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Resumen Microbiológico

Géneros Escherichia, Salmonella y Yersinia

ESCHERICHIA
1. Introducción

Escherichia coli es un bacilo gramnegativo de la familia Enterobacteriaceae,


dominio Bacteria, filo Proteobacteria, clase Gammaproteobacteria, y orden
Enterobacteriales. Esta fue inicialmente aislada y descrita por el pediatra alemán
Theodor Escherich en 1885 (Fig. 1), quien demostró su existencia como
hospedero habitual del intestino. La denominó Bacterium coli commune, que
puede traducirse como “bacteria común del colon”. Fue hasta 1919 cuando
Castellani y Chalmers le dieron su denominación actual en homenaje a
Escherich. Escherichia se convirtió rápidamente en el género típico de la familia
de las Enterobacteriaceae (Walker, 2003).

E. coli puede ser uno de los microorganismos más estudiados en microbiología


(Camacho, 2006). Además, es fundamental para el estudiante conocer los
aspectos que caracterizan a esta bacteria (morfología, hábitats, clasificación,
composición química y pruebas de identificación fenotípica y genotípica).

2. Clasificación taxonómica

El género Escherichia incluye solo siete especies:


E. adecarboxylata, E. alberti, E. blattae, E. fergusonii, E. hermannii, E. vulneris
y E. coli

E. coli es el género de mayor importancia para el humano debido a que forma


parte de la biota habitual del intestino, además, algunas cepas que causan
padecimientos extraintestinales como el síndrome diarreico.
3. Características morfológicas y bioquímicas

E. coli posee la morfología característica de las


enterobacterias, pues es un bacilo corto gramnegativo
recto de bordes redondeados, es anaerobio facultativo,
catalasa positiva, oxidasa negativa, móvil, y no forma
esporas.

Al ser una bacteria gramnegativa tiene las siguientes características:


1. La membrana citoplasmática se
encuentra debajo de la pared y actúa
como orgánulo limitante. En ella se
encuentran enzimas importantes como
las que llevan a cabo la fosforilación
oxidativa, además de que, como en todas
las células, esta estructura concentra los
nutrientes en el interior y excreta los
productos de desecho.

2. El espacio periplasmático, ubicado entre


la membrana citoplasmática y el
peptidoglicano.

3. Una fina capa de peptidoglicano con un


grosor de 0.01 µm.

4. Membrana externa, capa unida estrechamente al peptidoglicano y que


contiene fosfolípidos, el lipopolisacárido (antígeno O, causante del choque
séptico) característico de estas bacterias y proteínas de anclaje (Walker,
2003).
4. Hábitat

E. coli es una bacteria anaerobia facultativa que crece a un pH óptimo de 6.0 a


7.0, a una actividad de agua (Aw) de 0.99 y a una temperatura cercana a 37°C
(35-43 °C), puesto que es mesófila.

El hábitat normal en el que se encuentra E. coli es el colon, forma parte de la


microbiota nativa intestinal y se encuentra en calidad de saprobio sin causar
daño. Por el contrario muchas cepas de E. coli producen substancias que son
útiles para el hospedero, como las colicinas, que tienen efecto inhibitorio sobre
otras cepas potencialmente patógenas, por lo que la colonización del intestino es
benéfica para el hospedero de organismos de sangre caliente (como las aves y
los mamíferos), sin embargo, se puede encontrar en condiciones de ambiente
externo como: en frutas y verduras contaminadas, la carne picada empaquetada,
las aguas negras y el excremento al aire libre.

5. Alimentos asociados

Desafortunadamente no se puede saber si un alimento está contaminado con


Escherichia coli (E. coli) por su aspecto, olor o sabor. Aunque la mayoría de los
tipos de bacterias de E. coli es inofensiva, ciertas cepas pueden causar
enfermedades graves transmitidas por los alimentos.

Los alimentos que se han vinculado a la E. coli incluyen la carne vacuna, los
brotes, las espinacas, la lechuga, las ensaladas listas para comer, la fruta, la leche
cruda, y la harina y la masa para galletas crudas.
6. Medios de cultivo

Agar Urea: Para el caso de la E. coli esta presenta una actividad ureásica
negativa y las colonias que forman son de color amarillo.

Agar-hierro-triple azúcar (TSI): E. coli presenta positivo en la producción de


gas y negativo en la producción de ácido sulfhídrico.

Prueba de orto-nitrofenil-β-galactopiranósido (ONPG): E. coli es positiva


para esta prueba.

Medio Motilidad-Indol-Ornitina (MIO): E. coli presenta resultados positivos


a todos los puntos a evaluar de este medio, desde movilidad, indol y ornitina
descarboxilasa

Medio Rojo de Metilo y Voges-Proskauer MR-VP: E. coli en la prueba rojo


de metilo es positivo, mientras que en VogesProskauer es negativo.

Prueba de fenilalanina desaminasa: E. coli da negativa con respecto a la


fenilalanina desaminasa, dando un color el pico de flauta y liquido de
condensación de color amarillo.

A pesar de que E. coli no es una bacteria con requerimientos nutricionales


específicos, se necesita de sustratos nutritivos o medios de cultivo determinados
para poder observar su comportamiento en el laboratorio de investigación e
identificarla en el diagnóstico clínico. Dentro de los medios más usuales
tenemos los agares Tergitol 7, MacConkey, Agar cistina-lactosa deficiente en
electrolito (CLED) y eosina y azul de metileno

7. Identificación de colonias

Agar MacConkey

Este separa las bacterias fermentadoras de la lactosa,


E Coli produce colonias de color rosado de 2-3 mm.

Agar Eosina Azul de Metileno (EMB)

Permite la diferenciación de especies fermentadoras de


la lactosa, Klebsiella pneumoniae y E Coli presentan
colonias que varían del purpura a verde metalico estas
forman colonias circulares que presentan un centro
grande y oscuro, su tamaño varia entre 1- 2 mm.
Agar Salmonella y Shigella (SS)

Se utiliza para aislar bacterias lactosa negativa como


Salmonella y Shigella, pero especies de la familia
enterobacteriaceae lactosa-positivas como Escherichia
coli presentan colonias rosadas ovaladas y lisas de 1-3
mm.

Agar Hektoen

Colonias de E. coli en agar Hektoen agar especifico


para el aislamiento de enterobacterias, las colonias
se observan de coloración anaranjado de 1-5mm.

Agar Gelosa Sangre

En este se observan colonias medianas blanquecinas,


redondeadas, algunas cepas pueden producir
hemolisis.

Agar Tergitol 7

Este medio permite diferenciar especies fermentadoras


de la lactosa de las especies no fermentadoras, en este
medio Escherichia coli presenta colonias rojizas o
amarillas.

8. Conclusiones
 Escerichia coli, es una bacteria que habita el intestino de los seres vivos, y
es capaz de causar infecciones gastointestinales.
 Existen medios selectivos para su aislamiento donde las colonias adquieren
un típico color, E coli es lactosa positiva y las colonias adquieren el color
del viraje del indicador del medio.
 Mediante pruebas bioquímicas es posible identificar a las especies de
Salmonella.
SALMONELLA SPP

1. Introducción
La infección por salmonela (salmonelosis) es una enfermedad bacteriana
frecuente que afecta el aparato intestinal. La bacteria de la salmonela
generalmente vive en los intestinos de animales y humanos y se libera mediante
las heces. Los humanos se infectan con mayor frecuencia mediante el agua o
alimentos contaminados.
En general, las personas que tienen una infección por salmonela no tienen
síntomas. Otras manifiestan diarrea, fiebre y calambres abdominales dentro de
las 8 a 72 horas. La mayoría de las personas sanas se recuperan dentro de unos
pocos días sin tratamiento específico.
En algunos casos, la diarrea asociada con la infección por salmonela puede
deshidratar al punto de requerir atención médica. También pueden presentarse
complicaciones que ponen en riesgo la vida si la infección se propaga más allá
de los intestinos. El riesgo de adquirir la infección por salmonela es mayor si
viajas a países con condiciones de higiene deficientes.

2. Clasificación taxonómica

DOMINIO: Bacteria
FILO: Proteobacteria
CLASE: Gammaproteobacteria
ORDEN: Enterobacteriales
FAMILIA Enterobacteriaceae
GÉNERO: Salmonella
ESPECIE: Salmonella thypi
Salmonella bongorio
Salmonella enterica
Salmonella choleraesuis
Salmonella enteritidis
Salmonella nyanza
Salmonella paratyphi
A,B,C
Salmonella typhimurium
Salmonella virginia

3. Características morfológicas y bioquímicas

Es un bacilo gramnegativo, catalasa positiva, Oxidasa negativo, no forman


esporas, son anaerobios facultativos, fermentan la glucosa (no producen gas), no
fermentan la lactosa, producen H2 S, móvil, al igual que toda la familia, reducen
los nitratos a nitritos, crecen en medios ordinarios, a temperatura de incubación
de 35 - 37 ºC. el pH óptimo de crecimiento es entre 6 - 8, puede crecer en
concentraciones altas de sales biliares

4. Hábitat
Salmonella puede colonizar a casi todos los animales, incluyendo aves, reptiles,
ganado, roedores, animales domésticos, aves y el ser humano.
La propagación de un animal a otro y el uso de piensos contaminados con
Salmonella mantienen un reservorio animal.
Algunos serotipos, como S. Typhi y S. Paratyphi, están muy bien adaptados al
ser humano y no producen enfermedad en otros anfitriones.
Otras cepas de Salmonella (p. ej., Salmonella choleraesuis) están adaptadas a los
animales y producen una enfermedad grave cuando infectan al ser humano

5. Alimentos asociados
La preparación y manipulación incorrectas de los alimentos en los hogares y en
los establecimientos de servicio de alimentación siguen siendo los factores
principales en los brotes.
La salmonelosis es una típica infección alimentaria cuyos síntomas son:
 El paciente puede permanecer como portador
 Gastroenteritis como evento más frecuente.
 Complicaciones: sepsis, falla renal, osteomielitis, meningitis
 Las fiebres tifoideas: incubación de 7 – 14 días, con sepsis, neumonía y
meningitis, malestar general, anorexia, fiebre, dolor abdominal y cefaleas.

6. Medios de cultivo
Para el diagnóstico en heces debe utilizarse dos medios selectivos además del de
enriquecimiento, el caldo selenito es el medio de enriquecimiento que se emplea
con mayor frecuencia, aunque también pueden utilizarse el caldo de tetrationato
y el caldo de tetrationato con verde brillante. Este último no debe usarse para la
búsqueda de S. typhi, pues inhibe a este microorganismo. Para la siembra directa
se recomienda utilizar más de un medio selectivo, entre ellos se hallan: el agar
Salmonella-Shigella, XLD y Verde brillante, para S. Typhi se recomienda
utilizar el sulfito de bismuto, los medios se incuban a 37° C de 18/24 horas.
7. Identificación de colonias
Colonias en Hektoen: las colonias de salmonella presentan un halo azul verdoso
o transparente y centro negro debido al sulfuro.

Colonias en Mc Conkey: las colonias en este medio son incoloras porque no


fermentan la lactosa.
8. Conclusiones
 Las salmonelas son bacilos no formadores de esporas que habitan y
contaminan diferentes alimentos y son capaces de generar varias
enfermedades infecciosas.
 Se aíslan en medios selectivos donde se le diferencia porque es lactosa
negativa, lo que la diferencia de otras bacterias.

YERSINIA SPP

1. Introducción
El agente causal de la peste es Yersinia pestis. Pese a ser una enfermedad
antigua, causante de millones de muertes a lo largo de la historia, todavía es
endémica en algunas zonas del mundo y por ello sigue siendo motivo de
preocupación. La infección por Y. pestis causa aproximadamente 3000 muertes
al año en todo el mundo (cifras de la Organización Mundial de la Salud) y
aunque las tasas de infección en Asia se han mantenido estables, la incidencia de
peste en África ha aumentado.

La Yersinia enterocolítica  y la Yersinia pseudotuberculosis  son infecciones


bacterianas poco comunes pero que pueden causar problemas cuando
aparecen. La Y enterocolítica causa una afección llamada enterocolitis, que es
una inflamación del intestino delgado y del colon que ocurre, y suele ser
recurrente, sobre todo en niños pequeños.

Estas infecciones parecen contraerse al comer alimentos contaminados, en


particular derivados del cerdo crudos o mal cocidos, y al beber leche sin
pasteurizar. También pueden contraerse al tocar un animal infectado, al tomar
agua de pozo contaminada o, excepcionalmente, por transfusiones de sangre
contaminada. Las infecciones son cada vez más frecuentes entre los niños con
sistemas inmunitarios debilitados. El período de incubación es de entre 4 y 6
días.

2. Clasificación taxonómica

El género Yersinia incluye 17 especies, aunque sólo existen tres patógenos,


Yersinia pestis (productora de peste), Yersinia pseudotuberculosis (productora
de cuadro de adenitis mesentérica) y Yersinia enterocolitica.

DOMINIO: Bacteria
FILO: Proteobacteria
CLASE: Gammaproteobacteria
ORDEN: Enterobacteriales
FAMILIA Enterobacteriaceae
GÉNERO: Yersinia
ESPECIE: Yersinia enterocolitica
Yersinia
pseudotuberculosis
Yersinia pestis

3. Características morfológicas y bioquímicas


 Morfológicamente son bacilos Gram negativos, no esporulados.
 Anaerobios facultativos y fermentadores de la glucosa (con producción
de ácido pero no de gases).
 Presentan un tamaño de 1-3 µm.
 Muestran una tinción bipolar con el colorante de Giemsa.
 Son catalasa positiva y carecen de oxidasa.
 Móvil por flagelos perítricos a 22-25ºC, pero no a 37°C.
 Crecen entre 30-37ºC a un pH entre 7 y 8,
 Pueden reproducirse a ±5ºC,
 tolera el 2,4,4- tricloro-2- hidrxydifenil eter (irgasan)

4. Hábitat
Los roedores son el principal reservorio natural de la Yersinia pestis y de
Yersinia enterocolítica. Puede encontrarse en animales de sangre caliente
domésticos y silvestres y ocasionalmente en reptiles y peces. Los cerdos son
importantes reservorios de los serotipos patógenos para el hombre.

5. Alimentos asociados
Se han reportado el aislamiento de esta bacteria a partir de diferentes alimentos
como lácteos o la carne precocida y fresca, en algunos animales como el cerdo
6. Medios de cultivo
Las especies de Yersinia crecen, aunque más lentamente en los medios
selectivos empleados en el aislamiento de enterobacterias incubadas a 37°C.
Forman colonias transparentes en el agar MacConkey, fermentan la sacarosa y la
xilosa, producirán colonias amarillas en el agar xilosa-lisina-desoxicolato por
fermentar la xilosa, se pueden usar medios selectivos y diferenciales como el
agar cefsulodina, irgasan, novobiocina (CIN)

7. Identificación de colonias
Para el aislamiento primario se recomienda incubar el agar CIN o el agar sangre
a 28-30°C por 24-48hr. En el agar CNI Y. enterocolitica desarrolla colonias
características con el centro de color rojo intenso rodeado de un borde
transparente lo que le confiere una apariencia de “ojo de toro”. Después de 42 h
de incubación pueden tomar un color rosa. Se recomienda realizar una prueba de
oxidasa para diferenciar a Yersinia (negativa) de Aeromonas spp (positiva)
Las colonias de Y. pseudotuberculosis son pequeñas, de color rojo y bordes
afilados rodeadas de una zona traslucida o carecen de la zona transparente. Y.
pestis después de 24 h de incubación desarrolla colonias opacas de color gris o
ligeramente amarillentas. Son necesarias las pruebas bioquímicas y serológicas
para obtener la confirmación e identificación completas.
8. Conclusiones
 Yersinia, es otro grupo de enterobacterias que no forman endosporas, son
contaminantes de alimentos y provocan infecciones intestinales.
 La especie más conocida fue Yersinia pestis, que generó la temida peste
negra en el pasado.
 Mediante pruebas bioquímicas de las puede diferenciar, son oxidasa
negativa.

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