ANTIBIOGRAMA

Objetivos:

 Determinar patrones de sensibilidad y resistencia microbianos.

 Apoyar en la toma de decisiones terapéuticas.

Fundamento:

El estudio de la sensibilidad de una bacteria ante un agente antimicrobiano es útil para el

establecimiento de un tratamiento y el conocimiento de los patrones de resistencia
adquiridos. Existen distintos métodos fenotípicos, bioquímicos y genéticos, de los cuales el
método fenotípico es el más utilizado.

Con el antibiograma se obtienen dos tipos de resultados: cualitativos, que indican si la

bacteria es sensible, intermedio o resistente, y cuantitativos que indican la concentración
mínima inhibitoria (CHI) o la dilución más baja de antimicrobiano que inhibe el crecimiento
bacteriano (ug/ml o mg/l). Se usa un inóculo estandarizado a una única o a diferentes
concentraciones de antibiótico.

Entre los métodos fenotípicos se encuentran principalmente dos técnicas:

 Técnica de dilución: usa medios líquidos (caldo) o sólido (agar). El medio estandarizado
es el agar Mueller Hinton.
 Técnica de difusión: usa discos de papel impregnados con una solución estándar sobre
un medio sólido. Además, otra técnica es el E-Test.

El antibiograma disco-placa basado en el trabajo de Bauer, Kirby y cols., es el método

recomendado por la National Committee for Clinical Laboratory Standards (NCCLS) para la
determinación de la sensibilidad bacteriana a antimicrobianos.

Materiales:

 Agar Mueller Hinton

 Hisopo
 Discos de papel impregnados con diluciones de antibiótico.
 Escala Mac Farland
 Cepa del microorganismo

Procedimiento:

1. Realizar una suspensión bacteriana, ajustando la concentración del microorganismo de

acuerdo a 0,5 de la escala de Mac farland.
2. Inocular el microorganismo en una caja Petri con el agar Mueller Hinton.
3. Depositar los discos de papel secante impregnados con diferentes antibióticos. El
antibiótico difundirá en el agar en el momento que el disco tiene contacto con la
superficie húmeda del mismo.
4. El antibiótico difundirá radialmente a través del espesor del agar a partir del disco,
formándose un gradiente de concentración en el lapso de 18 a 24 horas.
Resultados esperados:

Una vez transcurrido el período de tiempo necesario, se podrá observar un halo de inhibición
alrededor de los discos. La concentración mínima inhibitoria se refleja como la concentración
de antibiótico en la interface entra las bacterias en crecimiento y bacterias inhibidas.

 Halos pequeños se relacionan con valores altos de CMI (resistentes)

 Halos grandes se relacionan con valores bajos de CMI (sensibles)

Este método no permite la lectura directa del valor de la CMI. Sin embargo, existen diámetros
expresados en mm que tienen correspondencia entre la CMI y el diámetro del halo de
inhibición para cada antimicrobiano. El establecimiento de si un microorganismo es sensible,
intermedio o resistente, se basará en los puntos de corte en mm, dados por el NCLSI para cada
antibiótico en cada microorganismo de importancia médica.

Referencias bibliográficas:

1. Maye B. Prácticas de Laboratorio: Identificación bacteriana. Colombia: Facultad de

Medicina, UNC, Departamento de Microbiología; 2011.
2. Bernal M. Universidad Nacional de Colombia: Departamento de Microbiología.
(Online); 2014 (cited 2015 02 03. Available from: HYPERLINK
http://www.medicina.unal.edu.co/Departamentos/microbiología/Docs/W_IDENTIFICA
CIÓN_BACTERIANA%201%2014.pdf
3. http://www.medicina.unal.edu.co/Departamentos/microbiología/Docs/
W_IDENTIFICACIÓN_BACTERIANA%201%2014.pdf .