Tinción de ácido resistencia o tinción de Ziehl-Neelsen

Revisado febrero 2021, tomado de

https://www.google.com/search?q=procedimiento+zielh+neelsen&tbm=isch&ved=2ahUKEwj84Oy76I
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Método de tinción

1. Efectuar un extendido fino sobre un portaobjeto limpio y perfectamente desengrasado.

2. Cubrir con colorante carbol-fucsina y calentar con la llama de un mechero o con un hisopo
impregnado con alcohol, durante 5 minutos hasta la emisión de vapores. Cuidar que no ebulla
o se seque, si esto sucede agregar más colorante.
3. Esperar que se enfríe.
4. Lavar con agua y escurrir
5. Colocar solución alcohol ácido, máximo 2 minutos, hasta que salga trazas de rosada de la
preparación.
6. Lavar con agua y escurrir
7. Contra-teñir con azul de metileno por 2 minutos
1. Lavar con agua y escurrir.
2. Colocar en posición vertical o sobre una plantilla hasta que se seque.
8. Observar con objetivo de 100 X de inmersión.

Interpretación: los bacilos ácido alcohol resistentes (BAAR) aparecen color rojo sobre fondo azul.

Control de calidad: Se utiliza una mezcla de cepa de Mycobacyterium bovis (no patógena) y cepa
de Staphylococcus spp, las micobacterias son BAAR, aparecen color rojo sobre fondo azul; y los
estafilococos aparecerán de color azul y son alcohol ácido sensibles.

Observaciones: Cuando se esté realizando esta tinción es importante que en esa pila no se haga
tinción de Gram u otra tinción que emplee reactivos inflamables

Referencia

- Díaz R, Gamazo C y López Goñi I. 1999. Manual práctico de microbiología. Edición Masson.
- Rodríguez C, E., Gamboa C., M., López U, D. , Quesada G, C., y Rodríguez S, C. 2016. Bacteriología
general. Principios y prácticas de laboratorio. 2 ed, San José: Editorial UCR.