UNIVERSIDAD AUTÓNOMA METROPOLITANA UNIDAD XOCHIMILCO

DIVISIÓN DE CIENCIAS BIOLÓGICAS Y DE LA SALUD

DEPARTAMENTO DE SISTEMAS BIOLÓGICOS

LICENCIATURA EN QUÍMICA FARMACÉUTICO BIOLÓGICA (QFB)

MÓDULO 7. LOS FÁRMACOS COMO MODIFICADORES DE FUNCIONES

BIOLÓGICAS

PRÁCTICA: UNIÓN A PROTEÍNAS EN LA DISTRIBUCIÓN DE LOS

FÁRMACOS

DOCENTES: GERARDO GARCÍA SANCHEZ

BEATRIZ GODÍNEZ CHAPARRO

EQUIPO 2A
NOMBRES DE LOS INTEGRANTES:

GARCÍA CRUZ ADOLFO

GONZÁLEZ SAIZ LUIS ENRIQUE
PEÑA LUCAS YAEL

TRIMESTRE VII

Marco teórico:
Tras la absorción de un fármaco y su paso al torrente sanguíneo este circula
rápidamente por todo el organismo. A medida que la sangre recircula, el fármaco
pasa desde el torrente sanguíneo a los tejidos del cuerpo Una vez absorbido el
fármaco, su distribución no suele ser uniforme en todo el organismo. Los fármacos
hidrosolubles, como el atenolol, tienden a quedarse en la sangre y en el espacio
intersticial. Los fármacos liposolubles, como el clorazepato, usado para combatir la
ansiedad, tienden a concentrarse en los tejidos grasos. Otros fármacos se
concentran en gran medida en una pequeña parte del cuerpo únicamente (por
ejemplo, el yodo se concentra sobre todo en la glándula tiroidea), debido a que los
tejidos en esa zona ejercen una especial atracción sobre el fármaco (afinidad) y
tienen una especial capacidad para retenerlo.

Los fármacos penetran en diferentes tejidos a distinta velocidad, dependiendo de

su habilidad para atravesar las membranas.

Algunos fármacos abandonan el torrente sanguíneo de forma muy lenta, dado que
se unen con firmeza a las proteínas que circulan por la sangre. Otros abandonan
rápidamente la sangre y entran en los tejidos porque su unión con las proteínas
sanguíneas es menos firme. Algunas o prácticamente todas las moléculas de un
fármaco que se encuentran en el torrente sanguíneo pueden unirse a las proteínas
sanguíneas. La parte que se une a las proteínas es generalmente inactiva.
Mientras la parte no unida se distribuye por los tejidos y disminuye su
concentración en el torrente sanguíneo, las proteínas sanguíneas liberarán
gradualmente el fármaco fijado en ellas. De ese modo, el fármaco unido actúa
como un depósito del medicamento localizado en el torrente sanguíneo.

La albúmina es una proteína producida por el hígado. Ingresa al torrente sanguíneo

y ayuda a mantener el líquido evitando su filtración de hacia otros tejidos. También
ayuda a transportar varías hormonas. enzimas y vitaminas. La carencia de albúmina
puede ocasionar que el líquido se escape de la sangre y se acumule en pulmones,
vientre u otras partes del cuerpo.
La mayoría de los fármacos se unen a las proteínas plasmáticas. Los fármacos
ácidos se unen principalmente a la albúmina y los fármacos básicos a la a1-
glucoproteína. La unión a otras proteínas es generalmente menor y reversible.
La concentración de un fármaco unido a proteínas plasmáticas está determinada por
su afinidad, el número de sitios de unión y su constante de disociación. Sin
embargo, también se limita por su biotransformación y filtración glomerular. La unión
a proteínas también se ve afectada por enfermedades como la hipoalbuminemia.
La unión a proteínas no es selectiva de un sólo fármaco, varios fármacos con
características fisicoquímicas parecidas pueden competir con otros fármacos o con
las sustancias endógenas. La fracción del fármaco unido a proteínas está en
función de su fracción libre.

Las membranas tanto biológicas como sintéticas actúan como estructuras laminares
atravesadas por poros de determinadas dimensiones. Esta relación entre el tamaño
del poro y de las partículas en disolución define el comportamiento de la membrana
ante soluciones concretas.
Las membranas pueden clasificarse en 4 clases:

1. Membranas impermeables: No permiten que nada las atraviese

2. Membranas semipermeables: Son atravesadas por el agua, no permiten
que pase ningún tipo de soluto
3. Membranas dialíticas: Son atravesadas por el agua y los solutos empleados
4. Membranas permeables: Son atravesadas por el agua, coloides, solutos
verdaderos. Son impermeables para dispersiones groseras. (Papel filtro)

Una vez que el fármaco entra en el torrente sanguíneo este se distribuye a los
diferentes tejidos. La distribución no es uniforme debido a las diferencias de
perfusión sanguínea, pH, fijación a los tejidos y su permeabilidad a las membranas
celulares.
La velocidad de acceso de un fármaco a un tejido depende de la velocidad del flujo
de sangre hacia el tejido y de los coeficientes de partición de la sangre hacia dicho
tejido.
El equilibrio de la distribución entre la sangre y un tejido se alcanza en regiones con
mayor vascularización excepto cuando el paso limitante es la difusión a través de
las membranas.
Una vez que se alcanza el equilibrio las concentraciones del fármaco y de los
líquidos extracelulares están dadas por su concentración plasmática.
Al mismo tiempo que se llevan a cabo los procesos de difusión se llevan a cabo
procesos de metabolismo y excreción.

Volumen de distribución: Es el volumen teórico en el cual se habría que disolver la

cantidad de fármaco administrado para que su concentración sea igual a la del
plasma. Cada fármaco se distribuye en el cuerpo de manera específica, algunos se
concentran en el tejido adiposo, otros en el líquido extracelular y otros se unen a
determinados tejidos.

El grado de distribución de un fármaco depende en gran medida de su porcentaje de

fijación a las proteínas plasmáticas y a los propios tejidos. Los fármacos
transportados en el torrente sanguíneo son transportados una parte en forma libre y
una parte unida a componentes sanguíneos, estos componentes sanguíneos
pueden ser albúmina, a1-glucorpoteina ácida y lipoproteínas o ambas.

La acumulación de fármaco en los tejidos o compartimentos corporales puede

prolongar sus efectos ya que los tejidos liberan el fármaco acumulado según
disminuye la concentración plasmática. Algunos fármacos se acumulan en las
células tras unirse a proteínas, ácidos nucleicos o fosfolípidos.

Objetivo general:
-Determinar la concentración de desvenlafaxina libre (no unida a albúmina) capaz
de difundir a través de una membrana semipermeable

Objetivos particulares:

-Cuantificar el fármaco (desvelafaxina) libre que atraviesa la membrana por un

método analítico espectrofotométrico. UV-Vis
-Analizar el efecto de la unión a proteína (albúmina) de desvenlafaxina comparando
el área bajo la curva del curso temporal de desvenlafaxina libre.

Materiales y métodos:
Equipo

- Calculadora
- Balanza analítica
- Parrilla de calentamiento
- Termómetro
- Espectrofotómetro UV-Vis
- micropipeta de 1mL
- 1 piseta
- 1 embudo de vidrio
- 3 pipetas de vidrio 10ml
- 2 membranas de diálisis
- 4 ligas elásticas gruesas o hilo cáñamo
- 1 matraz aforado 1L
- 1 matraz aforado 25mL
- 1 vaso pp 500mL
- 1 magneto
- 1 celda de cuarzo
- 6 matraz aforado 10 mL
Reactivos
Succinato de desvenlafaxina
Solución amortiguadora de fosfatos (Buffer) 1L a pH=7.4
Agua destilada
Resultados:
Se preparó 1L de una solución amortiguadora de fosfatos a pH fisiológico 7.4,
pesando y disolviendo 3.1 g de Na P O4∗H 2 O, 10.9 g de Na2HPO y 9 g de NaCl y
aforando posteriormente a un volumen total de 1L en un matraz aforo.
Se preparó una solución de desvelafaxina, pesando 10 mg del fármaco y diluyendo
en un volumen final de 25 ml.

Se preparó una solución de albumina de suero humano a una concentración de 50

mg/mL, diluyendo con solución amortiguadora de fosfatos pH=7.4

Una vez realizadas las soluciones requeridas para el procedimiento experimental, se

procedió a hidratar dos membranas de diálisis (unidad donadora) de 10 cm en agua
destilada por un mínimo de tiempo de 10 minutos.

Se colocaron 25 mL de solución amortiguadora de fosfatos pH=7.4 en un vaso de

precipitado de 500 mL (Unidad receptora) manteniendo una temperatura de 37
grados centígrados.

A una unidad donadora (membrana de diálisis) se agregaron 10 mL de la solución

de albumina, de suero humano y 10 mL de solución de desvenlafaxina.

A otra unidad donadora (membrana de diálisis) se agregaron 10 mL de la solución

amortiguadora de fosfatos pH 7.4 y 10 mL de la solución de desvenlafaxina.

Se procedió a tomar muestras de cada una de las unidades receptoras a los 0.5, 1 y
2 horas, ajustando el volumen de la unidad receptora en cada tiempo de muestreo.

Se determinó la curva de calibración con la absorbancia medida en el

espectrofotómetro UV-Vis de 5 disoluciones stock de fosfatos.

Concentración Vol stock Volumen de aforo (mL) Absorbancia

Desvenlafaxina

Blanco - 10 3.800

2.8323 100 10 3.832

3.0000 200 10 4.000

2.7533 300 10 3.753

3.0000 600 10 4.000

2.8154 1000 10 3.815

Tiempo 0 30minutos 1h 2h

Albúmina + 2.7663 2.9726 2.7651 1.8795

Desvenlafaxina

Desvenlafaxina 2.7663 2.7663 2.7806 2.7651

+ solución de
fosfatos

Curva de calibració n
102

100

98
Absorbancia

96 f(x) = 0.0062860576923077 x + 96.4361778846154

R² = 0.00771856779338875
94

92

90
0 20 40 60 80 100 120
Concentració n μl/mL

Imagen 1. Curva de calibración. Elaboración propia

Curso temporal de concentració n del farmaco en

cada condició n
3.5
3
Concentració n

2.5
2
1.5
1
0.5
0
0 0.5 1 1.5 2 2.5
Tiempo en horas

sin albumina con albumina

Imagen 2. Curso temporal de concentración del fármaco en cada condición dada.

Elaboración propia.
Interpretación de resultados.

En la presente elaboración experimental, se tenia como objetivo Determinar la

concentración de desvenlafaxina libre (no unida a albúmina) capaz de difundir a
través de una membrana semipermeable, con el propósito de conocer, analizar y
comparar el efecto de las proteínas al interactuar con agentes externos como los
son los fármacos.
Para este trabajo se buscó recrear las condiciones fisiológicas de una persona en
estado sano, cuya proteína con mas interacción con agentes externos es la
albumina. Los fármacos una vez ingresados al torrente sanguíneo pueden verse
afectados en su biodisponibilidad por la interacción con proteínas como la albumina,
la cual se encuentra muy presente en el ser humano y la cual nos permite entre
otras cosas capturar y transportar sustancias que pueden ser toxicas para el optimo
funcionamiento de los diversos sistemas biológicos.
Por medio de la elaboración de una solución amortiguador o también conocida como
solución buffer, de un pH 7.4 realizada tras los cálculos pertinentes y el correcto
pesado de los fosfatos empleados, se buscó crear un ambiente muy parecido al pH
fisiológico en el cual se encuentra de manera normal la proteína albumina. Una vez
diseñada la solución amortiguadora y teniendo un ambiente adecuado para la
albumina, por medio del uso de membranas de diálisis se procedió a preparar dos
vasos de precipitado con solución amortiguadora.
A las membranas se les agregó 10 ml de una solución previamente preparada del
fármaco empleado, agregando solo a una de las membranas un volumen conocido
de la solución de albumina.
Ambas membranas fueron sumergidas en vasos de precipitado, tomando
volúmenes conocidos de la solución resultante tras periodos conocidos de tiempo
(media hora, una hora y dos horas).
Considerando que las proteínas al interactuar con los fármacos pueden verse
afectadas las concentraciones y con ello afectar la biodisponibilidad, se esperaba
que la membrana que tenia la combinación de la proteína albumina así como el
fármaco (desvelafaxina) se verían afectadas sus concentraciones tras el paso del
tiempo establecido, esto en comparación con la concentración de develafaxina
obtenida en la membrana que no estuvo en contacto con la proteína albumina, nos
permitiría determinar la concentración de desvelafaxina libre capaz de difundir a
través de la membrana.
Una vez realizada la parte experimental del presente trabajo, se cuantificaron las
concentraciones del fármaco desvelafaxina que se encontraba libre, identificando y
pudiéndose observar por medio de las gráficas de los resultados que la
desvelafaxina al encontrarse en contacto con proteínas como la albumina, que tiene
la capacidad de unirse a determinados fármacos por sus características
fisicoquímicas, se ve disminuida en comparación al fármaco si no presentara la
interacción con la albumina.
En este caso para poder cuantificar de manera correcta las concentraciones
obtenidas en las diferentes etapas del proceso experimental, la curva de calibración
que se realizó tendría que haber obtenido valores lo más exactos posibles,
permitiendo de esta manera que los datos fueran lineales. Sin embargo, el equipo
empleado para la cuantificación de los datos (uv-vis) nos proporcionaba además de
los datos de absorbancia, las concentraciones, permitiendo de esta manera analizar
los datos de una forma más precisa.
Se pueden obtener resultados más precisos usando el equipo adecuado, pesando
de forma precisa los reactivos para realizar las soluciones requeridas, así como
preparando las diluciones de forma correcta para la realización de la curva de
calibración correspondiente.
Como se pudo notar en el presente trabajo existen condiciones biológicas presentes
en el cuerpo humano que pueden promover o afectar la distribución de los principios
activos que se consumen para el tratamiento de diversas enfermedades.
Es por ello que en la formulación, diseño o preparación de una molécula activa o de
una forma farmacéutica se deben tomar en consideración las características como
la liposolubilidad o la hidrosolubilidad así como la interacción con proteínas o incluso
el pH, de esta manera se puede garantizar que la dosis empleada de un
determinado fármaco tendrá efectos positivos en el paciente que lo consume y no
tendrá efectos no deseados como consecuencia de un almacenamiento en el
organismo por proteínas como la albumina, la cual se encuentra en mayor
porcentaje pero que no es la única que se presenta en el organismo.
Bibliografía:

Prueba de albúmina en la sangre. (s/f). Medlineplus.gov. Recuperado el 6 de enero

de 2023, de https://medlineplus.gov/spanish/pruebas-de-laboratorio/prueba-de-

albumina-en-la-sangre/

Farmacocinética. Conceptos generales. (s/f). Mhmedical.com. Recuperado el 6 de

enero de 2023, de https://accessmedicina.mhmedical.com/content.aspx?

bookid=1510&sectionid=98017078

Le, J. (s/f). Distribución del fármaco en los tejidos. Manual MSD versión para

profesionales. Recuperado el 7 de enero de 2023, de

https://www.msdmanuals.com/es-mx/professional/farmacolog%C3%ADa-cl

%C3%ADnica/farmacocin%C3%A9tica/distribuci%C3%B3n-del-f%C3%A1rmaco-en-

los-tejidos

Elsevier. (2020). El viaje de un fármaco en nuestro cuerpo: Transporte y fases de

actividad. Elsevier Connect. Recuperado 8 de enero de 2023, de

https://www.elsevier.com/es-es/connect/enfermeria/edu-el-viaje-de-un-

farmaco-en-nuestro-cuerpo-transporte-y-fases-de-actividad