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PROYECTO DE

NORMA TCNICA COLOMBIANA

NTC 5167 (Primera actualizacin)

DE 073/04

PRODUCTOS PARA LA INDUSTRIA AGRCOLA.


PRODUCTOS ORGNICOS USADOS COMO ABONOS O
FERTILIZANTES Y ENMIENDAS DE SUELO
I.C.S.: 65.080.00

1.

OBJETO

Esta norma tiene por objeto establecer los requisitos que deben cumplir y los ensayos a los
cuales deben ser sometidos los productos orgnicos usados como abonos o fertilizantes y
como enmiendas de suelo.
2.

DEFINICIONES

Para efectos de la presente norma se aplican las definiciones consignadas en la NTC 1927.
3.

REQUISITOS

3.1

REQUISITOS GENERALES

3.1.1 Los productos deben presentarse en forma slida como granulados, polvos o agregados
o lquida como concentrados solubles, suspensiones o dispersiones.
3.1.2 Todo producto cuyo origen sea materia orgnica fresca debe ser sometido a procesos
de transformacin que aseguren su estabilizacin agronmica tales como: compostaje o
fermentacin.
3.1.3 Deber declararse el origen (clase y procedencia) de las materias primas y los procesos
de transformacin empleados.
3.2

REQUISITOS ESPECFICOS

3.2.1 Los productos orgnicos empleados como fertilizantes o abonos y enmiendas del suelo,
deben cumplir con los requisitos establecidos en la Tabla 1.

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Tabla 1. Requisitos especficos


Fertilizantes o abonos orgnicos, orgnico minerales y enmiendas orgnicas
Fertilizantes o abonos orgnicos
Clasificacin del
producto

Indicaciones
relacionadas con la
obtencin y los
componentes principales

Parmetros a caracterizar

Parmetros a garantizar
(en base hmeda)

Producto slido obtenido a partir de la Prdidas por volatilizacin % *


estabilizacin de residuos de animales, Contenido de cenizas mximo 60 % *
vegetales o residuos slidos urbanos
(separados en la fuente) o mezcla de los Contenido de humedad *:
Para materiales de origen animal, mximo 20 %
anteriores,
que contiene porcentajes
Para materiales de origen vegetal, mximo 35 %
mnimos de materia orgnica expresada
como carbono orgnico oxidable total y los
Para mezclas, el contenido de humedad estar dado por el
parmetros que se indican.
origen del material predominante.
Contenido de carbono orgnico oxidable total mnimo 15 %
N, P2O5 y K2O totales (declararlos si cada uno es mayor de 1%)
Abono Orgnico
Relacin C/N
-1
Capacidad de intercambio catinico, mnimo 30 cmol(+) kg
(meq/100 g)
Capacidad de retencin de humedad, mnimo su propio peso
pH mayor de 4 y menor de 9
3
Densidad mximo 0,6 g/cm
Se indicar la materia prima de que procede el producto

Contenido de carbono orgnico oxidable


total
(%C)
Humedad mxima
(%)
Contenido de cenizas
(%)
-1
Capacidad de intercambio catinico (cmol(+) kg )
(meq/100 g)
Capacidad de Retencin de Humedad (%)
pH
Contenido de Nitrgeno Total
(% N)
3
Densidad
(g/cm )

* La suma de estos parmetros debe ser 100


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Tabla 1. (Continuacin)

Fertilizantes o abonos orgnico-minerales


Indicaciones relacionadas con la
Clasificacin
obtencin y los componentes
del producto
principales
1
2
Producto slido obtenido por
mezcla o combinacin de abonos
minerales y orgnicos de origen
animal,
vegetal,
pedogentico
(geolgico) o provenientes de lodos
de tratamiento de aguas residuales,
que contiene porcentajes mnimos
de materia orgnica expresada
como carbono orgnico oxidable
total y de los parmetros que se
indican.
Abono orgnico
mineral slido

Parmetros a caracterizar
3
Prdidas por volatilizacin % *
Contenido de cenizas %*
Contenido de humedad, mximo 15 %*
Contenido de Carbono Orgnico Total Oxidable, mayor de 5%
y menor de 15 %
N, P2O5 , K2O, CaO, MgO, elementos menores, reportar si la
riqueza total de cada elemento mnimo es 2 %
La suma de los elementos a reportar debe ser mnimo 10%
Densidad, reportar
pH, reportar
Residuo insoluble en cido, mximo 50 % del contenido de
cenizas
Contenido de sodio, reportar
Conductividad elctrica, reportar
Lmites mximos en mg/kg (ppm) de metales pesados de los
expresados a continuacin (slo para productos de mezcla con
residuos de plantas de tratamiento de aguas residuales):
Arsnico (As)
15,0
Cadmio (Cd)
0,7
Cromo (Cr)
70,0
Mercurio (Hg)
1,0
Nquel (Ni)
25,0
Plomo (Pb)
140
Se indicar la materia prima de la que procede el producto
* La suma de estos parmetros debe ser 100

Parmetros a garantizar
(en base hmeda)
4
Contenido de carbono orgnico oxidable
total
(% C)
Humedad mxima
(%)
Contenido total de nitrgeno
(% Nt)
El nitrgeno se expresar en forma orgnica y
+
mineral
N org N- NH4 y N- NO3
Contenido de Potasio total
(% K2O)
Contenido de Potasio soluble
(% K2O)
Contenido de Fsforo Total
(% P2O5)
Contenido de Fsforo soluble
(% P2O5)
Contenido de Calcio
(% CaO)
Contenido de Magnesio
(% MgO)
Contenido de Elementos menores
(%)
3
Densidad
(g/cm )
Contenido de metales pesados (mg/kg) (ppm)
Residuo insoluble
(%)

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Tabla 1. (Continuacin)
Fertilizantes o abonos orgnico-minerales
Clasificacin del
producto
1

Indicaciones relacionadas con la


obtencin y los componentes
principales

Parmetros a caracterizar

Slidos suspendidos mximo 4 %


Contenido de Carbono Orgnico Oxidable total mnimo 20 g/l
N total+ P2O5 + K2O, mnimo 40 g/l
Riqueza mxima potasio 50 g/l de K2O
CaO y MgO reportar en g/l
Elementos menores, reportar en g/l
Contenido de sodio, reportar
Densidad, reportar
pH, reportar
Conductividad electrica, reportar

Slidos suspendidos
(%)
Contenido de carbono orgnico oxidable
total
(g/l)
Contenido total de nitrgeno
(g/l Nt)
El nitrgeno se expresar en forma orgnica y
+
mineral N org N- NH4 y N- NO3
Contenido de Potasio
(g/l K2O)
Contenido de Fsforo
(g/l P2O5)
Contenido de metales pesados
(mg/l)(ppm)

Producto lquido obtenido por


adicin de agua a un abono
orgnico, orgnico mineral slido o
mezcla de los anteriores, con
posterior extraccin al que puede o
no, aadrsele un fertilizante
mineral y que cumple con los
parmetros que se indican.

Abono orgnico
mineral lquido

Parmetros a garantizar

Lmites mximos en mg/l (ppm) de metales pesados (slo para


productos de mezcla con residuos de plantas de tratamiento de
aguas residuales o residuos slidos urbanos separados en la
fuente):
Arsnico (As)
15,0
Cadmio (Cd)
0,7
Cromo (Cr)
70,0
Mercurio (Hg)
1,0
Nquel (Ni)
25,0
Plomo (Pb)
140
Se indicar la materia prima de la que procede el producto
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Tabla 1. (continuacin)
Enmiendas orgnicas
Enmienda orgnica hmica
Clasificacin del
producto

Indicaciones relacionadas con la


obtencin y los componentes
principales

Parmetros a caracterizar

Parmetros a garantizar

Si el producto no tiene tratamiento qumico debe ser insoluble en agua y su


disolucin en medio alcalino debe ser mnimo el 50 % en peso.
Si el producto tiene tratamiento qumico debe ser soluble en agua y la
disolucin en agua debe desarrollar pH alcalino
Contenido de carbono orgnico oxidable total, Mnimo 30 %
Extracto hmico total expresado como carbono (carbono total soluble en
medio alcalino). Mnimo 30 % del Carbono orgnico oxidable Total
Carbono de cidos hmicos. Mnimo el 60 % del carbono del extracto
hmico total.
Nitrgeno orgnico reportar %
Humedad mxima: 20 %
Granulometra: tamao de partcula reportar
Indicar el origen del cual procede el producto
Extracto hmico total expresado como carbono del extracto hmico
(carbono orgnico oxidable total soluble en medio alcalino), mnimo 40 g/l
Carbono del extracto hmico total mnimo el 30 % del peso de sustancias
solubles en medio alcalino
Carbono de cidos hmicos mnimo el 60 % del carbono del extracto
hmico total.
Carbono de cidos flvicos % (declararlos)
Ausencia de slidos suspendidos
pH Mayor de 10
Contenido de potasio (como KOH) Mx. 50 g/l
Contenido de fsforo y otros elementos reportar g/l
Densidad, reportar
Se indicar la materia prima de la que procede el producto

Carbono orgnico oxidable total


%C
Carbono del Extracto Hmico Total
%CEHT
Carbono de cidos Hmicos
% CAH
(% CAH/ % CEHT) x 100 > % 60
Humedad mxima
%
Solubilidad en medio alcalino %

Producto orgnico slido de origen


pedogentico o geolgico con o
sin tratamiento qumico que
aplicado al suelo aporta o genera
humus mejorando las propiedades
fsicas, qumicas y biolgicas del
Enmienda hmica mismo y que cumple las
especificaciones que se indican.
slida

Producto orgnico lquido obtenido


mediante solubilizacin en medio
alcalino o por Oxidacin qumica,
de un material de origen
pedogentico que aporta cidos
hmicos y flvicos, destinado
Enmienda hmica preferentemente a la fertirrigacin
y
que
cumple
con
las
lquida
especificaciones que se indican.

Carbono del extracto hmico total


CEHT g/l
CEHT (g/l)/peso de sustancias
solubles en medio alcalino > % 30
Carbono de cidos Hmicos
CAH g/l
(CAH(g/l)/CEHT(g/l)) x 100 > %60
Carbono de cidos flvicos
CAF g/l
Potasio (KOH)
Mx 50 g/l

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Tabla 1. (final)
Enmienda orgnica no hmica
Clasificacin del
producto
1

Indicaciones relacionadas con la obtencin y los


componentes principales
2
Producto orgnico slido obtenido a partir de la
deshidratacin y estabilizacin de los residuos
provenientes de las plantas industriales y de tratamiento
de a) aguas residuales industriales y urbanas y b)
residuos slidos urbanos separados en la fuente.

Enmienda
orgnica no
hmica

Parmetros a caracterizar
y otros requisitos
3

Parametros a garantizar
4

El producto debe ser soluble en agua y su disolucin no Contenido de carbono orgnico


oxidable
total
debe desarrollar pH alcalino
Contenido de Carbono orgnico oxidable total, mnimo 15 % % C
Capacidad de Intercambio Cationico
Capacidad Intercambio Catinico. Mnimo 30 meq/100 g
meq/100 g
Conductividad Elctrica (declararla)
Contenido de Sodio soluble (declararlo, restricciones de uso) Contenido de metales pesados mg/kg
Lmites mximos en mg/kg (ppm) de metales pesados (en
base seca):
Arsnico (As)
15,0
Cadmio (Cd)
0,7
Cromo (Cr)
70,0
Mercurio (Hg)
1,0
Nquel (Ni)
25,0
Plomo (Pb)
140
Se indicar la materia prima de la que procede el producto

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3.2.2 Macrocontaminantes
En la siguiente tabla se presentan los lmites mximos permitidos para macrocontaminantes
presentes en productos slidos.

Limite
(% en m.s.)
< 0,2
< 0,02
<2
no

Macrocontaminantes
Plstico, metal, Caucho > 2 mm
Vidrio>2 mm
Piedras> 5 mm
Vidrio >16 mm deteccin (si/no)

3.2.3 Niveles mximos de patgenos


Los fertilizantes y acondicionadores orgnicos de origen no pedogentico, debern demostrar
que no superan los siguientes niveles mximos de microorganismos patgenos:
Salmonella sp: ausente en 25 gramos de producto final.
Enterobacterias totales: menos de 100 UFC/g de producto final.
Adems, si alguna de las materias primas es de origen vegetal, debern estar exentos de
fitopatgenos de los gneros: Fusarium spp., Botrytis sp., Rhizoctonia sp., Phytophthora sp. y
de nemtodos fitopatgenos.
De igual manera deber garantizar la sanidad del material, en relacin con fitopatgenos
especficos que pudieren estar presentes por el origen de las materias primas; por ejemplo: los
subproductos de rechazo de la industria bananera deben estar libres de Pseudomonas
solanacearum Cepa II y Micosphaerella fijiensis.
3.2.4 Carga microbiana
Si el producto presenta contenidos de microorganismos benficos debe declararse el recuento
de microorganismos mesfilos aerobios, mohos y levaduras.
4.

TOMA DE MUESTRAS Y CRITERIO DE ACEPTACIN O DE RECHAZO

4.1

TOMA DE MUESTRAS

Se efectuar de acuerdo con lo indicado en las NTC-ISO 8633, NTC-ISO 8634 y NTC 3795.
4.2

CRITERIO DE ACEPTACIN O RECHAZO

Si la muestra no cumple con uno o ms de los requisitos indicados en esta norma, ser
rechazado el lote. En caso de discrepancia, se tendrn que repetir los ensayos sobre la
muestra reservada para tales efectos. Cualquier resultado no satisfactorio en este segundo
caso, ser motivo para rechazar el lote.

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5.

MTODOS DE ENSAYO

5.1

MTODOS FISICOQUMICOS

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Los mtodos de anlisis fisicoqumicos del componente orgnico, de los productos clasificados
como orgnicos, se basan en su mayora en metodologas de anlisis de suelos y de material
vegetal. La razn de esto, es que dichos materiales o bien son de aplicacin directa al suelo o
bien son de uso como sustratos para siembra directa. En consecuencia los resultados de los
parmetros evaluados son comparables y compatibles con los de suelos especficamente en lo
relacionado con los aspectos de salinidad y de comportamiento del material orgnico.
5.1.1 Preparacin de la muestra y cuantificacin de la humedad
La preparacin de las muestras de los productos orgnicos, involucra la cuantificacin de la
humedad, por cuanto todos los mtodos se desarrollan sobre la muestra seca, molida y
tamizada. Si bien todos los mtodos de ensayo fisicoqumicos se realizan sobre la muestra
seca, los resultados debern expresarse en base hmeda.
5.1.1.1 Equipos y materiales
-

Estufa de secado

Molino

Tamiz malla 60 (0,5 mm)

Cuarteador

Recipientes para secado en estufa de aproximadamente 400 ml

Balanza (con precisin de 0,01 g)

Desecador

5.1.1.2 Procedimiento
-

Cuartear la muestra original.

Pesar el recipiente vaco en el cual se va a cuantificar la humedad

Pesar en el recipiente una cantidad de muestra suficiente como para recolectar


300 g de material seco. (Si es necesario colocar la misma muestra en dos
recipientes)

Llevar el recipiente a la estufa de secado y mantenerlo a 70 C durante 24 h.

Sacar de la estufa, dejarlo enfriar dentro de un desecador hasta peso constante.

Pesar

Moler el material en el molino.

Tamizar por malla 60 (0,5 mm)


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-

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Empacar la muestra en recipientes debidamente rotulados.

5.1.1.3 Clculos
% Humedad =

peso muestra hmeda peso muestra sec a


100
peso muestra hmeda

5.1.2 Cuantificacin de la densidad real en productos orgnicos


5.1.2.1 Principio del mtodo
El mtodo se basa en la cuantificacin de la masa de producto que se deposita libremente por
unidad volumen, en un recipiente de volumen conocido.
5.1.2.2 Equipo y materiales
-

Balanza (con precisin de 0,01 g)

Probeta de vidrio con capacidad para 50 ml

Embudo

Soporte universal

Pinzas para soporte o aro de hierro.

5.1.2.3 Procedimiento
-

Pesar la probeta vaca, limpia y seca. Tarar la balanza.

Dejar caer libremente una cantidad de material (preparado como se indica en el


numeral 5.1.1) suficiente para obtener una lectura cercana a 30 ml. Registrar el
volumen ocupado por el material.

Determinar el peso de la probeta con el material.

Realizar tres determinaciones sobre muestras diferentes.

5.1.2.4 Clculos
La densidad del producto se expresa en g/cm3 y se calcula segn la ecuacin:
W W
Densidad real = 2 1
V

en donde
W1

peso en gramos de la probeta vaca.

W2

peso en gramos de la probeta con el material.

volumen ocupado por el material en la probeta y expresado en cm

El resultado ser el promedio de las tres determinaciones.


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5.1.3 Cuantificacin de la capacidad de retencin de agua, pH y conductividad elctrica


en un producto orgnico
5.1.3.1 Principio del mtodo
El mtodo utilizado para evaluar el pH y la conductividad elctrica de un producto orgnico, es
el mismo empleado para la caracterizacin de la salinidad en suelos, esto es en pasta de
saturacin. Este mtodo permite tener resultados comparables entre los laboratorios, a la vez
que aporta informacin muy cercana a la realidad, puesto que slo tiene la influencia del medio
acuoso, situacin semejante al comportamiento del material al entrar en contacto con el suelo.
Sobre el mismo mtodo de anlisis es posible obtener informacin acerca de la capacidad de
retencin de agua del material (porcentaje de saturacin).
A su vez el pH se puede determinar utilizando una relacin material orgnico agua, 1:10.
5.1.3.2 Equipos y materiales
-

Recipiente de plstico de boca ancha.

Esptula de madera.

Papel de filtro cualitativo de filtracin rpida tipo S&S 595 u otro equivalente.

Probeta de 100 ml.

Potencimetro con electrodo de vidrio.

Conductmetro.

Erlenmeyer con desprendimiento lateral para filtracin al vaco.

Recipientes para recolectar el filtrado.

Embudo Buchner para vaco.

Bomba para vaco.

5.1.3.3 Procedimiento
5.1.3.3.1 Procedimiento para determinar la capacidad de retencin de agua
-

Pesar aproximadamente 100 g de material preparado como se indica en el


numeral 5.1.1, colocarlos en el recipiente plstico. Aadir pequeos volmenes
de agua destilada o desmineralizada (utilizar una probeta).

Agitar continuamente con la esptula de madera, esto con el fin de eliminar aire
y formar poco a poco una masa. De vez en cuando se debe consolidar la
muestra golpeando el recipiente suavemente sobre la superficie de trabajo.

Adicionar agua hasta llegar a un punto de equilibrio, (punto de saturacin) cuya


evidencia est dada por un contenido de agua suficiente que refleja un brillo
metlico sobre la superficie, estado en el cual no absorbe mas agua y ni la
escurre, aunque habr un poco de agua libre que asciende a la superficie
cuando se deja en reposo.
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Registrar el volumen de agua utilizado. Tambin es posible pesar la totalidad del


producto slido con el agua a punto de saturacin.

Dejar en reposo durante 2 h.

La pasta no debe acumular agua en la superficie, perder su brillo, o endurecerse


durante el reposo. Si la pasta es demasiado hmeda se debe agregar ms
material, registrando el peso adicional, o si es demasiado dura o se ha perdido el
brillo se agrega ms agua mezclando nuevamente, registrando el volumen de
agua aadido.

5.1.3.3.2 Procedimiento para medir el pH


-

Calibrar el potencimetro con las soluciones buffer de pH 7,0 y pH 4,0

Introducir el electrodo de pH en la pasta saturada y registrar la lectura.

5.1.3.3.3 Procedimiento para medir la conductividad elctrica


-

Separacin del extracto. Transferir la pasta a un embudo Buchner o similar con


papel de filtro cualitativo rpido y aplicar vaco.

Calibrar el Conductmetro con soluciones estandarizadas de Cloruro de potasio


0,01 y 0,02 N, conductividades aproximadas de 1,36 y 2,70 dS/m respectivamente.

Medir la conductividad elctrica en el filtrado.

Registrar y corregir las lecturas con base en la temperatura. Si el conductmetro


no dispone de compensacin de temperatura, debe hacerse la correccin a 25 C
por medio de tablas.

5.1.3.4 Clculos
5.1.3.4.1 Capacidad de retencin de agua (porcentaje de saturacin)
Se expresa teniendo en cuenta la siguiente relacin:
A 100 100 % humedad
% Saturacin =

100
Wm

en donde
A

volumen de agua utilizado para alcanzar el punto de saturacin.

Wm

peso en gramos de la muestra seca

% humedad =

Contenido de humedad del producto (vase el numeral 5.1.1.3)

5.1.3.4.2 pH
Se expresa en unidades de pH.

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5.1.3.4.3 Conductividad elctrica


La conductividad elctrica es la lectura obtenida en el conductmetro con la respectiva
correccin por temperatura y se expresa en dS/m.
5.1.4 Cuantificacin de cenizas por el mtodo de prdidas por volatilizacin
5.1.4.1 Principio del mtodo
Esta determinacin es una aproximacin del contenido de materia orgnica presente en el
producto, considerando que el 100% del producto menos la suma del porcentaje de cenizas,
carbonatos y humedad refleja el contenido de materia orgnica. No obstante es importante
verificar la presencia de otros componentes voltiles provenientes principalmente de fuentes
nitrogenadas.
5.1.4.2.Equipos y materiales
-

Balanza analtica

Mufla

Desecador

Crisoles de porcelana

5.1.4.3 Procedimiento
-

Pesar aproximadamente 5 g del material preparado segn lo indicado en el numeral


5.1.1 en un crisol de porcelana.

Colocar el crisol en la mufla y dejarlo a 650 oC durante 4 h.

Al cabo de este tiempo, esperar que enfre y pasar el crisol a un desecador.

Registrar el peso final.

5.1.4.4 Clculos
peso final
100 % humedad
% cenizas =
100

peso
inicial
100

% prdidas por volatizacin = 100 % cenizas

en donde
% humedad

contenido de humedad del producto (vase el numeral 5.1.1.3)

5.1.5 Cuantificacin de carbonatos


5.1.5.1 Principio del mtodo
El mtodo descrito para la cuantificacin de carbonatos se fundamenta en la adicin de un
volumen en exceso de una solucin normalizada de cido clorhdrico, el cual reacciona con los
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carbonatos presentes. El exceso de cido se valora con una solucin de hodrxido de sodio
normalizada.
5.1.5.2 Equipos y materiales
-

Balanza analtica.

Bureta de 25 ml.

Pipeta aforada de 25 ml.

Erlenmeyer.

Estufa.

5.1.5.3 Reactivos
-

Solucin de cido clorhdrico 0,5 N

Solucin hidrxido de sodio 0,5 N

Solucin de fenolftalena.

5.1.5.4 Procedimiento
-

Pesar aproximadamente 0,5 g de material preparado como se indica en el


numeral 5.1.1, en un erlenmeyer.

Adicionar 25 ml de HCl 0,5 N.

Llevar a ebullicin durante 5 min.

Dejar enfriar y titular con hidrxido de sodio 0,5 N en presencia de fenolftalena.

5.1.5.5 Clculos
(V N HCl ) (VNaOH N NaOH ) 0,03100 100 % humedad
% Carbonatos (CO3 = ) = HCl

Wm
100

o
(V N HCl ) (VNaOH N NaOH ) 0,05 100 100 % humedad
% Carbonatos (CaCO3 ) = HCl

Wm
100

en donde
VHCl

volumen en mililitros utilizado de solucin de cido clorhdrico.

NHCl

normalidad de la solucin de cido clorhdrico.

VNaOH

volumen en mililitros utilizado de solucin de hidrxido de sodio.

NNaOH

normalidad de la solucin de hidrxido de sodio.

Wm

Peso en gramos de la muestra seca

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5.1.6 Cuantificacin del carbono orgnico oxidable total


5.1.6.1 Principio del mtodo
El mtodo descrito para la cuantificacin del carbono conocido como el mtodo de Walkley
Black se fundamenta en la reduccin del in dicromato y el contenido de carbono se mide por
el in dicromato no reducido, en consecuencia es un mtodo indirecto. Esto significa que est
sujeto a interferencias tales como cloruros.
El mtodo aqu enunciado es volumtrico, sin embargo
colorimtricamente, previa estandarizacin de la curva respectiva.

puede

hacerse

tambin

5.1.6.2 Equipos y materiales


-

Balanza Analtica

Erlenmeyer de 250 ml

Bureta de 50 ml

Pipetas aforadas de 20 ml y 10 ml

5.1.6.3 Reactivos
-

Agua destilada

Solucin de dicromato de potasio 1,0 N

Acido sulfrico concentrado

Acido ortofosfrico concentrado

Solucin indicadora de ortofenantrolina o difenilamina

Solucin de sulfato ferroso amnico 0,5 N

5.1.6.4 Procedimiento
(Este procedimiento se ilustra en la marcha analtica indicada en el Anexo A)
-

Pesar en un erlenmeyer de 250 ml entre 0,1 g y 0,5 g del producto preparado


como se indica en el numeral 5.1.1, con aproximacin a 0,0001 g.

Adicionar 10 ml de solucin de dicromato de potasio 1,0 N, dejar en contacto


unos minutos y agregar 20 ml de cido sulfrico concentrado. Agitar
manualmente durante 1 min y dejar enfriar durante 30 min. Agregar agua (volumen
no mayor de 50 ml ni menor de 20 ml), 5 ml de cido ortofosfrico y 5 gotas de
solucin indicadora.

Si al adicionar la mezcla oxidante (K2Cr2O7 y H2SO4) la solucin se torna verde


brillante, se deben duplicar las cantidades aadidas o pesar menos segn sea el
caso.

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Preparar paralelamente un blanco de reactivos (10 ml K2Cr2O7 1 N y 20 ml H2SO4


concentrado. Este paso permite tener un blanco de reactivos y la valoracin de la
normalidad de la solucin del sulfato ferroso amnico.

Titular el blanco de reactivos con la solucin de sulfato ferroso amnico. El


cambio de color observado ser de un amarillo tpico de la solucin de
dicromato, a un verde brillante. Registrar el volumen (debe ser aproximadamente
20 ml)

Titular con la solucin de sulfato ferroso amnico valorada, las muestras objeto
del ensayo. El cambio de color observado debe ser desde el amarillo (poco o
ningn contenido de carbono) o desde un caf rojizo hasta color verde brillante.

5.1.6.5 Clculos
5.1.6.5.1 Normalidad de la solucin de sulfato ferroso amnico
Normalidad =

10 ml
V

en donde
10 ml

volumen de solucin de dicromato 1N usado para el blanco

volumen de solucin de sulfato ferroso amnico gastado en la titulacin

5.1.6.5.2 Contenido de carbono orgnico oxidable total del producto


(Vb Vm ) x N x 0,003 x 100 100 % humedad
% C.O.ox =

Wm
100

en donde
Vb

volumen de solucin de sulfato ferroso amnico gastado en el blanco

Vm

volumen de solucin de sulfato ferroso amnico gastado en la muestra

normalidad de la solucin de sulfato ferroso amnico.

Wm

peso en gramos de muestra seca.

% humedad =

Contenido de humedad del producto (vase el numeral 5.1.1.3)

5.1.7 Cuantificacin de la capacidad de intercambio catinico (C.I.C)


5.1.7.1 Principio del mtodo
El mtodo descrito es el del acetato de amonio 1 N pH 7,0 el cual presenta algunas ventajas
sobre los dems mtodos conocidos. Se basa en el reemplazo de las posiciones de
intercambio por el in amonio y su posterior desplazamiento con una solucin de cloruro de
sodio, produciendo cloruro de amonio el cual en presencia de formaldehdo forma
estequiomtricamente un complejo nitrogenado y cido clorhdrico el cual es evaluado con
hidrxido de sodio.

15

PROYECTO DE
NORMA TCNICA COLOMBIANA

NTC 5167 (Primera actualizacin)

DE 073/04

5.1.7.2 Equipos y materiales


-

Balanza

Frascos de vidrio o plstico de 250 ml

Varillas de vidrio

Bomba de vaco

Embudos Buchner de porcelana

Erlenmeyers con desprendimiento lateral

Bureta

Agitador recproco

5.1.7.3 Reactivos
-

Solucin de acetato de amonio 1N pH 7,0

Etanol 95 %

Solucin de cloruro de sodio, 10 %

Solucin de formaldehdo, 37 % neutralizada

Solucin de NaOH 0,1N valorada

Fenolftalena

5.1.7.4 Procedimiento
-

Pesar en un frasco 5 g de muestra preparada como se indica en el numeral


5.1.1.

Adicionar 100 ml de acetato de amonio 1N pH 7,0

Agitar durante 2 h en agitador recproco o agitar con una varilla de vidrio y dejar
en contacto durante la noche.

Filtrar a vaco

Lavar lentamente el residuo sobre el embudo con 5 porciones de 10 ml de


acetato de amonio.

Luego lavar con 5 porciones de 10 ml cada una de etanol al 95 %.

Sustituir el erlenmeyer por otro limpio.

Lavar con 5 porciones de 10 ml cada una de NaCl 10 %.

16

PROYECTO DE
NORMA TCNICA COLOMBIANA

NTC 5167 (Primera actualizacin)

DE 073/04

Desconectar el erlenmeyer y adicionar al filtrado 10 ml de formaldehdo al 37 %,


unas gotas de fenolftaleina y titular con NaOH 0,1N.

Llevar simultneamente un blanco de reactivos.

5.1.7.5 Clculos
(VNaOHmuestra) (VNaOHblanco) NNaOH 100 100 % humedad
C.I .C. cmol (+)kg1(me/100g) =

100
Wm


en donde
VNaOH muestra

Volumen en ml de NaOH empleado en la titulacin de la muestra.

VNaOH blanco

Volumen en ml de NaOH empleado en la titulacin del blanco.

NNaOH

Normalidad de la solucin de NaOH.

Wm

Peso en gramos de la muestra seca

% humedad

Contenido de humedad del producto (vase el numeral 5.1.1.3)

5.1.8 Cuantificacin del nitrgeno total, nitrgeno orgnico, nitrgeno ntrico y


nitrgeno amoniacal en materiales clasificados como orgnicos y orgnico
minerales
Se determinan de acuerdo con lo indicado en las normas NTC 370, NTC 208, NTC 209 y
NTC 211, teniendo en cuenta que se parte de una muestra de ensayo preparada como se
indica en el numeral 5.1.1.
5.1.9 Cuantificacin de fsforo y potasio en productos clasificados como orgnicos
5.1.9.1 Principio del mtodo
Los mtodos de anlisis para la cuantificacin de los elementos minerales presentes en un
producto orgnico, son los establecidos para cuantificar los mismos, en un material vegetal.
Para tal efecto existen diferentes mtodos, el aqu descrito es un mtodo definido como
mineralizacin por va seca. Por este mtodo es posible cuantificar fsforo, potasio, calcio,
magnesio, sodio, hierro, cobre, manganeso, zinc, boro y azufre. Sin embargo estos elementos
tambin se pueden determinar por mineralizacin va hmeda.
5.1.9.2 Equipos y materiales
-

Balanza analtica.

Mufla.

Crisoles de porcelana.

Plancha de calentamiento.

Balones aforados de 50 ml.

Embudos.
17

PROYECTO DE
NORMA TCNICA COLOMBIANA
-

NTC 5167 (Primera actualizacin)

DE 073/04

Papel de filtro cualitativo.

5.1.9.3 Reactivos
-

cido clorhdrico concentrado

5.1.9.4 Procedimiento
-

Pesar de 2,0 g a 2,5 g de muestra seca, molida y tamizada en el crisol de


porcelana.

Calcinar en la mufla a 650 oC durante 4h.

Dejar enfriar.

Humedecer con agua destilada.

Adicionar 2 ml de HCl concentrado.

Colocar sobre la plancha de calentamiento y evaporar lentamente hasta


sequedad, evitando salpicaduras.

Agregar 2 ml de agua destilada y 2 ml de HCl concentrado.

Calentar suavemente sin permitir que se seque. Dejar enfriar.

Transferir cuantitativamente a un baln aforado de 50 ml (puede o no ser


necesario filtrar). Llevar a volumen.

Sobre este extracto se cuantifica el fsforo y el potasio.

5.1.9.5 Clculos
Los clculos se realizan de acuerdo con lo establecido en las normas NTC 202 y NTC 234.
5.1.10 Cuantificacin de Fsforo, Potasio, Calcio, Magnesio, elementos menores y
metales pesados en productos clasificados como orgnico-minerales y en
enmiendas orgnicas no hmicas
5.1.10.1 Principio del mtodo
Para los productos orgnico minerales, el mtodo de mineralizacin de los elementos tiene
en cuenta su presencia en el material orgnico como en el mineral. Para el primer tipo de
nutrientes se requiere un agente oxidante y en el caso de los de origen mineral es suficiente la
digestin con cido clorhdrico. A su vez, con esta muestra es posible cuantificar los metales
pesados tales como el Cadmio, Plomo, Cromo, Nquel, Mercurio y Arsnico, empleando los
mismos mtodos con los que se cuantifican en suelos. La muestra se mineraliza en una mezcla
de cido ntrico y clorhdrico (agua regia) y se evalan por absorcin atmica o por otro mtodo
equivalente.
5.1.10.2 Equipos y materiales
-

Balanza analtica.
18

PROYECTO DE
NORMA TCNICA COLOMBIANA
-

Plancha de calentamiento.

Balones aforados de 50 ml.

Embudos.

Papel de filtro cualitativo.

NTC 5167 (Primera actualizacin)

DE 073/04

5.1.10.3 Reactivos
-

HCl concentrado.

HNO3 concentrado.

Los dems reactivos especificados en las normas NTC 1860, NTC1369,


NTC 234 y NTC 202.

5.1.10.4 Procedimiento
-

Se pesan aproximadamente 5 g de la muestra preparada como se indica en el


numeral 5.1.1.

Se adicionan 35 ml de agua regia (HCl :HNO3) (3 :1).

Se coloca sobre una plancha de calentamiento y se evapora lentamente hasta


sequedad.

Se adicionan 15 ml de agua regia.

La mezcla se calienta durante 30 min ms y se deja enfriar.

Se adicionan 100 ml de agua y se filtra empleando papel de filtro cualitativo


previamente pesado.

Se lava el papel de filtro con agua destilada o desmineralizada.

El papel de filtro junto con el residuo se seca en estufa a 80 C, hasta peso


constante.

El filtrado se lleva a 250 ml con agua destilada y se cuantifica el contenido de


fsforo, potasio, calcio, magnesio y los elementos menores de acuerdo con lo
establecido en las normas NTC 1860, NTC 1369, NTC 234, NTC 202.

Los metales pesados se cuantifican por absorcin atmica o un mtodo


equivalente.

5.1.10.5 Clculos
5.1.10.5.1 Residuo insoluble en cido
W W2
100 % humedad
% Re siduo inso lub le en cido = 3
100

W
100

19

PROYECTO DE
NORMA TCNICA COLOMBIANA

NTC 5167 (Primera actualizacin)

DE 073/04

en donde
W1

Peso en gramos de la muestra seca.

W2

Peso en gramos del papel de filtro.

W3

Peso en gramos del papel de filtro junto con el residuo seco.

% humedad

contenido de humedad del producto (vase el numeral 5.1.1.3)

5.1.10.5.2 Fsforo, calcio, magnesio y elementos menores


Los clculos se realizan de acuerdo con lo indicado en las normas NTC 1860, NTC 1369,
NTC 234, NTC 202.
5.1.11 Determinacin de la fraccin hmica
Por definicin las materiales hmicos son de origen pedogentico y analticamente es la
fraccin de materia orgnica (carbono orgnico) extrable o soluble en medio alcalino.
En la actualidad, los productos cuyo componente principal son las sustancias hmicas, se
comercializan en dos presentaciones: slidos y lquidos
5.1.11.1 Determinacin de la fraccin hmica en enmiendas orgnicas hmicas slidas
5.1.11.1.1 Cuantificacin del carbono orgnico del Extracto Hmico Total (CEHT) y de la
solubilidad en medio alcalino
5.1.11.1.1.1 Principio del mtodo
El extracto hmico total se define como el contenido de carbono total extrable en medio
alcalino sobre un material de origen pedogentico, esto es de un suelo, de una leonardita o de
un carbn oxidado qumicamente.
La marcha analtica consignada en el Anexo C, esta diseada para llevar el material orgnico
hmico slido a las condiciones fisicoqumicas bajo las cuales se comercializan las enmiendas
orgnicas hmicas lquidas.
5.1.11.1.1.2 Equipos y materiales
-

Agitador recproco

Erlenmeyer de 250 ml

Embudos de vidrio

Papel de filtro cualitativo rpido (S&S 595) o centrfuga

Tubos para centrifuga

Pipetas aforadas de 2 ml y 5 ml

Vasos de precipitado de 400 ml y 100 ml

Bao de agua
20

PROYECTO DE
NORMA TCNICA COLOMBIANA

NTC 5167 (Primera actualizacin)

Bureta de 25 ml

Recipientes de plstico para agitacin

DE 073/04

5.1.11.1.1.3 Reactivos
-

Agua destilada o desmineralizada.

Solucin de hidrxido de potasio del 4 % p/v

Solucin de dicromato de potasio 1,0 N

Acido sulfurico concentrado

Acido ortofofrico concentrado

Solucin indicadora de ortofenantrolina o difenilamina

Solucin de sulfato ferroso amnico 0,5 N

5.1.11.1.1.4 Procedimiento
-

Se pesan 15 g del producto preparado como se indica en el numeral 5.1.1 y se


adicionan 100 ml de solucin de KOH del 4 % p/v.

Se agita durante 2 h en agitador recproco.

Se filtra con papel cualitativo rpido o se centrfuga. Por cualquiera de los dos
mtodos se obtiene un sobrenadante y un residuo insoluble.

El residuo insoluble se somete a lavados sucesivos con agua sobre un embudo


de filtracin hasta fin de alcalinidad. Se seca en estufa a 50 C y se pesa.

Del sobrenadante obtenido tomar una alcuota de 2 ml en un erlenmeyer de 125 ml


y evaporar en bao de Mara a 50 C (tener cuidado de que la temperatura no se
exceda de los 70 C), o sobre plancha de calentamiento cuidando que no se
produzcan salpicaduras.

Adicionar la mezcla oxidante (K2Cr2O7 y H2SO4) y una vez fro operar como se
describe en el numeral 5.1.6.4

5.1.11.1.1.5 Clculos
5.1.11.1.1.5.1 Clculo de la solubilidad del producto en medio alcalino
W
100 % humedad
% slidos so lub les en medio alcalino = R 100

W
100

en donde
WR

Peso en gramos del residuo seco

Wm

Peso en gramos de la muestra seca

21

PROYECTO DE
NORMA TCNICA COLOMBIANA

NTC 5167 (Primera actualizacin)

DE 073/04

5.1.11.1.1.5.2 Clculo del carbono del extracto hmico total


(Vb Vm ) x N x 0,003 x 100 x 100 100 % humedad
% C EHT =

A x Wm
100

en donde
% C EHT =

gramos de carbono del extracto hmico total por 100 g de producto hmedo.

Vb

volumen de solucin de sulfato ferroso amnico utilizado en el blanco

Vm

volumen de solucin de sulfato ferroso amnico utilizado en la titulacin de la muestra en estudio.

normalidad de la solucin de sulfato ferroso amnico.

100

volumen de solucin extractante de KOH

alcuota de la solucin problema

Wm

peso en gramos de la muestra seca

% humedad =

Contenido de humedad del producto (vase el numeral 5.1.1.3)

5.1.11.1.2 Distribucin del carbono del extracto hmico total


5.1.11.1.2.1 Carbono orgnico en los cidos hmicos %C AH
5.1.11.1.2.1.1 Principio del mtodo
El carbono de los cidos hmicos es el contenido de carbono precipitable a pH 2 a partir del
extracto hmico total es decir del extracto en medio alcalino. De igual manera el contenido de
carbono que no es precipitable a pH 2 y que se mantiene en solucin se denomina carbono de
cidos flvicos.
5.1.11.1.2.1.2 Equipos y materiales
-

Centrifuga o embudos de vidrio

Papel de filtro cualitativo rpido

Vasos de precipitados de 250 ml

Potencimetro

5.1.11.1.2.1.3 Reactivos
-

Agua destilada

cido sulfrico concentrado

5.1.11.1.2.1.4 Procedimiento
-

Tomar una alcuota de 25 ml del extracto hmico total en un vaso de precipitados


y adicionar cido sulfrico concentrado hasta pH 2.

22

PROYECTO DE
NORMA TCNICA COLOMBIANA

NTC 5167 (Primera actualizacin)

DE 073/04

Colocar el vaso de precipitados con una solucin a 4 C por 24 h. Al cabo de


este tiempo centrifugar por 15 min a 4 000 rpm o filtrar.

Si se centrfuga pasar el precipitado con agua destilada ayudado por un frasco


lavador de chorro fino, a un vaso de precipitados de 50 ml. En caso de filtrar se
procede de igual manera.

Se seca el precipitado a 50 C en bao de Mara y se pesa.

Se toma 0,1 g del precipitado seco para operar como en el numeral 5.1.6.4.

5.1.11.1.2.1.5 Clculos
(Vb Vm ) x N x 0,003 x Wt x 100 ml x 100 g 100 % humedad
% C AH =

0,1 g x 25 ml x 15 g
100

en donde
% C AH =

gramos de carbono de cidos hmicos por 100g de muestra.

Vb

volumen de solucin de sulfato ferroso amnico gastado en el blanco

Vm

volumen de solucin de sulfato ferroso amnico gastado en la titulacin de la muestra en


estudio.

normalidad de la solucin de sulfato ferroso amnico.

Wt

peso total del residuo en gramos

% humedad =

contenido de humedad del producto (vase el numeral 5.1.1.3)

5.1.11.1.2.2 Carbono orgnico en Acidos Flvicos %C AF


% C AF = % CEHT % CAH

5.1.11.2 Determinacin de la fraccin hmica en las enmiendas orgnicas hmicas


lquidas
5.1.11.2.1 Cuantificacin del carbono orgnico del extracto hmico total
5.1.11.2.1.1 Equipos y materiales
Se emplean los equipos y materiales descritos en el numeral 5.1.11.1.1.2.
5.1.11.2.1.2 Reactivos
-

Agua destilada o desmineralizada.

Solucin de dicromato de potasio 1,0 N

Acido sulfurico concentrado

Acido ortofofrico concentrado


23

PROYECTO DE
NORMA TCNICA COLOMBIANA

NTC 5167 (Primera actualizacin)

Solucin indicadora de ortofenantrolina o difenilamina

Solucin de sulfato ferroso amnico 0,5 N

DE 073/04

5.1.11.2.1.3 Procedimiento
(Este procedimiento se ilustra en la marcha analtica indicada en el Anexo D)
-

Homogeneizar y verificar el pH.

Cuantificar el potasio.

Tomar una alcuota de 2 ml en un erlenmeyer de 125 ml y evaporar en bao de


Mara a 50 oC (tener cuidado de que la temperatura no se exceda de los 70 oC),
o sobre plancha de calentamiento cuidando que no se produzcan salpicaduras.

Adicionar la mezcla oxidante (K2Cr2O7 y H2SO4) y una vez fro operar como se
describe en el numeral 5.1.6.4

5.1.11.2.1.4 Clculos
g / l CEHT =

(Vb Vm) N 0,003 1 000


A

en donde
g/l C EHT =

gramos de carbono del extracto hmico total por litro de producto.

Vb

volumen de solucin de sulfato ferroso amnico gastado en el blanco

Vm

volumen de solucin de sulfato ferroso amnico gastado en la titulacin de la muestra en


estudio.

normalidad de la solucin de sulfato ferroso amnico.

alcuota tomada

5.1.11.2.2 Distribucin del carbono de extracto hmico total


5.1.11.2.2.1 Carbono orgnico de cidos hmicos g/l C AH
5.1.11.2.2.1.1 Procedimiento
Se realiza de acuerdo con lo indicado en el numeral 5.1.11.1.2.1.
5.1.11.2.2.1.2 Clculos
g / l C AH =

(Vb Vm ) N 0,003 1 000


0,1 g 25

en donde
% C AH =

gramos de carbono de cidos hmicos por litro de producto.

Vb

volumen de solucin de sulfato ferroso amnico gastado en el blanco

Vm

volumen de solucin de sulfato ferroso amnico gastado en la titulacin de la muestra en


estudio.

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PROYECTO DE
NORMA TCNICA COLOMBIANA
N

NTC 5167 (Primera actualizacin)

DE 073/04

normalidad de la solucin de sulfato ferroso amnico.

5.1.11.2.2.2 Carbono orgnico de cidos flvicos g/l C AF


g / l C AF = g / l CEHT g / l CAH

5.2

MTODOS MICROBIOLGICOS

5.2.1 Enriquecimiento, aislamiento y deteccin de salmonella


1.

Enriquecimiento previo no selectivo (regeneracin)


Pesar 25 g de muestra y verterlos en un erlenmeyer con 225 ml de caldo
lactosado haciendo una suspensin. Incubar a 35 C durante 24 h - 48 h.

2.

Enriquecimiento selectivo
En un erlenmeyer disolver 1,38 g de caldo tetrationato en 30 ml de agua
destilada, mezclar y calentar hasta ebullicin (NO AUTOCLAVAR), enfriar y
cuando alcance los 45 C agregar solucin de yodo. Se mezcla todo y se
adicionan 10 ml en dos o tres tubos previamente esterilizados.

Preparacin de la solucin de yodo: pesar 0,18 g de yodo y 0,15 g de yoduro de potasio, todo
esto se adiciona a los 30 ml de caldo tetrationato.
(Si se tiene la solucin de yodo preparada, se adicionan 0,6 ml de esta solucin a los 30 ml de
caldo tetrationato)
5.2.1.1 Procedimiento
-

Despus de la incubacin del caldo lactosado ms los 25 g de muestra por 24 h


48 h, se toma 1 ml de esta solucin y se lleva a los tubos con caldo tetrationato
(1 ml por cada tubo). Tratar de adicionar el mililitro cuando el medio est ms o
menos a 30 C - 35 C. Incubar de 24 h a 48 h a 37 C.

Aislamiento: tomar una asada llena de inculo de cada uno los tubos con el caldo
y extender sobre medios de cultivo slidos (agar Bismuto Sulfito o agar Salmonella
- Shigella), hasta agotar la muestra, de tal forma que se puedan obtener colonias
aisladas. Incubar a 37 C durante 24 h a 48 h.

5.2.1.2 Lectura
En agar bismuto sulfito: colonias pardas con el centro negro, borde claro, precipitado negro con
brillo metlico alrededor de las colonias: Salmonella, excepto Salmonella paratyphi A y
Salmonella pollorum.
En agar Salmonella Shigella: Colonias incoloras: Shigellas y la mayora de Salmonellas.
Transparentes con el centro negro: Proteus y algunas Salmonellas.
Reportar los resultados como presencia ausencia de Salmonella en 25 g de muestra.

25

PROYECTO DE
NORMA TCNICA COLOMBIANA

NTC 5167 (Primera actualizacin)

DE 073/04

5.2.2 Recuento total de microorganismos mesfilos facultativos (Mtodo estndar de


recuento en placa por siembra en profundidad)
5.2.2.1 Equipos y materiales
-

Balanza analtica.

Estufa de incubacin.

Contador de colonias.

Pipetas de 1 ml y 10 ml estriles.

Cajas de petri estriles.

Recipientes de vidrio resistentes a la temperatura del autoclave.

Instrumentos para preparar la preparacin de muestras: cuchillos, pinzas,


esptulas. Todo el material debe estar previamente esterilizado.

5.2.2.2 Reactivos
-

Agua peptonada al 0,1 %: frascos con 90 ml y tubos con 9 ml, estriles.

Agar para recuento en placa, fundido y enfriado a 48 C 2 C.

5.2.2.3 Procedimiento
a)

b)

Preparar las muestras y las diluciones de los homogenizados de la siguiente


manera:
-

Pesar 10 g de muestra representativa.

Aadir 90 ml del diluyente (agua peptonada) y mezclar durante 2 min


como mximo.

Dejar la mezcla en reposo, a temperatura ambiente, durante 15 min. De


esta manera se obtiene la dilucin 10-1.

Mezclar nuevamente el contenido de la primera dilucin agitando y se


toma con pipeta una alcuota de 1 ml y se lleva a un tubo con 9 ml del
diluyente (agua peptonada). Mezclar con otra pipeta diferente para
homogenizar la muestra. Esta es la dilucin 10-2.

Continuar preparando el nmero de diluciones necesarias.

Siembra de las muestras:


-

Se toma con pipeta y por duplicado, en cajas de petri, alcuotas de 1 ml


de las diluciones 10-1 , 10-2 , 10-3 , 10-4 , 10-5 y 10-6.
Estas diluciones se recomiendan cuando no se conozca previamente el
nmero aproximado de microorganismos presentes en la muestra. Otras
26

PROYECTO DE
NORMA TCNICA COLOMBIANA

NTC 5167 (Primera actualizacin)

DE 073/04

veces se escogen aquellas que por experiencia permiten realizar


adecuadamente los conteos.
-

Inmediatamente despus de adicionar la alcuota, se agrega a cada placa


de petri 12 ml a 15 ml de agar de cuenta grmenes, fundido y mantenido
entre 45 C a 48 C.

Luego se mezclan de manera homognea el inculo con el agar,


agitando las placas en varias direcciones con movimientos cortos pero
firmes; de esta manera se asegura que las colonias se separen y se
puedan contar fcilmente.

5.2.2.4 Lectura y clculos de recuento


-

Seleccionar las placas de una misma dilucin que presente entre 30 y 300
colonias.

Utilizando el contador de colonias, contar todas las colonias.

Calcular el nmero de colonias visibles por gramo de muestra.

5.2.3 Recuento total de hongos y levaduras


5.2.3.1 Equipos y materiales
-

Balanza analtica.

Contador de colonias.

Bao mara para temperatura de 50 C.

Cajas de petri estriles.

Pipetas de 1 ml y 10 ml estriles.

Recipientes de vidrio, resistentes a la temperatura del autoclave.

Instrumentos para preparar las muestras: cuchillos, pinzas, tijeras, esptulas.


Todo el material debe estar previamente esterilizado.

5.2.3.2 Reactivos
-

Agua peptonada al 0,1 % estril: frascos con 90 ml y tubos con 9 ml.

Oxitetraciclina Gentamicina Extracto de Levadura Agar (Agar OGY) fundido


y mantenido entre 46 C a 48 C.

5.2.3.3 Procedimiento
a)

Preparar las muestras y las diluciones de los homogenizados de la siguiente


manera:
-

Pesar 10 g de la muestra.
27

PROYECTO DE
NORMA TCNICA COLOMBIANA

b)

NTC 5167 (Primera actualizacin)

DE 073/04

Aadir 90 ml del diluyente (agua peptonada) y homogenizar o mezclar por


2 min como mximo.

Dejar la mezcla en reposo, a temperatura ambiente, durante 15 min. De


esta manera se obtiene la dilucin 10-1.

Mezclar nuevamente el contenido de la primera dilucin agitando, y se


toma con pipeta una alcuota de 1 ml a un tubo con 9 ml del diluyente
(agua peptonada). Mezclar con otra pipeta diferente para homogenizar la
muestra. Esta es la dilucin 10-2.

Continuar preparando el nmero de diluciones necesarias.

Siembra de las muestras:


-

Pipetear por duplicado, en placas de petri, alcuotas de 1 ml de las


diluciones
10-1, 10-2, 10-3, 10-4 , 10-5 y 10-6.
Las citadas diluciones se aconsejan en los casos en que no se conozca
previamente el nmero aproximado de microorganismos presentes en la
muestra; pero puede modificarse siempre que lo aconseje la cantidad de
microorganismos esperados.

Inmediatamente despus deadicioanar la alcuota, se agrega a cada placa


de petri 12 ml a 15 ml del medio oxitetraciclina-gentamicina-extracto de
levadura.

Mezclar el inculo con el agar, inclinando y girando las placas.

Como prueba de control de la esterilidad, verter una cantidad de medio de


cultivo sobre una placa de petri sin muestra. (marcarla como Control).

Dejar las placas sobre una mesa en reposo y hasta que se solidifique el
agar.

Invertir las placas e incubar a temperatura de laboratorio (temperatura


ambiente) durante 3 d a 5 d.

5.2.3.4 Lectura y clculos de recuento


-

Seleccionar las placas de una misma dilucin que presente entre 30 y 300 colonias.

Utilizando el contador de colonias, contar todas las colonias.

Calcular el nmero de hongos y levaduras visibles por gramo de muestra.

5.2.4 Recuento de enterobacterias


5.2.4.1 Equipos y materiales
-

Balanza analtica.
28

PROYECTO DE
NORMA TCNICA COLOMBIANA

NTC 5167 (Primera actualizacin)

DE 073/04

Estufa de incubacin a 35 C - 37 C.

Contador de colonias.

Instrumentos para preparar muestras: esptulas, tubos de ensayo, pipetas de 1 ml,


cajas de petri (100 mm x 15 mm) estriles.

5.2.4.2 Reactivos
-

Agar-cristal violeta-rojo neutro-bilis-glucosa.

Bactident-oxidasa.

5.2.4.3 Procedimiento
-

Disolver 10 g de la muestra en 90 ml del diluyente (agua peptonada) colocar en


agitacin durante 5 min (Esta es la dilucin 101). Con pipeta de 1 ml mezclar
con cuidado aspirando varias veces.

Transferir 1 ml de la dilucin 101 en un tubo con 9 ml de diluyente, descartar la


pipeta, esta es la dilucin 102.

Repetir los dos ltimos pasos hasta realizar el nmero de diluciones necesarias.

Se toma con pipeta y por duplicado en placas de petri, alcuotas de 1 ml de la


serie de diluciones.

A continuacin se agrega aproximadamente 10 ml del medio cristal violeta rojo


neutro - bilis-glucosa, fundido y enfriado a 46 C - 48 C, a cada una de las
placas.

Mezclar las diluciones con el medio, inclinando y girando las placas en varias
direcciones.

Como prueba de esterilidad, verter una cantidad de medio de cultivo sobre una
placa de petri sin muestra (control).

Dejar las placas sobre la mesa hasta que el medio se solidifique.

Una vez solidificado el medio de las placas agregar otra vez, aproximadamente 8 ml
del medio fundido y enfriado a 46 C - 48 C.

Despus de solidificada esta nueva etapa, invertir las placas e incubarlas a 35 C 37 C durante 21 ms o menos tres horas.

5.2.4.4 Lectura y clculo de los recuentos


Seleccionar las placas que contengan entre 30 y 300 colonias violetas, rodeadas por
precipitado rojo violeta.
-

Tomar mnimo tres colonias y realizar a cada una de ellas la prueba de la


oxidasa.

29

PROYECTO DE
NORMA TCNICA COLOMBIANA
5.3

NTC 5167 (Primera actualizacin)

DE 073/04

Calcular de acuerdo a las diluciones, el nmero de enterobacterias viables por


gramo de muestra.

INFORME DE LOS ENSAYOS

El informe de los ensayos deber incluir los siguientes datos:


-

Identificacin de la muestra.

Condicin fsica de la muestra.

Referencia al mtodo utilizado.

El resultado y el mtodo de expresin.

Cualquier caracterstica inusual durante la determinacin.

6.

EMPAQUE Y ROTULADO

6.1.

EMPAQUE

El empaque debe ser tal que garantice la calidad el producto contenido.


6.2

ROTULADO

El rotulado debe cumplir con la NTC 40.


7.

APNDICE

7.1

REFERENCIAS NORMATIVAS

Los siguientes documentos normativos referenciados son indispensables para la aplicacin de


este documento normativo. Para referencias fechadas, se aplica nicamente la edicin citada.
Para referencias no fechadas, se aplica la ltima edicin del documento normativo referenciado
(incluida cualquier correccin).
NTC 40:2003, Fertilizantes y acondicionadores de suelos. Etiquetado.
NTC 202:2001, Mtodos cuantitativos para la determinacin de potasio soluble en agua, en
abonos o fertilizantes de materias para su fabricacin.
NTC 208:1999, Abonos o fertilizantes. Mtodo cuantitativo de determinacin del nitrgeno
ntrico.
NTC 209:1996, Abonos o fertilizantes. Mtodo de ensayo cuantitativo para la determinacin del
nitrgeno amoniacal y de nitratos.
NTC 211:1997, Abonos o fertilizantes. Mtodo cuantitativo de determinacin del nitrgeno
amoniacal por destilacin.
NTC 234:1996, Abonos o fertilizantes. Mtodo de ensayo para la determinacin cuantitativa de
fsforo.
30

PROYECTO DE
NORMA TCNICA COLOMBIANA

NTC 5167 (Primera actualizacin)

DE 073/04

NTC 370:1997, Abonos o fertilizantes. Determinacin del nitrgeno total.


NTC 627:1972, Abonos o fertilizantes. Determinacin del cobre.
NTC 642:1972, Abonos o fertilizantes. Determinacin del cobalto.
NTC 650:1997, Abonos o fertilizantes. Determinacin del boro.
NTC 1369:1976, Fertilizantes. Determinacin de cinc, cobre, hierro, manganeso, calcio y
magnesio por absorcin atmica.
NTC 1860:1997, Productos qumicos para uso agropecuario. Abonos o fertilizantes. Mtodo de
ensayo para determinar el contenido de boro. Mtodo de azometina-h.
NTC 1927:2001, Fertilizantes y acondicionadores de suelos. Definiciones, clasificacin y
fuentes de materias primas.
NTC-ISO 8633:1995, Fertilizantes slidos. Mtodo de muestreo simple para lotes pequeos.
NTC-ISO 8634:1995, Fertilizantes slidos. Plan de muestreo para la evaluacin de una entrega
grande.
NTC 3795:1995, Fertilizantes slidos. Derivacin de un plan de muestreo para la evaluacin de
una entrega grande.

31

PROYECTO DE
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NTC 5167 (Primera actualizacin)

DE 073/04

ANEXO A
(Informativo)
MARCHA ANALTICA PARA LA CUANTIFICACIN DEL CARBONO OXIDABLE TOTAL EN
UN PRODUCTO ORGNICO U ORGNICO MINERAL SLIDO

0,1 g de producto o residuo slido

Blanco de reactivos

Adicionar 10 ml de K2Cr2O7 1N

Dejar en contacto por unos minutos

Adicionar 20 ml de H2SO4 concentrado

Agitar manualmente durante 1 min

Dejar enfriar y adicionar agua

Adicionar 5 gotas de indicador

Titular con sulfato ferroso amnico 0,5 N

32

PROYECTO DE
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DE 073/04

ANEXO B
(Informativo)
CRITERIOS PARA EVALUAR LA PRESENCIA DE SUSTANCIAS HMICAS EN
ENMIENDAS ORGNICAS SEGN LOS PARMETROS DE ESTA NORMA

15 g de producto

Llevar a 100 ml con agua destilada

El producto
es soluble
?
Si

No

Medir pH

pH del agua utilizada

Pesar 15 g

pH alcalino

Adicionar 100 ml de KOH 4%

?
No hay sustancias
hmicas

Si hay sustancias
hmicas

El producto
es soluble
mnimo
50%
Si

No

Consultar el Anexo D

Cumple la norma

Consultar el Anexo C

33

No
cumple la norma

PROYECTO DE
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DE 073/04

ANEXO C
(Informativo)
MARCHA ANALTICA PARA LA CUANTIFICACIN DE LA FRACCIN HMICA EN
ENMIENDAS ORGNICAS HMICAS SLIDAS
15 g de material

Adicionar 100 ml de KOH 4%

Agitar 2h
(agitador recproco)

centrifugar o filtrar

Sobrenadante

Residuo insoluble

Lavar con agua


Tomar alcuota
de 2ml

Tomar alcuota de 25 ml
(en vaso de 50 ml o tubo de
centrfuga de 50 ml)
Secar y pesar

Secar

Adicionar H2SO4 hasta pH 2

Cuantificar el
Carbono orgnico
% C EHT

Dejar en reposo
durante 24 h a 4C

Filtrar o centrifugar

Sobrenadante
cidos flvicos

Residuo
cidos hmicos

Cuantificar el carbono
de cidos flvicos % C AF

Secar y pesar

Tomar 0,1 g del residuo

Cuantificar el carbono
de cidos hmicos % CAH

34

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DE 073/04

ANEXO D
(Informativo)
MARCHA ANALTICA PARA LA CUANTIFICACIN DE CARBONO ORGANICO EN LA
FRACCIN HUMICA EN ENMIENDAS ORGANICAS HUMICAS LQUIDAS

Homogeneizar y verificar el pH

Cuantificar el potasio

Tomar alcuota de 25 ml
(en vaso de 50 ml o tubo
de centrfuga de 50 ml)

Tomar alcuota de 2 ml

Secar

Adicionar H2SO4 hasta


pH 2

Cuantificar el carbono
orgnico % C EHT

Dejar en reposo durante


24 h a 4C

Filtrar o centrifugar

Sobrenadante
cidos flvicos

Precipitado
cidos hmicos

Cuantificar el carbono
de cidos flvicos %C AF

Secar y pesar

Tomar 0,1 g
del residuo

Cuantificar el carbono de
cidos hmicos % C AH

35

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DE 073/04

ANEXO E
(Informativo)
BIBLIOGRAFA

ALMENDROS G. Mtodos de Anlisis del Consejo Superior de Investigaciones Cientficas,


Centro de Ciencias Medio Ambientales. E- mail ccma@cc.csic.es.
ALMENDROS, G., A. POLO., E. DORADO y J. GALVAN. 1982. Estudio al microscopio
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36

PROYECTO DE
NORMA TCNICA COLOMBIANA

NTC 5167 (Primera actualizacin)

DE 073/04

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NORMA TCNICA COLOMBIANA

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DE 073/04

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www.epa.gov

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