Tinción de Gram

Revisado enero 2021. Tomado de

https://www.google.com/search?q=tinci%C3%B2n+de+Gram&rlz=1C1GCEU_esCR854C
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Método

1. En portaobjeto perfectamente limpio y desengrasado preparar un extendido fino y dejarlo

secar al aire.
2. Fijar el material pasando el portaobjeto 3 o 4 veces por la llama, para evitar que sea arrastrado
por agua de lavado.
3. Colorear el portaobjeto sobre las varillas de la cubeta de coloración y cubrir con solución de
cristal violeta 1 minuto (según la calidad del colorante se pueden acortar los tiempos).
4. Lavar cuidadosamente con abundante agua.
5. Cubrir con solución de iodo durante 1 minuto.
6. Lavar con agua.
7. Decolorar durante 20 segundos exactamente con solución de alcohol-acetona.
8. Lavar con agua.
9. Cubrir con solución contra colorante de safranina durante 1 minuto.
10. Lavar con agua y escurrir.
11. Colocar en posición vertical o sobre una plantilla hasta que se seque.
12. Observar con objetivo de 100 X de inmersión.

Revisado enero 2021. Tomado de

https://www.google.com/search?q=tinci%C3%B2n+de+Gram&rlz=1C1G
CEU_esCR854CR854&sxsrf=AOaemvLSV59_ZrNhlRy5lx5HFGDb7JFCfg:1
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Control de calidad de la tinción: Se utilizan una mezcla de cepas de Staphylococcus aureus en fase
logarítmica de crecimiento como control de Gram positivo y una cepa de Escherichia coli en fase
logarítmica como control Gram Negativo.

Referencia

- Díaz R, Gamazo C y López Goñi I. 1999. Manual práctico de microbiología. Edición Masson.
- Rodríguez C, E., Gamboa C., M., López U, D. , Quesada G, C., y Rodríguez S, C. 2016. Bacteriología
general. Principios y prácticas de laboratorio. 2 ed, San José: Editorial UCR.