Práctica 11: Determinación de la sensibilidad a un agente microbiano.

Introducción
Uno de los objetivos de las pruebas de sensibilidad microbiana es predecir cuál
será el resultado de un tratamiento. En muchas ocasiones los resultados se
expresan, para un patógeno aislado y analizado, de forma cualitativa: como
“sensible”, “resistente” o “intermedio”. Otro de los objetivos de las pruebas es
obtener series históricas que permiten predecir el comportamiento de un
tratamiento cuando éste se hace de forma empírica.1
En la Imagen 1 se muestran algunos de los métodos utilizados para predecir la
sensibilidad microbiana.

Imagen 1. Métodos de sensibilidad microbiana

Una de las pruebas más comunes es la prueba de difusión en disco. “La prueba
de difusión en disco se basa en la capacidad de muchos agentes
antimicrobianos de difundir en el agar creando un gradiente continuo de
concentración. Si el disco que contiene el antibiótico se deposita sobre una placa
recién inoculada, se producirá la inhibición del crecimiento del microorganismo
analizado en un punto del gradiente y dará como resultado un área concéntrica
al disco de inhibición del crecimiento. Esta área, al ser proporcional a la CMI
permitirá la distinción de cepas sensibles, resistentes o intermedias” .1
La prueba de microdilución en placa es la prueba de determinación de CMI más
popular. Esta prueba consiste en valorar el crecimiento del microorganismo a
analizar en una serie de diluciones de caldo que contienen cantidades
decrecientes del antimicrobiano elegido. Después de una incubación de 20 h a
37°C se determina la capacidad de crecimiento de la bacteria en presencia del
antimicrobiano para valoración de la turbidez del medio. La CMI se define como
la máxima dilución de antimicrobiano en la que no hay crecimiento bacteriano .1
Resultados

Imagen 1. Prueba en disco

 Imagen 2. Prueba en disco al reverso
Análisis de resultados
Conclusión
A través de esta práctica identificamos el efecto antibacteriano de los fármacos
en un cultivo de bacterias, específicamente E.coli, al mismo tiempo
demostramos la utilidad de la prueba de sensibilidad antimicrobiana por difusión
en disco e identificamos la utilidad de las pruebas de sensibilidad a los
antimicrobianos en la clínica.

Cuestionario
1. ¿Cuál es la finalidad de las pruebas de susceptibilidad?
“El principal objetivo de las pruebas de susceptibilidad a antimicrobianos (PSA)
in vitro es el proporcionar una guía para el manejo terapéutico de las
enfermedades infecciosas a través de la sensibilidad o resistencia de bacterias
patógenas aerobias y anaerobias facultativas a diferentes compuestos
antimicrobianos”.2
2. ¿Qué significa sensibilidad y resistencia cuando se interpreta un
antibiograma?
“Sensible, si existe una buena probabilidad de éxito terapéutico en el caso de un
tratamiento a la dosìs habitual”.3
“Resistente, si la probabilidad de éxito terapéutico es nula o muy reducida.
No es de esperar ningún efecto terapéutico sea cual fuere el tipo de
tratamiento”.3

3. ¿En qué casos las pruebas de susceptibilidad requerirían de medios de

cultivos distintos al de Mueller Hinton?
“Usualmente se utiliza el agar de Mueller-Hinton en las pruebas de sensibilidad
de microorganismos aeróbicos de rápido crecimiento. Cuando se trata de
estreptococos u otros microorganismos exigentes, se le añade al Mueller-Hinton,
5% de sangre desfibrinada. De los métodos existentes, el más popular es el del
disco de papel. La variante más utilizada de este método es la de Kirby Bauer, la
cual consiste en utilizar una sola concentración de antibiótico y medir el tamaño
de la zona de inhibición”.4
Bibliografía
1. Cristina Vázquez, Mariana. Pruebas de sensibilidad a agentes microbianos.
[Internet]. 2009. [citado 20 noviembre 2017]. Disponible en:
https://mariacristinavasquez.files.wordpress.com/2009/07/unidad-2-
8antibiograma4.pdf
2. CONDA. Pruebas para susceptibilidad de bacterias a antibióticos (psa).
[Internet]. [citado 24 noviembre 2017]. Disponible en:
https://www.condalab.com/pdf/Antibiotic_Susceptability_Test_esp_new.pdf
3. Sin autor. El antibiograma. [Internet]. [citado 24 noviembre 2017]. Disponible
en:
http://www.microinmuno.qb.fcen.uba.ar/SeminarioAntibioticos.htm
4. Pedrique de Aulacio, Magaly. Determinación de la sensibilidad de las
bacterias a los antibióticos (antibiograma). [Internet]. 2002. [citado 24 noviembre
2017]. Disponible en:
http://www.ucv.ve/fileadmin/user_upload/facultad_farmacia/catedraMicro/10_Anti
biograma.pdf