Técnico en calidad de

Alimentos

Detección de Enterobacteriaceae

Prof. Julia CASTRO

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 Familia Enterobacteriaceae

• Constituida por distintos grupos de

microorganismos, que varían en sus
propiedades bioquímicas y composición
antigénica.
• Son bacilos Gram negativos, aerobios o
anaerobios facultativos, no esporulados.
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 Familia Enterobacteriaceae

 La mayoría de los miembros de esta familia son

móviles a excepción de la Shigella y Klebsiella.
 Todas las especies fermentan la glucosa con
formación de ácido, o de ácido y gas.
 Su habitat es el intestino del hombre y de los
animales, encontrándose también en el suelo.
 Muchas especies son patógenas para el ser humano,
produciendo una variedad de enfermedades
infecciosas, incluyendo enfermedades entéricas y la
septicemia.
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 Clasificación
• Estaría compuesta por 7 tribus, 14 géneros y 33 especies (considerando 3
en Salmonella)
tribu género
Escherichieae escherichia
shigella
Salmonelleae salmonella
Klebsielleae klebsiella
Enterobacter
Serratia
proteae proteus
yersinieae yersinia

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 Importancia

• Algunos miembros de la familia Enterobacteriaceae

son constituyentes normales de la flora intestinal y
en el intestino no causan enfermedad.
• Son patógenos cuando salen de su habitat normal y
alcanzan otros órganos.
• Entre estos tenemos: E.coli, Klebsiella pneumoniae y
Proteus que producen infecciones del tracto biliar y
tracto urinario.

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 Klebsiella pneumoniae puede producir neumonía.
 E. coli principal causante de septicemias y meningitis
en recién nacidos.
 Algunas cepas de E. coli pueden causar
gastroenteritis y se denominan E. coli
enteropatógenas.
 Estas cepas provoca daño a nivel intestinal debido a
su capacidad toxigénica e invasiva.

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 Otros miembros de esta familia son:

• Patógenos entéricos que provocan

gastroenteritis, como:
• Yersinia enterocolítica
• Shigella
• Salmonella
• También puede producir las fiebres entéricas
(tifoidea y paratifoidea) y septicemia.

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 La familia Enterobacteriaceae tiene importancia en:

• Infecciones intrahospitalarias
• E.coli y miembros de las tribus:

Klebsiellea Causan enfermedades como:

Bacteremia y bacteriuria en
Proteae hospitalizados

E.Coli causa frecuentemente sepsis intra abdominal

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 Medios de aislamiento para identificar bacterias de
distintas especies de la familia Enterobacteriaceae
Medios sólidos, diferenciales y
selectivos Características de las colonias
• Agar Mac Conkey: compuesto  Fermentadoras de lactosa, de color
por lactosa y un indicador de p H rosa a rojo por viraje del indicador
rojo neutro. Contiene cristal debido a la producción de ácido.
violeta que inhibe el desarrollo de  Las bacterias pueden rodearse de
bacterias Gram +. una zona de bilis.
 Si las bacterias no fermentan la
lactosa forman colonias incoloras y
no alteran la apariencia del medio.

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 Medios de aislamiento para identificar bacterias de distintas
especies de la familia Enterobacteriaceae

Medios sólidos diferenciales y selectivos

• Agar SS: recomendado para
aislar Salmonella y Shigella.
• Este medio contiene lactosa,
indicador rojo neutro y sales
biliares para inhibir bacterias
Gram +.
• Además contiene verde
brillante que inhibe el
desarrollo de gérmenes
coliformes y tiosulfato de
sodio y citrato férrico para
evidenciar la producción de
H2S.
Características de las colonias
 Incoloras , de tamaño regular o
grande, a veces con un punto
negro en el centro, con
producción de H2S.
 Las colonias de Shigella son
transparentes, pequeñas, planas
y con bordes regulares.
 A veces pueden crecer colonias
coliformes, de color rosa o casi
incoloras de centro rosa.
 Algunos tipos de Proteus pueden
formar colonias con centro negro.

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Klebsiella en agar SS

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12
E. Coli en agar sangre

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Las colonias aisladas en estos medios se siembran en medios
indicadores diferenciales

1. Agar con Fierro de Kliger (KIA)

2. Agar con Fierro y Lisina (LIA)
3. Caldo triptonado con urea (CTU)
4. Agar Citrato de Simmons (SC)

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 Agar con Fierro de Kliger (KIA)

Contiene lactosa, glucosa e indicador de pH rojo fenol y

también sulfato ferroso.
Se envasa en tubo de modo que quede una columna de agar
profundo y una estría pequeña.
En el agar KIA se leen las siguientes reacciones bioquímicas:
 Fermentación de la glucosa: fondo amarillo, estría roja
(K/A).
 Producción de gas: ruptura del agar.
 Fermentación de la lactosa: todo el tubo amarillo(A/A)
 Producción de H2S: ennegrecimiento del medio que puede
ser más o menos intenso, por formación del sulfuro de
hierro.

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 Agar con hierro y lisina (LIA)

• Contiene lisina, glucosa, indicador de pH: púrpura de

bromocresol y una sal de hierro. Se envasa en medio igual que
el agar KIA. Se siembran 3 picaduras hasta el fondo del tubo y
luego se siembra la estría.
En el LIA se leen las siguientes reacciones bioquímicas:
• Decarboxilación de la lisina : todo el tubo azul.
• Deaminación de la lisina: tendido rojo.
• Producción de H2S: ennegrecimiento de las picaduras.
• Producción de gas: ruptura del agar.
Con el indicador empleado, la acidez se ve de color amarillo y la
alcalinidad de color azul.

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 ¿Cómo reconozco los gérmenes?

Aquellos que decarboxilan la lisina viran el p H a

la alcalinidad, toma color azul el tubo.
Con los gérmenes que no la decarboxilan el
fondo del tubo sigue amarillo (acidez).
La desaminación de la lisina se identifica por el
tendido rojo en el tubo, el proteus da este
color. El fondo del tubo siempre se verá
amarillo.

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 Caldo triptonado con urea (CTU)

• Medio líquido al cual se le agregan 2 gotas de

urea al momento de sembrar.
• Se evidencian las siguientes reacciones
bioquímicas:
Producción de ureasa: algunos gérmenes
hidrolizan la urea, dando productos como CO2 y
NH3.
Desaminación del triptofano: Se evidencia con el
reactivo de Kovacs, formándose un anillo rojo en
la superficie.
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 Agar citrato de Simmons

• El medio contiene indicador azul de bromo timol. Al

utilizar citrato de sodio, se libera NaOH, esto hace
que le p H suba y el indicador vira a azul.
• Se realiza también la reacción de la oxidasa.
• Las bacterias que producen citocromooxidasa oxidan
el reactivo produciendo color rosa oscuro.
• Las enterobacteriaceas son oxidasa negativas.

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