“AÑO DE LA UNIDAD, LA PAZ Y EL DESARROLLO”

UNIVERSIDAD NACIONAL DE TRUJILLO

FACULTAD DE CIENCIAS AGROPECUARIAS
ESCUELA DE INGENIERÍA AGROINDUSTRIAL

CURSO: Microbiología General

GRUPO: 04

APELLIDO Y NOMBRE:
● Lujan Vasquez Luis Angel

CODIGO DE MATRICULA : 1052401022

PROFESORA:
●Torres Chiclayo, Keyla Mirely

PRACTICA: PREPARACIÓN DE MEDIOS DE CULTIVO, SIEMBRA Y

OBSERVACIÓN MACROSCÓPICA(COLONIAS Y MICROSCÓPICA
(MORFOLOGÍA Y AGRUPACIONES BACTERIANAS

11/09/2023
TRUJILLO - PERÚ
 PRÁCTICA 2
PREPARACIÓN DE MEDIOS DE CULTIVO, SIEMBRA Y OBSERVACIÓN
MACROSCÓPICA(COLONIAS Y MICROSCÓPICA (MORFOLOGÍA Y
AGRUPACIONES BACTERIANAS

I. MARCO TEORICO:
Un medio de cultivo es un sustrato o una solución de nutrientes que permite el desarrollo
de microorganismos. En las condiciones de laboratorio para realizar un cultivo, se debe
sembrar sobre el medio de cultivo elegido las muestras en las que los microorganismos
van a crecer y multiplicarse para dar colonias
. (López T. & Torres C.,2006)

Los microorganismos son los seres más abundantes de la tierra, pueden vivir en
condiciones extremas de pH, temperatura y tensión de oxígeno, colonizando una amplia
diversidad de nichos ecológicos. Entre los requerimientos más importantes para su
desarrollo están el carbono, el oxígeno, nitrógeno, dióxido de carbono e hidrógeno.
Muchas bacterias sin embargo necesitan del aporte extra de factores de crecimiento
específicos en forma de suero, sangre y extracto de levadura entre otros.(Ramón P. &
Juárez A., 2002).

El desarrollo de un microorganismo en un medio de cultivo depende de diversos

factores, entre los cuales los más importantes son:
-Disponibilidad de los elementos nutritivos necesarios
-Existencia del oxígeno requerido
-Grado de humedad apropiado
-Valores de pH adecuados: Usualmente neutro o ligeramente alcalino (7.2-7.4),
salvo excepciones.
-Temperatura de incubación precisa: 3–37°C para las bacterias patógenas.
-Condiciones de esterilidad del medio y protección de posibles
contaminaciones.(García M., Fernández T. & Paredes S., 2005)
II. OBJETVOS
• Aprender a preparar los medios de cultivo mas comunes que se utilizan para
el cultivo de los microorganismos.
• Diferenciar los diversos tipos de medios y su aplicación adecuada de acuerdo
al tipo de microorganismos a cultivar.
• La siembra es el paso inicial en el estudio de las propiedades culturales de un
germen. La práctica pretende dar al estudiante la manualidad necesaria para
sembrar muestras en diversos medios y comprender que la meta de trabajo es
el aislamiento de los gérmenes.

III. PROCEDIMIENTO

METODOS DE SIEMBRA
IV. FUNDAMENTO
4.1. CLASIFICACIÓN DE LOS MEDIOS DE CULTIVO:
Según su origen:
Naturales:
Son los preparados a partir de sustancias naturales de origen animal o vegetal como
ser extractos de tejidos o infusiones y cuya composición química no se conoce
exactamente.
Sintéticos:
Son los medios que contienen una composición química definida cual y
cuantitativamente. Se utilizan para obtener resultados reproducibles.
Semisintéticos:
Son los sintéticos a los que se les añaden factores de crecimiento bajo una forma de un
extracto orgánico complejo, como por ejemplo extracto de levadura.

4.1.2. Según su consistencia:

Líquidos:
Se denominan caldos y contienen los nutrientes en solución acuosa. Favorecen mucho
el desarrollo y la multiplicación de las bacterias porque al difundirse estas por todo el
medio encuentran con facilidad las sustancias que necesitan para nutrirse.
Sólidos:
Se preparan añadiendo un agar a un medio líquido (caldo). El Agar es una sustancia
inerte polisacárido (hidrato de carbono) que se extrae de las algas. Como esta sustancia
no es digerida por las bacterias no constituye ningún elemento nutritivo, en ellos las
bacterias crecen con mayor dificultad, pues los nutrientes se agotan con rapidez en el
punto donde se desarrollan.
Semisólidos:
Se utilizan para determinar la motilidad de las especies en estudio. Actualmente se
encuentran disponibles comercialmente con el agregado de agar.

4.1.3 Según su composición:

Comunes o universales: Su finalidad es el crecimiento de la mayor parte de los
microorganismos poco existentes. Es el medio más frecuentemente utilizado para
mantener colonias microbianas. Por Ejemplo: agar común o caldo común.

Selectivos: Son sólidos en los que la selectividad se consigue alterando las condiciones
físicas del medio o añadiendo o suprimiendo componentes químicos específicos con el
fin de inhibir el crecimiento de especies químicas cuyo crecimiento no interesa. Este tipo
de medio sólo permite el crecimiento de un grupo de microorganismos e inhibiendo el
de otros. Se utiliza para seleccionar y aislar microorganismos a partir de poblaciones
mixtas. Por ejemplo, Agar salado-manitol o Chapman(permite el crecimiento de ciertos
estafilococos).

4.1.4 Según su aplicación:

Generales: También llamados comunes, son apropiados para el cultivo de la mayoría
de los microorganismos por la facilidad con que se desarrollan en ellos.

Especiales: Conocidos también como específicos, van dirigidos al cultivo de

determinadas especies bacterianas o son utilizadas con fines de diferenciación.

Enriquecidos: Van añadidos de nutrientes muy ricos que permiten el crecimiento de

ciertas bacterias difíciles de cultivar.
4.2 COMPONENTES USUALES DE LOS MEDIOS DE CULTIVO:
Extractos: Para su preparación, ciertos órganos o tejidos animales o vegetales(por
ejemplo, carne, hígado, semillas, etc.) son extraídos con agua y calor, y posteriormente
concentrado hasta la forma final de pasta o polvo. Estos preparados deshidratados son
frecuentemente empleados en la confección de medios de cultivo. Ejemplos: extracto
de carne, de levadura, de malta, etc. En caso de extractos de carne en polvo o pasta,
provee sustancias nitrogenadas, minerales y vitaminas, mientras que el extracto de
levaduras provee vitaminas del grupo B, nitrógeno y carbono.

Peptonas: Son mezclas complejas de compuestos orgánicos nitrogenados y sales

minerales que carecen de identidad química definida; se obtienen por digestión
enzimática o química de proteínas animales o vegetales (soja, carne, gelatina, caseína,
etc.). Las peptonas son muy ricas en péptidos y aminoácidos, pero pueden ser
deficientes en determinadas vitaminas y sales.

Fluidos Corporales: Sangre completa, sangre desfibrilada, plasma o suero sanguíneo

son frecuentemente añadidos a los medios empleados para el cultivo de algunos
patógenos. La sangre no puede ser esterilizada y debe, por tanto, ser obtenida en
condiciones asépticas directamente de un animal sano. Los fluidos corporales no
solamente contribuyen con factores de crecimiento, sino también con sustancias que
neutralizan inhibidores del crecimiento de algunas bacterias.

Sistemas amortiguadores:
Algunos componentes son incorporados al medio de cultivo para mantener el pH dentro
del rango óptimo del crecimiento bacteriano. Los microorganismos más comunes son
neutrófilos (el pH óptimo para su crecimiento está próximo a la neutralidad), y sales
como fosfatos bisódicos o bipotásicos, o sustancias como las peptonas, previenen una
desviación del pH.
Indicadores de pH: Indicadores ácido- base se añaden a menudo a los medios de
cultivo con objeto de detectar variaciones del pH.

Agentes reductores: Cisteína, tioglicolato y otros son agentes reductores que se

añaden a los medios de cultivo para crear condiciones que permitan el desarrollo de los
gérmenes microaerófilos o anaerobios.

Agentes selectivos: La adición de determinadas sustancias al medio de cultivo puede

convertirlo en selectivo (ver más adelante, clasificación de los medios de cultivo). Por
ejemplo, cristal violeta, sales biliares, ácida sódica, telurio potásico, antibióticos, etc., a
la concentración adecuada, actúan como agentes selectivos frente a determinados
microorganismos.
V. RESULTADOS

OBSERVACIÓN: forma de sacacorchos

de bacterias

COLORACION: Tinción Argéntica de

fontana

UMENTO: 1000

OBSERVACIÓN: Bacilos Gram Positivos

de Bacillus sp

COLORACION: GRAM

UMENTO: 1000

OBSERVACIÓN: Bacilos Gram

negativos de Escherichia coli

COLORACION: GRAM

UMENTO: 1000

OBSERVACIÓN: Estreptococos Gram

positivos dispuestos en cadena de
Streptococus sp

COLORACION: GAM

UMENTO: 1000
 OBSERVACIÓN: Cocos Gram

COLORACION: GRAM

UMENTO: 1000

OBSERVACIÓN: Diplococos

COLORACION: GRAM

UMENTO: 1000

Agar Mc Conkey
Se observo que claramente hubo crecimiento de microorganismos y que se lograron
aislar varias colonias, que se identifican pequeñas manchas en la placa Petri

VI. COMENTARIOS E INDICACIONES

En general toda la practica se llevo a cabo sin ningún inconveniente, se tubo una
buena ejecución por parte de los maestros tomando en cuenta que es la primera
vez que observamos la realización de una practica de ese tipo y se utilizó equipo
nuevo que nunca habíamos utilizado con anterioridad.
A mi punto de vista, el resultado fue satisfactorio ya que lo prepararon con
cuidado minucioso por parte de los maestros. Una forma de comprobar si hubo
contaminación es observando que las cajas Petri no hayan desarrollado colonias
bacterias cuando aun no se ha realizado la siembra ya que, de ser así, la caja
Petri seria inservible para cultivar el tipo de bacterias que deseamos cultivar.
En este laboratorio vamos estar manejando bacterias por lo que debemos
minimizar los errores en la práctica de la metodología para garantizar la
innocuidad del material y de los reactivos que estuvimos manipulando, ya que
es muy fácil que nuestros medios de cultivo se infectan con bacterias aeróbicas
que no queremos aislar o estudiar.
También aprendimos que las bacterias necesitan un medio optimo y que este a
un PH adecuado por lo que no debemos dar por sentado que el PH de nuestro
medio de cultivo será adecuado agregándole algún acido o bace según sea el
caso. Sabemos gracias a la práctica, que hay diferentes medios de cultivo y que
vamos utilizarlo dependiendo del tipo de cultivo que se desea ya sea para cultivar
colonias de bacterias para un estudio general, o para aislar un tipo especifico
para un estudio más particular.

VII. Bibliografía

Delgado A., Polanco A. & Prieto S. (2001)Manual de laboratorio clínico

básico “Microbiología”. España: Mc Graw

García M., Fernández T. & Paredes S. (2005) Microbiología clínica práctica.

España: Repeto

López T. & Torres C. (2006) Microbiología General. Argentina

Ramón P. & Juárez A. (2002) Bioquímica de los microorganismos. España: Editorial

Reverté

Rodríguez C., Gamboa C. & Hernández Ch. (2005) Bacteriología General: Principios y
prácticas de laboratorio. Costa Rica

Uberoa F. (1981) Medios de cultivo para microbiología. Barcelona: ADSA– MICRO

Camacho A., Giles M., Ortegón A., Palao M., Serrano B. y Velázquez O.
2009.Técnicas para el Análisis Microbiológico de Alimentos. 2ª ed. Facultad de
Química, UNAM. México

Pinto, G., & Martín, M. (2012). Enseñanza y Divulgación de la Química y la Física.

Madrid: Garceta.