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“Año del bicentenario del Perú: 200 años de independencia”

UNIVERSIDAD NACIONAL MAYOR DE SAN MARCOS, Decana de América

Facultad de Medicina
Escuela profesional de Tecnología Médica

Tema:
Determinación de triglicéridos en suero
Estudiantes:
Adrian Jafet Sanchez Naccha
Diana Carolina Rios Vasquez
Keily Yelitza Roncal Rivera
Stephania Silva Vargas
Joselyn Nicol Romero Obregon

Docente:
Helí Jaime Barrón Pastor
Asignatura:
Bioquímica y nutrición

Lima - Perú

2021
I. INTRODUCCIÓN
Los triglicéridos son lípidos, también llamados grasas, que existen en el cuerpo
humano y que podemos consumir en nuestra dieta diaria, como por ejemplo: en el
aceite, mantequilla, margarina, entre otros, o a través del consumo de carbohidratos.
Desde un punto de vista bioquímico, estas células están conformadas por la unión de
tres moléculas de ácidos grasos más una molécula de glicerina o glicerol (1). El
organismo se encarga de almacenar eficientemente a los triglicéridos en forma de
células de grasas, las cuales serán absorbidas por el intestino delgado y transportadas
a través de la sangre con la ayuda de las lipoproteínas. Luego de ser almacenadas,
podemos ubicarlas en el tejido adiposo. Su importancia radica en que tienen la
función de ser una reserva de energía para el cuerpo humano y ser liberados cuando
sea necesario (2).
El objetivo de este informe es el de profundizar en la importancia del nivel de
triglicéridos presente en el organismo, el cual nos ayuda al diagnósticos de distintos
tipos de patologías, ya sean congénitas o no. Para esto, la prueba de Valtek involucra
el uso de enzimas y elementos fotométricos que permiten determinar el nivel de
triglicéridos que están siendo transportados a través de la sangre de los pacientes.
II. IMPORTANCIA CLÍNICA DE LOS TRIGLICÉRIDOS
El incremento de la cantidad de triglicéridos en la sangre o hipertrigliceridemia, es
una entidad compleja y heterogénea, en donde participan diversos tipos de
lipoproteínas como quilomicrones y lipoproteínas de una densidad bastante baja,
estas padecen un veloz y largo metabolismo para dar forma a partículas más
pequeñas que irrumpen el plasma y los tejidos. Estas partículas pequeñas o
remanentes poseen un papel significativo en la aterogénesis. Así también se ha dado a
conocer la relación de la hipertrigliceridemia con enfermedades de las arterias
coronarias, además de empeorar su condición de forma progresiva, donde se puede
mencionar que las lipoproteínas ricas en triglicéridos tienen un rol importante en la
progresión de las obstrucciones coronarias. Las lesiones provocadas por este tipo de
obstrucciones son susceptibles a romperse en síndromes coronarios agudos. (3)
Para la presente práctica se tendrá en consideración los valores dentro de un rango de
25 a 160 mg/dL, por lo cual los valores que se encuentren fuera de este rango serán
reconocidos como anormales, con la presencia de alteraciones en el metabolismo de
los triglicéridos. Cabe resaltar que los valores el rango a tomar en cuenta pueden
variar de acuerdo a lo establecido por cada laboratorio y la población de pacientes. (4)
III. FUNDAMENTOS

Los triglicéridos se determinan iniciando con la reacción de la lipasa, quien lo va a


hidrolizar liberando ácidos grasos y glicerol. El glicerol es convertido por acción de la
enzima glicerolquinasa en glicerol-1-fosfato, este es oxidado a dihidroxiacetona
fosfato por acción de la enzima glicerofosfato oxidasa, generándose así peróxido de
hidrógeno. A continuación, ocurre una reacción entre peróxido de hidrógeno, y
4-aminoantipirina y ácido 3,5-dicloro-2-hidroxi-bencensulfónico, catalizada por la
enzima peroxidasa para producir un compuesto coloreado en cantidad proporcional a
la concentración de triglicéridos presente en la muestra, midiéndose con una
absorbancia de 520 nm (5).

IV. REACTIVOS

El reactivo GPO-PAP es un reactivo de forma líquida que se utiliza para determinar


fotométricamente los triglicéridos en suero.
La composición del reactivo es la siguiente:

V. MUESTRA
Para el siguiente experimento se debe usar de preferencia suero o plasma (Heparina o
EDTA) libre de hemólisis. Las muestras que se tomen siempre deben ser con el
paciente en ayuna. Los tubos y material de vidrio deben estar limpios y libres de
residuos de detergentes. Los triglicéridos son estables algunos días entre 2° y 8°C.

VI. TÉCNICA
Se hará uso de 3 tubos de ensayo (Blanco, Calibrador, Muestra) los cuales después de
ser mezclados e incubados de acuerdo a los requerimientos de tiempo (5 min) y
temperatura (37°) que precise el ensayo, pasarán por el espectrómetro. Cabe resaltar
que el espectrofotómetro debe llevarse a cero con el blanco del reactivo. El cambio
de color se debe a la formación de quinonimina coloreada y en este procedimiento la
intesidad de color es directamente proporcional a la concentración de triglicéridos.
Por ejemplo:

Blanco Standard Muestra

H20 - - -

St (2g/L) - 10uL -

Muestra - - 10uL

Reactivo 1mL 1mL 1mL


GPO/POD

Absorbancia a 505 0,004 0,644 0,584


nm

Se puede llegar a la medición de la concentración de los triglicéridos mediante un


control de cálculo, el cual se hace tomando en cuenta la siguiente fórmula:
(𝐴𝑏𝑠𝑀𝑃−𝐴𝑏𝑠𝐵)×[𝑆𝑡]
[𝑀𝑃] =
(𝐴𝑏𝑠𝑆𝑇−𝐴𝑏𝑠𝐵)

VII. PROBLEMA

1. Se leyó las absorbancias de los tubos muestra problema y estándar contra el blanco
reactivo, los valores obtenidos fueron: 0.25 y 0.62 respectivamente. Calcule la
concentración de triglicéridos de la muestra problema. [𝑆𝑡]=2 g/L
[𝑆𝑡𝑎𝑛𝑑𝑎𝑟𝑑]
𝐹𝑎𝑐𝑡𝑜𝑟 = 𝐴𝑏𝑠𝑠𝑡 −𝐴𝑏𝑠𝐵

[200 𝑚𝑔/𝑑𝑙]
𝐹𝑎𝑐𝑡𝑜𝑟 = 0.62−0
= 322.58

(
𝑇𝑟𝑖𝑔𝑙𝑖𝑐é𝑟𝑖𝑑𝑜𝑠 (𝑚𝑔/𝑑𝑙) = 𝐹𝑎𝑐𝑡𝑜𝑟 × 𝐴𝑏𝑠𝑀𝑃 − 𝐴𝑏𝑠𝐵 )
𝑇𝑟𝑖𝑔𝑙𝑖𝑐é𝑟𝑖𝑑𝑜𝑠 (𝑚𝑔/𝑑𝑙) = 322. 58 × (0. 25 − 0)
𝑇𝑟𝑖𝑔𝑙𝑖𝑐é𝑟𝑖𝑑𝑜𝑠 (𝑚ℎ/𝑑𝑙) = 80. 6
2. Suponer que la muestra anterior fue diluida al ⅕. ¿Cuál será el valor de la
concentración de triglicéridos en la muestra diluida?
𝑇𝑟𝑖𝑔𝑙𝑖𝑐é𝑟𝑖𝑑𝑜𝑠 (𝑚ℎ/𝑑𝑙) = 80. 6
Diluida a 1/5= 16.12
3. Si la concentración de triglicéridos en una muestra problema es de 161 mg%, ¿Cuál
será el valor de la absorbancia de la muestra problema? Si 𝐴𝑏𝑠𝑠𝑡=0.622 y [𝑆𝑡]=2 g/L.

[𝑆𝑡𝑎𝑛𝑑𝑎𝑟𝑑]
𝐹𝑎𝑐𝑡𝑜𝑟 = 𝐴𝑏𝑠𝑠𝑡 −𝐴𝑏𝑠𝐵

[200 𝑚𝑔/𝑑𝑙]
𝐹𝑎𝑐𝑡𝑜𝑟 = 0.622−0
= 321.54

(
𝑇𝑟𝑖𝑔𝑙𝑖𝑐é𝑟𝑖𝑑𝑜𝑠 (𝑚𝑔/𝑑𝑙) = 𝐹𝑎𝑐𝑡𝑜𝑟 × 𝐴𝑏𝑠𝑀𝑃 − 𝐴𝑏𝑠𝐵 )
161 𝑚𝑔% = 321. 54 × 𝐴𝑏𝑠𝑀𝑃

161 𝑚𝑔%
321.54
= 𝐴𝑏𝑠𝑀𝑃

0. 5 = 𝐴𝑏𝑠𝑀𝑃

VIII. CONCLUSIÓN
Como hemos podido observar en este informe, conocer el nivel de triglicéridos que
hay en sangre es de suma importancia para la salud de los pacientes. El uso específico
de enzimas para representar las condiciones de los lípidos en sangre, además del uso
del espectrofotómetro, hacen a la prueba de una herramienta sumamente útil y de fácil
manejo clínico. La gran cantidad de repercusiones en la salud tanto física como
mental que puede producir una tasa elevada de triglicéridos es un tema que debe estar
bajo supervisión constante. Además de esto, cabe resaltar la gran ayuda que significa
la prueba para el diagnóstico y control de posibles hiperlipidemias u otras patologías
como posibles arteriosclerosis o enfermedades coronarias. Finalmente, se puede decir
que el apoyo de este tipo de pruebas lo vemos evidenciado en las diversas campañas
de salud en el país, logrando diagnosticar diversos casos clínicos relacionados con
altos niveles de triglicéridos, en zonas de difícil acceso.
IX. BIBLIOGRAFÍA
1. Fabiani Romero F. ¿Qué son los Triglicéridos?. 1era ed. Sevilla: Sociedad Española
de Arteriosclerosis; 2010.
2. Frothingham S. Triglicéridos: Niveles normales y altos, riesgos y tratamiento
[Internet]. Healthline. 2021 [citado el 19 de Noviembre de 2021]. Disponible en:
https://www.healthline.com/health/es/trigliceridos
3. Rodríguez Antonio J.. Triglicéridos, "el enemigo olvidado". Rev. costarric. cardiol
[Internet]. 2002 Apr [citado el 19 de Noviembre de 2021] ; 4( 1 ): 28-31. Disponible
en:
http://www.scielo.sa.cr/scielo.php?script=sci_arttext&pid=S1409-4142200200010000
6&lng=en.
4. Valtek SA. TRIGLICÉRIDOS (GPO – PAP) Reactivo líquido para la determinación
fotométrica de Triglicéridos en suero o plasma. Disponible en:
https://andinamedica.com.pe/wp-content/uploads/2016/08/VTK-trigliceridos.pdf
5. Sandoval Vegas, M. H., Barrón Pastor, H. J., Loli Ponce, R. A., & Salazar Criado, Y.
V. (2012, Julio). Precisión en la determinación de glucosa, colesterol y triglicéridos
séricos, en laboratorios clínicos de Lima, Perú. In Anales de la Facultad de Medicina
(Vol. 73, No. 3, pp. 233-238). UNMSM. Facultad de Medicina.

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