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Manual de Bacteriologia

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FACULTAD DE CIENCIAS EN LA SALUD.
LICENCIATURA EN LABORATORIO CLINICO

MANUAL DE
DIAGNOSTICO
BACTERIOLOGIC
O.

INTRODUCCIÓN.

El presente Manual contiene los procedimientos de rutina en el Laboratorio de

Bacteriología, con el fin de conocer las vías bioquímicas y metabólicas que

sirven de base en las identificaciones bacterianas, a la vez se hace mención de

las normas de bioseguridad útiles para mantener la seguridad dentro del

laboratorio y de quienes laboran en el, así como también normas generales en

toma, manejo y envío de muestras para los diferentes análisis bacteriológicos, y

su respectivo control de calidad. Además está elaborado de tal manera que sea

aplicable al funcionamiento actual de los diferentes procedimientos de

laboratorio en Bacteriología.

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CONSIDERACIONES PARA SU PROTECCIÓN PERSONAL

Todas las muestras de especimenes biológicos deben
considerarse potencialmente infecciosas.

Vacunarse contra los principales agentes infecciosos.

Procurar no producir "salpicaduras" con la muestra obtenida. Debe
limpiarse y desinfectarse cualquier superficie contaminada por algún
espécimen biológico.

Lavarse las manos correctamente, después de haber tenido contacto
con cada paciente y al concluir cualquier procedimiento.

No deben ingerirse comidas, bebidas, goma de mascar o fumar
durante los diferentes procedimientos en el Laboratorio.

Vigile que los elementos de trabajo estén en perfectas condiciones
físicas. Algún elemento en mal estado, podría causarle una herida.

ESTERILIZACIÓN

Proceso mediante el cual se eliminan todas las formas de vida de los
microorganismos de un objeto o de una sustancia para evitar su
reproducción.

ASEPSIA: Libre de microorganismos.

MÉTODOS DE ESTERILIZACIÓN

Comprende todos los procedimientos físicos, mecánicos y
preferentemente químicos, que se emplean para destruir gérmenes
patógenos. A través de esta, los materiales quirúrgicos y la piel del

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enfermo alcanzan un estado de desinfección que evita la
contaminación operatoria. Hay varias formas de esterilizar como:

MÉTODOS QUÍMICOS

Estos métodos provocan la perdida de viabilidad de los
microorganismos.

Hipoclorito de Sodio: Es el mas utilizado por su fácil adquisición y por
su efectividad en la desinfección. Vida media 20 minutos.
Oxido de etileno: Destruye todos los microorganismos incluso virus.

Aldehídos: Son agentes alquilantes que actúan sobre las proteínas.
Estos compuestos destruyen las esporas. Glutaraldehído: Este método
tiene la ventaja de ser rápido y ser el único esterilizante efectivo frío.
Formaldehído: Las pastillas de formalina a temperatura ambiente
esterilizan en 36 horas. Gas-plasma de Peróxido de Hidrógeno: Es
proceso de esterilización a baja temperatura la cual consta en la
transmisión de peróxido de hidrógeno en fase plasma.

Alcohol: Esteriliza superficies, pero se evapora fácilmente.

MÉTODOS FÍSICOS

Calor: La utilización de este método y su eficacia depende de dos
factores: el tiempo de exposición y la temperatura. Todos los
microorganismos son susceptibles, en distinto grado, a la acción del
calor. El calor provoca desnaturalización de proteínas, fusión y
desorganización de las membranas y/o procesos oxidantes
irreversibles en los microorganismos.

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Calor Húmedo: El calor húmedo produce desnaturalización y
coagulación de proteínas.

Autoclave
Se realiza la esterilización por el vapor de agua a presión. El modelo
más usado es el de Chamberland. Esteriliza a 121º C, 15Lb de presión,
por 20 minutos.

Calor seco: El calor seco produce desecación de la célula, es esto
tóxico por niveles elevados de electrolitos, fusión de membranas.

Estufas –Hornos

Doble cámara, el aire caliente generado por una resistencia, circula
por la cavidad principal y por el espacio entre ambas cámaras, a
temperatura de 170º C para el instrumental metálico y a 140º C para
el contenido de los tambores.

NORMAS DE BIOSEGURIDAD

•Mantenga el lugar de trabajo en óptimas condiciones de

higiene y aseo.
•Evite fumar, beber y comer cualquier alimento en el sitio de

trabajo.
•NO SE DEBE UTILIZAR ELTELEFONO CELULAR DENTRO DE LAS

PRACTICAS DE LABORATORIO
•No guarde alimentos, en las neveras ni en los equipos de

refrigeración de sustancias contaminantes o químicos.

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•Maneje todo paciente como potencialmente infectado. Las

normas universales deben aplicarse con todos los pacientes,
independientemente del diagnóstico, por lo que se hace
innecesaria la clasificación específica de sangre y otros
líquidos corporales.
•Lávese cuidadosamente las manos antes y después de cada

procedimiento e igualmente si se tiene contacto con material
patógeno.
•Utilice en forma sistemática guantes plásticos o de látex en

procedimientos que con lleven manipulación de elementos
biológicos y/o cuando maneje instrumental o equipo
contaminado en la atención de pacientes.
•Utilice un par de guantes por paciente.

•Absténgase de tocar con las manos enguatadas alguna parte

del cuerpo y de manipular objetos diferentes a los requeridos
durante el procedimiento.
•Emplee mascarilla y protectores oculares durante

procedimientos que puedan generar salpicaduras góticas
-aerosoles- de sangre u otros líquidos corporales.
•Use batas o cubiertas plásticas en aquellos procedimientos en

que se esperen salpicaduras, aerosoles o derrames
importantes de sangre u otros líquidos orgánicos.
•Evite deambular con los elementos de protección personal por

fuera de su sitio de trabajo.
•Mantenga sus elementos de protección personal en óptimas

condiciones de aseo, en un lugar seguro y de fácil acceso.
•Evite la atención directa de pacientes si usted presenta

lesiones exudativas o dermatitis serosas, hasta tanto éstas
hayan desaparecido.

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•Las mujeres embarazadas que trabajen en ambientes

hospitalarios expuestas al riesgo biológico VIH/SIDA y/o
Hepatitis B, deberán ser muy estrictas en el cumplimiento de
las precauciones universales y cuando el caso lo amerite, se
deben reubicar en áreas de menor riesgo.
•Aplique en todo procedimiento asistencial las normas de

asepsia necesarias.
•Utilice las técnicas correctas en la realización de todo

procedimiento.
•No cambie elementos cortopunzantes de un recipiente a otro.

•Absténgase de doblar o partir manualmente las hojas de

bisturí, cuchillas, agujas o cualquier otro material
cortopunzante.
•Evite reutilizar el material contaminado como agujas, jeringas

y hojas de bisturí.
•Realice desinfección y limpieza a las superficies, elementos,

equipos de trabajo al final década procedimiento y al finalizar
la jornada.
•En caso de derrame o contaminación accidental de sangre u

otros líquidos corporales sobre superficies de trabajo, cubra
con papel u otro material absorbente; luego vierta hipoclorito
de sodio a 5.000 ppm (o cualquier otro desinfectante
indicado) sobre el mismo y sobre la superficie circundante,
dejando actuar durante 30 minutos; después limpie
nuevamente la superficie con desinfectante a la misma
concentración y realice limpieza con agua y jabón. El
personal encargado de realizar dicho procedimiento debe
utilizar guantes, mascarilla y bata.

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•En caso de ruptura de material de vidrio contaminado con

sangre u otro líquido corporal, los vidrios deben recogerse
con escoba y recogedor, nunca con las manos.
•Los recipientes para transporte de muestras deben ser de

material irrompible y cierre hermético. Deben tener
preferiblemente el tapón de rosca.
•Manipule, transporte y envíe las muestras disponiéndolas en

recipientes seguros, con tapa y debidamente rotuladas,
empleando gradillas limpias para su transporte. Las gradillas
a su vez se transportarán en recipientes herméticos de
plásticos o acrílico que retengan fugas o derrames
accidentales. Además deben ser fácilmente lavables.
•En caso de contaminación externa accidental del recipiente,

éste debe lavarse con hipoclorito de sodio al 0.5% (5.000
ppm) y secarse.
•Restrinja el ingreso a las áreas de alto riesgo biológico al

personal no autorizado, al que no utilice los elementos de
protección personal necesarios y a los niños.
•La ropa contaminada con sangre, líquidos corporales u otro

material orgánico debe ser enviada a la lavandería en bolsa
plástica roja.
•Disponga el material patógeno en bolsas resistentes de color

rojo que lo identifique con símbolo de riesgo biológico.
•En caso de accidente de trabajo con material cortopunzante

haga el reporte inmediato de accidente de trabajo.

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GENERALIDADES

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