Diga
usted ¿cuál es el tiempo de generación del microorganismo en este medio de
cultivo?

9. Una población bacteriana con una cantidad inicial de 4.5X10 5 bacterias/ml, se


multiplicó en un medio de cultivo sin tener una fase de adaptación, hasta alcanzar
la cifra de 2.68 X 1010 células/ml en 7 horas 30 minutos, sin haber alcanzado la
fase estacionaria. ¿Cuál es el tiempo medio de generación de los
microorganismos en dicho cultivo?

10. Se inoculó 1 ml de un cultivo de Escherichia coli conteniendo 4 X 106 células


en un matraz conteniendo 25 mL de medio de cultivo peptonado, y se incubó a
37°C. A los 284 minutos de incubación se alcanzó la fase estacionaria de 3X10 9
células/mL sin que hubiese fase de inducción. ¿Cuál es el tiempo medio de
generación en el medio de cultivo peptonado?

11. Aerobacter aerogenes se sembró simultáneamente en tres medios diferentes:


peptona y dos medios químicamente definidos que contienen glucosa y ácido
cítrico respectivamente, como únicas fuentes de carbono. El inóculo contenía en
cada uno de los casos 5 X 10 5 bacterias/mL. Transcurridas 5.5 h se hicieron los
respectivos recuentos en cada cultivo, obteniéndose para la peptona el valor de
8,934 X 106, para la glucosa 51.2 X 106 y para el citrato 1.728 X 106 bacterias/mL.
El cultivo de citrato fue el único que manifestó fase de inducción cuya duración fue
de 85 minutos y los microorganismos de cada cultivo se encontraban aún en fase
Lag de crecimiento. ¿Cuál es el tiempo de generación medio para el
microorganismo en cada medio de cultivo?

12. En un medio de cultivo conteniendo glucosa y una sal amónica se sembró un


cultivo de Salmonella entérica serotipo Typhi hasta obtener un número inicial de 5
X 105 células/mL. Transcurridos 300 minutos de incubación, el cultivo todavía se
encontraba en fase logarítmica con una población de 35 X 10 6 células /ml. Si el
tiempo medio de generación de este microorganismo en el medio de cultivo es de
40 minutos, determinar si existe o no fase de inducción y, en caso afirmativo,
calcular su duración.
13. Usted tiene un matraz con 25 mL de medio de cultivo líquido adicionado de
maltosa como única fuente de carbono y lo inocula con 1 mL conteniendo 5 x 10 6
células de Escherichia coli. Después de incubar durante 12 horas, alcanza una
población de 6 x 109 células/mL con un tiempo de generación de 32 minutos. Diga
usted si el cultivo presenta fase Lag y si existe ¿Cuál es su duración? INDIQUE
LAS OPERACIONES COMPLETAS

14. Usted tiene un matraz con 50 ml de medio de cultivo líquido adicionado de


sacarosa como única fuente de carbono y lo inocula con 50 X 10 6 células de
Escherichia coli. Después de incubar durante 5 horas, alcanza una población de
38 X 108 celulas/mL con un tiempo de generación de 25 min. Diga usted si el
cultivo presenta fase LAG y si existe ¿Cuál es su duración?

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