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PROCESO GESTION DE APOYO A LA ACADEMIA FECHA: 02/09/2016

FORMATO GUÍA PARA PRÁCTICAS DE LABORATORIO VIGENCIA: 2016

LABORATORIO DE BIOLOGÍA

UNIDAD ACADEMICA: INGENIERIA AMBIENTAL

CURSO: BIOLOGÍA GENERAL Y LABORATORIOS
PRACTICA Nº 6: DIVISIÓN CELULAR

1. OBJETIVOS
• Observar y determinar cada una de las fases del ciclo mitótico, estableciendo su secuencia en montajes en
fresco y micro-preparados.
• Reconocer y describir los cambios citológicos relacionados con cada una de las fases de la mitosis.

2. FUNDAMENTO TEORICO
Las células provienen de células preexistentes y ello ocurre por el proceso de la reproducción. Cada célula
nueva recibe una serie completa de instrucciones genéticas, lo cual significa que el genoma se replica fielmente
en las células maternas y luego se distribuye en las células de la progenie por procesos ordenados que se
repiten en generaciones innumerables. Estos procesos se verifican durante un ciclo celular y consisten en la
replicación del DNA y la separación de los cromosomas durante la mitosis. Además, se deben sintetizar nuevas
moléculas de todas clases a medida que la célula progenitora crece y finalmente origina dos células hijas.

CICLO CELULAR
El ciclo celular consiste en un intervalo de biosíntesis y crecimiento activos, durante el cual la célula duplica su
masa y su contenido, seguido por un episodio relativamente breve de división nuclear, que suele ir acompañado
por la división del citoplasma y la formación de una nueva frontera límite para separar los núcleos y el
citoplasma en un par de células hijas.
El ciclo celular está dividido en cuatro fases consecutivas: La fase M corresponde a la Mitosis y las fases G1,
S y G2 constituyen el tiempo biosintéticamente activo de la interfase.
 Figura 1. Etapas del ciclo celular en células eucariotas
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La replicación del DNA ocurre durante la fase S y está separada de la mitosis por la fase de pre-replicación G1 y
la fase de post-replicación preitótica G2 o tiempos vacíos. La duración relativa de cada fase también varía, pero
generalmente M es muy breve. La fase G1 es la duración más variable en diferentes tipos de células; incluso
puede faltar en algunos ciclos celulares.

MITOSIS
Es un proceso de división nuclear que consiste en una secuencia contínua de eventos dividida por conveniencia
en cinco etapas: profase (pro: antes), metafase (met: entre), anafase (ana: atrás), y telofase (telo: final). Las
características morfológicas principales de la mitosis implican condensación cromosómica, formación del huso y
alineación de los cromosomas en el ecuador de este, separación de cromosomas hermanos replicados y
desplazamiento de estos a los polos opuestos de la célula y reorganización nuclear.

El primer signo visible de la mitosis es la condensación de los cromosomas, lo cual marca el principio de la
profase. Los cromosomas continúan haciéndose más cortos y gruesos en toda esa etapa y en un momento dado
se tornan reconocibles individualmente. Aunque cada cromosoma se replica en la interfase precedente, su
naturaleza doble no es obvia al microscopio sino hasta alrededor de la mitad de la profase. En este momento es
posible ver que cada cromosoma está formado por dos cromátides hermanas unidad en la región del
centrómero. El núcleo empieza a desaparecer cuando se condensan los cromosomas y se pierde
completamente al final de la profase.

Cada centriolo del par original de la célula ha ensamblado un centriolo nuevo durante la interfase, de suerte que
hay dos pares de tales organelos cuando comienza la mitosis. Durante la profase, cada par de centriolos es
rodeado por los otros componentes del centro mitótico (material pericentriolar, centrosoma y áster) en el
citoplasma adyacente al núcleo en un polo de la célula. Los microtúbulos del huso se polimerizan entre los dos
centros mitóticos y el alargamiento de las fibras del huso conduce a la separación de los dos centros mitóticos
alrededor del perímetro nuclear. Los centros mitóticos se sitúan en polos opuestos de la célula al final de la
profase, con el huso entre ellos, pero permanecen fuera del área nuclear hasta que la envoltura del núcleo se ha
desensamblado completamente en la prometafase.

La etapa de prometafase empieza con la destrucción total de la envoltura nuclear y con movimientos erráticos
de los cromosomas en el espacio nuclear. En la metafase cada cromosoma se alinea en el ecuador del huso, en
una orienación tal que los centrómeros de cada par de cromatidas hermanas se colocan opuestos a los polos de
la célula. Para este momento las fibras cromosómicas se han adherido a cada centrómero y todo está listo para
la separación precisa de las cromátidas hermanas y su emigración a los polos opuestos.
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Figura 2. Etapas que caracterizan la mitosis

La anafase inicia cuando las cromátidas hermanas de cada cromosoma replicando son atraídas a los polos
opuestas de la célula. Después de su separación cada cromatide se convierte en un cromosoma completamente
maduro que actúa independientemente de su hermano. Durante el movimiento anafásico cada cromosoma es
atraído al polo por las fibras cromosomas del huso adheridas al centrómero.

Figura 3. Diferencias a nivel de la citocinesis entre células animales y vegetales.

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3. EQUIPOS, MATERIALES Y REACTIVOS

Equipos Materiales Sustancias y/o Reactivos

Microscopio binocular Biológico: Meristemo Solución de aceto –

primario radicular (Raíces de
cebolla) carmín Ácido clorhídrico

Vidriería y otros:
Vidrios Reloj
Laminas porta y cubre
objetos Pinza metálica
Bisturí u hojas de bisturí

4. PROCEDIMIENTO O METODOLOGÍA
Con dos semanas de anticipación a la práctica de laboratorio, ponga un bulbo de cebolla cabezona a germinar.
Tome una cebolla cabezona fresca, elimine las raíces secas que se encuentran en la base del bulbo:

• Coloque la raíz en la boca de un recipiente que contenga agua suficiente como para permitir que haga
contacto con la base de la cebolla.

• Mantenga la base de la cebolla siempre húmeda. Observe cuando aparezcan nuevas raíces.

Las raíces que se formen serán la materia prima para el laboratorio puesto que en el ápice de estas, se
encuentra un tejido conocido como meristemo radicular. Las células meristemáticas se caracterizan por su alto
índice mitótico ya que la función de este tejido es dividirse continuamente para producir células indiferenciadas
que posteriormente se transformarán en los otros tejidos que la planta necesite.

Figura 4. Corte y Obtención de la muestra de raíz

Las células cercanas a la terminación de las raíces se están dividiendo activamente y son las que
vamos a estudiar.
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PROCEDIMIENTO

1. Corte el último centímetro terminal de la raíz y utilícelo inmediatamente.

2. Ponga un poco de ácido clorhídrico, 1 molar en un vidrio de reloj, dentro de este acido coloque las
porciones terminales de la raíz de cebolla. (Para examinar los procesos mitóticos en las células de
la raíz de la cebolla, la raíz debe ser suavizada de manera que las células pueden ser separadas y
sea posible ver los cromosomas.)
 3. En unos pocos minutos la porción de raíz se sentirá suave cuando se toca con aguja de disección.
4. Ahora utilice pinzas y agujas de disección para transferir la porción de raíz a una gota de aceto –
carmín sobre una lámina porta – objeto limpia.
5. Con un bisturí corte la porción de raíz en piezas pequeñas, el hierro reacciona en el aceto – carmín
para producir una mejor coloración.
6. Una vez que esto se ha logrado, coloque una lámina cubre – objeto limpia y caliente suavemente
de manera que no hierva.
7. Coloque entonces la lámina boca bajo en una toalla de papel y presione sobre ella firmemente, esto
aplastara y dispersara las células haciéndolas más fácil de ser observadas en el microscopio. 8.
Observe al microscopio en todos los aumentos.
9. Identifique cada una de las fases de la mitosis
10. Observe cuidadosamente las células meristemáticas. Fíjese que estas se distinguen por tener un
tamaño pequeño, una forma relativamente cuadrada, núcleo central y relativamente grande. La
mayoría de ellas se encuentran en algún estado de la mitosis. Observe la diferencia entre núcleos
en estado de interfase y células en estado inicial de mitosis (profase). Tome registros fotográficos.
11. Observe detenidamente las células meristemáticas para identificar los diferentes estados de la
mitosis. Diferencie los estados de profase, metafase, anafase y telofase. Tome registros
fotográficos.
12. Observe la formación de la placa celular durante la citocinesis. ¿Cómo diferencia la telofase de la
citocinesis?

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Figura 5. Observacion al microscopio
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5. CUESTIONARIO
• ¿Cómo son morfológicamente los cromosomas?
• ¿Qué es y que función cumple el centrómero?
• La citocinesis difiere en algunos aspectos en las células de las plantas y los animales. ¿Cuáles son las
diferencias encontradas respecto de la citocinesis en estos dos tipos de células?

6. BIBLIOGRAFIA
Campbell, N., & Reece, J. (2007). BIOLOGIA (Septima ed.). Madrid, España: Medica Panamericana S.A.
Curtis, H., & Schnek, A. (2008). BIOLOGIA (Septima ed.). España: Medica Panamericana.

Karp, G. (2009). BIOLOGIA CELULAR Y MOLECULAR (Quinta edición ed.). Mexico: The McGraw Hill
Companies.

Taiz, L., & Zeiger, E. (2007). FISOLOGIA VEGETAL. Universitat Jaume.

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