CONTROL MICROBIOLOGICO DE

ALIMENTOS Y AGUAS
DEFINICION DE MICROBIOLOGIA

La Microbiología se puede definir, como la ciencia que trata los seres vivos muy
pequeños, concretamente de aquellos cuyo tamaño se encuentra por debajo del poder
resolutivo del ojo humano. Esto hace que el objeto de esta disciplina venga
determinado por la metodología apropiada para poner en evidencia, y poder estudiar,
a los microorganismos, también conocidos como microbios.

ANÁLISIS MICROBIOLÓGICOS
Los análisis microbiológicos se basan habitualmente en el cultivo y recuento de los
microorganismos. Para ello es necesario preparar y conservar adecuadamente los
medios de cultivo, realizar una siembra y observar los resultados.

LOS MEDIOS DE CULTIVO

Dado el pequeño tamaño de los microorganismos, la cantidad de información que
puede obtenerse de un individuo es muy limitada. Por ello es necesario el estudio de
poblaciones, que contienen miles o millones de individuos. Estas poblaciones se
obtienen al hacer crecer los microorganismos bajo condiciones más o menos bien
definidas, como cultivos.

El estudio de estos cultivos permite detectar la presencia de microorganismos en una

muestra y su posterior identificación, efectuar pruebas de susceptibilidad de estos
microorganismos a antibióticos o a antisépticos concretos, etc.

El cultivo es el crecimiento de poblaciones microbianas en ambientes artificiales

(medios de cultivo) y bajo condiciones de laboratorio (temperatura, humedad, presión
de oxígeno y pH óptimos para el crecimiento del microorganismo concreto y sin
presencia de microorganismos contaminantes).

Se entiende por medio de cultivo la mezcla de sustancias, naturales, sintéticas o

ambas, que permite el crecimiento y la reproducción de microorganismos o bien que
permite mantener su viabilidad. Preparación y conservación de medios de cultivo.

CONSERVACIÓN

Cada lote de medio de cultivo, una vez preparado, esterilizado, revisado y en su

presentación final, se identifica mediante una etiqueta con el nombre del medio de
cultivo correspondiente, el número de lote y la fecha de caducidad.
Se almacenan en frigorífico a 4ºC. No los guardes por debajo de 0ºC, porque eso altera
la estructura del agar. Los medios preparados en placas se guardan en bolsas de
plástico, precintadas con cinta adhesiva para preservarlos de la desecación, y se ponen
en la nevera en posición invertida, para evitar la caída de gotas de condensación sobre
el medio.

ESTERILIZACIÓN

Algunos medios de cultivo se esterilizan con autoclave, otros al baño María y otros
mediante filtración por membrana. Todos ellos son procedimientos de esterilización.
En todo caso las indicaciones del fabricante te indicarán que procedimiento debes
seguir en cada uno de los medios comerciales deshidratados.

CLASIFICACIÓN

Los medios de cultivo se clasifican dependiendo de sus características o finalidad:

1.- Según el estado Físico

- Medios líquidos: Todos los componentes se encuentran en estado líquido.

- Medios semisólidos: Llevan incorporada una pequeña cantidad de agar.

- Medios sólidos: Llevan incorporado agar como agente gelificante

2.- Según su comportamiento frente a los microorganismos inoculados:

- Medios de cultivo generales. Permiten el crecimiento de una gran variedad de

microorganismos, siempre que estos no tengan unos requerimientos nutritivos
especiales y las condiciones de incubación. Se utiliza para muchas bacterias patógenas
(causantes de enfermedades).

- Medios de cultivo selectivos. Favorecen el crecimiento de un género o de una especie

concreta de microorganismos, sin afectar a ningún otro. Son muy útiles para aislar
ciertos microorganismos a partir de una población mixta.

- Medios de cultivo diferenciales. Llevan incorporados sustancias nutritivas extras,

necesarias para el desarrollo de los microorganismos más exigentes (aminoacido,
vitaminas, sangre, suero etc…)

- Medios enriquecidos: llevan incorporada alguna sustancia que inhibe el crecimiento

de determinados microorganismos pero n afecta al desarrollo de otros.

3.- Según su empleo:

- Medios de enriquecimiento. Son medios enriquecidos. Lo que se hace es añadir

aditivos, que favorecen el crecimiento de un grupo determinado de microorganismos,
y neutralizantes que inhiben el crecimiento de otros microorganismos que interferirían
con el que estamos buscando. Se puede adicionar sangre, suero o extractos de tejidos
animales o de plantas.

- Medios de aislamiento: Son medios sólidos en los que van a crecer los
microorganismos formando colonias aisladas, que en teoría proceden de una sola
célula, lo que nos permitirá su identificación.

- Medios de identificación: Aquellos en los que al crecer los microorganismos van a

poner de manifiesto sus propiedades bioquímicas características.

MEDIOS DE CULTIVOS UTILIZADOS

- Agar –endo (rosa): Medio desarrollado para el recuento de Coliformes totales en
aguas, mediante técnica de filtración membrana.

- Agar-mFC (azul): medio para el recuento de Coliformes fecales en aguas, mediante

técnica de filtración de membrana.

- Agar chromocult: Medio para el recuento e identificación de coliformes totales y

Escherichia coli en muestras de agua de consumo mediante la técnica de filtración de
membrana.

- Agar-MacConkey: Medio de cultivo selectivo y diferencial para el aislamiento de

bacterias Gram (-)

- Agar VRBG: Medio que se utiliza como presuntivo para la enumeración de

enterobacterias en alimentos.

Se basa en que las sales biliares y el cristal violeta inhiben el crecimiento de los
microorganismos gram positivos. Las enterobacterias (bacteriasGram negativas)
capaces de fermentar la glucosa produciendo ácido, crecen en el medio formando
colonias de color rojo purpúreo de 1 a2 mm de diámetro debido a la presencia de rojo
neutro como indicador en el medio.

- APHA: medio cultivo general.

- Agar PCA: Medio utilizado para el recuento de microorganismos en agua y alimentos.

Medio nutritivo que permite el crecimiento de la mayoría de microorganismos
heterótrofos tanto aerobios, como anaerobios, a diferentes temperaturas.

- CALDO Lauril sulfato con MUG: Este caldo proporciona un medio selectivo para la
detección de organismos coliformes en agua, productos lácteos y alimentos.

Al medio se le incluye campana de Durhman a la hora de supreparación, de forma que

el gas producido tras la incubación del medio a 37ºC 24 horas quedara retenido en
esta campana al estar invertida.
Lleva incorporado el agente fluorescente MUG (4metilumbeliferil-ß-D-glucurónido)
para la posterior identificación de E.Coli.

MATERIAL UTILIZADO
-AUTOCLAVE: Una autoclave es un recipiente de presión
metálico de paredes gruesas con un cierre hermético que
permite trabajar a alta presión para realizar una reacción
industrial, una cocción o una esterilización con vapor de
agua. Su construcción debe ser tal que resista la presión y
temperatura desarrollada en su interior. La presión
elevada permite que el agua alcance temperaturas
superiores a su punto de ebullición. La acción conjunta de la
temperatura y el vapor produce la coagulación de las
proteínas de los microorganismos, entre ellas las
esenciales para la vida y la reproducción de éstos, cosa
que lleva a su destrucción.

Las autoclaves son ampliamente utilizadas en laboratorios, como una medida

elemental de esterilización de material. Aunque cabe notar que, debido a que el
proceso involucra vapor de agua a alta temperatura, ciertos materiales no pueden ser
esterilizados en autoclave, como el papel y muchos plásticos

-CAMPANA DE FLUJO LAMINAR: Una cabina de flujo laminar, cámara de flujo laminar o
campana de flujo laminar es un recinto que emplea
un ventilador para forzar el paso de aire a través de
un filtro HEPA o ULPA y proporcionar aire limpio a la
zona de trabajo libre de partículas de hasta 0.1
micras.

- ESTUFA DE LABORATORIO: Estufa de cultivo

microbiológico, aparato eléctrico utilizado para la incubación de muestras microbianas:
bacterias, hongos, cultivos celulares, con el fin de dar las condiciones necesarias de
temperatura a las cuales crezcan satisfactoriamente.

OBJETIVO
El objetivo general de esta práctica es determinar la carga microbiana de cada muestra
a analizar.

1. ANALISIS MICROBIOLÓGICO DE LOS

ALIMENTOS.
El análisis microbiológico de alimentos no tiene carácter preventivo sino que
simplemente es una inspección que permite valorar la carga microbiana. Por tanto, no
se puede lograr un aumento de la calidad microbiológica mediante el análisis
microbiológico sino que lo que hay que hacer es determinar en la Industria cuáles son
los puntos de riesgo de contaminación o multiplicación microbiana (los llamados
Puntos Críticos del proceso) y evitarlos siguiendo un código estricto de Buenas
Prácticas de Elaboración y Distribución del alimento (BPE).

La prevención, por tanto, está en evitar manufacturar productos de baja calidad

microbiológica y no en comprobar la calidad microbiológica de los ya elaborados (lo
que, por otra parte, presenta una relación coste - beneficio muy baja por la gran
cantidad de muestras que es necesario analizar).

1.1. ANÁLISIS DE LECHE CRUDA

FUNDAMENTO TEORICO

Fermentadores de lactosa la
La fermentación láctica es causada por algunos hongos y bacterias. El ácido láctico más
importante que producen las bacterias es el lactobacillus. Otras bacterias que produce
el ácido láctico son: Leuconostoc, Pediococcus , Estreptococo lactis y Bifido
bacteriumbifidus.
La presencia del ácido láctico, producido durante la fermentación láctica es
responsable del sabor amargo, y de mejorar la estabilidad y seguridad microbiológica
del alimento. Este ácido láctico fermentado es responsable del sabor amargo de
productos lácteos como el queso, yogurt y el kéfir..

Recuento de aerobios mesófilos

En este grupo se incluyen todas las bacterias, mohos y levaduras capaces de

desarrollarse a 30º C en las condiciones establecidas. En este recuento se estima la
microflora total sin especificar tipos de microorganismos. Refleja la calidad sanitaria de
un alimento, las condiciones de manipulación, las condiciones higiénicas de la materia
prima. Un recuento bajo de aerobios mesófilos no implica o no asegura la ausencia de
patógenos o sus toxinas, de la misma manera un recuento elevado no significa
presencia de flora patógena. Ahora bien, salvo en alimentos obtenidos por
fermentación, no son recomendables recuentos elevados.

MATERIAL

Pipeta de 25 ml
Disolución de NaCl
Gradilla
5 tubos de ensayo

PROCEDIMIENTO
Para proceder a sembrar la muestra de leche, lo primero que se hace son una serie de
diluciones, por lo que primeramente prepararemos una dilución madre y de ahí se
prepara el resto.

En la primera dilución
se toman 25 ml de
leche cruda y 225 ml
de NaCl al 0,9% todo
esto se prepara en un
erlenmeyer estéril. Se
homogeneiza esta
solución que será la
dilución 10 -1 (dilución
madre); de esta se
toma 1 ml con ayuda
de una micropipeta y
se vierte a un tubo de
ensayo que contiene 9 ml de solución NaCl, se homogeneiza en el agitador de tubos y
esta será la dilución 10-2 . De esta última dilución se coge 1 ml y se deposita en el
siguiente tubo, así hasta llegar a la dilución 10-6.
Una vez hechas las diluciones se procede a realizar las siembras en profundidad y por
extensión en superficie en dos medios de cultivo: MacConkey y APHA

Se comienza con las siembras en profundidad se harán 3 siembras de las diluciones

10-2 10-4 y 10-6 en cada medio de cultivo, para ello se vierte 1 ml de cada dilución en
cada placa petri vacía y a continuación se le añaden los medios de cultivo MacConkey y
APHA hasta la mitad de la placa; antes de que los medios se solidifiquen se agitan las
placas 3 veces en un sentido y otras 3 en el otro, y se dejan cerca del fuego con la tapa
a medio cerrar hasta que se solidifiquen.

A continuación se realizan las siembras por extensión en superficie; las siembras se

realizan de las mismas diluciones que antes, pero en esta ocasión los medios de cultivo
ya están sólidificados en sus placas, por lo que solo se deben de tomar 0,2 ml de cada
dilución con micropipeta y verterlos en las placas con los agares citados
anteriormente, la muestra se extenderá por toda la placa en todas las direcciones con
un asa de drigraski (asa para siembra por diseminación en superficie).

Una vez hechas todas las siembras se meten a incubar a la estufa todas las placas boca
abajo con el medio hacia arriba a 37°C durante 24 horas.

RESULTADOS

Siembras en profundidad:
McConkey: 10-2  > 300 COLONIAS NO CONTABLE

10-4 7 COLONIAS

10-6  5 COLONIAS

APHA: 10-2  > 300 COLONIAS NO CONTABLE

10-4 29 COLONIAS

10-6  34 COLONIAS

Siembras por extensión en superficie:

McConkey: 10-2  > 300 COLONIAS NO CONTABLE

10-4 17 COLONIAS

10-6  3 COLONIAS
APHA: 10-2  > 300 COLONIAS NO CONTABLE

10-4  7 COLONIAS

10-6  31 COLONIAS
1.2. ANALISIS DEL POLLO

FUNDAMENTO TEORICO

Toxiinfección alimentaria
Una toxiinfección alimentaria es una enfermedad originada en el hombre al ingerir
alimentos que contienen microorganismos viables o las toxinas que se producen
cuando éstos se multiplican en los alimentos.

Las Enterobacterias
Las Enterobacterias son un grupo de bacterias gram-negativas, que no producen
esporas, e incluyen la Salmonella, la Escherichia coli, y otras bacterias entéricas. Estas
bacterias pueden estar presentes en los alimentos y sus ingredientes a niveles tan altos
como 100.000.000cfu/g. El nivel de Enterobacterias en los alimentos es un buen
indicador de la calidad microbiana del alimento y por lo tanto ofrece información
importante respecto a la productividad del animal y la seguridad de los alimentos. En
los animales, las enterobacterias pueden colonizar el tracto gastrointestinal y causar
enfermedades como la Coliobacilosis y la Salmonelosis. Con frecuencia, ésta bacteria
puede causar enfermedades subclínicas, siendo el indicador mas obvio la reducción de
los índices de producción.
El nivel de Enterobacterias en los alimentos también ha demostrado ser un buen
indicador de contaminación por Salmonella. Cuando los niveles de Enterobacteria son
altos, la probabilidad de contaminación por Salmonella también será alta, y similar
cuando los niveles de enterobacterias son bajos

MATERIAL:

Pollo
Vaso de precipitado
Estufa

PROCEDIMIENTO:

Se corta con un cuchillo un muslo de pollo

El muslo de pollo crudo se esparce en una placa con medio VRBGA.
Con el cuchillo que se ha utilizado, sin limpiar, se da unos toques en otra placa con
medio de cultivo VRBGA.
En otra placa con medio VRBGA y PCA se pasan los dedos sucios de tocar el pollo.
Nos lavamos las manos y las pasamos por el medio PCA
Por último se cuece el pollo y una vez cocido se esparce por una placa de VRBGA.

Todas las placas se meten a la estufa a 37°C durante 24 horas.

RESULTADOS:

Placa VRBGA con pollo crudo, se observan 16

colonias.

Placa VRBGA con la muestra del cuchillo, han crecido

solamente 2 colonias.

VRBGA Manos sucias, 7 colonias

PCA Manos sucias 253 colonias

PCA Manos limpias; 23 colonias

VRBGA Pollo cocido: no ha crecido ninguna colonia

2. ANÁLISIS MICROBIOLÓGICO DEL AGUA

MICROBIOLOGIA DE AGUAS

El agua, alimento esencial para los animales incluido el hombre, frecuentemente actúa
como vehículo de transmisión de microorganismos entéricos. La materia fecal puede
accidentalmente alcanzar una fuente de abastecimiento, siendo la forma más común
el ingreso a través de los sistemas de pozo ciego a napas profundas.

2.1. FILTRACION DEL AGUA DE LA RIA

FUNDAMENTO TEORICO

Coliformes Totales

Los coliformes son microorganismos que se encuentran en tracto intestinal del hombre
y de los animales de sangre caliente y son eliminados a través de la materia fecal. Son
utilizados como indicadores de contaminación bacteriana.

La presencia de coliformes totales debe interpretarse de acuerdo con el tipo de aguas:

deben estar ausentes en 85% de las muestras de aguas potables tratadas. En caso de
estar presentes, su número no puede ser superior a 2-3 coliformes. Esta
contaminación a pesar de ser baja, no puede ocurrir en tres muestras recolectas en
días consecutivos.

En aguas tratadas, los coliformes totales funcionan como un alerta de que ocurrió
contaminación, sin identificar el
origen. Indican que hubo fallas en el tratamiento, en la distribución o en las propias
fuentes domiciliarias. Su presencia acciona los mecanismos de control de calidad y de
procesamiento dentro de la planta de tratamiento de agua, e intensifica la vigilancia en
la red de distribución

Coliformes fecales

Las bacterias coliformes fecales forman parte del total del grupo coliforme. Son
definidas como bacilos gram-negativos, no esporulados que fermentan la lactosa con
producción de ácido y gas a 44.5 °C +/- 0.2 °C dentro de las 24 +/- 2 horas. La mayor
especie en el grupo de coliforme fecal es el Escherichia coli.

La presencia de coliformes en el suministro de agua es un indicio de que el suministro

de agua puede estar contaminado con aguas negras u otro tipo de desechos en
descomposición. Generalmente, las bacterias coliformes se encuentran en mayor
abundancia en la capa superficial del agua o en los sedimentos del fondo.

Los niveles recomendados de bacterias coliformes fecales son:

 Agua potable: menos de 0 colonias por 100 ml de la muestra de agua.

  Natación: menos de 200 colonias por 100 ml de la muestra de agua
 Navegar/Pescar: menos de 1,000 colonias por 100 ml de la muestra de agua.

E. Coli

El aislamiento de esta bacteria en el agua da alto grado de certeza de contaminación

de origen fecal, alrededor del 99%. No es absoluta porque se han aislado cepas de E.
coli que no tienen origen fecal, pero es un grado de certeza más que razonable para
certificar contaminación con ese origen. Sin embargo, el aislamiento de este
microorganismo no permite distinguir si la contaminación proviene de excretas
humanas o animales, lo cual puede ser importante, puesto que la contaminación que
se desea habitualmente controlar es la de origen humano. Esto no significa
menospreciar la de origen animal, especialmente dada la existencia de zoonosis,
enfermedades que son comunes al hombre y animales, que también se pueden
transmitir por el agua.

Filtración por membrana

FILTRACIÓN: Es un medio eficaz de eliminar materia orgánica y otras sustancias de

suspensión del H2O.

La filtración por membrana es un proceso físico en el que se separan componentes

mediante membranas semipermeables. Se diferencian cuatro tipos de procesos en
función del tamaño de las partículas/moléculas que deben eliminarse.

MATERIAL

Filtros millipore
Equipo de filtración
Reactivos:
NaCl (para diluir la muestra de agua)
Tampón fosfato (para arrastrar los restos de muestra)

PROCEDIMIENTO

Se va a filtrar el agua de la ría de Erandio de dos maneras: concentrada y diluida y se

colocarán sus filtros en tres medios de cultivo distintos: ENDO, para el recuento de
coliformes totales; m-FC, para el recuento de coliformes fecales y Chromocult para el
recuento de Coliformes totales y E.Coli.

El agua se filtra igual sea diluida o concentrada, para filtrar la diluida primero
tomaremos 1 ml del agua de la ría y los pasaremos a una probeta de 100 ml, la cual la
enrasamos con NaCl.

Se flambea la base del filtro y el embudo, y mientras se enfría, se procede a tomar con
pinza estéril el filtro y se coloca en la base de la rampa, se coloca el embudo y se fija
con la pinza.
Se añade la muestra al embudo se abre la llave y se
enciende el mecanismo de succión; una vez filtrado, se
retira el filtro (siempre se flamea la pinza antes de
tocar el filtro y después) y se coloca en una placa petri
a modo de pegatina teniendo cuidado de no dejar
burbujas.

Este procedimiento se repetirá con cada medio de cultivo, y en el caso del agua
concentrada se filtran directamente los 100 ml del agua de la ría.

No hay que olvidar añadir solución tampón fosfato

entre filtrado y filtrado para arrastrar los posibles
restos de muestra y se filtra también

Una vez preparados los cultivos se meten en la

estufa a 37°C durante 24 horas el ENDO y el
Chromocult.

El cultivo con m-FC se incuba a 44°C durante 24

horas.
RESULTADOS

RECUENTO COLIFORMES TOTALES:

Medio de cultivo ENDO

Muestra de agua diluida: 5 colonias Muestra de agua concentrada: > 300

colonias INCONTABLE

RECUENTO DE COLIFORMES FECALES

MEDIO DE CULTIVO: m-FC

Muestra de agua diluida: no han Muestra de agua concentrada: 18 colonias

crecido colonias 6 colonias rosas: no típicas
12 colonias verdes: son dudosas
RECUENTO DE COLIFORMES TOTALES Y E.COLI

Medio de cultivo: chromocult

Muestra de agua diluida: 95 colonias Muestra de agua concentrada:> 300

Rosas : 6 coliformes totales colonias INCONTABLE, hay colonias no típicas azul,
Azul/morado: el resto E.Coli turquesa y amarillas
Total: 9.500 ufc/ml

2.2 DETERMINACIÓN DE AEROBIOS MESÓFILOS

FUNDAMENTO TEORICO

Recuento de aerobios mesófilos

En este grupo se incluyen todas las bacterias, mohos y levaduras capaces de

desarrollarse a 30º C en las condiciones establecidas. En este recuento se estima la
microflora total sin especificar tipos de microorganismos. Refleja la calidad sanitaria de
un alimento, las condiciones de manipulación, las condiciones higiénicas de la materia
prima. Un recuento bajo de aerobios mesófilos no implica o no asegura la ausencia de
patógenos o sus toxinas, de la misma manera un recuento elevado no significa
presencia de flora patógena. Ahora bien, salvo en alimentos obtenidos por
fermentación, no son recomendables recuentos elevados.

PROCEDIMIENTO

Realizar una dilución de la muestra de la ría en la campana de flujo laminar; para ello
se toman 10 ml del agua de la ría y se vierten en un matraz erlenmeyer de 100ml .

Se toma 1 ml de esa dilución y se vierte en una placa petri vacía, a la que se le añade
posteriormente medio de cultivo APHA, y se realizan 3 giros hacia la izquierda y 3 giros
hacia la derecha, se deja que se solidifique y se mete a incubar a la estufa a 37°C
durante 48 horas.
RESULTADO
FALTA

2.3. CONFIRMACIÓN DE E.COLI

El propósito es obtener un cultivo puro de E.Coli, para ello se toma una colonia
representativa de E.Coli del cultivo de Chromocult con un asa de siembra y se siembra
por agotamiento en estría en Mackonkey que es un medio selectivo, se incuba a 37°C
24 horas.

RESULTADOS

En esta caso ha ocurrido algo extraño, ya

que al resto de compañeros se les ha
confirmado que es E.Coli, a nosotras se nos
ha quedado el medio de cultivo y las colonias
de un tono amarillo, por lo que nos han
crecido otros microorganismos que podemos
deducir que son bacterias Gram – y como
son de color blanco –amarillo no fermentan
la lactosa.

2.4 IDENTIFICACIÓN DE E.COLI MEDIANTE PRUEBAS

BIOQUÍMICAS

Prueba del gas: Inocular 10 ml de agua de la ría

sin diluir en 10 ml de caldo lauril-sulfato, por
último introducir la camapana Durham e
incubar a 37°C durante 24 horas.

Fluorescencia:

Kovacs: Añadir a una colonia típica de E.Coli del

cultivo de Chromocult unas dos gotas del
reactivo Kovacs, si se pone de color rosa como ha
sido nuestro caso significa que se trata de
E.Coli.
MICROBIOLOGÍA: Cuestionario
1. ¿Cómo generarías una atmósfera anaerobia?

Se realiza en las placas una siembra en sándwich o en profundidad. A continuación,

se meten los cultivos en una bolsa herméticamente cerrada, que contiene además un
secuestrante de oxígeno.

2. Diferencia entre medio selectivo y diferencial.

Medio selectivo: Llevan incorporada alguna sustancia que inhibe el crecimiento de

determinados microorganismos pero no afecta al desarrollo de otros.
Medio diferencial: Llevan incorporada alguna sustancia que solamente son capaces de
utilizar ciertos microorganismos que crecen en el medio.

3. En el Lauril sulfato que pruebas han de cumplirse para asegurar que es E- Coli.

Producción de gas en la campana Durham

Mediante la prueba del indol con el recativo Kovacs
Prueba de la fluorescencia con luz ultravioleta

4. Indica, esquemáticamente, el comportamiento de las bacterias frente a la

temperatura.

5. En un análisis de una muestra el de agua de coliformes totales de UFC/ ml es

de 45. ¿ Es posible que el UFC/ml de coliformes fecales sea de 100?. Razona la
respuesta.

No, ya que si están en un mismo cultivo los coliformes fecales forman parte de esos
totales.
6. Tienes dos muestras de agua, una clorada y otra sin clorar. ¿Cuál filtrarías
primero?

Primero la no clorada, para evitar que los residuos de cloro afecten a la muestra.

A la clorada se le añade tiosulfato, que secuestra el cloro

7. ¿Cuál es la finalidad de las pruebas bioquímicas?

Identificar de qué tipo de microorganismo se trata, con nombre y apellidos.

8. La producción de gas se observa en medio sólido, medio líquido o en ambos.

En ambos:
En medio líquido se observa con la campana Durham
En medio sólido por la rotura del mismo

9. ¿Cuántas diluciones son necesarias para realizar un recuento de bacterias?

Dependerá de la concentración bacteriana inicial, pero habrá que realizar tantas

diluciones como sean necesarias para que haya entre 30y 300 UFC.

10. Enumera los tipos de esterilización.

Térmica: calor seco/húmedo.
Incineración.
Química
Alta presión.
Ultravioleta.
Radiación.

11. ¿Para que se utilizan los indicadores en un medio de cultivo?

Para detectar la actividad o presencia de algún microorganismo determinado.

12. Diferencia entre esterilización y desinfección?

Esterilización: Eliminación de todo tipo de microorganismo, incluidas sus formas de

resistencia (esporas).
Desinfección: Eliminación de microorganismos patógenos o nó.

13. ¿Cuál es la finalidad de la siembra en estría?

Distribuir la muestra de tal manera que se puedan contar fácilmente las colonias.

14. ¿Cuándo se flambea el asa de siembra?

Antes y después de cada siembra.

15. Te dan una muestra para realizar un análisis microbiológico ¿Qué pasos
realizarías?

Prepara medios de cultivo generales y específicos

Realizar diluciones
Sembrar en los medios generales
Resembrar en medios específicos para lograr un cultivo puro
Realizar pruebas bioquímicas

16. Antes de realizar una prueba bioquímica. ¿De qué hay que cerciorarse
respecto al cultivo de sembrar?

De que sea un cultivo puro

17. ¿Cómo podemos saber que un alimento está contaminado?, ¿Tiene alguna
característica especial?

Un alimento contaminado no tiene por qué presentar una característica en especial

(olor, sabor, color…pueden mantenerse igual); por lo tanto es necesario realizar un
análisis en el laboratorio.