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CÓDIGO: FO-DOC-112

UNIVERSIDAD DE LOS LLANOS


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PROCESO GESTION DE APOYO A LA ACADEMIA FECHA: 02/09/2016
FORMATO GUÍA PARA PRÁCTICAS DE LABORATORIO VIGENCIA: 2016

LABORATORIO DE BIOLOGÍA
UNIDAD ACADEMICA: MVZ
CURSO: Biología
PRACTICA Nº 11: Mitosis

1. OBJETIVOS
 Observar y determinar cada una de las fases del ciclo mitótico, estableciendo su secuencia en montajes
en fresco y micro-preparados.
 Reconocer y describir los cambios citológicos relacionados con cada una de las fases de la mitosis.

2. CONSULTA PREVIA
¿Cuál es la importancia de mantener la dosis genética durante la mitosis?

3. FUNDAMENTO TEORICO
Las células provienen de células preexistentes y ello ocurre por el proceso de la reproducción. Cada célula
nueva recibe una serie completa de instrucciones genéticas, lo cual significa que el genoma se replica fielmente
en las células maternas y luego se distribuye en las células de la progenie por procesos ordenados que se
repiten en generaciones innumerables. Estos procesos se verifican durante un ciclo celular y consisten en la
replicación del DNA y la separación de los cromosomas durante la mitosis. Además, se deben sintetizar nuevas
moléculas de todas clases a medida que la célula progenitora crece y finalmente origina dos células hijas.

CICLO CELULAR
El ciclo celular consiste en un intervalo de biosíntesis y crecimiento activos, durante el cual la célula duplica su
masa y su contenido, seguido por un episodio relativamente breve de división nuclear, que suele ir acompañado
por la división del citoplasma y la formación de una nueva frontera límite para separar los núcleos y el
citoplasma en un par de células hijas.
El ciclo celular está dividido en cuatro fases consecutivas: La fase M corresponde a la Mitosis y las fases G1,
S y G2 constituyen el tiempo biosintéticamente activo de la interfase.

ELABORADO POR: Deyli Suta CARGO: Docente Catedrática FECHA: 19/03/2023


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Figura 1. Etapas del ciclo celular en células eucariotas

La replicación del DNA ocurre durante la fase S y está separada de la mitosis por la fase de pre-replicación G1
y la fase de post-replicación preitótica G2 o tiempos vacíos. La duración relativa de cada fase también varía,
pero generalmente M es muy breve. La fase G1 es la duración más variable en diferentes tipos de células;
incluso puede faltar en algunos ciclos celulares.

MITOSIS
Es un proceso de división nuclear que consiste en una secuencia contínua de eventos dividida por conveniencia
en cinco etapas: profase (pro: antes), metafase (met: entre), anafase (ana: atrás), y telofase (telo: final). Las
características morfológicas principales de la mitosis implican condensación cromosómica, formación del huso y
alineación de los cromosomas en el ecuador de este, separación de cromosomas hermanos replicados y
desplazamiento de estos a los polos opuestos de la célula y reorganización nuclear.

El primer signo visible de la mitosis es la condensación de los cromosomas, lo cual marca el principio de la
profase. Los cromosomas continúan haciéndose más cortos y gruesos en toda esa etapa y en un momento
dado se tornan reconocibles individualmente. Aunque cada cromosoma se replica en la interfase precedente, su
naturaleza doble no es obvia al microscopio sino hasta alrededor de la mitad de la profase. En este momento es
posible ver que cada cromosoma está formado por dos cromátides hermanas unidad en la región del
centrómero. El núcleo empieza a desaparecer cuando se condensan los cromosomas y se pierde
completamente al final de la profase.

Cada centriolo del par original de la célula ha ensamblado un centriolo nuevo durante la interfase, de suerte que
hay dos pares de tales organelos cuando comienza la mitosis. Durante la profase, cada par de centriolos es
rodeado por los otros componentes del centro mitótico (material pericentriolar, centrosoma y áster) en el
citoplasma adyacente al núcleo en un polo de la célula. Los microtúbulos del huso se polimerizan entre los dos
centros mitóticos y el alargamiento de las fibras del huso conduce a la separación de los dos centros mitóticos
alrededor del perímetro nuclear. Los centros mitóticos se sitúan en polos opuestos de la célula al final de la
profase, con el huso entre ellos, pero permanecen fuera del área nuclear hasta que la envoltura del núcleo se
ha desensamblado completamente en la prometafase.

La etapa de prometafase empieza con la destrucción total de la envoltura nuclear y con movimientos erráticos
de los cromosomas en el espacio nuclear. En la metafase cada cromosoma se alinea en el ecuador del huso,
en una orienación tal que los centrómeros de cada par de cromatidas hermanas se colocan opuestos a los
polos de la célula. Para este momento las fibras cromosómicas se han adherido a cada centrómero y todo está
listo para la separación precisa de las cromátidas hermanas y su emigración a los polos opuestos.

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Figura 2. Etapas que caracterizan la mitosis

La anafase inicia cuando las cromátidas hermanas de cada cromosoma replicando son atraídas a los polos
opuestas de la célula. Después de su separación cada cromatide se convierte en un cromosoma
completamente maduro que actúa independientemente de su hermano. Durante el movimiento anafásico cada
cromosoma es atraído al polo por las fibras cromosomas del huso adheridas al centrómero.

Figura 3. Diferencias a nivel de la citocinesis entre células animales y vegetales.

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4. EQUIPOS, MATERIALES Y REACTIVOS

Equipos Materiales Sustancias y/o Reactivos


Biológico: Meristemo primario
radicular (Raíces de cebolla)

Vidriería y otros:
HCL 1M
Microscopio binocular Laminas porta y cubre objetos
1 Vidrio Reloj (Por grupo) Acetorceina o
1 Pinza metálica (Por grupo) Acetocarmin
1 Agujas de disección (Por grupo)
1 Pinza de madera (Por grupo)
1 Mechero (Por grupo)
1 Mango de bisturí (Por grupo)
Micropreparados de mitosis

5. PROCEDIMIENTO O METODOLOGÍA

Con dos semanas de anticipación a la práctica de laboratorio, ponga un bulbo de cebolla cabezona a germinar.
Las raíces que se formen serán la materia prima para el laboratorio puesto que, en el ápice de estas, se
encuentra un tejido conocido como meristemo. Las células meristemáticas se caracterizan por su alto índice
mitótico ya que la función de este tejido es dividirse continuamente para producir células indiferenciadas que
posteriormente se transformarán en los otros tejidos que la planta necesite.

1. Corte aproximadamente 0.5 cm. de longitud de la raíz (desde la punta) y póngalos en un tubo de
ensayo con solución de HCl 1M durante 30 minutos aproximadamente. La finalidad de este paso es
ablandar el tejido para posteriormente poder aplastarlo en el portaobjetos. Si no se realiza este paso,
difícilmente podrá obtener una buena lámina en la cual pueda identificar las diferentes etapas de la
mitosis; así que de alguna manera el éxito de la práctica radica en este paso. Entre más tiempo deje el
meristemo en la solución ácida podrá obtener mejores láminas.

Figura 4. Corte y Obtención de la muestra de raíz

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2. Descarte la solución de HCl y en el mismo tubo ponga la cantidad necesaria de acetocarmín para cubrir
los meristemos radiculares. Déjelos en el colorante por aproximadamente 10 minutos.
3. Pase en varias ocasiones el tubo rápidamente por la llama de un mechero teniendo cuidado de que el
acetocarmín no vaya a entrar en ebullición.

4. Saque los meristemos de la solución de acetocarmín y póngalos sobre una lámina portaobjetos. Si la
raíz está muy larga, córtela con un bisturí para dejar sólo el extremo de la raíz que es el sitio donde se
encuentra el meristemo. Evite que su tejido se seque poniendo una gota de colorante.

5. Coloque encima una lámina cubreobjetos y ejerciendo presión con la parte plana del pulgar, aplaste la
raíz en un movimiento firme. Tenga cuidado de no remover la raíz después de haber hecho la
preparación. Si la remueve, será imposible observar con claridad las células.

6. Observe al microscopio. Identifique las diferentes etapas de la mitosis y realice los respectivos
esquemas.

Figura 5. Observacion al microscopio

NOTA
 Observe cuidadosamente las células meristemáticas. Fíjese que estas se distinguen por tener un
tamaño pequeño, una forma relativamente cuadrada, núcleo central y relativamente grande. La mayoría
de ellas se encuentran en algún estado de la mitosis. Observe la diferencia entre núcleos en estado de
interfase y células en estado inicial de mitosis (profase). Haga los respectivos esquemas.
 Observe detenidamente las células meristemáticas para identificar los diferentes estados de la mitosis.
Diferencie los estados de profase, metafase, anafase y telofase. Dibuje lo que observa.

 En un campo visual cuente las células que se encuentran en profase, metafase, anafase, telofase y
citocinesis. Presente sus datos en una tabla. Qué puede discutir al respecto.

 Observe la estructura del huso mitótico y de las cromátides hermanas. Haga los respectivos esquemas.

 Observe la formación de la placa celular durante la citocinesis. ¿Cómo diferencia la telofase de la


citocinesis?

OBSERVACION DE MICROPREPARADOS

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 Tome laminas con cortes longitudinales de raíces de cebolla, que fueron preparadas por un proceso
que envuelve la fijación, deshidratación en alcohol e incluso en parafina y después las raíces fueron
seccionadas en un micrótomo, teñidas y montadas en bálsamo.
 Cuidadosamente estudie las células en los diferentes estados de mitosis. ¿En cuál etapa esta la
mayoría de células?

6. BIBLIOGRAFIA
Campbell, N., & Reece, J. (2007). BIOLOGIA (Septima ed.). Madrid, España: Medica Panamericana S.A.
Curtis, H., & Schnek, A. (2008). BIOLOGIA (Septima ed.). España: Medica Panamericana.
Karp, G. (2009). BIOLOGIA CELULAR Y MOLECULAR (Quinta edición ed.). Mexico: The McGraw Hill
Companies.

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