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UNIVERSIDAD DE MANIZALES

LABORATORIO BIOQUIMICA II
INFORME PRÁCTICA DE LABORATORIO

Programa: MEDICINA
Curso: LABORATORIO DE BIOQUÍMICA II
Docente: Eridia Dinora Castaño Mora
Número de grupo y día Grupo 6 martes
Fecha de entrega 19 de abril 2023
Nombres y apellidos Valeria ARROYO LUNA, Santiago DIAZ OCAMPO, Juan David GUERRERO
completos del grupo CORRALES, Juan Camilo RÍOS GIL, Luisa Mercedes RESTREPO BEDOYA
PRÁCTICA No 2 : Triglicéridos

RESUMEN PATOLOGIA RELACIONADA CON LA PRÁCTICA:


Nombre patología Hipertrigliceridemia enfocada en la Pancreatitis Aguda

Valores normales de
Triglicéridos valores normales : 150 a 199 mg/dL.
la biomolécula
- Dolores punzantes agudos en la zona superior del abdomen
- Heces aceitosas y con olor fétido
Síntomas - Náuseas y Vómitos
(mínimo 3 máximo 5)
- Fiebre y Pulso rápido
- Distensión abdominal y dolor que se irradia a la espalda

Fotografía
(1 foto relacionadas con la
patología)

Descripción del La pancreatitis aguda es una inflamación del páncreas debido a un aumento en los
daño bioquímico valores de los lípidos en la sangre, especialmente de los triglicéridos. Estos
(Descripción corta de daño triglicéridos se acumulan en la sangre provocando una hipertrigliceridemia y
metabólico por la que se estos triglicéridos se acumulan en el páncreas provocando una inflamación y
presenta la patología, mínima una daño de sus paredes causando un daño en el funcionamiento correcto de este
30 máximo 70 caracteres).
órgano.
Tratamiento
farmacológico Tratamiento con analgésico Meperidina 50-100 mg vía intravenosa cada 4 horas
(1 o 2 medicamento, nombre para el dolor abdominal, y Ketorolaco vía intravenosa 30 mg cada 6-8 horas.
genérico, dosis y frecuencia)

ELABORADO POR: CARGO: FECHA:


Eridia Dinora Castaño Mora Docente Laboratorio Bioquímica II 06/02/2023
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LABORATORIO BIOQUIMICA II
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OBJETIVOS
1. Preparar las muestras para la medición de absorbancia.
2. Calcular la concentración de Triglicéridos de acuerdo a las absorbancias obtenidas.
3. Comparar las concentraciones de las muestras obtenidas de contra los valores de referencia.

CONSULTA PREVIA
A- Explique con un diagrama y texto la liberación de ácidos grasos a partir de triglicéridos en
ayuno

Durante el ayuno los valores glucémicos en sangre disminuyen drásticamente, es por esto que el cuerpo usará
otras vías para la obtención de energía, como lo es la vía lipolítica, esta se le considera la 2 fase del ayuno

Distintos órganos secretan hormonas para llevar a cabo este proceso como lo es por ejemplo
- HIPOTÁLAMO: Somatotropina u hormona de crecimiento (STH).
- PÁNCREAS: Glucagón.

En conjugación y simultáneamente estas hormonas obligan al desarmamiento de los triglicéridos, dejando los
ácidos graso libres en el plasma, alcanzando su pico en sangre a partir del 4 día, por otro lado los niveles de
lipoproteínas de alta densidad aumentan pues llevaran los ácidos grasos disueltos en sangre al hígado donde se
realizará la beta oxidación.

- Los triglicéridos del tejido adiposo son metabolizados de forma constante, liberando ácidos grasos al
plasma. Como esta cantidad excede respecto a la necesidad del organismo, una parte de los ácidos grasos
libre es utilizada como la fuente principal de calor y energía y la otra es metabolizada en el hígado, donde
son convertidos en acetil coenzima A, la que a su vez puede seguir tres caminos:
- 1) Entrar en el ciclo de Krebs.
- 2) Ser utilizada para síntesis de sustancias que forman parte del plasma como triglicéridos y colesterol
endógeno.
- 3) Transformarse en cuerpos cetónicos, que son la otra gran fuente de energía en el ayuno.

1.1 La siguiente imagen explica el proceso de esta lipolisis ligada a las hormonas secretadas durante el ayuno.
-

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B- Explique la síntesis de triacilglicerol a partir de glicerol-3-fosfato.

La mayoría de los triacilgliceroles se sintetiza en el hígado y se almacena en el tejido adiposo. Se requiere


glicerol-3-fosfato para la síntesis de novo de los triacilgliceroles en el hígado y la reestructuración de los
triacilgliceroles (almacenamiento) en el tejido adiposo. Un porcentaje significativo del glicerol-3-fosfato
requerido en la síntesis de triacilgliceroles en el hígado y el tejido adiposo proviene de la gliceroneogénesis, que
emplea lactato, piruvato y aminoácidos glucogénicos como la alanina. El producto de la condensación del
glicerol-3-fosfato y dos acil-CoA es el ácido fosfatídico, que se utiliza en la síntesis de fosfolípidos. En los
triacilgliceroles del ser humano, el palmitato suele estar unido al C-1 y el oleato al C-2.

El glicerol-3-fosfato o el fosfato de dihidroxiacetona reaccionan de forma secuencial con tres moléculas de


acil-CoA (ésteres de ácidos grasos de CoASH). Las moléculas de acil-CoA se producen en la siguiente reacción:

EQUIPOS, MATERIALES Y REACTIVOS

Equipos Materiales Sustancias y/o Reactivos


- Cubetas para
espectrofotómetro
- Sangre
- lipasa, glicerol
- Plasma/Suero
quinasa, glicerol 3
- Micropipetas 100 -
fosfato oxidasa, 1
- Espectrofotómetro 1000 microlitros
peroxidasa
- Agua Destilada
- Blanco
- Glicerol con una
- Estándar
concentración de
200mg/dL

TABLA DE VALORES DE REFERENCIA

ANÁLISIS VALORES DE REFERENCIA

BAJO <150 m g/dL

DUDOSO 150-199 mg/dL

ALTO 200- 499 mg/dL

MUY ALTO >500 mg/dL

PROCEDIMIENTO Y/O METODOLOGÍA


1. Muestras procesadas para espectrofotometría:
a. Preparación del Blanco

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1. Se pipetea 2000 μL de agua destilada a la cubeta 1 para el blanco, con esta se calibra el
espectrofotómetro.

b. Preparación del Estándar


2. Se pipetea 1000 μL del reactivo a la cubeta 2 y con la micropipeta se mide 10 μL del estándar (glicerol
con concentración de 200 mg/dL) los cuales se pipetean a la cubeta 2.
3. Se espera 15 minutos para que ocurra la reacción entre ambos reactivos y se mide la absorbancia en el
equipo.
4. La absorbancia del estándar tomado por el espectrofotómetro fue de 0,434 nm.

c. Preparación de la Muestra
5. Se realiza la toma de muestra de sangre de la paciente Juan David GUERRERO CORRALES por parte
de la auxiliar de laboratorio.
6. La muestra se lleva a la centrifuga para obtener el suero del paciente.
7. Se pipetea 1000 μL del reactivo a la cubeta 3 y con la micropipeta se mide 10 μL del plasma para ser
añadido a la cubeta 3.
8. Se espera 15 minutos para que ocurra la reacción entre ambos reactivos y se lleva a medir la absorbancia
en el espectrofotómetro antiguo.
9. La absorbancia de la muestra tomada por el espectrofotómetro fue de 0,322 nm.
10. Se procesa la muestra en el equipo nuevo donde se confirma la concentración la cual fue de 146 mg/dL.

EVIDENCIA FOTOGRÁFICA DE LA PRÁCTICA

Figura 1. tres cubetas para ser llevadas al


espectrofotómetro.

Figura 2. absorbancia del estándar: 0.434


nm.

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Figura 3. absorbancia de la muestra :0.322


nm.

RESULTADOS
1.1 Se presenta la Siguiente reacción entre los reactivos utilizados:

● triglicéridos + H2O + lipasa = glicerol + ácidos grasos


● glicerol + ATP + glicerol quinasa = glicerol 3 fosfato + ADP
● glicerol 3 fosfato + O2 + glicerol 3 fosfato quinasa = dihidroxiacetona fosfato + H202
● 2H2O2 + 4 aminoantipirina + 4 clorofenol + peroxidasa = quinonaimina + 4H2O

1.2 Tener en cuenta la siguiente fórmula : concentración en g/dL = (concentración del STD en
mg/dL) X (Abs MUESTRA en nm) / ( Abs STD en nm) y los siguiente resultados :

● El valor de la absorbancia de la muestra del paciente Maria Jose GAVIRIA CARDENAS fue de 0,304nm
y el valor de la absorbancia del estándar fue de 0,445nm.
● El valor de la absorbancia de la muestra de la paciente Sofia LOPEZ CARDONA fue de 0,287nm y el
valor de la absorbancia del estándar fue de 0,494 nm.
● El valor de la absorbancia de la muestra de la paciente Samy GIRALDO VITAR fue de 0,227 nm y el
valor de la absorbancia del estándar fue de 0,483 nm.
● El valor de la absorbancia de la muestra del paciente Andrés GASPAR SOLANO fue de 0,342 nm y el
valor de la absorbancia del estándar fue de 0,389 nm.
● El valor de la absorbancia de la muestra de la paciente Jacobo BERNAL MARIN fue de 0,439 nm y el
valor de la absorbancia del estándar fue de 0,952 nm.
● El valor de la absorbancia de la muestra del paciente Juan David GUERRERO CORRALES fue de
0,322 nm y el valor de la absorbancia del estándar fue de 0,434 nm.

Con la ayuda de estos valores y la fórmula de la concentración, realizamos los siguientes cálculos:

Maria Jose GAVIRIA C = 200 Mg/dL x 0,304 nm/0,445 nm = 136,6 mg/dL


CARDENAS

Sofia LOPEZ CARDONA C = 200 Mg/dL x 0,287 nm/0,494 nm = 116 mg/dL

Samy GIRALDO VITAR C = 200 Mg/dL x 0,227 nm/0,483 nm = 93,9 mg/dL

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Andres GASPAR SOLANO C = 200 Mg/dL x 0,342 nm/0,389 nm = 175 mg/dL

Jacobo BERNAL MARIN C = 200 Mg/dL x 0,439 nm/0,952 nm = 92 mg/dL

Juan David GUERRERO C = 200 Mg/dL x 0,322 nm/0,434 nm = 146 mg/dL


CORRALES

1.3 En la siguiente tabla se mostrarán los resultados :

PACIENTE Abs MUESTRA Abs STD CONCENTRACIÓN ANÁLISIS

Maria Jose 0,304 nm 0,445 nm 136,6 mg/dL BAJO


GAVIRIA
CARDENAS

Sofia LOPEZ 0,287 nm 0,494 nm 116 mg/dL BAJO


CARDONA

Samy GIRALDO 0,227 nm 0,494 nm 93,9 mg/dL BAJO


VITAR

Andres GASPAR 0,342 nm 0,389 nm 175 mg/dL DUDOSO


SOLANO

Jacobo BERNAL 0,439 nm 0,952 nm 92 mg/dL BAJO


MARIN

Juan David 0,322 nm 0,434 nm 146 mg/dL BAJO


GUERRERO
CORRALES

PACIENTE CONCENTRACIÓN EN EQUIPO ANÁLISIS


NUEVO

Maria Jose GAVIRIA CARDENAS 76,4 mg/dl BAJO

Sofia LOPEZ CARDONA 128 mg/dl BAJO

Samy GIRALDO VITAR 54,1 mg/dl BAJO

Andres GASPAR SOLANO 170 mg/dl DUDOSO

Jacobo BERNAL MARIN 123,2 mg/dl BAJO

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Juan David GUERRERO 85 mg/dl BAJO


CORRALES

1.4 En la siguiente gráfica se expone la concentración de triglicéridos obtenida por cada paciente :

NOTA:
- El eje X son los pacientes en el siguiente orden : paciente 1 Maria Jose GAVIRIA CARDENAS,
paciente 2 Sofia LOPEZ CARDONA, paciente 3 Samy Rossana GIRALDO VITAR, paciente 4
Andrés GASPAR SOLANO, paciente 5 Jacobo BERNAL MARIN, paciente 6 Juan David
GUERRERO CORRALES.
- El eje Y representa la concentración de triglicéridos en mg/dL
- La concentración 1 (en color azul) corresponde al valor obtenido en el equipo antiguo, y la concentración
2 (en color naranja) corresponde al valor obtenido en el equipo nuevo.

DISCUSIÓN DE RESULTADOS
1. La concentración de triglicéridos procesada por el espectrofotómetro en la muestra 1 que corresponde a
la paciente Maria Jose GAVIRIA CARDENAS fue de 136,6 mg/dL. Teniendo en cuenta los valores
de referencia, la concentración obtenida se encuentra en un nivel bajo .
2. La concentración de triglicéridos procesada por el espectrofotómetro en la muestra 2 que corresponde a
la paciente Sofia LOPEZ CARDONA fue de 116 mg/dL. Teniendo en cuenta los valores de referencia,
la concentración obtenida se encuentra en un nivel bajo.
3. La concentración de triglicéridos procesada por el espectrofotómetro en la muestra 3 que corresponde a
la paciente Samy GIRALDO VITAR fue de 93,9 mg/dL. Teniendo en cuenta los valores de
referencia, la concentración obtenida se encuentra en un nivel bajo.
4. La concentración triglicéridos procesada por el espectrofotómetro en la muestra 4 que corresponde al
paciente Andres GASPAR SOLANO fue de 175 mg/dL. Teniendo en cuenta los valores de referencia,
la concentración obtenida se encuentra en un nivel dudoso.

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5. La concentración de triglicéridos procesada por el espectrofotómetro en la muestra 5 que corresponde a


la paciente Jacobo BERNAL MARIN fue de 92 mg/dL. Teniendo en cuenta los valores de referencia,
la concentración obtenida se encuentra en un nivel bajo.
6. La concentración de triglicéridos procesada por el espectrofotómetro en la muestra 6 que corresponde al
paciente Juan David GUERRERO CORRALES fue de 146 mg/dL. Teniendo en cuenta los valores
de referencia, la concentración obtenida se encuentra en un nivel bajo.
7. Los pacientes Maria Jose GAVIRIA CARDENAS,Sofia LOPEZ CARDONA, Samy GIRALDO
VITAR,Jacobo BERNAL MARÍN y Juan David GUERRERO CORRALES presentan niveles
séricos de triglicéridos bajos que también pueden ser considerados como normales , es decir que hay un
buen procesamiento metabólico y sus dietas no son ricas en grasas saturadas.
8. El paciente Andres GASPAR SOLANO, presenta un nivel sérico de triglicéridos dudoso, esto significa
que si bien no implica un problema metabólico, tal vez ha estado consumiendo bastantes grasas en su
dieta y eso explicaría el resultado dudoso.
9. La concentración de triglicéridos procesada por el espectrofotómetro nuevo en la muestra 1 que
corresponde a la paciente Maria Jose GAVIRIA CARDENAS fue de 76,3 mg/dL. Teniendo en
cuenta los valores de referencia, la concentración obtenida se encuentra en un nivel bajo
10. La concentración de triglicéridos procesada por el espectrofotómetro nuevo en la muestra 2 que
corresponde a la paciente Sofia LOPEZ CARDONA fue de 128 mg/dL. Teniendo en cuenta los
valores de referencia, la concentración obtenida se encuentra en un nivel bajo.
11. La concentración de triglicéridos procesada por el espectrofotómetro nuevo en la muestra 3 que
corresponde a la paciente Samy GIRALDO VITAR fue de 54 mg/dL. Teniendo en cuenta los valores
de referencia, la concentración obtenida se encuentra en un nivel bajo.
12. La concentración triglicéridos procesada por el espectrofotómetro nuevo en la muestra 4 que
corresponde al paciente Andres GASPAR SOLANO fue de 170 mg/dL. Teniendo en cuenta los
valores de referencia, la concentración obtenida se encuentra en un nivel dudoso.
13. La concentración de triglicéridos procesada por el espectrofotómetro nuevo en la muestra 5 que
corresponde a la paciente Jacobo BERNAL MARIN fue de 123 mg/dL. Teniendo en cuenta los
valores de referencia, la concentración obtenida se encuentra en un nivel bajo.
14. La concentración de triglicéridos procesada por el espectrofotómetro en la muestra 6 que corresponde al
paciente Juan David GUERRERO CORRALES fue de 85 mg/dL. Teniendo en cuenta los valores
de referencia, la concentración obtenida se encuentra en un nivel bajo.
15. Se presentan diferencias entre las concentraciones calculadas y aquellas mostradas por el segundo
equipo, sin embargo los valores son diferentes por pocas unidades, además de que los resultados están
entre los mismos rangos.

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BIBLIOGRAFÍA

a. de-Madaria, E. (2011). Pancreatitis aguda. Gastroenterologia y hepatologia, 34, 89–94.

https://doi.org/10.1016/s0210-5705(11)70014-0

b. Lago Deibe, F. (2004). Hipertrigliceridemia. FMC - Formación Médica Continuada en Atención

Primaria, 11(8), 454–467. https://doi.org/10.1016/s1134-2072(04)76178-2

c. Metabolismo de los lípidos. (s/f). Mhmedical.com. Recuperado el 18 de abril de 2023, de

https://accessmedicina.mhmedical.com/content.aspx?bookid=1960&sectionid=148096233

○ Vera Carrasco, O. (2011). MANEJO Y TRATAMIENTO DE LA PANCREATITIS AGUDA EN LA

UNIDAD DE CUIDADOS INTENSIVOS. Revista médica - Colegio Médico de La Paz, 17(1),

47–59.

http://www.scielo.org.bo/scielo.php?script=sci_arttext&pid=S1726-89582011000100009

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