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CÓDIGO: FO-DOC-112

UNIVERSIDAD DE LOS LLANOS


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PROCESO GESTION DE APOYO A LA ACADEMIA FECHA: 02/09/2016
FORMATO GUÍA PARA PRÁCTICAS DE LABORATORIO VIGENCIA: 2016

LABORATORIO DE BIOLOGÍA CELULAR

UNIDAD ACADEMICA: Programa de Medicina Veterinaria y Zootecnia.


CURSO: Biología general.
PRACTICA Nº 10: Reproducción celular

1. OBJETIVOS
 Observar y determinar cada una de las fases del ciclo mitótico, estableciendo su secuencia en
montajes, en fresco y micropreparados.
 Reconocer y describir los cambios citológicos relacionados con cada una de las fases mitóticas.
 Identificar los cromosomas y su posición dependiendo de la fase en la que se encuentra la
célula.

2. CONSULTA PREVIA - PREINFORME


 ¿Cuál es la importancia de mantener la dosis genética durante la mitosis?
 ¿Se pueden distinguir cromátidas hermanas en el período G0?
 ¿Por qué el endospermo de una semilla puede tener una dosis genética variable?
 Si ocurren anomalías en la repartición de los cromosomas durante la meiosis de gametos en
animales, ¿cuál es el efecto en la descendencia?

3. FUNDAMENTO TEÓRICO

Las células provienen de células preexistentes, y ello ocurre por el proceso de la reproducción.
Cada célula nueva recibe una serie completa de instrucciones genéticas, lo cual significa que el
genoma se replica fielmente en las células maternas y luego se distribuye en las células de la
progenie por procesos ordenados que se repiten en generaciones innumerables. Estos procesos se
verifican durante un ciclo celular y consiste en la replicación del DNA y la separación ordenada de
los cromosomas durante la mitosis. Además se deben sintetizar nuevas moléculas de todas clases
a medida que la célula progenitora crece y finalmente origina dos células hijas.

CICLO CELULAR

El ciclo celular consiste en un intervalo de biosíntesis y crecimiento activos, durante el cual la célula
duplica su masa y su contenido, seguido por un episodio relativamente breve de división nuclear, que
suele ir acompañado por la división del citoplasma y la formación de una nueva frontera o límite para
separar los núcleos y el citoplasma en un par de células hijas.

El ciclo celular está dividido en cuatro fases consecutivas: la fase M corresponde a la mitosis y las
fases G1, S y G2 constituyen el tiempo biosintéticamente activo de la interfase.

La replicación de DNA ocurre durante la fase S y está separada de la mitosis por la fase de
replicación G1 y la fase de post-replicación pre-mitótica G2 o tiempos vacíos.
ELABORADO POR: ACTUALIZADO POR: CARGO: FECHA:
Elizabeth Aya B. Karen Giselle Rodríguez C. Docentes FCBI Diciembre 2021
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La duración relativa de cada frase también varía, pero generalmente M es muy breve. La fase G1 es
la de duración más variable en diferentes tipos de células; incluso puede faltar en algunos ciclos
celulares.

MITOSIS

La mitosis es un proceso de división nuclear que consiste en una secuencia continua de eventos
dividida por conveniencia en cinco etapas: profase (pro: antes), metafase (meta: entre), anafase
(ana: atrás), telofase (telo: final) (Figura 1). Las características morfológicas principales de la mitosis
implican condensación cromosómica, formación del huso y alineamiento de los cromosomas en el
ecuador de este, separación de cromosomas hermanos replicados y desplazamiento de estos a los
polos opuestos de la célula y reorganización nuclear.

Figura 1. Etapas de la mitosis. Modificado de Biología web,


http://www.etitudela.com/profesores/rma/celula/04f7af9d590edee08/04f7af9d5f0dc0808/04f7af9d5f0dc3a0a/inde
x.html

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El primer signo visible de la mitosis es la condensación de los cromosomas lo cual marca el principio
de la profase. Los cromosomas continúan haciéndose más cortos y gruesos en toda esta etapa y en
un momento dado se tornan reconocibles individualmente. Aunque cada cromosoma se replica en la
interfase precedente, su naturaleza doble no es obvia al microscopio sino hasta alrededor de la mitad
de la profase. En este momento es posible ver que cada cromosoma está formado por dos
cromatides hermanas unidas en la región del centrómero. El núcleo empieza a desaparecer cuando
se condensan los cromosomas y se pierde completamente al final de la profase.

Cada centriolo del par original de la célula ha ensamblado un centriolo nuevo durante la interfase de
suerte que hay dos pares de tales organelos cuando comienza la mitosis. Durante la profase, cada
par de centriolos es rodeado por los otros componentes del centro mitótico (material pericentriolar,
centrosoma y áster), en el citoplasma adyacente al núcleo en un polo de la célula. Los microtubulos
del huso se polimerizan entre dos centros mitóticos, y el alargamiento de las fibras del huso conduce
a la separación de los dos centros mitóticos alrededor del perímetro nuclear. Los centros mitóticos se
sitúan en polos opuestos de la célula al final de la profase, con el huso entre ellos, pero permanecen
fuera del área nuclear hasta que la envoltura del núcleo se ha desensamblado completamente en la
prometafase.

La etapa de prometafase empieza con la destrucción total de la envoltura nuclear y con movimientos
erráticos de los cromosomas en el espacio nuclear. En la metafase cada cromosoma se alinea en el
ecuador del huso, en una orientación tal que los centrómeros de cada par de cromatides hermanas se
colocan opuestos a los polos de la célula. Para este momento las fibras cromosómicas se han
adherido a cada centrómero y todo está listo para la separación precisa de las cromatides hermanas
y su emigración a los polos opuestos.

La anafase inicia cuando las cromatides hermanas de cada cromosoma replicado son atraídas a los
polos opuestos de la célula, después de sus separación cada cromatide se convierte en un
cromosoma completamente maduro que actúa independientemente de su hermano. Durante el
movimiento anafasico cada cromosoma es atraído al polo por las fibras cromosómicas del huso
adheridas al centrómero.

Algunos minutos después de la separación en la anafase, las dos series de cromosomas se


ensamblan en núcleos separados a medida que se forma una envoltura nuclear alrededor de cada
serie en la telofase. En esta etapa final se ensamblan nuevos nucléolos y se consolida la envoltura
nuclear, el huso desaparece poco a poco y los cromosomas se desdoblan y gradualmente asumen el
aspecto extendido que tenían en la interfase.

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4. EQUIPOS, MATERIALES Y REACTIVOS
Equipos Materiales Sustancias y/o Reactivos
 Microscopio Biológicos:
 Cebolla cabezona con raiz  Solución de aceto-carmin
 Ácido clorhídrico
Vidrería y otros:
 Láminas preparadas de raíz
de cebolla
 Láminas portaobjetos
 Láminas cubreobjetos
 Cuchilla o navaja
 Aguja o alfiler
 Vidrios de reloj
 Pinzas de madera
 Mechero

5. PROCEDIMIENTO O METODOLOGÍA

Observación de mitosis en las raíces de cebolla

Los bulbos de cebolla producen raíces si se son colocadas en agua durante varios días. Ocho días
antes de la práctica, toma una cebolla cabezona fresca, elimine las raíces secas que se encuentran
en la base del bulbo. Coloque la raíz en la boca de un vaso de precipitado o un frasco de boca ancha,
que contiene agua suficiente como para permitir que esta haga contacto con la base de la cebolla.

Envuelva el recipiente en papel negro, colóquelo en la semi oscuridad y a temperatura ambiente.


Mantenga la base de la cebolla siempre húmeda. Observe cuando aparezcan nuevas raíces.

Cuando las raíces lleguen a una longitud de 2.5cm. Pueden ser utilizadas para el estudio de mitosis.
Las células cercanas a la terminación de las raíces se están dividiendo activamente y son las que
vamos a estudiar.

Corte el último centímetro terminal de la raíz y utilícelo inmediatamente. Para examinar los procesos
mitóticos en las células de la raíz de cebolla, la raíz debe ser suavizada, de manera que las células
pueden ser separadas y sea posible ver los cromosomas. Ponga un poco de ácido clorhídrico 1molar
en un vidrio de reloj, dentro de este acido coloque las porciones terminales de la raíz de cebolla.

En unos pocos minutos la porción de raíz se sentirá suave cuando se toca con una aguja de
disección. Ahora utilice pinzas y agujas de disección para transferir la porción de raíz a una gota de
aceto-carmín sobre una lámina portaobjeto limpia.

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Con una navaja oxidada o un bisturí (que no sea de acero inoxidable), corte la porción de raíz en
piezas más pequeñas, el hierro reacciona con el aceto carmín para producir una mejor coloración.

Una vez que esto se ha logrado, coloque una lámina cubreobjetos limpio y caliente suavemente de
manera que no hierva. Coloque entonces la lámina boca abajo en un toalla de papel y presione
firmemente; esto aplastara y dispersara las células, haciéndolas más fácil de ser observadas en el
microscopio.

Examine con 10X y 40X. Identifique cada una de las fases de la mitosis. Anote las características
fundamentales de cada una. Esquematícelas en 40X.

Índice mitótico e índice de fases

Escoja 100 células y contabilice el número que se encuentran en cada fase. Calcule el índice mitótico
y el índice de fase utilizando las fórmulas a continuación.

Observación de micropreparados

Tome laminas con cortes longitudinales de raíces de cebolla, que fueron preparadas por un proceso
que envuelve la fijación, deshidratación en alcohol e incluso en parafina y después las raíces fueron
seccionadas en un micrótomo, teñidas y montadas en bálsamo del Canadá o en un medio similar.

6. RESULTADOS

Esquematice lo encontrado. Si es necesario realice más cuadros para lo observado. En las observaciones no
olvide colocar la fase en la que se encuentra y las características principales.

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Con los cálculos realizados complete el siguiente cuadro,

Fases Número de células Índice mitótico Índice de fase


Interfase
Profase
Metafase
Anafase
Telofase
Total

¿En qué se diferencian las láminas de los micropreparados de las láminas que usted ha preparado?

Cuidadosamente estudie las células en los diferentes estados de mitosis. ¿En cuál etapa esta la
mayoría de células?

¿Cuántos pares de cromosomas poseen las células de la cebolla? ¿Qué fase prevalece más en la
mitosis?

7. BIBLIOGRAFIA

 Campbell, N., & Reece, J. (2007). BIOLOGIA (Septima ed.). Madrid, España: Medica Panamericana S.A.

 Curtis, H., & Schnek, A. (2008). BIOLOGIA (Septima ed.). España: Medica Panamericana.

 Karp, G. (2009). Biologia Celular y Molecular (Quinta edición ed.). Mexico: The McGraw Hill Companies

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