INSTITUTO TECNOLÓGICO SUPERIOR DE Medios de Cultivo

ALUMNO (A):

Lucia Bautista Salazar

ACTIVIDAD ****

Número de Control:
20TE0554*

Licenciatura en:
Ingeniería en Industrias
TEZIUTLÁN

Alimentarias

Materia:
Microbiología

ASESOR (A):
Hiram Alejandro Wall Martinez

Teziutlán, Puebla; 23/02/2022

“La juventud de hoy. Tecnología del mañana”

 Medios de Cultivo
Para permitir el crecimiento de microorganismos en el laboratorio, es necesario
aportarles un medio con nutrientes y condiciones fisicoquímicas adecuadas para su
desarrollo. El medio de cultivo es aquel que contiene agua y una serie de nutrientes,
necesarios para su metabolismo.

En los Laboratorios de Microbiología se utiliza una gran variedad de medios de cultivos

para mantener las cepas, aislar o identificar microorganismos con varias finalidades:
determinar la existencia de contaminación de alimentos, medicamentos o cosméticos;
diagnosticar alguna enfermedad, elaboración de vacunas bacterianas, entre otras más
funciones.

Antes de realizar el cultivo, se debe tener en cuenta lo siguiente;

• El laboratorio debe establecer criterios de recolección, rechazo y conservación

de las muestras de acuerdo con su política de calidad, para evitar alguna
alteración en los resultados.
• Siempre considerar las necesidades específicas de los microorganismos que se
quieren recuperar en los análisis, ya que al no ser así pueden no presentar
crecimiento adecuado al sembrarse en medio de cultivo que no presente los
requisitos mínimos.

Medios de cultivo

Normalmente se utilizan placas de Petri con agar más nutrientes específicos (según el
microorganismo que se desea aislar), aunque también existen medios de cultivo en
tubo.
La gran diversidad metabólica que tiene este conjunto de organismos explica la amplia
gama de medios de cultivo que existen en el mercado.

Agar sangre

El medio de cultivo agar sangre ovina´´, bien este medio de

cultivo proporciona el crecimiento de la gran mayoría de las
bacterias Gram-positivas y Gram-negativas así como de
hongos (mohos y levaduras), a partir de una base rica y
complementada, ofreciendo así óptimas condiciones de
desarrollo para microorganismos no fastidiosos, por lo que
la conservación de los eritrocitos íntegros favorece la
formación de halos de hemólisis nítidos, facilitando la diferenciación de algunas
especies hemolíticas.

Ingredientes
(concentración por litro)
Hidrolizado pancreático de caseína 12.0l
Hidrolizado péptido de tejido animal 5.0l
Extracto de levaduras 3.5
Extracto de bovino 3.0
Almidón de maíz 1.0
Cloruro de sodio 5.0
Agar Base 15.0
Sangre ovina, desfibrilada 5%
H2O ultra purificada 1L
pH 7,3 ±0,2 a 25ºC

Además de los reactivos mostrados, se pueden utilizar también, muestras clínicas

como: orina, secreciones y otros fluidos corporales.

Diagrama de Proceso de su elaboración

Diagrama del proceso de elaboración

Los bacilos Gram- negativos se identifican inicialmente con base en la fermentación o
no de la glucosa. En la rutina de laboratorio la diferenciación inicial puede utilizar
características del agar Mac Conkey para decisión del proceso de identificación,
juntamente con la prueba de oxidasa.

Microorganismos que crecen

El AS al 5% con base de Tripticasa-Soja es un medio de uso general que permite el
crecimiento tanto de microorganismos exigentes como no exigentes, que incluyen
bacterias aerobias y anaerobias, aunque no es medio de elección para anaerobios.
Permite visualizar reacciones hemolíticas que producen muchas especies bacterianas.
Con la adición de sangre, el medio es útil tanto para el aislamiento y cultivo de
microorganismos aerobios y anaerobios nutricionalmente exigentes a partir de una
gran variedad de muestras, como para la observación de reacciones de hemólisis. La
aportación de caseína y peptonas de soja al agar de Tripticasa-soja hace el medio en
muy nutritivo por el suministro de nitrógeno orgánico, particularmente aminoácidos y
pépticos de cadena más larga. La presencia de estas peptonas en el medio permite el
cultivo de una gran variedad de gérmenes aerobios y anaerobios que crecen
rápidamente, así como los del género Candida. También permite el crecimiento de
FOTO 26. Placa agar sangre 66 algunos gérmenes exigentes como Estreptococos,
Pneumococos, Brucella, Corinebacterias, Erysipelothrix y Pasteurella.

Agar nutritivo

Medio de cultivo nutritivo no selectivo, en el cual la

pluripeptona y el extracto de carne constituyen la
fuente de carbono, nitrógeno y aportan nutrientes para
el desarrollo bacteriano. Su uso está descripto en
procedimientos para el análisis de alimentos, aguas y
otros materiales de importancia sanitaria.
Puede ser suplementado con sangre ovina
desfibrinada estéril para favorecer el crecimiento de
microorganismos exigentes en sus requerimientos
nutricionales y permite una clara visualización de las reacciones de hemólisis.

Ingredientes (concentración por litro)

PLURIPEPTONA 5.0
EXTRACTO DE CARNE 3.0
CLORURO DE SODIO 8.0
AGAR 15.0 pH FINAL: 7.3 ± 0.

Diagrama del proceso de su elaboración

Tiene un estricto control de calidad a lo largo del proceso de producción. Este medio
al usarse, debe ser estéril y permitir un desarrollo óptimo de las cepas de referencia,
ya que para la utilización de este medio se deben manipular microorganismos
patógenos, se deben guardar las más estrictas normas de asepsia y antisepsia.

Microorganismos que crecen en el

Por ser el Agar Nutritivo un medio enriquecido permitirá el crecimiento de bacterias

tanto patógenas como saprofitas, por esto es importante trabajar con las mayores
condiciones de asepsia para garantizar que no hay crecimiento de microorganismos
contaminantes que puedan ocasionar un resultado erróneo.
Estos son algunos microorganismos que pueden crecer en el,scherichia coli–Colonias
grandes, Staphylococcus aureus–Colonias grandes ligeramente amarillas, brillantes y
lisas, y por ultimo, Enterococcus faecalis.

Agar MacConkey.

Es un medio diferencial y selectivo muy utilizado para el

aislamiento e identificación de enterobacterias (bacilos
gramnegativos). Estos llevan en su composición sales
biliares y cristal violeta que inhiben el crecimiento de
grampositivos y hongos. Contienen también lactosa y rojo
neutro como indicador de pH.
Para el medio de cultivo se necesitan los siguientes ingredientes.

Ingredientes (concentración/l)
Peptona de carne 1.5
Peptona de gelatina 17.0
Tripteína 1.5
Lactosa 10.0
Mezcla de sales biliares 1.5
Cloruro de sodio 5.0
Rojo neutro 0.03
Cristal violeta 0.001
Agar 13.5 pH final: 7.1 ± 0.2

Diagrama del proceso de elaboración

Considerar las muestras como potencialmente infecciosas y manipularlas

apropiadamente siguiendo las normas de bioseguridad establecidas por el laboratorio.
Las características del producto pueden alterarse si no se conserva apropiadamente.

Microorganismo que crecen en el

En este medio crecerán todos los organismos de la familia Enterobacteriaceae y varios
bacilos gram negativos, por ejemplo, Pseudomonas y otros géneros relacionados5-9.
Los organismos no fermentadores y otros bacilos gram negativos sensibles a los
componentes selectivos no crecen en este medio.
Y también se ha descrito la inhibición de algunas Enterobacteriaceae y Pseudomonas
aeruginosa cuando se incuban en una atmósfera enriquecida con CO2 10. Ciertas
pruebas de diagnóstico pueden efectuarse directamente en este medio; sin embargo,
para lograr la identificación completa se necesitan pruebas bioquímicas, y también
pruebas inmunológicas usando cultivos puros.

Actualmente, algunos laboratorios han incorporado además de los medios de cultivo

tradicionales otros medios denominados cromogénicos. Este tipo de medios de cultivo
incorporan sustancias cromo génicas que al ser utilizadas por un microorganismo dan
como resultado un color que caracteriza a cada especie o grupo y las diferencia de
otras. Es una herramienta potente y rápida para la identificación visual de
microorganismos.

Referencias
Anonimo. (24 de 02 de 2022). laanunciataikerketa.com. Obtenido de
http://www.laanunciataikerketa.com/trabajos/manoslimpias/medios.pdf
Cuevas, L. B. (26 de 02 de 2022). sintesis.com. Obtenido de
https://www.sintesis.com/data/indices/9788490773185.pdf
Monteiro, A. L. (08 de 12 de 2019). laborclin.com. Obtenido de
https://www.laborclin.com.br/wp-content/uploads/2020/02/540195-
BIPLACA-SANGRE-AGAR-TSA-2X10mL-10PL.pdf
Rosi, A. (s.f.). britanialab.com. Obtenido de
https://www.britanialab.com/back/public/upload/productos/upl_60707267ecd
a2.pdf
Farmacopea Nacional Argentina, Codex Medicamentarius Argen tino, Séptima
Edición, volumen 1. 2003. Control Microbiológico de
Productos no Obligatoriamente Estériles.
- United States Pharmacopeia (USP 31),. 2008. (61) Microbiolo gical
Examination of Nonsterile products: Microbial Enumeration
Tests. Harmonized Method