Universidad Nacional Autónoma de Nicaragua, Managua

UNAN-Managua.
Facultad Regional Multidisciplinaria de Carazo
FAREM-CARAZO
Departamento De Ciencias, Tecnología y Salud
Licenciatura en Bioanálisis Clínico

Unidad 1: Generalidades de la Microbiología

Medios de cultivos.
Fases de la curva de crecimiento de los microorganismos.
Agentes antimicrobianos, físicos y químicos que impiden el desarrollo de
los diferentes microorganismos.
Microbiota normal de diferentes sitios anatómicos.
Muestras biológicas para el estudio microbiano.
OBJETIVOS
 Exponer medios de cultivos y la curva de crecimiento de los microorganismos.
 Describir las propiedades de los microorganismos para producir enfermedad en el
ser humano, así como la microbiota norma del cuerpo humano.
 Explicar la toma de muestras biológicas para el estudio microbiano.
Medios de cultivos
Uno de los sistemas más importantes para la identificación de microorganismos es observar su
crecimiento en sustancias alimenticias artificiales preparadas en el laboratorio. El material
alimenticio en el que crecen los microorganismos es el Medio de Cultivo y el crecimiento de los
microorganismos es el Cultivo. Se han preparado más de 10.000 medios de cultivo diferentes.
Para que las bacterias crezcan adecuadamente en un medio de cultivo artificial debe reunir una serie
de condiciones como son: temperatura, grado de humedad y presión de oxígeno adecuado, así como
un grado correcto de acidez o alcalinidad. Un medio de cultivo debe contener los nutrientes y
factores de crecimiento necesarios y debe estar exento de todo microorganismo contaminante.
La mayoría de las bacterias patógenas requieren nutrientes complejos similares en composición a
los líquidos orgánicos del cuerpo humano. Por eso, la base de muchos medios de cultivo es una
infusión de extractos de carne y Peptona a la que se añadirán otros ingredientes.
El agar es un elemento solidificante muy empleado para la preparación de medios de cultivo. Se
licúa completamente a la temperatura del agua hirviendo y se solidifica al enfriarse a 40 grados.
Con mínimas excepciones no tiene efecto sobre el crecimiento de las bacterias y no es atacado por
aquellas que crecen en él.
La Gelatina es otro agente solidificante pero se emplea mucho menos ya que bastantes bacterias
provocan su licuación.
En los diferentes medios de cultivo se encuentran numerosos materiales de enriquecimiento como
hidratos de carbono, suero, sangre completa, bilis, etc. Los hidratos de Carbono se adicionan por
dos motivos fundamentales: para incrementar el valor nutritivo del medio y para detectar reacciones
de fermentación de los microorganismos que ayuden a identificarlos. El suero y la sangre completa
se añaden para promover el crecimiento de los microorganismos menos resistentes.
También se añaden colorantes que actúan como indicadores para detectar, por ejemplo, la
formación de ácido o como inhibidores del crecimiento de unas bacterias y no de otras (el Rojo
Fenol se usa como indicador ya que es rojo en pH básico y amarillo en pH ácido. La Violeta de
Genciana se usa como inhibidor ya que impide el crecimiento de la mayoría de las bacterias Gram-
positivas).
QUE ES UN MEDIO DE MEDIOS DE CULTIVO
Un medio de cultivo es un sustrato o una solución de nutrientes que permite el desarrollo de
microorganismos. En las condiciones de laboratorio para realizar un cultivo, se debe sembrar sobre
el medio de cultivo elegido las muestras en las que los microorganismos van a crecer y
multiplicarse para dar colonias. Los microorganismos son los seres más abundantes de la tierra,
pueden vivir en condiciones extremas de pH, temperatura y tensión de oxígeno, colonizando una
amplia diversidad de nichos ecológicos. Entre los requerimientos más importantes para su
desarrollo están el carbono, el oxígeno, nitrógeno, dióxido de carbono e hidrógeno. Muchas
bacterias sin embargo necesitan del aporte extra de factores de crecimiento específicos en forma de
suero, sangre y extracto de levadura entre otros.
Clasificación de los medios de cultivo
Según su origen:
a) NATURALES: son los preparados a partir de sustancias naturales de origen animal o vegetal
como ser extractos de tejidos o infusiones y cuya composición química no se conoce exactamente.
b) SINTÉTICOS: son los medios que contienen una composición química definida cuali y
cuantitativamente. Se utilizan para obtener resultados reproducibles.
c) SEMISINTÉTICOS son los sintéticos a los que se les añaden factores de crecimiento bajo una
forma de un extracto orgánico complejo, como por ejemplo extracto de levadura.
Según su consistencia
a) LÍQUIDOS: se denominan caldos y contienen los nutrientes en solución acuosa.
b) SÓLIDOS: se preparan añadiendo un agar a un medio líquido (caldo) a razón de 15g/litro. El
agar es una sustancia inerte polisacárido (hidrato de carbono) que se extrae de las algas. Como esta
sustancia no es digerida por las bacterias no constituye ningún elemento nutritivo. Este conjunto
convenientemente esterilizado puede ser vertido en placas de Petri o en tubos de ensayo y presentan
la posibilidad de aislar y diferenciar bacterias, "procesos que antes no eran posibles en medio
líquido".
c) SEMISÓLIDOS: contienen 7,5 g de agar /litro de caldo. Se utilizan para determinar la motilidad
de las especies en estudio. Actualmente se encuentran disponibles comercialmente con el agregado
de agar.
Según su composición: A causa de los requerimientos químicos del mundo microbiano, a
veces es necesario agregar o eliminar componentes químicos del medio.
a) COMUNES O UNIVERSALES: su finalidad es el crecimiento de la mayor parte de los
Microorganismos poco existentes. Es el medio más frecuentemente utilizado para mantener
colonias microbianas. Por ejemplo: agar común o caldo común.
b) ENRIQUECIDOS: están compuestos de un medio base como apoyo del crecimiento al cual se
le puede agregar un gran exceso de nutrientes como suplementos nutritivos, por ejemplo: sangre,
suero, líquido ascítico, etc. Se utiliza para microorganismos que tienen grandes exigencias
nutricionales.
c) SELECTIVOS: son sólidos en los que la selectividad se consigue alterando las condiciones
físicas del medio o añadiendo o suprimiendo componentes químicos específicos con el fin de inhibir
el crecimiento de especies químicas cuyo crecimiento no interesa. Este tipo de medio sólo permite
el crecimiento de un grupo de microorganismos e inhibiendo el de otros. Se utiliza para seleccionar
y aislar microorganismos a partir de poblaciones mixtas. Por ejemplo Agar salado-manitol o
Chapman (permite el crecimiento de ciertos estafilococos).

Entre los factores que inhiben el crecimiento de bacterias indeseables

tenemos:
Antisépticos: sustancias antibacterianas inespecíficas que pueden actuar como inhibidores. Por
ejemplo: el medio de cultivo comercial S - S (Salmonella - Shigella) que contiene verde brillante
(inhibe las bacterias grampositivas) y sales biliares (que inhiben un gran número de gramnegativas
menos enterobacterias). Otro ejemplo es el medio de Mc Conkey que contiene cristal violeta (inhibe
las grampositivas pero no las enterobacterias)
Antibióticos: sustancias antibacterianas específicas que impiden el crecimiento de aquellos
Microorganismos que no nos interesa que crezcan en ese medio. Un ejemplo es el medio de Thayer
Martin con VCN (vancomicina, colistina y nistatina) que se utiliza para el aislamiento de
gonococos. La penicilina en una concentración de 5,50 unidades/ ml inhibe la mayoría de las
grampositivas. Otro ejemplo es el medio de Sabouraud - cloranfenicol para el aislamiento de
Cándida albicans.
d) DIFERENCIALES: son medios de cultivos que nos permiten distinguir entre varios géneros y
especies de microorganismos. Por ejemplo si al medio se le ha añadido un carbohidrato y un
indicador y la bacteria que se cultiva es capaz de fermentar dicho carbohidrato, se produce una
acidificación del medio con el consiguiente viraje de color del indicador por el cambio de pH. El
citrato de Simmons es un medio cuya única fuente de carbono es el citrato sódico, entonces en él
solo crecerán las bacterias capaces de desarrollarse utilizando como única fuente de carbono ese
componente. A menudo la separación se basa en la diferencia de color de las colonias aisladas,
como en el agar con azul de metileno - eosina que permite diferenciar E. coli (colonias oscuras y de
brillo metálico) de Enterobacter aerogenes (colonias rosadas de centro azul sin brillo). Estos dos
microorganismos en agar nutritivo producen colonias de color gris blancuzco.
Suelen ser a la vez selectivos, por lo tanto solo crecerán determinadas bacterias (pueden ser dos o
más tipos) que al actuar sobre alguno de los componentes específicos del medio, demuestran
algunas de sus propiedades o características y nos permite diferenciar entre ambos tipos.
e) DE ENRIQUECIMIENTO: son medios líquidos que contienen un agente que inhibe las
especies no
Deseadas pero que favorece el crecimiento irrestricto del agente infeccioso. El medio de Muller -
Kauffman, permite el crecimiento de Salmonella inhibiendo a su vez el de numerosos coliformes.
Esto es de gran importancia ya que en ciertas muestras, por ejemplo fecales, el agente infeccioso
(Salmonella) es frágil y puede ser superado en número por agente bacterianos indígenas como E.
coli; por lo tanto antes de realizar las pruebas de laboratorio es necesario aumentar su número con
respecto a ésta en un caldo de enriquecimiento. Ejemplo de este tipo son los caldos de tetrationato y
selenito. El agua de peptona alcalina se utiliza para Vibrio cholerae.
El enriquecimiento es una técnica que utiliza un medio selectivo líquido para permitir el desarrollo
de un microorganismo a partir de una muestra que contiene una gran variedad de microorganismos.
Así, aquellos microorganismos para los que el ambiente sea más favorable crecerán más que los
otros y finalmente serán predominantes
f) DE TRANSPORTE: son utilizados para asegurar la viabilidad de la bacteria sin multiplicación
Significativa de los microorganismos desde el momento de su extracción hasta su posterior estudio.
Se utilizan generalmente cuando las muestras deben ser enviadas de un laboratorio a otro. Se
recomienda un límite de dos horas desde la recolección de las muestras y su estudio en el
laboratorio, pero este límite de tiempo es superado (frecuentemente cuando se trata de muestras
tomadas en un consultorio). Esta demora hace necesario el uso de medios de transporte adecuados.
Los medios de transporte más frecuentemente utilizados son los de Stuart, Amies y Carey - Blair.
Existe una unidad descartable de cultivo de transporte llamada Culterette que consiste en un tapón
estéril de poliestireno y una ampolla en la parte inferior que se rompe cuando se ejerce presión
liberando el medio de transporte de Stuart alrededor del extremo del tapón impregnado en la
muestra. Hasta hace algunos años los componentes orgánicos mencionados debían ser obtenidos por
el microbiólogo y el medio de cultivo se preparaba en el laboratorio. Actualmente se dispone
comercialmente de la mayor parte de los medios e incluso de sus componentes adicionales.
Un gran número de medios de cultivo usados en el laboratorio de microbiología son mixtos, es decir
que tienen como finalidad la de varios grupos de los mencionados, por ejemplo, el agar S- S es
selectivo (pues tiene un inhibidor: el verde brillante) y es a la vez un medio diferencial (lleva
lactosa y un indicador) que permite diferenciar las bacterias fermentadoras o no de dicho
polisacárido. El medio de Thayer y Martin para Neisseria es un medio enriquecido (contiene
plasma) y es selectivo (tiene 3 antibióticos inhibidores de la flora bacteriana y fúngica: colistina,
vancomicina y nistatina).

Condiciones generales para el cultivo de microorganismos

El desarrollo adecuado de los microorganismos en un medio de cultivo se ve afectado por una serie
de factores de gran importancia y que, en algunos casos, son ajenos por completo al propio medio.
1- disponibilidad de nutrientes adecuados
Un medio de cultivo adecuado para la investigación microbiológica ha de contener, como mínimo,
carbono, nitrógeno, azufre, fósforo y sales inorgánicas. En muchos casos serán necesarias ciertas
vitaminas y otra sustancia inductoras del crecimiento. Siempre han de estar presentes las sustancias
adecuadas para ejercer de donantes o captadores de electrones para las reacciones químicas que
tengan lugar.

Todas estas sustancias se suministraban originalmente en forma de infusiones de carne, extractos de

carne o extractos de levadura. Sin embargo, la preparación de estas sustancias para su aplicación a
los medios de cultivo provocaba la pérdida de los factores nutritivos lábiles.

Actualmente, la forma más extendida de aportar estas sustancias a los medios es utilizar peptona
que, además, representa una fuente fácilmente asequible de nitrógeno y carbón ya que la mayoría de
los microorganismos, que no suelen utilizar directamente las proteínas naturales, tienen capacidad
de atacar los aminoácidos y otros compuestos más simples de nitrógeno presentes en la peptona.
Ciertas bacterias tienen necesidades nutritivas específicas por lo que se añade a muchos medias
sustancias como suero, sangre, líquido ascítico, etc. Igualmente pueden ser necesarios ciertos
carbohidratos y sales minerales como las de calcio, magnesio, manganeso, sodio o potasio y
sustancias promotoras del crecimiento, generalmente de naturaleza vitamínica.
Muy a menudo se añaden al medio de cultivo ciertos colorantes, bien como indicadores de ciertas
actividades metabólicas o bien por sus capacidades de ejercer de inhibidores selectivos de ciertos
microorganismos.
2- consistencia adecuada del medio
Partiendo de un medio líquido podemos modificar su consistencia añadiendo productos como
albúmina, gelatina o agar, con lo que obtendríamos medios en estado semisólido o sólido.

Los medios solidificados con gelatina tienen el gran inconveniente de que muchos microorganismos
no se desarrollan adecuadamente a temperaturas inferiores al punto de fusión de este solidificante y
de que otros tienen la capacidad de licuarla.

Actualmente los medios sólidos son de uso universal, por su versatilidad y comodidad, pero hay
también gran cantidad de medios líquidos cuyo uso está ampliamente extendido en el laboratorio.
3- presencia (o ausencia) de oxígeno y otros gases
Gran cantidad de bacterias pueden crecer en una atmósfera con tensión de oxígeno normal. Algunas
pueden obtener el oxígeno directamente de variados sustratos. Pero los microorganismos anaerobios
estrictos sólo se desarrollarán adecuadamente en una atmósfera sin oxígeno ambiental. En un punto
intermedio, los microorganismos microaerófilos crecen mejor en condiciones atmosféricas
parcialmente anaerobias (tensión de oxígeno muy reducida), mientras los anaerobios facultativos
tienen un metabolismo capaz de adaptarse a cualquiera de las citadas condiciones.
4- condiciones adecuadas de humedad
Un nivel mínimo de humedad, tanto en el medio como en la atmósfera, es imprescindible para un
buen desarrollo de las células vegetativas microbianas en los cultivos. Hay que prever el
mantenimiento de estas condiciones mínimas en las estufas de cultivo a 35-37ºC proporcionando
una fuente adecuada de agua que mantenga la humedad necesaria para el crecimiento de los cultivos
y evitar así que se deseque el medio.
5- Luz ambiental
La mayoría de los microorganismos crecen mucho mejor en la oscuridad que en presencia de luz
solar. Hay excepciones evidentes como sería el caso de los microorganismos fotosintéticos.
6- pH

La concentración de iones hidrógeno es muy importante para el crecimiento de los

microorganismos. La mayoría de ellos se desarrollan mejor en medios con un pH neutro, aunque los
hay que requieren medios más o menos ácidos. No se debe olvidar que la presencia de ácidos o
bases en cantidades que no impiden el crecimiento bacteriano pueden sin embargo inhibirlo o
incluso alterar sus procesos metabólicos normales.
7- Temperatura
Los microorganismos mesófilos crecen de forma óptima a temperaturas entre 15 y 43ºC. Otros
como los Psicrófilas crecen a 0ºC y las termófilas a 80ºC o incluso a temperaturas superiores
(hipertemófilos). En líneas generales, los patógenos humanos crecen en rangos de temperatura
mucho más cortos, alrededor de 37ºC, y los saprofitos tienen rangos más amplios.
8- Esterilidad del medio
Todos los medios de cultivo han de estar perfectamente estériles para evitar la aparición de formas
de vida que puedan alterar, enmascarar o incluso impedir el crecimiento microbiano normal del o de
los especímenes inoculados en dichos medios. El sistema clásico para esterilizar los medios de
cultivo es el autoclave (que utiliza vapor de agua a presión como agente esterilizante).
Etapas de la curva de crecimiento de las bacterias.
Se define como crecimiento el aumento de la cantidad de constituyentes y estructuras celulares,
cuando hay crecimiento en ausencia de división celular hay aumento en el tamaño y peso de la
célula. Mientras que cuando el crecimiento es seguido de división de células hay un aumento en el
número de células.
El crecimiento de una población es el aumento del número de células como consecuencia de un
crecimiento individual y posterior división. Esto ocurre de una manera exponencial. El crecimiento
exponencial es una consecuencia del hecho de que cada célula se divide dando dos células.
La velocidad del crecimiento exponencial se expresa como el tiempo de generación “G”, y este se
define como el tiempo que tarda una población en duplicarse, los tiempos de generación varían
ampliamente entre los distintos microorganismos.
Por ejemplo una bacteria con un tiempo G de 30 min.

La curva del crecimiento de una población bacteriana se divide en 4 fases:

Latencia
Cuando una población bacteriana es inoculada en un medio fresco el crecimiento no suele comenzar
d inmediato, sino después de un tiempo llamado latencia.
La fase de latencia representa un periodo de transición para los microorganismos cuando son
transferidos a una nueva condición. En esta fase se producen las enzimas necesarias para que ellos
puedan crecer en un nuevo medio ambiente. En esta fase no hay incremento de células, pero hay
gran actividad metabólica, aumento en el tamaño individual de las células, en el contenido proteico,
ADN y peso seco de las células.
Exponencial o logarítmica
Es el periodo de la curva del crecimiento en el cual el microorganismo crece exponencialmente, es
decir que cada vez que pasa un cierto tiempo de generación la población se duplica. Bajo
condiciones apropiadas la velocidad de crecimiento es máxima. Las condiciones ambientales
afectan la velocidad de crecimiento exponencial.
Fase estacionaria
En cultivos en recipientes cerrados una población no puede crecer indefinidamente de forma
exponencial. Las limitaciones de crecimiento ocurren ya sea por agotamiento de algún nutriente
esencial, por acumulación de productos tóxicos, porque se alcance un número de células elevado
para el espacio disponible o por combinación de las causas anteriores.
Fase de muerte
Si la incubación continua después de que una población microbiana alcanza la fase estacionaria, las
células pueden continuar vivas y seguir metabolizando, pero va a comenzar una disminución
progresiva en el número de células viables, y cuando esto ocurre se dice que la población ha entrado
en fase de muerte.
Agentes antimicrobianos, físicos y químicos que impiden el desarrollo de
los diferentes microorganismos.
Agentes antimicrobianos son aquellos utilizados para destruir o impedir el crecimiento de los
microorganismos. Por su estado pueden ser: líquidos, sólidos o gases y por su naturaleza, físicos y
químicos. La eficacia de estos agentes está condicionada por varios factores como son: la natura-
leza y concentración del mismo, así como la concentración y características de la población
microbiana presente, la temperatura, la duración del contacto entre el agente y los microorganismos,
la naturaleza del material a descontaminar, particularmente la presencia de material orgánico, y el
pH. Los agentes antimicrobianos actúan sobre la estructura de la célula bacteriana y sobre sus
procesos metabólicos, y sus modos posibles de acción son: desnaturalización de la proteína,
rompimiento de la membrana o de la pared celular, remoción de grupos sulfhidrilo libres,
interferencia con reacciones enzimáticas de los microorganismos y acción sobre el ADN.

A continuación vamos a exponer, algunos delos términos relacionados con los agentes
antimicrobianos y los procesos de esterilización y desinfección.
Bacteriostático es aquel que aunque no produce la muerte a una bacteria, impide su
reproducción; la bacteria envejece y muere sin dejar descendencia. Un efecto
bacteriostático está producido por sustancias bacteriostáticas. Estas sustancias son
secretadas por los organismos como medios defensivos contra las bacterias.
Bactericida es aquel que produce la muerte a una bacteria. Un efecto bactericida está
producido por sustancias bactericidas. Estas sustancias son secretadas por los organismos
como medios defensivos contra las bacterias. Antimicrobianos de efecto lísico o lítico
(Lisis) en las bacterias, provocan una reducción en la población bacteriana en el huésped o
en el uso de sensibilidad microbiana.
VIRICIDA (VIRUCIDA): Agente destructor de virus.
Fungicida: Es un agente con la capacidad de eliminar hongos.
Esporicida: agente que destruye a las esporas bacterianas o micóticas.
Antisépticos .Son compuestos químicos con efecto antimicrobiano que se pueden aplicar
en tejido vivo, localmente, de forma tópica en piel sana. Al ser sustancias que se utilizan en
tejidos vivos requieren de propiedades especiales.
EN GENERAL, EL USO DE ANTISÉPTICO ESTÁ RECOMENDANDO PARA:
 Disminuir la colonización de la piel con gérmenes.
  Lavado de manos habitual en unidades de alto riesgo.
 Preparación de la piel para procedimientos invasivos.
 Para la atención de pacientes inmunocomprometidos o con muchos factores de
riesgo de IIH.
 Posterior a la manipulación de material contaminado.
 Lavado quirúrgico de manos.
 Preparación pre operatoria de la piel.
ANTISÉPTICO DE USO HOSPITALARIO
ALCOHOLES:
Su mecanismo de acción corresponde a la desnaturalización de las proteínas. Tienen buena
acción contra las formas vegetativas de las bacterias Gram + y - , bacilo tuberculoso,
hongos y virus, hepatitis B y VIH.

Su aplicación en la piel es segura y no presenta efectos adversos, solo sequedad de la piel

en algunos casos de uso de formulaciones no cosméticas.

Es de rápida acción, incluso desde los 15 segundos. Aunque no tiene efecto químico de
persistencia sus efectos biológicos de daño microbiano permanece por varias horas.
Existen tres tipos de alcoholes útiles como antiséptico:
etílico
propílico
isopropílico

En mayor uso es el alcohol etílico, pos su disponibilidad, ya que respecto a la efectividad

no se han demostrado diferencias importantes. Respecto a la concentración, la más utilizada
es al 70%, ya que aparte de producir menos sequedad e irritación de la piel y es de menor
costo.
TINTURA DE YODO:
-Su acción se produce por oxidación e inactivación de los componentes celulares.
-Su uso es relativamente seguro y su acción es rápida, pudiendo mantener el efecto hasta 2
horas
-Tiene un amplio espectro de acción, su concentración habitual de uso es entre 1 a 2% de
yodo y yoduro de potasio en 70% de alcohol
-Este producto tiene como principal desventaja la irritación de la piel y quemaduras de tipo
química, especialmente cuando se deja por muchas horas en la piel sin retirar el producto.
-Su uso masivo responde a la facilidad de su preparación y bajo costo. Se utiliza por
muchos años para la preparación de la piel antes de la cirugía y en menor frecuencia previo
a las punciones.
-Los alcoholes son volátiles e inflamables por lo que deben ser almacenados en condiciones
apropiadas.
POVIDONA YODADA:
-Presenta el mismo mecanismo de acción y espectro de los yodados.
-Es un compuesto soluble en agua que resulta de la combinación del yodo y
polivinyilpyrrolidona con lo cual se mejora la solubilidad del yodo y permite su liberación
en forma gradual a los tejidos. Este efecto determina una menor irritación de la piel y una
mayor disponibilidad del producto en el tiempo.
-El término yodo disponible se refiere a la cantidad de yodo disponible como reservorio y
el de yodo libre al porcentaje en solución en condiciones de actuar, es decir una solución de
povidona yodada al 10%, contiene 1% de yodo disponible y la concentración de yodo libre
es de 1 a 2 partes de un millón que se mantiene hasta agotarse el yodo disponible. Esta
ventaja del producto se pierde al diluirse en agua, ya que en estas circunstancias se
comporta como solución acuosa de yodo.
-Su actividad puede verse disminuida por la presencia de sangre u otra materia orgánica.
-Las concentraciones de uso habitual como Lavador quirúrgico son al 7,5 % y 8% y en el
utilizado para curaciones es al 10%.
-En relación a la tintura de yodo o lugol, presenta menor irritación dérmica. Se deben usar
con precaución en los recién nacidos y quemados
-Su acción antiséptica se clasifica entre nivel alto y nivel intermedio. Son letales en minutos
para las bacterias, hongos, virus, protozoos, quistes amebas y esporas. Sin embargo, frente
a esporas secas requiere de un mayor tiempo de exposición (horas).
-Los antisépticos yodados tienen la ventaja de ser baratos.
CLORHEXIDINA:
-Su acción está determinada por daño a la membrana celular y precipitación del citoplasma.
-Posee un amplio espectro de acción, actúa sobre bacterias, gram + y gram -, no tiene
acción sobre el bacilo tuberculoso y débil en hongos. Su acción antiviral incluye VIH,
herpes simplex, citomegalovirus e influenza.
-Las ventajas que justifican el uso de Clorhexidina son la acción germicida rápida y su
duración prolongada gracias a que esta sustancia tiene gran adhesividad a la piel, tiene un
buen índice terapéutico.
-Su uso es seguro incluso en la piel de los recién nacidos y la absorción a través de la piel
es mínima. Solamente se ha reportado toxicidad en instilaciones de oído medio y ojos.
-La rapidez de su acción es intermedia y posee alto nivel de persistencia de su acción
debido a una fuerte afinidad con la piel, por lo que sus efectos antimicrobianos permanecen
hasta 6 horas después de su uso, el mayor efecto que cualquiera de los agentes utilizados
para el lavado de manos. Presenta un importante efecto acumulativo de modo que su acción
antimicrobiana aumenta con su uso periódico.
-Su actividad no se ve afectada por la presencia de sangre u otras sustancias orgánicas, sin
embargo su acción se puede ver afectada por surfactantes no iónicos o aniones inorgánicos
presentes en el agua dura y componentes utilizados en su preparación, razón por la cual su
actividad es fórmula dependiente y esto determina las distintas concentraciones de uso.
-Las formulaciones más comunes son al 2% y 4%.
DESINFECTANTES: Los desinfectantes son sustancias químicas capaces de destruir un
germen patógeno que debido a su alta toxicidad celular se aplican solamente sobre tejido
inanimado, es decir material inerte.
Con objeto de racionalizar los procedimientos más adecuados para cada tipo de material
Spaulding clasificó los elementos de atención según su utilización en el paciente en cuanto
a su invasión en:
Artículos críticos: Son aquellos que acceden a cavidades normalmente estériles del
organismo, por lo que deben ser siempre estériles
Artículos semicríticos: Son aquellos que entran en contacto con piel no intacta o con
mucosas. Estos artículos deben estar libres de toda forma vegetativa de los
microorganismos y de preferencia deben ser estériles. Si la esterilización no es factible
deben ser sometidos a desinfección de alto nivel.
Artículos no críticos: Son aquellos que toman contacto con piel intacta, o no toman
contacto con el paciente. Estos artículos sólo requieren limpieza y secado y en ocasiones
desinfección de bajo nivel.
La desinfección de alto nivel consiste en la acción letal sobre todos los microorganismos,
incluyendo bacterias, hongos y algunas esporas. No reemplaza a los procedimientos de
esterilización. Dentro de este grupo encontramos el glutaraldehido activado al 2% en
solución acuosa.
En la desinfección de nivel intermedio hay destrucción de todas las formas vegetativas de
los microorganismos exceptuando las esporas. A este grupo pertenece el Hipoclorito de
Sodio y Alcohol etílico al 70%.

La desinfección de nivel bajo no alcanza a esporas, ni hongos, solo bacterias vegetativas y

alguno virus. En este grupo encontramos los compuestos acuosos de amonio cuaternario 0,1
a 0,2%.
GLUTARALDEHIDO: El glutaraldehido es un desinfectante altamente utilizado en el
medio hospitalario debido a que tiene un amplio espectro de acción, es activo en presencia
de material orgánico y no es corrosivo. Dependiendo del tiempo de exposición se alcanzan
distintos grados de desinfección. Al esperar 12 horas se obtiene esterilización, con 30
minutos, desinfección de nivel alto y con 10 minutos, de nivel bajo. Si el material que se va
a desinfectar está sucio con sangre, pus o cualquier elemento orgánico, se va a alterar el
poder de desinfección. El material orgánico actúa como barrera física y se interpone entre
el desinfectante y la superficie de contacto del material a limpiar, por lo que es
recomendable limpiar previamente todo el material que será sometido a desinfección. No es
corrosivo.

-Se utiliza para la desinfección de alto nivel en materiales que no se pueden someter a altas
temperaturas como endoscopios, los cuales tienen fibras ópticas delicadas y piezas de
goma.

-Es una sustancia tóxica, no sólo para el personal que lo manipula, sino también para las
personas que utilizan el instrumental. Por lo tanto se debe enjuagar el instrumental después
de la desinfección para eliminar todo el desinfectante impregnado.
-Se inactiva después de dos semanas de preparada y por dilución, por ejemplo al sumergir
instrumentos previamente lavados con agua sin secarlos.
HIPOCLORITO DE SODIO 1%
A pesar de ser un desinfectante de alto nivel tiene un uso clínico más limitado porque el pH
alcalino disminuye su actividad, lo mismo con la presencia de materia orgánica, y corroe el
material metálico.
CONSIDERACIONES GENERALES
- La selección del antiséptico o desinfectante a usar debe considerar poder germicida,
seguridad y eficacia del producto, rapidez, espectro de acción y efecto residual.
- Los desinfectantes y antisépticos deben usarse respetando las instrucciones del fabricante
respecto a duración del producto, condiciones de conservación, tiempo de contacto y
dilución.
- No se debe usar dos o más agentes químicos simultáneamente, ya que se altera su acción.
- El contacto de estas sustancias químicas sobre objetos o tejidos sucios pueden inactivar o
reducir su acción.
- Los productos yodados deben envasarse en frascos oscuros o quedar protegidos de la luz.
- No se debe rellenar ni trasvasijar los antisépticos y desinfectantes.
NORMAS DE RACIONALIZACIÓN DE ANTISÉPTICOS Y DESINFECTANTES
- Debe existir un listado único de ellos para todo el hospital, en el que se especifiquen las
normas de uso, indicaciones, contraindicaciones, periodo de vencimiento y precauciones
para su conservación.
- Debe existir un mecanismo de evaluación del cumplimiento de las normas del uso de
desinfectantes y antisépticos.

- Los productos seleccionados deberán tener efectividad comprobada para las indicaciones
que se han definido en el centro hospitalario en uso.
- Guardar en recipientes libres de contaminación, rotulados, tapados y con la fecha de
expiración vigente.
- Evitar el trasvasije, para evitar la contaminación del producto.
Estéril: libre de vida de cualquier clase .tenemos que señalar la muerte de los
microorganismos en su capacidad para reproducir, de material estéril.
Aséptico: Se le denomina aséptico a aquello que está libre de algún tipo de infección o de
contaminación. En medicina la asepsias aquello que está libre de materia séptica, que es
aquella que, o bien contiene algún tipo de gérmenes patógenos, o aquella que produce
putrefacción.
Todos los micoorganismos son afectados por diferentes factores fiscos, entre ellos el más
importante es la temperatura, pero también otros elementos del medio.
Atendiendo a este margen de temperatura de crecimiento, los microorganismos se
clasifican en:
Hipertemófilos: Su temperatura óptima se encuentra por encima de los 80ºC. Muchos de
ellos son arqueas.
Termófilos: Su temperatura óptima se encuentra entre 45-70ºC. Suelen ser
microorganismos de vida libre
Mesófilos: Su temperatura óptima se encuentra entre los 25-45ºC. Incluye
microorganismos patógenos y comensales del hombre y animales de sangre caliente y
algunos de vida libre.
Psicótrofos: La temperatura óptima de los microorganismos de este grupo está por debajo
de los 25 – 30°C incluye microorganismos de vida libre.
Psicrófilas: Su temperatura óptima de desarrollo se encuentra entre los 12 – 15°C.

La mayor parte de las bacterias son Neutrófilas. Muchas bacterias Neutrófilas modifican el
Ph del medio, y resisten entornos relativamente ácidos o alcalinos.
Microbiota normal de diferentes sitios anatómicos.
Definiciones: El cuerpo humano presenta una gran superficie cutánea y mucosa por la
que entra en contacto con el medio ambiente. En esta superficie existen diversos sectores,
donde residen microorganismos con diferentes características de humedad, temperatura, pH
y disponibilidad de nutrientes.
La flora humana normal es el conjunto de gérmenes que conviven con el huésped en
estado normal, sin causarle enfermedad. Su composición es característica para la especie
humana, tanto en los gérmenes que la componen como en su número y distribución en el
organismo.
Sitios colonizados y sitios estériles: La flora normal coloniza las superficies cutáneas
mucosas. Por otro lado, en el organismo existen sectores que son estériles en condiciones
normales: por ejemplo, pleura, meninges, cavidad peritoneal, pericardio, etc. Esto debe ser
tenido en cuenta al realizar un estudio microbiológico. Las técnicas empleadas para obtener
una muestra de un sitio con flora son diferentes a las de los sectores que no la tienen.
También son diferentes los medios de cultivo que se emplearán para sembrar esas muestras
(que requerirán a menudo de medios que inhiban la flora normal) y la interpretación de los
cultivos. Por ejemplo, el aislar un germen del líquido cefalorraquídeo es siempre patológico
si se tomaron las precauciones para no contaminar la muestra; en cambio, en un exudado
faríngeo se aislarán diversos gérmenes y se deberá valorar en forma cuidadosa cuales son
habitantes normales de ese sector y cuáles no.
Flora basal y flora transitoria: La flora basal es la característica de cada sector del
organismo y está constituida por gérmenes que siempre están presentes en ese sector. Por
ejemplo: Staphylococcus epidermidis en la piel o E. coli en el intestino. En cambio, la flora
transitoria es variable de un ser humano a otro y está compuesta por gérmenes que
colonizan en forma intermitente un determinado sector. Esta flora transitoria puede incluir
bacterias potencialmente patógenas para el propio individuo u otras personas que entran en
contacto con él.
Importancia de la flora normal: La flora humana normal desde diversos puntos de vista
representa un importante mecanismo de defensa del huésped. Contribuye al desarrollo de la
respuesta inmunológica, como ha sido demostrado en modelos animales que nacen y son
criados en condiciones de esterilidad (individuos axénicos). Estos animales presentan un
pobre desarrollo de los diversos componentes de su sistema inmunitario. La flora además
ayuda a evitar la colonización de la piel o las mucosas por bacterias que pueden ser
patógenas. Los gérmenes para iniciar la infección deben, en general, comenzar por
colonizar los epitelios. Allí seguramente compiten con los integrantes de la flora por
factores tales como receptores celulares y nutrientes.
Flora normal de la cavidad oral: Existen diversos nichos dentro de la cavidad oral y
pueden reconocerse diferencias si se estudia la flora de dientes, lengua, mucosa yugal o
surco periodontal. La flora oral es de tipo mixto, con asociación de gérmenes aerobios y
anaerobios. Las bacterias que se adhieren a la superficie dental en forma permanente y a
través de diferentes polímeros de origen bacteriano como dextranos y levanos. El contenido
de gérmenes anaerobios es máximo a nivel del surco gingival. Los dientes presentan
superficies de adherencia que tienen la particularidad de no renovarse en forma periódica,
como lo hacen los epitelios.
Composición: Predominan diferentes especies de Streptococcus α hemolíticos.
Streptococcus mutans y Streptococcus sanguis se hallan a nivel de la placa dentaria.
Streptococcus mitis se adhiere tanto a los dientes como a las mucosas; S. salivarius
predomina en la mucosa lingual. Entre los gérmenes anaerobios Gram positivos pueden
hallarse Actinomyces sp.
A nivel de la placa, y algunas especies de Lactobacillus, en menor cantidad. La mayoría de
los Gram negativos son anaerobios como Bacteroides del grupo melaninogenicus y
especies del género Fusobacterium. También pueden encontrarse espiroquetas del género
Treponema distintas de T. pallidum. Los cocos Gram positivos anaerobios pertenecen a los
géneros Peptococcus, Peptostreptococcus, Ruminococcus entre otros. Pueden además
aislarse especies de Mycoplasma y levaduras del género Cándida. Dado que se trata de un
complejo ecosistema, existen también complejas interrelaciones entre los distintos
integrantes. A nivel de la placa dentaria, las bacterias se hallan en grandes concentraciones,
formando micro colonias y disponiéndose en estratos. La flora de la cavidad oral está
involucrada en la patogenia de enfermedades como la caries y periodontitis. En el
desarrollo da la caries dental intervienen no sólo las bacterias sino también factores como el
pH ácido resultante de la descomposición de hidratos de carbono de la dieta, etc. La
periodontitis resulta de la agresión de la flora normal a los tejidos de sostén del diente. Los
gérmenes de la boca también causan procesos como abscesos periodontales y de cuello.
Pacientes con válvulas cardíacas patológicas pueden desarrollar endocarditis bacteriana en
la que están implicados Streptococcus α hemolíticos. Esta enfermedad suele ser una
infección endógena, causada por bacterias de la cavidad oral que pasan al torrente
sanguíneo debido a manipulaciones odontológicas, y colonizan válvulas cardíacas
alteradas. La actinomicosis cérvico-facial es una entidad que reconoce como agente
etiológico especies de Actinomyces provenientes de la boca.
Flora normal del aparato digestivo: El tubo digestivo alberga un gran número de
bacterias. También a este nivel se pueden reconocer distintos nichos ecológicos. La flora
normal intestinal contribuye a la síntesis de vitaminas K y vitaminas del complejo B y
colabora con procesos digestivos. Además compite con los microorganismos patógenos por
nutrientes y receptores y elabora bacteriocinas.
Estómago: En condiciones fisiológicas y sin alimentos, el pH gástrico es extremadamente
ácido, alrededor de 2; este pH aumenta aproximándose a la normalidad al ingerir alimentos.
La densidad de bacterias es relativamente baja y se compone de gérmenes de la flora oro
faríngea que han sido deglutidos como Streptococcus α hemolíticos, Lactobacillus sp.,
cocos anaerobios, Candida sp. Y otros gérmenes capaces de resistir el medio ácido.
Intestino delgado: En el duodeno se mantiene el pH que limita el crecimiento de
gérmenes. El peristaltismo representa un mecanismo importante que mantiene un número
bajo de bacterias. La bilis tiene propiedades antimicrobianas e inhibe de muchos gérmenes.
Otras sustancias, como la lisozima e IgA secretoria, también contribuyen a mantener un
número relativamente bajo de microorganismos. El número de bacterias aumenta
gradualmente hacia el íleon. En sectores distales del intestino delgado la flora se asemeja a
la colónica.
A nivel del íleon terminal se alcanzan concentraciones de 106 a 108 bacterias por ml de
contenido intestinal, con predominio de los anaerobios.
Intestino grueso: Las bacterias representan aproximadamente el 40% del peso seco de las
materias fecales. El aumento del contenido bacteriano probablemente se explica por: -
disminución del peristaltismo, - aumento del pH; cercano al fisiológico, - disminución del
contenido de agua. Pasando la válvula ileocecal los gérmenes de la flora alcanzan
concentraciones de 107 a 109 bacterias por ml, llegando al máximo en el recto con 10 11
bacterias por ml.
Es, sin duda, el mayor y más complejo ecosistema microbiano del organismo y se estima
que a nivel colónico conviven más de 500 especies diferentes de bacterias, con un
predominio notorio de gérmenes anaerobios. Estos corresponden en su mayoría a
microorganismos de los géneros Bacteroides, y Fusobacterium, entre los bacilos Gram
negativos, y especies de Peptostreptococcus, Sarcina y Veillonella entre los cocos.
Los bacilos Gram positivos están representados por especies de Bifidobacterium,
Actinomyces, Bacillus, Lactobacillus y Clostridium. Entre los anaerobios facultativos
predominan las enterobacterias, siendo E.coli la más numerosa, seguida de especies de
Klebsiella, Proteus, Enterobacter y Citrobacter.
De los cocos Gram positivos pueden hallarse especies de Enterococcus, Streptococcus y
Staphylococcus. La adquisición de la flora normal se inicia en el momento del nacimiento;
en el recién nacido los gérmenes que inicialmente colonizan el tubo digestivo provienen del
perineo y de la vagina de la madre. En general se trata de E. Coli, Klebsiella spp. Y
especies de Enterococcus; más raramente especies de Clostridium.
En lactantes alimentados a pecho se aíslan Bifidobacterium spp. Con la introducción de la
alimentación artificial aumenta el número y la diversidad de los gérmenes. Al año de edad
la flora digestiva es idéntica a la del adulto.
Importancia de la flora digestiva: - La presencia de la flora determina un correcto
desarrollo de la mucosa intestinal.-
- Interviene en el metabolismo de sustancias como el ácido fólico, biotina, vitaminas B12,
K y E.
- Favorece la producción de IgA y contribuye a la inmunotolerancia. Es un importante
estímulo antigénico.
- Interviene en el ciclo entero hepático de drogas como el Cloranfenicol.
- Tiene efecto de barrera, al ocupar nichos ecológicos, impide el establecimiento de otras
bacterias, potencialmente patógenas. Este fenómeno se conoce como interferencia
bacteriana.
- Segrega bacteriocinas, sustancias que son tóxicas para bacterias de otros géneros.
- La flora normal del tubo digestivo interviene en infecciones oportunistas o endógenas en
circunstancias tales como obstrucciones mecánicas, o perforación del tubo digestivo. En
este caso, los gérmenes pasan al peritoneo, causando una enfermedad grave.
Flora normal vaginal: Fue una de las primeras en ser reconocida en 1892 por Döderlein
quien describió el patrón normal que se observa en la mujer en edad genital activa. La
composición de la flora depende del contenido de estrógenos.
El estímulo hormonal determina la proliferación de las células epiteliales que aumentan su
contenido de glucógeno. Este es utilizado por Lactobacillus spp., siendo el ácido láctico el
producto final del metabolismo que ocasiona un descenso importante del pH. La acidez
resultante inhibe en muchas bacterias.
En la mujer en edad genital activa predominan distintas especies de Lactobacillus, otros
bacilos Gram positivos y menor número de cocos Gram positivos (Streptococcus spp.,
Enterococcus spp., etc.). También pueden encontrarse en bajo número Actinomyces,
bacilos Gram negativos anaerobios como Bacteroides y distintas especies enterobacterias.
Streptococcus agalactiae (grupo B) se aísla en un porcentaje variable a esta edad.
Si bien no suele producir enfermedad en la mujer, su presencia implica riesgo para el
recién nacido, en el cual puede causar enfermedad severa. Durante la gestación, a medida
que el embarazo progresa, aumenta la densidad de LactoBacillus y disminuyen los bacilos
Gram negativos anaerobios y facultativos, el resultado es un mecanismo que reduce el
riesgo de bacteriemia grave durante el parto y el puerperio.
También puede aumentar la cantidad de levaduras y, eventualmente, pueden causar
síntomas. En la etapa prepuberal predominan gérmenes de origen cutáneo y perineal: S.
epidermidis, Propionibacterium spp., pueden aislarse levaduras en escaso número, al igual
que enterobacterias y algunos bacilos Gram negativos anaerobios.
En la mujer postmenopáusica, al cesar el estímulo hormonal, la flora retorna al patrón de la
infancia. A la flora vaginal se le reconocen importantes funciones: - proteger frente a la
infección vaginal, en especial en el embarazo, - suministrar la flora al recién nacido, -
disminuir los riesgos de la madre y del recién nacido en la fase bacteriémica del parto.
Flora del aparato respiratorio: El aparato respiratorio es dividido en dos sectores
anatómicos: alto y bajo. En el sujeto normal solamente el árbol respiratorio alto (fosas
nasales y faringe) presenta flora normal; los senos paranasales, oído medio, tráquea,
bronquios pulmonares y A nivel de la faringe la flora está compuesta principalmente por
Streptococcus α hemolíticos.
En las fosas nasales se encuentran gérmenes de tipo cutáneo: Staphylococcus epidermidis y
especies de Corynebacterium. Alrededor de 20 a 30% de los sujetos son portadores sanos
de S. aureus a nivel nasal. En preescolares es habitual la colonización por Streptococcus
pneumoniae y especies de Haemophilus.
A nivel faríngeo se encuentran además diferentes especies de Lactobacillus,
Propionibacterium, Corynebacterium, Moraxella, etc. Los anaerobios superan en 10 veces a
los aerobios. Se aíslan Peptoestreptococcus spp., Bifidobacterium spp.
y Actinomyces spp. Los bacilos Gram negativos que se encuentran en general son
Fusobacterium spp. y Bacteroides spp. A nivel de las criptas amigdalinas se produce
acumulación de materia orgánica, disminuye el potencial redox y el número de anaerobios
puede ser muy elevado.
Cierto porcentaje de individuos alberga S. pneumoniae y Haemophillus influenzae sin que
esto signifique enfermedad. También pueden encontrarse especies no patógenas de
Neisseria y Streptococcus ß hemolíticos no pertenecientes al grupo A. En condiciones
normales no existen bacterias más allá de la glotis.
La flora orofaringe está implicada en infecciones pulmonares que se deben a la aspiración
de esos gérmenes. En general eso ocurre en pacientes que tienen alterados sus reflejos
defensivos debido a alteraciones de la conciencia, etc
.Flora normal de la piel: La piel del ser humano es un extenso y heterogéneo territorio con
grandes variaciones en cuanto a estructura y condiciones ambientales, lo que determina
diferencias en la densidad y composición de la flora, según el área pleura son estériles.
El lavado de manos es la medida profiláctica más importante.
 Composición: Predominan los gérmenes Gram positivos. La flora basal se compone de
Staphylococcus spp.
En general S. epidermidis, Micrococcus spp. y Corynebacterium spp. Propionibacterium
acnés es un bacilo Gram positivo anaerobio que se encuentra colonizando glándulas
sebáceas. Esta bacteria posee lipasas que degradan los lípidos secretados por esas bacterias.
Los metabolitos resultantes son principalmente ácidos grasos insaturados que tienen
actividad antimicrobiana.
La flora transitoria está integrada por S. aureus y menor cantidad de bacilos Gram
negativos (Enterobacterias, Acinetobacter) en regiones como axilas, ingle y perineo. La
flora cutánea se ve involucrada en infecciones cuando la piel presenta soluciones de
continuidad. Muchas infecciones como Foliculitis o forunculosis tienen origen a nivel de
folículos pilosos o glándulas. Otras infecciones ocasionadas por gérmenes de la flora son
las que se producen al colocar catéteres percutáneos u otros dispositivos que impliquen
ruptura de la barrera cutánea.
La flora del conducto auditivo externo es similar a la de la piel. El oído medio es estéril.
Conjuntiva: Carece de una flora basal ya que no se dan interacciones estables entre esta
mucosa y los gérmenes.
El saco conjuntival puede contener cierta cantidad de microorganismos que proceden de
la piel circundante o que provienen de contactos mano-ojo. La secreción lacrimal efectúa
un continuo barrido de las partículas que se depositan en la conjuntiva. Esta secreción es
rica en lizosima, enzima que destruye bacterias, en especial.
Gram positivas. El parpadeo, las pestañas y las cejas contribuyen a evitar el ingreso de
partículas al saco conjuntival. Los gérmenes que pueden encontrarse son Staphylococcus
spp., Corynebacterium spp., Streptococcus α hemolíticos y Bacillus spp. El uso de lentes de
contacto se asocia a la colonización por bacterias de los géneros Serratia y Pseudomonas.
Los gérmenes de la conjuntiva pueden causar serias infecciones como úlceras de córnea y
endoftalmitis. Estas, en general, están precedidas de traumatismos de la córnea o
perforaciones del globo ocular.
Flora del aparato urinario: Salvo la uretra anterior, el aparato urinario es estéril. La orina
contribuye a mantener la vía urinaria libre de gérmenes, debido al arrastre, al pH ácido y a
su elevada osmolaridad.
El sector anterior de la uretra se coloniza con gérmenes que provienen del perineo. Esas
bacterias son eliminadas al comenzar la micción, lo que se utiliza para obtener la muestra
para Urocultivo por chorro medio, evitando así la presencia de contaminantes.
En la mujer, la menor longitud de la uretra, así como la proximidad del ano explican, al
menos en parte, la mayor incidencia de infección urinaria. La infección del aparato urinario
en general es causada por gérmenes que colonizan primero la zona circundante y que por
vía ascendente llegan a la vejiga o hasta el riñón. Las causas que favorecen esta
enfermedad, son todas las que alteran los mecanismos de defensa: obstrucción a la
circulación de la orina (cálculos, hipertrofia prostática) malformaciones de la vía excretora,
sondas vesicales, etc.

Muestras biológicas para el estudio microbiano.

BIBLIOGRAFIA:

2.Patríck R. Murray, PhD, Ken S. Rosenthal, PhD, MichaelA. Pfaüer, MO. Microbiología Médica. Editora ELSEVIER,
Madrid. Año 2007.

2 . Schaechter, Medoff, Eisenteen, Guerra. Microbiología, mecanismos de las enfermedades infecciosas. Enfoque
mediante la resolución de problemas. Editorial médica panamericana. 2da edición. 1994. Buenos Aires.

3 . . Koneman, Allen, Dowel, Sonmers. Diagnóstico microbiológico. Texto atlas color. Editorial médica panamericana.
México D.F 2001.

4 . Jawestz, Melnich, Edelberg. Microbiología médica 21ava edición, traducida de la edición en inglés. Editorial el
manual moderno, S.A de C.V. México D F. ISBN

Elaborado: Lic. Roberto Martínez

Docente de la carrera Bioanálisis clínico /clase diagnóstico microbiológico
Microbiología clínica