CÓDIGO: FO-DOC-112

UNIVERSIDAD DE LOS LLANOS

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FORMATO GUÍA PARA PRÁCTICAS DE LABORATORIO VIGENCIA: 2016

LABORATORIO DE BIOLOGÍA
UNIDAD ACADEMICA: MVZ
CURSO: Biología
PRACTICA Nº 05: Composición química y celular de la sangre

1. OBJETIVOS
 Conocer e identificar los diferentes elementos componentes de la sangre.
 Establecer diferencias morfológicas (tamaño y forma) del componente celular en la sangre.

2. CONSULTA PREVIA
 Cite siete funciones de la sangre en el ser humano
 Establezca la diferencia entre plasma y suero
 Que es la oxihemoglobina. ¿Qué importancia funcional tiene?
 ¿Dónde y cómo se forman los glóbulos rojos?
 ¿Por qué motivo, a grandes altitudes aumenta el número de glóbulos rojos circulantes?
 Establezca las principales diferencias estructurales y funcionales entre glóbulos rojos y blancos.
 Describa brevemente las reacciones sucesivas del mecanismo de la coagulación. ¿Por qué no se
coagula la sangre dentro de los vasos?

3. FUNDAMENTO TEORICO
En todos los animales, excepto en aquellos de tamaño muy pequeño o con un plan corporal extremadamente
simple, la sangre es la “autopista” química que conecta a la multitud de células que forman el cuerpo del
organismo; es el medio por el cual las moléculas de nutrientes procesadas por digestión y las moléculas de
oxígeno incorporados por la respiración son enviadas a las células individuales. La sangre también se lleva los
materiales de desecho, incluyendo el dióxido de carbono y la urea, producidos por las células en el curso de sus
actividades metabólicas. Como es sabido, el dióxido de carbono recogido por la sangre abandona el cuerpo por
difusión a través de las superficies respiratorias. La sangre también transporta otras sustancias importantes,
tales como hormonas, enzimas y anticuerpos y tiene entre sus constituyentes básicos a las células que
defienden el cuerpo contra los invasores extraños.

Aproximadamente el 60% de la sangre es un líquido que forma el componente acelular llamado plasma que es
90-92% agua aproximadamente. El otro 40% de la sangre que no es plasma está constituido por los glóbulos
rojos, los glóbulos blancos y las plaquetas.

La sangre se clasifica como un tipo de tejido conectivo especializado.

PLASMA

Con excepción del oxígeno y el dióxido de carbono transportados por la hemoglobina, la mayoría de las
moléculas necesitas por las células individuales, así como los productos de desecho de estas células, son
arrastrados por el tránsito denso del torrente sanguíneo, disueltas en el plasma. Además del agua, el plasma
contiene moléculas de proteína, conocidas como proteínas plasmáticas, que funcionan en el propio torrente
sanguíneo y para transportar grasas, colesterol y moléculas insolubles.

Las proteínas plasmáticas constituyen aproximadamente el 7-8% del plasma y son de tres tipos principales:
 Albúmina: Cuya función principal es mantener el alto potencial osmótico del plasma en relación con el
líquido intersticial (Osmoreguladora).
 Fibrinógeno: Es el responsable de la coagulación sanguínea.

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 Globulina: la más importante, las inmunoglobulinas o anticuerpos formados con respuestas a
antígenos.

FRACCIÓN CELULAR

Una pequeña fracción (1-2%) del plasma está constituida por iones tales como Na + y K+, azúcares como
glucosa, hormonas, enzimas, aminoácidos libres y otros electrolitos.
Como ya se dijo el componente celular de la sangre es aproximadamente el 40% de esta. Las células
sanguíneas están involucradas en tres funciones principales:

1. Transporte del oxígeno y del CO2

2. Defensa del organismo
3. Proceso de coagulación

 Glóbulos rojos

Los glóbulos rojos, hematíes o eritrocitos están especializados para el transporte de oxígeno, son discos
bicóncavos de aproximadamente 7-8 µ. Cuando madura el glóbulo rojo de un mamífero, expulsa su núcleo y
mitocondrias y otras estructuras celulares se disuelven. Casi todo el volumen del glóbulo rojo maduro está lleno
de hemoglobina, proteína encargada del transporte de O 2/CO2, alrededor de 265 millones de moléculas por
célula en los seres humanos.

En vertebrados inferiores, como peces y anfibios, los eritrocitos tienen forma esférica y son nucleados.

Hay aproximadamente 5 millones de glóbulos rojos por milímetro cúbico de sangre. Aproximadamente 25.000
millones en el cuerpo de una persona adulta. La producción de glóbulos rojos se da a nivel de médula ósea y
recibe el nombre de hematopoyesis.

 Glóbulos blancos

Por cada mil glóbulos blancos en el torrente sanguíneo de los seres humanos hay uno o dos glóbulos blancos o
leucocitos totalizando 6000 a 9000 por milímetro cúbico de sangre. Estas células son casi incoloras, más
grandes que los glóbulos rojos, no tienen hemoglobina y tienen un núcleo.

La función principal es la defensa del organismo contra invasores tales como virus, bacterias y otras partículas
extrañas.

Granulocitos: Glóbulos blancos con gránulos citoplasmáticos.

1. Neutrófilos: Son los más numerosos, constituyendo entre el 50 y 70% de los glóbulos blancos.
Aparecen durante las reacciones de inflamación.
2. Basófilos y Eosinófilos: Son también fagocíticos. Los eosinófilos pueden aparecer durante casos de
parasitismo y los basófilos en reacciones de hipersensibilidad como alergias y choques anafilácticos.
Eosinófilos, gránulos rojos.
Basófilos, gránulos azules, que contienen histamina (un vasodilatador).

Agranulocitos: Sin gránulos en el citoplasma.

1. Linfocitos: Principalmente B y T. Producen anticuerpos (inmunoglobulinas) como respuesta a antígenos;
especialmente en infecciones virales. Son uninucleados y pequeños.
2. Monocitos: Son fagocitarios. Salen de los vasos sanguíneos a tejidos infectados y necrosados. Allí
reciben el nombre de macrófagos. Son uninucleados y más grandes que los linfocitos.

 Plaquetas

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Las plaquetas, llamadas así porque se asemejan a placas pequeñas, son discos incoloros ovales, o de forma
irregular, más pequeños que los glóbulos rojos (de unos 3 micrómetros de diámetro). Las plaquetas son
fragmentos citoplasmáticos, limitados por membrana, de células inusualmente grandes, los megacariocitos, que
se encuentran en la médula ósea. Son en efecto pequeñas bolsas de productos químicos que desempeñan un
papel esencial al iniciar la coagulación de la sangre y obturar roturas de los vasos sanguíneos.

Figura 1. Composición sanguínea y celular de la sangre.

4. EQUIPOS, MATERIALES Y REACTIVOS

Equipos Materiales Sustancias y/o Reactivos

Microscopio Binocular Biológicos: Colorante de Wright
Centrifuga Muestras sanguíneas Glicerol 0.6 M
Contador diferencial de Vidriería y otros: Etanol 0.6 M
glóbulos Agua destilada
Láminas porta-objeto Alcohol al 70%
Láminas cubre-objeto
2 Goteros 1 ml (Por grupo)
3 Goteros 3 ml (Por grupo)
2 Cajas de Petri (Por grupo)
Lancetas desechables estériles
3 tubos de ensayo (Por grupo)
Gradillas
Puentes de coloración
2 tubos de EDTA (Etilen-diamino-
tetra-acetato)
Micropreparados de sangre de aves

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o anfibios

PROCEDIMIENTO O METODOLOGÍA PROCEDIMIENTO

I. FRACCION CELULAR (CÉLULAS SANGUÍNEAS)

Procedimiento de acuerdo a las indicaciones dadas por su profesor, realice un montaje de sangre siguiendo las
siguientes pautas:

1. Obtenga 5 cc de sangre de un estudiante donante (de acuerdo con las instrucciones dadas por su
profesor)
2. Lleve a la centrífuga la muestra de sangre y colóquela a 5000 rpm, durante 15 minutos
3. Pasado este tiempo, saque la muestra de la centrífuga y observará que en el tubo aparecen 3 estratos
o capas diferentes.

Plasma
4. Retire con extremo cuidado y con una pipeta Pasteur, la primera capa que como usted observará es de
color amarillo tranparente. Esta capa corresponde al plasma.

Glóbulos blancos
5. Tome una muestra de la capa dos (glóbulos blancos), color grisáceo
6. Coloque una pequeña gota en uno de los extremos de una lámina porta-objetos limpia
7. Con una lámina cubre-objeto colocada en ángulo de 45° en el borde de la lámina porta-objeto deslice
suavemente la gota de sangre hasta el extremo opuesto
8. Deje secar por tres minutos y agregue una gota de colorante Wright. Deje actuar por cinco minutos.
9. Lave el exceso de colorante con un chorro de agua suave
10. Proceda a observar con objetivo de inmersión.
Nota: Utilizando el contador diferencial de glóbulos identifique el número de tipos de glóbulos blanco que
observa en su muestra sanguínea (Realice una tabla con los datos obtenidos).

Eritrocitos
11. Tome una muestra de la capa 3 (eritrocitos) y repita el procedimiento realizado con la muestra de la
capa 2
12. Realice los diferentes esquemas para cada una de las muestras obtenidas ayudado de los diferentes
textos de histología
Nota: Obtenga una muestra de sangre de un vertebrado como anfibios o aves (de ser posible establezca
diferencias).

II. DIÁLISIS EN CÉLULAS ANIMALES

En soluciones hipertónicas de glicerol y etanol los eritrocitos pueden ser hemolizados, lo que se traduce como la
salida de hemoglobina a través de la membrana celular de los eritrocitos, cuando las propiedades de esta se
modifican. La hemolisis se puede reconocer por la aparición de una solución roja transparente en lugar de la
suspensión turbia característica de los glóbulos rojos.

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Para el siguiente experimento disponga de una pantalla de hemólisis de 20x20 cm, que posee una perforación
central atravesada por un hilo negro. Toda la pantalla está cubierta por papel blanco transparente. Tome tres
tubos de ensayo, numérelos y agregue a cada uno de ellos lo siguiente:

Tubo No. 1: 2ml de agua

Tubo No. 2: 2ml de glicerol 0.6 molar
Tubo No. 3: 2ml de etanol 0.6 molar

Usando sangre y una fuente luminosa realice estos experimentos haciendo un montaje como se indica a
continuación.

TUBO No.1
Agregue cuidadosamente dos gotas de sangre, evitando hacer contacto con las paredes del tubo. Mezcle
suavemente y anote el tiempo que marca su reloj a partir de este momento. Inmediatamente coloque el tubo
frente al hilo de la pantalla de hemólisis y mire a través de la solución. Cuando aparezca el hilo a través de la
solución, registre nuevamente el tiempo indicado en su reloj. El intervalo entre los dos tiempos, es el tiempo de
hemólisis producida por el agua.

TUBO No. 2 y 3
Para calcular el tiempo de hemolisis producido por el glicerol y etanol, repita en cada uno de los tubos y
respectivamente los pasos descritos para el tubo No. 1. Sin embargo, el tiempo de hemolisis corregido para las
dos sustancias será en cada caso el tiempo calculado para la solución menos el tiempo de hemolisis producido
por el agua.

BIBLIOGRAFÍA

 Curtis, H., & Schnek, A. (2008). BIOLOGIA (Septima ed.). España: Medica Panamericana.

 FAWCET, Don W. y RONALD P. JENSH. 1999. Compendio de Histología. Editorial McGraw-Hill.

Interamericana.

 Karp, G. (2009). BIOLOGIA CELULAR Y MOLECULAR (Quinta edición ed.). Mexico: The McGraw Hill
Companies.

 Meyer, D., & Harvey, J. (2000). EL LABORATORIO EN MEDICINA VETERINARIA (Segunda ed.).
Ecitorial Intermedica.

 Welsch, U. (2008). SOBOTTA WELSCH HISTOLOGIA (Segunda ed.). Alemania: Medica

Panamericana.

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