Concentración mínima inhibitoria en distintos productos de limpieza

María Telismarloy Hernández galindo, William David Flórez

Resumen
En la práctica de laboratorio de concentración mínima inhibitoria fueron empleadas distintas
técnicas, de las cuales algunas fueron inviables por motivos de ambiente y contaminación en
muestras, por otra parte se determino que la cantidad mínima requerida para inhibir fue
presentada por el tubo número 3.

Introducción
….
Una variedad de métodos pueden ser utilizados para medir la susceptibilidad in vitro de los
microorganismos patógenos a antimicrobianos, el de uso más común en los laboratorios de
microbiología es la difusión en agar estandarizado para microorganismos de crecimiento
rápido y algunos de crecimiento fastidioso.

Para un resultado confiable con este test se debe trabajar con una metodología estandarizada
y la medición del halo de inhibición debe correlacionarse con la CIM de cepas con
susceptibilidad o resistencia conocida a varios antimicrobianos.

El método estandarizado comúnmente recomendado por el NCCLS se basa en el

originalmente descrito por Bauer.
Metodología
Preparación del patrón Mc Farland
Se tomaron 9,95 ml de H2SO4 al 1% volumen y se depositaron en un en un tubo tapa rosca
posteriormente, fueron agregados 0,05 ml de BaCl2. 2H2O al 1.175% peso/volumen y se
homogenizó.
Preparación de inoculo
Se preparó una solución del grupo de microorganismos en caldo tripticasa soya agregando
microorganismos al caldo estéril con la ayuda de un asa redonda, se comparó la turbidez del
patrón de Mc Farland.
Siembra de la emulsión
Se introdujo un escobillón estéril dentro de la emulsión bacteriana y se froto contra las
paredes del mismo para remover el estrés exceso del inóculo, posteriormente se sembró
masivamente con el escobillón sobre la superficie de agar tripticasa soya o Müller Hinton.
Antibiograma
Se colocaron los semidiscos con los antibióticos con ayuda de pinzas de disección
esterilizadas pasándolas por la llama del mechero, se ubicaron 6 discos y en la periferia y 1 en
el centro dejando entre cada disco con una distancia uniforme aproximadamente de 2 cm para
evitar que las zonas de inhibición queden superpuestas, se presionaron ligeramente los discos
sobre el agar para asegurar un contacto uniforme y posteriormente fueron rotuladas. Las cajas
se inocularon invertidas a 35º Celsius por 24 horas.
Sensibilidad antisépticos
Con la ayuda de una perforadora se sacaron 6 discos de papel filtro, posteriormente, con una
pinza estéril se humedecieron en los productos a evaluar, fueron ubicados los discos en el
agar previamente tomado y se realizó el procedimiento anterior presionando los discos para
asegurar un contacto uniforme con la caja de agar, se marcaron e incubaron invertidas a 35
°C durante 24 horas.
Determinación de la concentración mínima inhibitoria
Una vez realizado los cálculos necesarios, se tomaron 5 tubos tapa rosca y se agregó la
cantidad de desinfectantes y diferentes productos para posteriormente con una pipeta agregar
10 ml del caldo de la solución bacteriana previamente y se incubó a 35 °C durante 24 horas.

Resultados y discusión
Los distintos métodos empleados requieren condiciones óptimas para su desarrollo, se cree
que en algunos casos experimentales las muestras se contaminaron o en su defecto no se usó
la cantidad suficiente de inhibidores.
La concentración mínima inhibitoria en microbiología, es la concentración más baja de
un antimicrobiano que inhibe el crecimiento de un microorganismo después de su incubación.
La concentración mínima inhibitoria es importante en diagnósticos de laboratorio para
confirmar la resistencia de microorganismos a un agente antimicrobiano y además para
monitorizar la actividad de los nuevos agentes antimicrobianos (Andrews, J. M 2001)
Para la comparación del patrón con las demás muestras, solo se observó la turbidez de ambos
(figura 1).
En esta práctica se obtuvo de manera experimental que la muestra problema se inhibe a partir
de la concentración número 4 (figura 2) siendo las concentraciones anteriores incapaces de
inhibir los microorganismos del medio.
Por otra parte, la sensibilidad da los antisépticos (figura 3) no permitió observar lo deseado
debido a que las concentraciones no fueron lo suficientemente altas para llevar a cabo la
inhibición.
Conclusiones
Los experimentos realizados con microorganismos se deben realizar bajo condiciones
controladas y sin focos de contaminación ya que por estos factores distintos experimentos
realizados no fueron viables.
Se logró determinar la concentración mínima inhibitoria de un desinfectante frente a un
microorganismo problema por el método de dilución en tubo.

Anexos

Figura 1.

Figura 1. Cantidad mínima inhibitoria. Figura #. Disposiciones de inhibidores.

Bibliografía
Andrews, J. M. Determination of minimum inhibitory concentrations. Journal of
Antimicrobial Chemotherapy 48 (Suppl. 1):5-16, (2001).
TERRIBLE LA BIBLIOGRAÍA