UNIVERSIDAD MAYOR REAL Y PONTIFICIA DE

SAN FRANCISCO XAVIER DE CHUQUISACA

FACULTAD DE CIENCIAS Y TECNOLOGÍA
CARRERA DE INGENIERIA QUIMICA

MATERIA: Fundamentos de Ingeniería Química (PRQ-218)

TITULO DEL TEMA: CULTIVOS CELULARES

INTEGRANTES: Choque Salinas Cristian Yader

Garcia Torrez Noemi

Rojas Daza Lilian Giovana

Tellez Jaldin Maria Fernanda

FECHA DE ENTREGA: 19/10/2023

DOCENTE: Ing. Francisco J. Camacho

Sucre-Bolivia
2023

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 INDICE

1. Cultivos celulares.

1. Cultivos celulares de bacterias.

 Técnicas de cultivo de bacterias.

 Factores que afectan a los cultivos celulares de bacterias.

 Medios de cultivo para bacterias.

2. Cultivos celulares de hongos.

 Técnicas de cultivo de hongos.

 Factores que afectan a los cultivos celulares de hongos.

 Medios de cultivo para hongos.

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 A) Cultivos celulares de bacterias

Los cultivos celulares de bacterias son técnicas que permiten el crecimiento y la

multiplicación de bacterias en condiciones controladas de laboratorio. Se utilizan en una
amplia variedad de aplicaciones, como la investigación básica, el diagnóstico médico y la
producción industrial de antibióticos y otros productos biológicos.

 Técnicas de cultivo de bacterias

Un cultivo celular de bacterias es una población de bacterias que crece en un medio

artificial. El medio de cultivo proporciona los nutrientes y el ambiente necesarios para
que las bacterias crezcan y se reproduzcan

Existen dos técnicas principales de cultivo de bacterias:

Cultivo en caldo líquido: Es una técnica sencilla y versátil que se utiliza para el crecimiento
y la multiplicación de bacterias. Se utiliza para una amplia variedad de aplicaciones, como
el aislamiento de bacterias, la identificación de bacterias y la producción de metabolitos
bacterianos. En este tipo de cultivo, las bacterias se cultivan en un medio líquido, como un
caldo de nutrientes. El caldo se agita constantemente para garantizar que las bacterias
tengan acceso a oxígeno y nutrientes.

 Cultivo en agar sólido: Es una técnica que permite visualizar el crecimiento bacteriano. Se
utiliza para la identificación de bacterias, la evaluación de la virulencia bacteriana y la
producción de metabolitos bacterianos En este tipo de cultivo, las bacterias se cultivan en
un medio sólido, como un agar nutritivo. El agar es un gel que proporciona un soporte para
el crecimiento de las bacterias.

 Factores que afectan a los cultivos celulares de bacterias

El crecimiento y la multiplicación de las bacterias en un cultivo celular están influenciados

por una serie de factores, entre los que se incluyen:

 Temperatura: Las bacterias tienen una temperatura óptima de crecimiento.

 pH: Las bacterias tienen un pH óptimo de crecimiento.
 Oxígeno: Algunas bacterias son aerobias, lo que significa que requieren oxígeno para
crecer. Otras bacterias son anaerobias, lo que significa que no requieren oxígeno para
crecer.
 Nutrientes: Las bacterias requieren una variedad de nutrientes para crecer, como
proteínas, carbohidratos, lípidos y vitaminas.

 Usar técnicas asépticas: Las técnicas asépticas se utilizan para prevenir la contaminación
de los cultivos celulares.
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Los cultivos celulares de bacterias son una técnica esencial para una amplia variedad de
aplicaciones. La comprensión de los principios básicos de los cultivos celulares de
bacterias es fundamental para el éxito de estas técnicas.

 Medios de cultivo para bacterias.

Un medio de cultivo es una técnica de laboratorio que consta de un gel o una solución que
contiene los nutrientes necesarios para permitir, en condiciones favorables
de pH y temperatura, el crecimiento de virus, microorganismos, células, tejidos vegetales o
incluso pequeñas plantas. Según lo que se quiera hacer crecer, el medio requerirá unas u
otras condiciones. Generalmente se presentan desecados en forma de polvo fino o
granular antes de ser preparados; ya preparados pueden encontrarse en estado líquido
(caldo), un sólido (placas de agar) o un semisólido (en profundidad). Los medios sólidos y
semisólidos contienen un agente solidificante como el agar o la gelatina.

AGAR NUTRITIVO
es un medio de cultivo usado normalmente como rutina para todo tipo de bacteria. Es muy
útil porque permanece sólido incluso a relativamente altas temperaturas. Además, el
crecimiento bacteriano en este agar lo hace en la superficie, por lo que se distinguen mejor
las colonias pequeñas.
En un caldo de nutrientes, la bacteria crece en el líquido, y aparece como una sustancia
espesa, con colonias difícilmente observables.
El agar nutritivo contiene normalmente (p/v):1

 0,5% de peptona;
 0,3% de extracto de carne/extracto de levadura;
 1,5% de agar;
 0,5% de cloruro de sodio;
 agua destilada;
 pH casi neutro (6,8) a 25 °C.

AGAR MACCONKEY

es un medio de cultivo selectivo y diferencial para bacterias diseñado para aislar

selectivamente bacilos Gram negativos y entéricos (encontrados normalmente en el tracto
intestinal) y diferenciarlos sobre la base de la fermentación de la lactosa.1 El cristal
violeta y las sales biliares inhiben el crecimiento de organismos grampositivos, lo que
permite la selección y el aislamiento de bacterias gramnegativas. Las bacterias entéricas
que tienen la habilidad de fermentar lactosa pueden ser detectadas utilizando
el carbohidrato lactosa y el indicador de pH rojo neutro.2

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AGAR SANGRE
es una combinación de un agar base (agar nutritivo) con el agregado de 5 %
de sangre ovina,1 también puede usarse sangre humana, para cultivos en una placa de
Agar. El agar sangre aporta muchos factores de enriquecimiento. Se usa también para ver
la capacidad hemolítica de los microorganismos patógenos (que es un factor de
Virulencia). Observando los halos hemolíticos alrededor de las colonias se determina el
tipo de hemólisis que posee:2

 alfa: halos verdosos (oxidación de la hemoglobina de los glóbulos rojos a

metahemoglobina en el medio)
 beta: halos incoloros (hemolisis total)
 gamma: inexistencia de halos (sin hemolisis)

AGAR CHOCOLATE
(CHOC) es un medio de cultivo enriquecido y no selectivo. Es una variante del agar
sangre. Contiene glóbulos rojos que han sido lisados por el suave calentamiento a 56 °C.
Este agar se usa para el delicado y exigente crecimiento de bacterias respiratorias, como
por ejemplo Haemophilus influenzae.
Estas bacterias necesitan factores de crecimiento, como el NAD y hemina, componentes
que podemos encontrar dentro de los glóbulos rojos; por lo tanto, un prerrequisito lógico
para el crecimiento es la lisis de los glóbulos rojos. El agar se llama así debido a su
parecido con el chocolate, pero no contiene nada de este.
Debido a que este medio soporta muchos tipos de bacterias, no es muy útil
para coprocultivos.

AGAR MANITOL SALADO

es un medio de cultivo que se utiliza normalmente en microbiología. Permite el crecimiento
de bacterias Gram-positivas mientras inhibe el crecimiento de Gram-negativas. Este medio
es importante en el laboratorio clínico debido a que es capaz de distinguir los
microorganismos patogénicos en un corto periodo de tiempo. Contiene una alta
concentración (~7.5%-10%) de sal (NaCl), haciéndolo selectivo
para Staphylococcus (y Micrococcaceae) debido su alta concentración de NaCl es
inhibitorio para la mayoría de las bacterias Gram negativas. Además, contiene manitol otro
inhibidor de bacterias Gram negativas y un indicador de pH indicador de fermentación; rojo
de fenol.
Coagulasa-positivo Staphylococcus producen colonias amarillas con zonas amarillas,
mientras que coagulasa-negativo Staphylococcus producen colonias rojas o ligeramente
rosadas sin cambio alguno al medio. Si un organismo es capaz de fermentar el manitol, un
subproducto ácido es creado que hace que el rojo de fenol cambie a amarillo. Se usa para
el aislamiento selectivo de colonias de Staphylococcus sospechosas de ser patógenas.

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AGAR CISTINA-LACTOSA DEFICIENTE EN ELECTRÓLITOS O CLED
es un medio de cultivo no inhibitorio usado en el aislamiento y diferenciación de
organismos urinarios. Al ser deficiente en electrólitos, previene del crecimiento exagerado
de las especies de Proteus. La cistina promueve la formación de colonias enanas
dependientes de cistina. Los fermentadores de lactosa producen colonias amarillas en el
agar de CLED; las NO fermentadoras de lactosa dan colonias azules. Tiene
un pH aproximado de 7.3.
El agar CLED o agar Brolacin tiene la característica de ser semitransparente y por la
acción del azul de bromofenol las colonias de bacterias fermentadoras de lactosa se tiñen
de color amarillo mientras que las no fermentadoras se tiñen de azul.

AGAR-HIERRO-TRIPLE AZÚCAR
es un medio de cultivo. Gracias a su composición es uno de los medios de cultivo más
empleados para la diferenciación de enterobacterias según:

1. Fermenten o no glucosa.
2. Fermenten o no lactosa o sacarosa.
3. Produzcan o no ácido sulfhídrico.
4. Produzcan o no gas.
Correspondientemente las reacciones sobre agar TSI son:

1. Si la bacteria problema fermenta la glucosa, acidificará el medio haciendo

virar a amarillo el indicador en el fondo del tubo, mientras que, si no es
fermentadora de glucosa, el medio permanecerá de color rojo.
2. Si la bacteria problema fermenta lactosa o sacarosa, acidifica el medio en su
superficie volviéndolo de color amarillo, mientras que, si no lo es, la
superficie del medio continuará de color rojo.
3. Si produce ácido sulfhídrico (debido a la reducción de las sales de hierro), se
presentará un ennegrecimiento del tubo. La producción de sulfhídrico y el
consiguiente ennegrecimiento pueden impedir ver la fermentación de la
glucosa (fondo amarillo), pero este hecho implica directamente que la
bacteria es fermentadora de glucosa.
4. Si aparece rotura o desplazamiento del medio, significa que la bacteria es
productora de gas.

B) Cultivos celulares de hongos.

 técnicas de cultivos de hongos

El cultivo de hongos es una práctica importante en la agricultura, la biotecnología, la

producción de alimentos y la investigación científica.
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Selección del hongo: Elige el tipo de hongo que deseas cultivar. Pueden ser hongos
comestibles (como champiñones), hongos medicinales (como el Reishi), hongos silvestres
u hongos utilizados en la producción de enzimas, antibióticos u otros productos
biotecnológicos.
Medio de cultivo: Prepara un medio de cultivo adecuado para el hongo. El medio de
cultivo puede variar según el hongo y puede incluir componentes como sustratos
orgánicos (madera, estiércol, granos), nutrientes, agua y reguladores de pH. La elección
del medio es crítica para el éxito del cultivo.
Inóculo: Introduce el inóculo en el medio de cultivo. El inóculo puede ser esporas, micelio
(el tejido vegetativo del hongo) o cultivos previos.
Condiciones de crecimiento: Controla las condiciones de crecimiento. Esto incluye la
temperatura, la humedad, la luz (en algunos casos), la agitación (para cultivos en
fermentadores) y el pH. Asegúrate de mantener condiciones óptimas para el crecimiento
del hongo que estás cultivando.
Aireación: La aireación es importante para suministrar oxígeno al hongo y eliminar el
dióxido de carbono producido durante el crecimiento. En fermentadores, se utiliza la
aireación controlada.
Esterilización: La esterilización del medio de cultivo y el equipo es esencial para evitar la
contaminación microbiana no deseada. Esto se logra mediante la autoclave u otros
métodos de esterilización.
Incubación: Deja que el hongo crezca durante un período específico. El tiempo de
incubación varía según el tipo de hongo y el propósito del cultivo.
Cosecha: Recolecta los hongos en el momento adecuado. Esto puede implicar la
recolección de cuerpos fructíferos (como las setas) o la extracción de productos
específicos (como enzimas o metabolitos).
Almacenamiento: Almacena los hongos o productos derivados del cultivo de manera
adecuada. Esto puede incluir la refrigeración, el secado o la congelación, según las
necesidades.
Replicación: Si deseas continuar cultivando hongos, guarda una parte del cultivo anterior
como inóculo para futuros cultivos.

 factores que afectan a los cultivos celulares de hongos

Los cultivos celulares de hongos pueden ser sensibles a varios factores que afectan su
crecimiento y productividad. Estos factores pueden variar según el tipo de hongo, las
condiciones de cultivo y el propósito del cultivo, pero algunos factores comunes que
pueden influir en los cultivos celulares de hongos son los siguientes:
Medio de cultivo: La composición del medio de cultivo, incluyendo la fuente de carbono,
nitrógeno, minerales y otros nutrientes, es fundamental. La falta de nutrientes esenciales o
un desequilibrio en la composición del medio puede limitar el crecimiento del hongo.

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PH: El pH del medio de cultivo es importante, ya que los hongos tienen rangos de pH
óptimos para el crecimiento. Un pH inadecuado puede inhibir el crecimiento y la
producción de metabolitos deseados.
Temperatura: La temperatura de incubación es crítica. Cada hongo tiene una temperatura
óptima de crecimiento que varía según la especie. Un cambio en la temperatura por
encima o por debajo de este rango puede afectar negativamente el crecimiento.
Oxígeno: Los hongos pueden ser aeróbicos (requieren oxígeno) o anaeróbicos (crecen en
ausencia de oxígeno). La disponibilidad de oxígeno y la eficiencia de la agitación en los
cultivos pueden influir en el crecimiento y la producción de metabolitos.
Humedad: La humedad relativa y la disponibilidad de agua en el medio de cultivo son
críticas. Demasiada o muy poca humedad puede afectar el crecimiento y la producción de
hongos.
Contaminación: La contaminación por microorganismos no deseados, como bacterias u
otros hongos, puede competir con el hongo que se cultiva y afectar negativamente el
cultivo.
Iluminación: Algunos hongos, como los hongos filamentosos utilizados en la producción
de enzimas, pueden ser sensibles a la luz. La presencia o ausencia de luz y la intensidad
luminosa pueden influir en el crecimiento y la producción.
Genética del hongo: La cepa o la variante del hongo utilizada puede afectar su
comportamiento en cultivo. Algunas cepas pueden ser más resistentes a condiciones
adversas o más productivas que otras.
Densidad de inóculo: La cantidad inicial de esporas o micelio utilizado como inóculo
puede influir en el tiempo de adaptación y el crecimiento del cultivo.
Nutrientes específicos y reguladores de crecimiento: La adición de compuestos
específicos, como reguladores de crecimiento o cofactores, puede influir en la producción
de metabolitos específicos o en el crecimiento.
Interacciones con sustrato: En el caso de hongos que crecen en sustratos orgánicos, la
naturaleza y la composición del sustrato también son factores críticos.
Para optimizar el cultivo celular de hongos, es importante comprender y controlar estos
factores, adaptándolos a las necesidades específicas del hongo que se está cultivando y
los objetivos del cultivo, ya sea la producción de alimentos, productos biotecnológicos o
investigación científica.

 medios de cultivos para hongos

Los medios de cultivos pueden prepararse como un líquido (caldo), un sólido (placas de
agar) o un semisólido (en profundidad). Los hongos filamentosos o mohos producen
colonias esponjosas, algodonosas, lanosas o polvorientas por lo que es recomendable
usar los siguientes medios de cultivos para una recuperación óptima de la misma:
 Medios con y sin cicloheximida para prevenir el sobre crecimiento de hongos de
crecimiento lento por especies de crecimiento más rápido. Es importante tener en
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 cuenta que la cicloheximida también puede ser inhibitorio para algunos hongos. El
Agar Hongos y Agar Hongos dermatofitos proporcionan estas características para la
recuperación fúngica.

 El agar inhibidor controla más la contaminación bacteriana eficaz que el agar

dextrosa Sabouraud; sin embargo, este medio permite la recuperación tanto de
levaduras como de hongos tipo moho apropiada para pruebas de identificación por
métodos bioquímicos, espectrometría de masa y pruebas de fungigrama.

 El crecimiento de hongos dimórficos mejora en medios enriquecidos como Agar BHI

que contiene antibióticos y 5% a 10% de sangre de oveja. Esto mejora el
crecimiento, pero inhibe la esporulación. Una vez aislados, los hongos deben
subcultivarse inmediatamente en medios enriquecidos sin sangre para
identificación. El Agar Sabouraud Dextrosa es un medio apropiado para esta fase
de recuperación.

 Química en la pared celular.

 Reproducción por medio de esporas, producidas asexual o sexualmente.
 Falta de susceptibilidad a los antibióticos antibacterianos.

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