GUIA ÚNICA DE LABORATORIO

SECCIONAL: BARRANQUILLA

FACULTAD: Ciencia de la Salud

PROGRAMA: Medicina

ASIGNATURA: Bioquímica

SEMESTRE: Segundo B

INTEGRANTES: Santiago Angulo Juan

Carlos Granadillo Mejía
Juliana Hernández Sierra
Jhon Jaramillo De La Rosa
MESA: 05

NOMBRE DE LA PRACTICA DE LABORATORIO:

CARBOHIDRATOS

LABORATORIO No. 4

Los carbohidratos, también llamados hidratos de carbono, glúcidos, sacáridos o

azúcares sirven como material energético inmediato y también cumplen funciones
estructurales. Los carbohidratos contienen los grupos funcionales C=O y –OH y se
pueden clasificar de forma genérica con base en el número de carbonos en la
molécula, así: las triosas contienen tres carbonos, las tetrosas contienen cuatro, las
pentosas contienen cinco y las hexosas contienen seis. Otra manera de clasificar los
carbohidratos se basa en el número de unidades de azúcar en la cadena:
monosacáridos (ejemplos: glucosa, fructosa, galactosa y manosa), disacáridos
(ejemplos: sacarosa, lactosa y maltosa) y polisacáridos (ejemplos: celulosa,
glucógeno y ácido hialurónico). Los oligosacáridos son cadenas cortas formadas por
la condensación de entre dos y diez unidades de monosacáridos. En este grupo, los
disacáridos son los más abundantes. Los carbohidratos pueden estar como cetosas
y aldosas. Las cetosas tienen una cetona como grupo funcional y las aldosas tienen
un aldehído como grupo funcional. Los monosacáridos se unen mediante enlaces
glucosídicos, que consisten en puentes de átomos de oxígeno, dando también como
producto una molécula de agua. El enlace glucosídico se rompe mediante la adición
de agua por un proceso denominado hidrólisis. Los monosacáridos no se hidrolizan.
41
Metabolismo de la glucosa. La glucosa es la principal fuente de energía en el
humano. Las siguientes rutasGUIA
metabólicas
ÚNICAestán implicadas en el metabolismo de
DE LABORATORIO

42
glucosa (revisar cada una de ellas): Glucólisis, Gluconeogénesis, Glucogenólisis,
Glucogénesis, Lipogénesis y Lipólisis.
GUIA ÚNICA DE LABORATORIO

Los niveles de glucosa en sangre están controlados, principalmente, por dos

hormonas, insulina y glucagón. Ambas son liberadas por el hígado, la insulina
reduce los niveles de glucosa en sangre, mientras que el glucagón induce tanto la
glucogenólisis como la gluconeogénesis, llevando al incremento de los niveles
sanguíneos de glucosa.

Diagnóstico de alteraciones en el metabolismo de los carbohidratos

Diferentes enfermedades son producto de alteraciones en el metabolismo de los

carbohidratos, entre las que se destacan: diabetes mellitus (hiperglucemia),
hipoglucemia y errores innatos del metabolismo (galactosemia y la enfermedad de
Von Gierke).

Prueba de Tolerancia Oral a la Glucosa (PTOG)

Existen diferentes pruebas de laboratorio que el médico puede solicitar para

identificar alteraciones en el metabolismo de la glucosa. Las principales pruebas que
solicitan son la glicemia en ayunas y la PTOG.

La PTOG se utiliza para diagnosticar la prediabetes, diabetes mellitus tipo 2 o la

diabetes gestacional. Se obtiene una muestra de sangre tras el ayuno de una noche
(8 horas), luego el paciente toma una bebida rica en glucosa (75 o 100 gramos) y, se
toman muestras de sangre en intervalos de 30 a 60 minutos después (hasta
completar 2 horas).

Seguimiento del paciente diabético: Prueba de la Hemoglobina Glicosilada (HbA1C)

y la Fructosamina.
Para controlar la efectividad del tratamiento en un paciente diabético se utiliza la
prueba de la Hemoglobina Glicosilada (HbA1C). Esta prueba informa cómo ha sido
el control glicémico en los últimos tres meses.
Hemoglobina es una proteína cuya función es transportar oxígeno desde los
pulmones a los tejidos. Se encuentra en los glóbulos rojos y contiene hierro. La

43
 GUIA ÚNICA DE LABORATORIO

glucosa se une a la hemoglobina hasta formar hemoglobina glicosilada, dicha unión

se mantiene hasta que el glóbulo rojo es desechado, proceso que ocurre en 120
días. Cuando los niveles sanguíneos de glucosa aumentan, también se incrementa
la HbA1c. Existen evidencias que sugieren que mayores niveles de HbA1c se
asocian con un mayor riesgo de complicaciones en pacientes diabéticos. La HbA1c
se expresa en porcentaje.

El nivel normal se encuentra entre 4 y 6% y se recomienda que los pacientes

diabéticos la mantengan menor de 6,5%. Resultados anormales indican que la
glucosa sanguínea no ha estado bien regulada durante períodos largos de semanas
a meses. Además de la hemoglobina, otras proteínas séricas se unen a la glucosa
mediante enlaces cetoamínicos. El término Fructosamina se refiere al enlace
cetoamínico entre la glucosa y una proteína. Todas las proteínas séricas pueden
sufrir glucación y como la proteína más abundante en el suero es la albúmina, la
determinación de fructosamina es en gran parte un estudio de los niveles de
albúmina glicosilada. Por esto, la fructosamina es una prueba de control glicémico
que arroja el dato de las últimas tres semanas debido a que la vida media de la
albúmina se encuentra entre las dos y tres semanas.

2. OBJETIVOS

 Identificar las pruebas de laboratorio que se requieren para el diagnóstico de

diabetes mellitus.

 Entender el fundamento de los métodos para la determinación de glucosa en

sangre y orina.

 Comprender la importancia de las pruebas de laboratorio para evaluar la efectividad

en el tratamiento de pacientes diabéticos.

3. EQUIPOS, MATERIALES Y REACTIVOS

Equipos y Materiales Reactivos

Espectrofotómetro micro pipetas Reactivo: Fosfatos, fenol, glucosa

(longitud de onda de 1000µmL , oxidasa, peroxidasa, 4-amino
340nm) 10µmL,20µmL antipirina, pH 7.5.
Baño María y 50µmL Muestra: Suero.
Centrifugadora Beaker. Solución patrón de
44
 GUIA ÚNICA DE LABORATORIO

Tubo de ensayo glucosa/úrea/creatinina: Glucosa

15x160 mm-1 100 mg/dl, úrea 50 mg/dl,
Gradilla. creatinina 2 mg/dl.

4. METODOLOGÍA

MÉTODOS PARA LA DETERMINACIÓN FOTOMÉTRICA DE GLUCOSA EN

SANGRE Y ORINA.
Determinación de glucosa en sangre mediante el método de Glucosa
oxidasa/peroxidasa
Fundamento: La glucosa oxidasa es una oxidorreductasa que cataliza la
transferencia reversible de electrones, por tanto, la oxidación de la glucosa a ácido
glucónico. La glucosa presente en la muestra origina, según las reacciones
acopladas descritas a continuación, un complejo coloreado que se cuantifica por
espectrofotometría.

La glucosa oxidasa (GOD) cataliza la oxidación de la glucosa con formación de ácido

glucónico y peróxido de hidrógeno. El peróxido de hidrógeno reacciona en presencia
de la peroxidasa (POD) hasta formar un complejo de color rojo. La intensidad de
este color es directamente proporcional a la concentración de glucosa. Muestra:
Suero. Reactivo: Fosfatos, fenol, glucosa oxidasa, peroxidasa, 4-amino antipirina, pH
7.5Solución patrón de glucosa/úrea/creatinina: Glucosa 100 mg/dl, úrea 50 mg/dl,
creatinina 2 mg/dl.

Procedimiento:
a. Tome 4 tubos de ensayo limpios y rotule así:
1. Blanco, 2. Patrón, 3. Muestra1 ½ hora y 4. Muestra1 hora. En cada tubo
adicionará:
1.1 mL de reactivo.
2.1 mL de reactivo + 10 μL de patrón.
3.1 mL de reactivo + 10 μL de muestra. Leer a la ½ hora de incubación

45
 GUIA ÚNICA DE LABORATORIO

4.1 mL de reactivo + 10 μL de muestra. Leer a la hora de incubación.

b. Agitar bien e incubar los tubos durante 5 minutos a 37°C o durante 10 minutos a
temperatura ambiente.

*Describa en el informe de laboratorio lo que se observa luego de la incubación.

c. Medición en el equipo:

Siga las instrucciones de manejo del equipo.

Al seleccionar concentración, en la pantalla aparecerán los parámetros a evaluar.

Seleccionar glucosa.

Realice la lectura del blanco: para esto debe presionar la flecha que aparece debajo
de la palabra nuevo blanco y esperar que se encienda la luz verde que indica que el
equipo está listo para succionar la solución blanco.

Realice la lectura de la muestra: Esperar que se encienda la luz verde y colocar el

tubo en posición para que la muestra sea succionada. El equipo arrojará el valor de
la concentración.

Valores de referencia

Resultados normales de glucosa sanguínea basal:

En diabéticos: ≥126 mg/dL. Para la glucosa posprandial (dos horas después de

ingerir alimentos), los resultados normales en personas entre 0-50 años: 70-140
mg/dL.

*Registre los resultados de sus muestras en el informe de laboratorio y describa si se

encuentran dentro o fuera de los parámetros normales.

Determinación de glucosa en orina

Prueba cuantitativa de Benedict mediante el uso de las tabletas reactivas

Clinitest®Fundamento: Se basa en la reacción clásica de Benedict, es decir, en la
reducción del Cobre, combinando reactivos con el calor generado por el sistema. El
46
 GUIA ÚNICA DE LABORATORIO

hidróxido de sodio proporciona el medio alcálino necesario para la reacción y el calor

requerido se alcanza por la reacción del hidróxido de sodio con el agua y con el
ácido cítrico. Se usa para determinar la cantidad de sustancias reductoras, en este
caso glucosa, en orina. La glucosa reduce el sulfato cúprico presente en la tableta
hasta óxido cuproso. Las tabletas pueden ser usadas por el procedimiento estándar
(5 gotas de orina) o el método validado por Clinitest® (2 gotas de orina). El color
resultante va desde el azul verdosa al naranja. Se interpreta el resultado con la carta
de color correspondiente.
Procedimiento:
En un tubo de ensayo coloque un papel filtro y filtre 6 gotas de orina fresca.
Adicione 10 gotas de agua destilada
Adicione una tableta de Clinitest.
Espere que se lleve a cabo la reacción y deje pasar 15 segundos. Agite suavemente
el tubo para mezclar.
Tome la carta de color y compare con el color obtenido.

Registre el resultado en su informe de laboratorio.

Prueba cualitativa para medir glucosa en orina utilizando tiras de papel
reactivo Multistix.
Fundamento: Involucra la doble reacción enzimática secuencial de la glucosa
oxidasa y la peroxidasa. Estas reacciones fueron ilustradas anteriormente.
Procedimiento: Mojar la tirilla en la muestra de orina por 30segundos y compara el
resultado con la tabla de colores que viene en el frasco

47
 GUIA ÚNICA DE LABORATORIO

Registrar el resultado en el informe de laboratorio.

Determinación de HbA1CFundamento: Después de preparar un hemolizado, las

hemoglobinas son retenidas por una resina de intercambio catiónico en la cual se
eluye de manera específica la HbA1C, previa eliminación por lavado de la HbA1A+B.

Muestra: Sangre venosa recogida mediante procedimientos estándar y con EDTA

como anticoagulante. HbA1C en sangre es estable 7 días a 2-8°C.
Método: Cromatográfico –espectrofotométrico. Se utilizará una resina de
intercambio iónico, independiente de la temperatura. Luego se estimará el
porcentaje de HbA1C mediante lectura de la absorbancia a 415 nm
Reactivos
Reactivo 1: Biftalato potásico y detergente.
Reactivo 2: Tampón fosfato30 mmol/Ly ázida sódica.
Reactivo 3: Tampón fosfato 72 mmol/L y ázida sódica.
Microcolumnas: contienen resina de intercambio catiónico
Procedimiento1.
Preparación del hemolizado.
a. Pipetear en un tubo de ensayo 50 μL de sangre y 200 μL de reactivo 1.
b. Agitar y dejar a temperatura ambiente durante 10-15 min. 2.
Preparación de la columna.
a. Destapar la parte superior de la columna y romper a continuación la lengüeta
inferior.
b. Con la ayuda del extremo plano de una pipeta, bajar el disco superior hasta el
nivel de la resina, evitando comprimirla.
c. Dejar gotear hasta que el líquido alcance el nivel del disco, desechando el eluido.
3. Separación y lectura de la HbA1ca.
Aplicar cuidadosamente sobre el disco superior, 50 μL del hemolizado y desechar el
eluido.
48
 GUIA ÚNICA DE LABORATORIO

b. Cuando haya penetrado todo el hemolizado añadir, procurando arrastrarlos

posibles restos del mismo, 200 μL del Reactivo 2 y desechar el eluido.
c. Pipetear 2 mL del Reactivo 2 y desechar el eluido.
d. Colocar la columna sobre un tubo de ensayo y añadir 4 mL del Reactivo 3 y
recoger el eluido.
e. Agitar bien y leer la absorbancia de la fracción HbA1c a 415 nm frente a agua
destilada (AHbA1c).
Lectura de la Hbtotal.
a. Pipetear en un tubo de ensayo 12 mL y 50 μL del hemolizado.
b. Agitar bien y leer la absorbancia de la Hbtotal a415 nm frente a agua destilada.
Cálculo
El porcentaje de HbA1C en la muestra se calcula a partir de la siguiente fórmula
general:

El volumen de HbA1c (VHbA1c) es 4 mL mientras que el volumen de Hb total

(VHbTOTAL) es 12 mL. Se deduce la fórmula siguiente para el cálculo de la
concentración:

Determinación de Fructosamina
Fundamento: técnica colorimétrica basada en la capacidad que tienen las proteínas
glicadas de reducir las sales de tetrazolio en medio alcalino. La velocidad de
formación de formazan es proporcional a la concentración sérica de proteína glicada.
Muestra: Suero libre de hemólisis.
Método: Cinética espectrofotométrica con lectura a dos tiempos fijos.
Reactivos:
Sales de tetrazolio Tampón carbonato 0.2 mol/l, pH 10,35

49
 GUIA ÚNICA DE LABORATORIO

Patrón de Fructosamina: Suero humano liofilizado. Desoximorfolino fructosa. Se

debe reconstituir en 1 ml de agua destilada.
Procedimiento
1. Preparar en un tubo de ensayo la solución patrón y, en otro tubo, la muestra.
Patrón: mezclar 1 mL de reactivo A con 50 μL de patrón.
Muestra: mezclar 1 mL de reactivo A con 50 μL de la muestra.
2. Mezclar bien e incubar a 37°C3.
3. Leer la absorbancia del patrón y de la muestra a 530 nm a los 10 minutos (A1) y a
los 15 minutos (A2) de incubación
5. RESULTADOS Y DISCUSIÓN
Incluir todos los resultados de la práctica en el informe de laboratorio y realice una
breve discusión (250 palabras) con base en lo obtenido.

-Paciente #1: Paciente virtual. Prueba de glucosa en sangre. Método de Glucosa

oxidasa/peroxidasa.
PRUEBA GLUCOSA OXIDASA/PEROXIDASA Paciente #1.
ABSORBANCIA MUESTRA 0,081
ABSORBANCIA PATRÓN 0,16
RESULTADO 50,625 mg/dl

Valores de referencia.

Conclusión Paciente #1: Paciente virtual:

Se encuentra que los valores de glucosa en sangre del paciene virtual son: 50,625
mg/dl. Por lo que, teniendo en cuenta los valores de referencia de glucosa en sangre, el
paciente virtual se encuentra hipoglucémico.

-Paciente #2: Paciente Carlos. Prueba de glucosa en sangre. Método de Glucosa

oxidasa/peroxidasa.
50
 PRUEBA GLUCOSA OXIDASA/PEROXIDASA PacienteDE
GUIA ÚNICA #2 LABORATORIO
ABSORBANCIA MUESTRA 0,08
ABSORBANCIA PATRÓN 0,04
RESULTADO 200 mg/dl

Valores de referencia.

Conclusión Paciente #2: Paciente Carlos.

Se encuentra que los valores de glucosa en sangre del paciente Carlos son: 200 mg/dl.
Por lo que, tomando en cuenta los valores de referencia de glucosa en sangre para un
adulto normal, el paciente Carlos se encuentra hiperglucémico.

-Paciente #3: Paciente Valentina. Prueba de glucosa en orina.

Conclusión: Debido a que los colores de la tira de uroanálisis de marca Mission, no
sufrió ningún cambio, se concluye que la paciente resultó negativa para glucosuria
PREGUNTAS COMPLEMENTARIAS
a. ¿Qué pruebas puede solicitar el médico para determinar qué tipo de diabetes
padece el paciente?

Pruebas para determinar el tipo de diabetes:

 Prueba de péptido c:

Esta prueba mide el nivel de péptido C en una muestra de sangre u orina. Medir el
péptido C es una manera precisa de averiguar cuánta insulina produce su cuerpo ya
que el proceso para producir insulina, su páncreas produce péptido C. El péptido C y
la insulina entran en su torrente sanguíneo al mismo tiempo y en cantidades iguales.
El péptido C no afecta los niveles de glucosa en la sangre, pero se queda en su
sangre por más tiempo que la insulina, por eso es más fácil que se mida de forma
precisa.

Debido al que péptido c se produce junto a la insulina, un bajo nivel (o la ausencia de

péptido C de insulina) indica que el páncreas no está produciendo o está
produciendo poca insulina, características propias de la diabetes tipo 1.

Un nivel bajo puede ser normal si usted no ha comido recientemente. Sus niveles de
51
azúcar e insulina en sangre serían entonces naturalmente bajos.

Un nivel bajo es anormal si el GUIA

azúcar ÚNICA DE
en sangre es LABORATORIO
alta y su cuerpo debería estar
produciendo insulina en ese momento.

En cambio, las personas con diabetes tipo 2, obesidad o resistencia a la insulina

pueden tener un alto nivel de péptido C. Esto significa que su cuerpo está
produciendo mucha insulina para mantener (o tratar de mantener) su azúcar en
sangre normal.

 Pruebas autoinmunes:

Las pruebas para detectar anticuerpos autoinmunes, como los anticuerpos contra las
células de los islotes pancreáticos (ICA), los anticuerpos contra la glutamato
descarboxilasa (GAD) y los anticuerpos contra la tirosina fosfatasa IA-2 (IA-2),
pueden ayudar a diagnosticar la diabetes tipo 1, ya que esta forma de diabetes está
asociada con la destrucción autoinmune de las células beta pancreáticas.

 Examen de anticuerpos antinsulínicos

El examen de anticuerpos antinsulínicos se realiza para ver si su cuerpo ha

producido anticuerpos contra la insulina.

La prueba de anticuerpos IgG e IgM contra la insulina puede ser parte de los
exámenes que lo diagnostique con diabetes tipo 1.

Si desarrolla anticuerpos antiinsulina, la insulina podría no funcionar muy bien o no

funcionar en absoluto. Como resultado, su azúcar en sangre puede elevarse mucho.
O los anticuerpos pueden ponerlo en riesgo de una baja de azúcar.

Su proveedor de atención médica puede sugerirle una forma diferente de insulina, a

para la que su cuerpo sea menos propenso a producir anticuerpos.

Si el examen muestra un nivel alto del anticuerpo IgE contra la insulina, su cuerpo ha
desarrollado una respuesta alérgica a la insulina.
b. ¿Qué es diabetes gestacional y cuáles son los valores de referencia descritos por
la ADA (American Diabetes Association) para el diagnóstico de diabetes gestacional?
La diabetes gestacional es una patología/tipo de diabetes que llega a aparecer por
primera vez durante el embarazo en mujeres embarazadas que no tienen antecedentes
de diabetes, los estudios se realizan entre las 24 y 28 semanas del embarazo.
En algunas mujeres, la diabetes gestacional puede afectarles en más de un embarazo
se puede controlar a menudo con una alimentación saludable y ejercicio regular, pero
52
algunas veces la madre también necesitará insulina, se desarrolla durante el embarazo y
se caracteriza por niveles elevados
GUIAdeÚNICA
azúcar DE
en laLABORATORIO
sangre, esta condición puede afectar
tanto a la madre como al feto, y es crucial controlarla para prevenir complicaciones, se
diagnostica a través de pruebas de glucosa y su tratamiento puede llegar a incluir
cambios en la dieta, ejercicio regular, monitoreo frecuente de azúcar en la sangre e
incluso la necesidad de insulina.
En algunos casos hay que tener en cuenta que las mujeres que tengan factores de
riesgos elevados son más propensas a desarrollar la DMG como lo son:
• La obesidad
• Malos hábitos alimenticios
• Sedentarismo
• Prediabetes
• Parto previo de un bebé con un peso de más de 9 libras (4,1 kilos)
• Pertenencia a una determinada raza o etnia, como negra, hispana, indígena
americana o asiática americana
• Síndrome de ovario poliquístico
• Diabetes gestacional en un embarazo previo
En las primeras semanas se presenta una disminución de glucemia en el ayuno y
aumenta postprandial y esto se debe a los cambios de sensibilidad de la insulina por
parte de los tejidos maternos para que posteriormente los nutrientes puedan dirigirse a la
unidad fetoplacentaria.
Cuando esto se mantiene constante y se le suma la resistencia a la leptina y aumento de
citocinas proinflamatorias tales como:
• Factor de necrosis tumoral alfa
• Interferón gamma
• Interleucina 2
• El factor de necrosis tumoral β
Se establece un estado proinflamatorio y base principal para el establecimiento de la
DMG.
A su vez, ésta se ha relacionado con complicaciones materno-fetales que ponen en
riesgo la vida de la madre y del producto como lo son la
• Macrosomía
• La ruptura prematura de membranas
• La hemorragia postparto
VALORES DE REFERENCIAS SEGÚN LA ADA
La monitorización de la glucemia en ayunas y posprandial se recomienda tanto en la
53
diabetes mellitus gestacional como en la diabetes preexistente en el embarazo para
conseguir unos niveles óptimos de glucosa
GUIA ÚNICA DE LABORATORIO
Los valores de referencia de glicemia son:
• Glucosa plasmática en ayunas <95 mg/dl (5,3 mmol/l)
• Glucosa posprandial en 1 h <140 mg/dl (7,8 mmol/l)
• Glucosa posprandial en 2 h <120 mg/dl (6,7 mmol/l)
Algunas personas con diabetes preexistente también deben controlar la glucemia
preprandial.
Debido a lo que es el aumento del recambio de glóbulos rojos, la A1C (hemoglobina
gicosilada) es ligeramente inferior durante el embarazo en personas con y sin diabetes,
Lo ideal es que el A1C durante el embarazo sea <6% (42 mmol/mol) si puede alcanzarse
sin hipoglucemia significativa, pero el objetivo puede relajarse a <7% (53 mmol/mol) si
es necesario para prevenir la hipoglucemia, Cuando se utiliza junto con la monitorización
de la glucemia pre y pos, prandial, la monitorización continua de la glucosa puede
ayudar a alcanzar el objetivo de A1C en la diabetes y el embarazo.
Cuando se utiliza además de la monitorización de la glucemia, centrándose en los
objetivos tradicionales, la monitorización continua de la glucosa en tiempo real puede
reducir la macrosomía y la hipoglucemia neonatal en el embarazo.
Para el monitoreo de glucosa los valores de referencia son:
• Glucosa en ayunas 70-95 mg/dL (3,9-5,3 mmol/L) y o bien
• Glucosa postprandial en una hora 110-140 mg/dL (6,1-7,8 mmol/L) o bien
• Glucosa postprandial a las dos horas 100-120 mg/dL (5,6-6,7 mmol/L)4
VALORE S REFERENCIALES PARA EL DIAGNOSTICO
La prueba de tolerancia oral a glucosa, es un examen que se realiza para medir los
niveles de glucosa (azúcar) en la sangre, en esta prueba, la persona debe ingerir una
cantidad específica de glucosa, generalmente 75 gramos, y luego se toman muestras de
sangre en intervalos de 30 a 60 minutos para medir cómo el cuerpo procesa y
metaboliza el azúcar, los valores de referencia descritos por la American Diabetes
Association (ADA) para el diagnóstico de diabetes gestacional son: en la primera hora,
mayor a 180 mg/dL; en la segunda hora, mayor a 155 mg/dL; y en la tercera hora, mayor
a 140 mg/dL. La presencia de dos o más resultados anormales establece el diagnóstico
de diabetes gestacional
c. ¿A quién se le ordena realizar la prueba de HbA1C? Describa la utilidad de esta
prueba.
La prueba de Hemoglobina A1C (HbA1C) es un análisis de sangre que proporciona
información sobre los niveles promedio de glucosa en la sangre en los últimos dos a
54
tres meses. Esta prueba, también conocida como prueba de hemoglobina
glicosilada, hemoglobina A1CGUIA
o HbA1c, es fundamental
ÚNICA para diagnosticar la diabetes
DE LABORATORIO
tipo 1 y tipo 2, así como para controlar los niveles de glucosa en la sangre. Los
resultados de la prueba de HbA1C se presentan como porcentajes, donde un valor
más alto indica niveles promedio de azúcar en sangre más elevados. Mantener un
nivel de HbA1C dentro de un rango objetivo es esencial para reducir el riesgo de
complicaciones asociadas con la diabetes
El resultado de una prueba de hemoglobina glicosilada indica el nivel promedio de
glucosa en la sangre de los últimos dos o tres meses, en especial, la prueba de
hemoglobina glicosilada mide el porcentaje de proteínas hemoglobina en la sangre
que están cubiertas por azúcar (glicosilada). Las proteínas hemoglobina en los
glóbulos rojos transportan el oxígeno. Estas pruebas normalmente se ordenan a
personas con diabetes tipo 2, prediabetes, y a aquellos que necesitan monitorear su
nivel promedio de glucosa en sangre durante los últimos tres meses.
Cuanto más elevado sea el nivel de hemoglobina glicosilada, menor será el control
de la glucosa en la sangre y habrá un mayor riesgo de complicaciones de la
diabetes.
La utilidad de la prueba de HbA1c radica en su capacidad para proporcionar una
visión a largo plazo del control glucémico de un individuo, a diferencia de las
mediciones puntuales de glucosa en sangre que pueden variar a lo largo del día
la HbA1c ofrece una evaluación más estable y representativa del control glucémico
a lo largo del tiempo. Esto es crucial en el manejo de la diabetes, ya que permite a
los médicos y pacientes tener una idea más precisa de cómo ha sido el control de la
glucosa en sangre en un período prolongado. además, la prueba de HbA1c es útil en
el diagnóstico de la diabetes, en la evaluación de la efectividad del tratamiento y en
la toma de decisiones sobre ajustes en la terapia.

d. Consigne en una tabla valores supuestos para pacientes con los siguientes
diagnósticos: diabético, hipoglicémico, normoglicémico.

 Valores de referencia en ayunas.

55
DIAGNÓSTICO NIVELES DE GLUCOSA EN SANGRE (mg/dl)
PRE-DIABETES DE 101 A 125 GUIA ÚNICA DE LABORATORIO
DIABETES POR ENCIMA DE 126
HIPOGLUCEMIA DEBAJO DE 70

NORMOGLUCEMIA ENTRE 70 Y 100

e. Describa el significado de los siguientes términos: glucólisis, glucogenólisis,

gluconeogénesis y glucosuria.

Glucólisis: El glucólisis es una vía metabólica universal, citoplasmática, esto quiere

decir que casi todos los organismos, hacen glicólisis. También es conocida como la
vía de Embden-Meyerhof, su objetivo se centra en transformar la glucosa, la cual es
un azúcar de 6 carbonos, en 2 moléculas de piruvato las cuales cada una tienen 3
carbonos. También se produce dos NAD reducido (NADH+H+) o poder reducido
junto con la generación de dos moles de ATP, por fosforilación a nivel de sustrato.
En la naturaleza existen 3 mecanismos que generan ATP, los cuales son, la
fotosíntesis, la fosforilación a nivel de sustrato y la fosforilación oxidativa.

Glucogenólisis: La glucogenólisis es el proceso por el cual se degrada el glucógeno

para formar Glucosa libre y Glucosa 6-P, todo esto dependerá si el tejido tiene
actividad de Glucosa 6 fosfatasa, si tiene Glucosa 6 fosfatasa, el resultado
será Glucosa libre y si carece de la enzima, el proceso será Glucosa 6-P. Muchos
son los órganos que metabolizan el glucógeno, el cual cobra importancia en el
hígado y el musculo, donde tiene una duración media de 24 horas, su función será
necesaria en momentos entre comidas. El objetivo del glucógeno hepático es el
torrente sanguíneo, mientras que el objetivo del glucógeno muscular tomará
dos objetivos finales y uno común, el común es la fabricación energía, pero si el
musculo está en condiciones anaerobias también producirá lactato, pero si está en
condiciones aerobias, aparte de energía su producto será CO2 y agua.

Gluconeogénesis: Es el proceso por el cual se sintetiza glucógeno a partir de

glucosa. Tiene como objetivo, producir glucosa a partir de sustratos que no son
carbohidratos. Por eso el proceso, fisiológicamente cobrará importancia en el
momento en el cual toda la glucosa que hay en el organismo ha sido consumida y se
hace necesario, seguirle produciendo glucosa al cerebro que vive exclusivamente de
56
la glucosa y a los tejidos anaerobios los cuales no pueden oxidar otro sustrato
diferente a la glucosa. Es decir, será importante
GUIA ÚNICA DE enLABORATORIO
el ayuno.

Glucosuria: Es una prueba urinaria que mide la excreción de glucosa. El umbral para
esta es de 180mg/dl, por consiguiente, este examen es un indicativo de
hiperglucemia.
 Es importante el tiempo de colección. Se utiliza en general la de la mañana
debido a su concentración. Será positiva sólo si la glicemia supera 180mg/dl
en un tiempo posterior al ayuno.
 Con enfermedad renal (filtrado glomerular reducido), se pueden excretar
cantidades de glucosa superiores a 180mg/dl. Común en personas con edad
avanzada y diabetes no diagnosticada con afección renal. Este tipo de
pacientes son asintomáticos.

7. BIBLIOGRAFIA NACIONAL E INTERNACIONAL

BioSystems S.A. Glucosa oxidasa/peroxidasa Data Sheet. Barcelona,
EspañaBayer®. Multistix 10 SG Data Sheet. México. Pacheco Vergara E. Prácticas
de Bioquímica: para estudiantes de Ciencias de la Salud. 2014.

Klonoff DC, Ahn D, Drincic A. Continuous glucose monitoring: A review of the

technology and clinical use. Diabetes Res Clin Pract. 2017;133:178-192.

Bahagavan, N.V. Bioquímica. México. Nueva Editorial interamericana.

Bioquímica Harper 15a Edición. Editorial El manual moderno.

57
 GUIA ÚNICA DE LABORATORIO

Bioquímica de lagunas 5 a Edición. José Lagunas, Enrique Piña Editorial El manual

moderno.
3.1 EQUIPOS
NOMBRE DEL EQUIPO
1 Espectrofotómetro ultravioleta Biosytems 350, centrifugadora y
Baño María
Observaciones:

3.2 Materiales

Materiales Cantidad
1 Gradilla 5
2 Tubos de ensayos 20
3 micro pipetas de 1000µmL , 5
10µmL,20µmL y 50µmL
4 Beaker 1
3.3 Reactivos

REACTIVOS CANTIDAD N° DE
POR GRUPO GRUPOS TOTAL
DE DE
TRABAJO TRABAJO
1 Reactivo: Fosfatos, fenol, glucosa 1ml 5 5ml
oxidasa, peroxidasa, 4-amino antipirina,
pH 7.5.
2 Muestra: Suero. 10µL 5 50µL
3 Solución patrón de
glucosa/úrea/creatinina: Glucosa 100
mg/dl, úrea 50 mg/dl, creatinina 2 mg/dl.
4 Reactivo 1: Biftalato potásico y 200µL 5 1ml
detergente.
5 Reactivo 2: Tampón fosfato30 mmol/Ly 2ml 5 10ml
ázida sódica.
6 Reactivo 3: Tampón fosfato 72 mmol/L y 4ml 5 20ml
ázida sódica.
7 Sales de tetrazolio Tampón carbonato 1ml 5 5ml
0.2 mol/l, pH 10,35
8 Patrón 50 µL 5 250 µL

Observaciones: Para el trabajo experimental de la asignatura de bioquímica en el

programa de Medicina se organiza las secciones por grupo 5 de 4 integrantes
máximo.

58