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CÓDIGO: FO-DOC-112

UNIVERSIDAD DE LOS LLANOS


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PROCESO GESTION DE APOYO A LA ACADEMIA FECHA: 02/09/2016
FORMATO GUÍA PARA PRÁCTICAS DE LABORATORIO VIGENCIA: 2016

LABORATORIO DE BIOLOGÍA
UNIDAD ACADEMICA: MVZ
CURSO: Biología
PRACTICA N.º 10: Extracción de ADN

1. OBJETIVOS
 Distinguir la estructura y función de los ácidos nucleicos.
 Conocer los experimentos que determinaron que el ADN, es el material genético.

2. CONSULTA PREVIA
 ¿Cómo se compone un nucleótido?
 ¿En que difieren el ADN y el ARN?
 ¿Cuáles fueron los antecedentes científicos que permitieron identificar que el ADN es el responsable de
las características de los organismos?
 ¿Por qué el colorante básico se puede asociar al ADN
 ¿Por qué el alcohol del 96% permite separar el DNA de los demás componentes del filtrado?

3. FUNDAMENTO TEORICO

Los ácidos nucléicos reciben este nombre porque fueron los primeros que se descubrieron en el núcleo de las
células; se trata de moléculas orgánicas gigantes que contienen carbono, nitrógeno, hidrógeno, oxígeno y
fósforo. Los ácidos nucléicos son de dos tipos: el primero, el ácido desoxirribonucléico (ADN), constituye el
material genético dentro de la célula. Cada gen es un segmento de una molécula de ADN. Nuestros genes
determinan los rasgos que heredaremos y, que mediante el control de las síntesis de proteínas, regulan las
actividades que tienen lugar en nuestras células a lo largo de la vida y, el segundo el ácido ribonucleico (ARN).

La molécula de ADN es lineal sin ramificaciones, forma hebras largas, está formada por dos cadenas de
polinucleótidos enrolladas alrededor del mismo eje, comúnmente conocida como doble hélice con giro a la
derecha, cada una de ellas está formada por los fosfatos al exterior en contacto con el medio acuoso, éstos se
unen en el C5 y C3 de un azúcar de cinco átomos de carbono llamado desoxirribosa se une a cada base en el
ADN. Las bases púricas y pirimídicas se enlazan en el extremo opuesto del azúcar; las cuatro bases son:
Adenina (A), Guanina (G), Tiamina (T) y Citosina(C). La adenina y la guanina son bases grandes de anillos
dobles llamadas purinas; la timina y la citosina son bases más pequeñas de un solo anillo denominadas
pirimidinas; se sitúan en la parte interna de la molécula, quedando perpendicularmente al eje, se enlaza una
base púrica con una pirimídica por medio de puentes de hidrogeno, lo que le da mayor resistencia ala
desnaturalización. Las cadenas de ADN son antiparalelas, es decir siguen direcciones opuestas, una va en
sentido 5’ a 3’ y la opuesta en dirección 3’ a 5’ (Fig. 1).

ELABORADO POR: Dolly Gallego CARGO: Docente Catedrática FECHA: 19/03/2023


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Figura 1. Unión de las bases púricas y pirimídicas del ADN

Al enrollarse las cadenas, se forman dos surcos o hendiduras paralelos a los giros de la hélice, uno mayor que
el otro. En estos sitios las proteínas interactúan con los átomos de los nucleótidos y controlan la expresión de
genes específicos. La estructura mencionada se denomina configuración B, si las condiciones fisiológicas se
alteran, poca sal o hidratación elevada, la doble hélice cambia de forma y adquiere conformación A, C, D, E y Z.
La configuración B es la más estable y contiene por cada vuelta10 pares de bases, se observa in vivo. La
configuración A es la más torcida, tiene 11 pares de bases por cada vuelta, las bases están inclinadas 20
gradosde la perpendicular al eje de la hélice, fue la primera obtenida in vitro. La configuración C es
estrechamente espiral, compacta, tiene 9 1/3 pares de bases, la posición de los nucleótidos es diferente. La
configuración Z tiene un giro a la izquierda, el eje está en zigzag, es poco estable ya que diferentes partes de la
molécula quedan expuestas.

4. EQUIPOS, MATERIALES Y REACTIVOS

Equipos Materiales Sustancias y/o Reactivos


Cubreobjetos
Portaobjetos
Pipetas
1 Probeta 100 ml (Por grupo)
1 Probeta 50 ml (Por grupo) Alcohol de 96°
Microscopio
1 Varilla de vidrio (Por grupo) Cloruro sódico 2M
1 Mortero (Por grupo) Dodecilsulfato de sodio (SDS)
2 Beacker (250 ml y 500 ml)
Arena
Hígado
1 Trozos de gasa (Por grupo)

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5. PROCEDIMIENTO O METODOLOGÍA
 Triturar un fragmento pequeño de hígado de pollo en un mortero.
 Añadir arena para que al triturar se puedan romper las membranas y se liberen los núcleos sueltos.
 Añadir al triturado, 50 ml de agua destilada.
 Remover hasta hacer una especie de papilla o puré.
 Filtrar varias veces sobre una tela para separar los restos de tejidos que hayan quedado por romper.
 Medir el volumen del filtrado con una probeta.
 Añadir al filtrado un volumen igual de cloruro sódico 2M. Con esto se consigue producir el estallido de
los núcleos para que queden libres las fibras de cromatina.
 A continuación, se añade 1 g de SDS. Así quedará el ADN libre delas proteínas que tiene asociadas.
Añadir mediante una pipeta 50 ml de alcohol de 96°. Hay que hacerlo de forma que el alcohol resbale
por las paredes del vaso y se formen dos capas. En la interfase, precipita el ADN.
 Introducir una varilla de vidrio e ir removiendo en la misma dirección. Sobre la varilla se van adhiriendo
unas fibras blancas, visibles a simple vista, que son el resultado de la agrupación de muchas fibras de
ADN.

6. RESULTADOS
Elaborar una tabla comparativa entre ADN y ARN

7. BIBLIOGRAFIA
Luque, J.2003. Texto Ilustrado de Biología Celular e Ingeniería Genética. Madrid. Segunda edición. Editorial
Harcourt S. A.

Ondarza R. 2000. Biología moderna: la célula, bioquímica, genética y biología molecular, biología general.
México D.F. Décima edición. Editorial Trillas. Pág. 277

http://www.arrakis.es/~rfluengo/anucleico.html

http://www.explora.cl/otros/biotec/adn.html

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