UD 17: PRUEBAS DE VALORACION DE LA HEMOSTASIA PRIMARIA EN EL LABORATORIO.

1. TIEMPOS DE SANGRIA

Mide la habilidad de los pequeños vasos para responder a una lesión. La prueba representa una valoración
global y simultánea de los procesos de adhesión, agregación y liberación plaquetarias.

 Método de Duke: OREJA

o valor normal entre 1-4
 Método de Ivy: BRAZO CON ESFIGMOMANOMETRO
o valor normal entre 6-8 patologico + 10

Suele estar prolongado en:

 Estados trombocitopénicos.
 Enfermedad de Von Willebrand.
 Trombopatías.
 Después de la toma de aspirina.

2. PRUEBA DE LA TOLERANCIA A LA ASPIRINA

La aspirina prolonga el tiempo de sangría. Método: IVY, ingiere, IVY

Valor normal: normal alargamiento de hasta 4 minutos. No efectuar si el tiempo inicial supera los 6 minutos.

Interpretación de los resultados: muy aumentada en las trombocitopatías y en la enfermedad de Von

Willebrand.

3. PRUEBA DEL LAZO (RUMPER-LEED)

Fundamento: la fragilidad capilar se pone a prueba al someter al paciente a una presión intermedia entre la
presión sistólica y diastólica en un tiempo determinado.

Valor normal: hasta 5 petequias.

Interpretación semiológica: normalmente es negativa, aunque un pequeño número de personas normales

pueden presentar una leve positividad. Es francamente positiva en: trombocitopenia, fibrinogenopenia y
púrpura vascular. En estados hemofiloides es casi siempre negativa.

4. RECUENTO DE PLAQUETAS

Actualmente casi todos los recuentos se realizan de forma automática. El recuento manual en cámara queda
reducido a la comprobación de la cifra en trombocitopenias graves o en el caso de plaquetas gigantes.

5. ESTUDIO DE ADHESIVIDAD PLAQUETARIA IN VIVO (P. DE BORCHGREVINK)

En el curso de la medida del tiempo de sangría por el método de Ivy, las plaquetas son contadas a intervalos
regulares en la sangre que mana de la herida. Las medidas de las cifras obtenidas se comparan con el nº de
plaquetas en sangre capilar. La diferencia expresa la adhesividad plaquetaria.

El índice de adhesividad se expresa por la relación:

La normalidad se encuentra entre el 20 y 40%, está disminuida en la enfermedad de Von Willebrand,

tromboastenia de Glanzmann y a veces en afibrinogenemias congénitas.
 6. ESTUDIO DE LA ADHESIVIDAD PLAQUETARIA IN VITRO (P. DE SALZMANN)

Se realiza en función de la distinta capacidad que pueden presentar las plaquetas para adherirse a
superficies extrañas. Lo vemos pasando la sangre por esferas de vidrio.

Calculo:

Estos estudios de la adhesividad plaquetaria no son específicos de la adhesividad, pues se ven influidos
también por la agregación e, incluso por la formación de trombina.

7. ESTUDIO DE LA AGREGABILIDAD PLAQUETARIA

Obtenemos un PRP de sangre citratada con una cubeta transparente y una agitación continua por una
barrita de hierro sometida a un campo magnético. La cubeta es atravesada por un haz de luz y se comienza a
producir la agregación, esto hace que aumente la transmisión de luz a través de la cubeta y esto se recoge
gráficamente. Los agente agregantes son:

 Adenosin – difosfato (ADP)

 Colágena
 Araquidonato sódico
 Ristocetina
 Otros agentes: adrenalina y trombina en determinados estudios.

Interpretación del resultado:

 El ADP a 0,5 µmol/L da lugar normalmente a una onda primaria de agregación pequeña y reversible.
 A la concentración de 2 µmol/L puede existir una doble onda o una onda única irreversible.
 A 5 µmol/L la respuesta debe ser una onda única irreversible.
 La falta o reducción de la onda primaria significa un trastorno del mecanismo de agregación.
 La ausencia de respuestas irreversibles a concentraciones altas señala un defecto de la reacción de
liberación.

La respuesta a la colágena va precedida por un período de latencia de 30 a 60 seg y da lugar a una onda
única, intensa e irreversible. Las ondas débiles y lentas señala un defecto de la reacción de liberación.

La respuesta al araquidónico es en forma de onda única, intensa e irreversible.

La ristocetina induce aglutinación plaquetaria en presencia del factor von Willebrand (FvW). La reducción o
la ausencia de respuesta puede ser secundaría a un déficit importante de dicho factor o a un defecto de
glucoproteínas Ib-IX en la membrana plaquetaria.

8. VALORACIÓN DEL FACTOR CON WILLERBRAND (FvW)

El estudio del FvW requiere su valoración inmunológica (FvW: Ag) por ELISA o RIA, y la función cuantitativa
como cofactor de la ristocetina (FvW:Ri-CoF), así como la determinación funcional del factor VIII
(transportado por el FvW).

Valoración inmunológica (FvW:Ag) por ELISA: mediante un equipo comercial ELISA vWF( (Boehringer
Mannheim), que precisará también un plasma control calibrado para el FvW:Ag: Reference plasma 100%
( (Immuno AG).

Determinación cuantitativa del cofactor de la ristocetina: Se basa en que las plaquetas lavadas, en presencia
de ristocetina y de plasma que contenga FvW, aglutinan tanto más intensamente cuanto más elevada sea la
concentración de este último. Requiere un agregómetro para registrar gráficamente la agregación inducida
por la ristocetina frente a distintas diluciones de un plasma control y un plasma problema.
 9. RETRACCIÓN DEL COÁGULO

Cuando la sangre coagula de forma espontánea el coágulo inicial engloba a todos los elementos de la sangre.
Con el tiempo aparece una separación en dos fases en la que vemos un coágulo flotando en el suero del
coagulo inicial. La tromboastenina, es la responsable de la retracción del coágulo.

Valores de referencia:

Lo normal es una retracción claramente diferenciada en el tiempo anterior. Indica un buen funcionalismo
plaquetario.

 Existe una falsa hiperretractibilidad en: Anemia e hipofibrinemia.

 Existe una falsa hiporretractibilidad en poliglobulias intensas.

La aparición de un coágulo escasamente retráctil o no retráctil indica trombopenia por debajo de 100.000
plaquetas/mm3 o tromboastenia de Glanzmann.

La presencia de coágulo con bordes irregulares con abundantes hematíes sedimentados en el fondo del
tubo, y en el que se observa una lluvia de hematíes hacia el fondo, indica que existe una fibrinolisis
importante.