LABORATORIO II

CÓDIGO 2146

Carrera: Técnico de Laboratorio.

Dpto. de Biología Molecular.
Fac. de Ciencias Exactas Físico Químicas y Naturales.
Universidad Nacional de Río Cuarto.

TEMA 12: SEROLOGÍA PARTE 3.

MONONUCLEOSIS INFECCIOSA Laboratorio II

Dr. Pablo Cesar Bogino

SEROLOGÍA

Temario

Mononucleosis Infecciosa
Patogénesis
Manifestaciones clínicas
Diagnóstico
Anticuerpos Heterófilos
Prueba de Paul-Bunnel Davidsohn
MONONUCLEOSIS INFECCIOSA
MONONUCLEOSIS INFECCIOSA (MI)

Es una enfermedad producida por el Virus de Epstein Barr (VEB)

Es una enfermedad de distribución mundial
La mayoría de los casos se observan en niños, adolescentes y adultos jóvenes
Casi siempre es un proceso benigno y autorresolutivo
En pacientes inmunodeprimidos puede dar lugar a complicaciones serias
Por su modo de transmisión se la conoce como “enfermedad del beso”
Por su sintomatología crónica se la conoce como “síndrome de fatiga crónica”
“Mononucleosis” hace referencia a la manifestación hematológica de leucocitosis
mononuclear con Linfocitos Reactivos

VEB es un virus de la familia Herpesviridae

Descubierto en 1968 por

Epstein, Achong y Barr
mediante microscopía
electrónica en cultivo de
células de tejido con
linfoma de Burkitt
MONONUCLEOSIS INFECCIOSA PATOGÉNESIS

Infección
VEB es un virus con tropismo en
Contacto con secreciones orales (saliva) Epitelio de orofaringe
Requiere contacto directo e íntimo (beso) Glándulas salivales
No se transmite por aerosoles Linfocitos B (LB)

Infección latente
y muy persistente

El hombre es el
único reservorio
natural del VEB
(Glándulas
salivales)
MONONUCLEOSIS INFECCIOSA PATOGÉNESIS

El VEB primero infecta y se replica en las células epiteliales de la orofaringe

(amígdalas) ocasionando la faringitis típica de la MI
Posteriormente infecta a LB del tejido linfoideo asociado a las amígdalas
Los LB infectados diseminan el virus por el sistema linforreticular ocasionando las
adenopatías características de la enfermedad
Los LB infectados inducen la proliferación de Linfocitos T (LT), ocasionando la
linfocitosis reactiva en sangre periférica
La respuesta celular por LT (NK, LT citotóxicos) controla la proliferación viral durante la
infección primaria y produce la fiebre típica de MI
El estado inmunológico del huésped condiciona el curso de la enfermedad
En personas inmunodeprimidas la respuesta celular es deficiente, conduciendo a una
gran proliferación de LB infectados
El espectro de la enfermedad abarca
Infecciones asintomáticas
Enfermedad febril no específica
Cuadro de Mononucleosis Infecciosa Típica
Infección con manifestaciones (complicaciones) sistémicas
Desórdenes linfoproliferativos (Linfoma de Burkitt, Carcinoma nasofaríngeo)
MONONUCLEOSIS INFECCIOSA EVOLUCIÓN Y MANIFESTACIONES CLÍNICAS

Período de Incubación: 3-7 semanas Otros Síntomas y Signos

Pérdida de peso (anorexia) Esplenomegalia
Fase sintomática: 2-4 semanas
Fatiga-Astenia Hepatomegalia
Dolores musculares Hepatitis Difusa Leve
Malestar General Escalofríos

Tríada Típica
Faringitis
Fiebre
Linfadenopatías
MONONUCLEOSIS INFECCIOSA EVOLUCIÓN Y MANIFESTACIONES CLÍNICAS

Resolución espontánea Complicaciones severas de la MI en

(2-3 semanas) de la la menor proporción de los casos
mayoría de los casos

La capacidad de transmisión se
mantiene hasta 18 meses post
infección inicial

Infección por VEB

Crónica o Persistente

Fatiga Crónica

Existe la posibilidad de que el paciente

pueda eliminar virus en forma
asintomática durante toda su vida:
Portador Asintomático
MONONUCLEOSIS INFECCIOSA DIAGNÓSTICO

Paciente con datos

Tríada: Faringitis, Fiebre y Linfadenopatías
clínicos sugestivos

SE DIAGNOSTICA MI
Laboratorio

3 criterios clásicos: Además:

Leucocitosis con linfocitosis (10000-20000 GB/mm3, HEPATOGRAMA ANORMAL
> 50 % de linfocitos) (90 % de los casos)
Presencia de Linfocitos Reactivos (> 10 %) Transaminasas
y FAL elevadas
Serología positiva para VEB
HEMOGRAMA ANORMAL
Anticuerpos Heterófilos
(Casi 100% de los casos)
Monotest: Prueba de Paul-Bunnel Davidshon
Leucocitosis con:
Anticuerpos específicos contra VEB
IgM o IgG anti-VCA (anti-cápside viral) Neutropenia
IgG anti-EBNA (anti-antígeno nuclear) Linfocitosis
Linfocitos Reactivos
Trombocitopenia
MONONUCLEOSIS INFECCIOSA DIAGNÓSTICO

DIAGNÓSTICO
Manifestaciones Clínicas
Laboratorio
Serología
Reacción de Paul-Bunnell-Davidsohn
IgM e IgG específica para VEB
Manifestaciones hematológicas

En adultos o niños mayores de 10 años:

Clínica sugestiva La serología específica debe ser utilizada
Hemograma típico como diagnóstico de MI en:
Ac Heterófilos (Monotest) positivos Presentaciones atípicas
Presentaciones severas
DIAGNÓSTICO DE MI
Enfermedad mononucleósica
prolongada con Ac Heterófilos negativos
Si el Monotest es negativo Niños menores de 10 años (Monotest
Investigar Ac específicos para VEB negativo no descarta MI)
(IgM e IgG anti-VCA)
MONONUCLEOSIS INFECCIOSA LINFOCITOS REACTIVOS

Son Linfocitos T
activos que responden
a los LB infectados con
el VEB

Mayor Tamaño

Abundante
Citoplasma

Presencia de
vacuolas

Membrana con
indentaciones
MONONUCLEOSIS INFECCIOSA SEROLOGÍA
Ac Heterófilos
Activación de LB por VEB Producción Policlonal de Ac
Ac Específicos

Heterophile Ab

Incubación MI Convalecencia
Aguda

Tomado de Clin. Microbiol. Rev. 2011, 24(1):193. DOI: 10.1128/CMR.00044-10, con modificaciones
MONONUCLEOSIS INFECCIOSA SEROLOGÍA

Anticuerpos Heterófilos Anticuerpos Específicos

El VEB genera Ac heterófilos asociados a MI pero Se generan contra Ag específicos del VEB
NO son reactantes específicos contra VEB VCA: Antígeno de Cápside Viral
Son Ac capaces de reaccionar con Ag presentes EBNA: Antígeno Nuclear Viral
en hematíes de otras especies (caballo, cabra, etc)
Presentes en un 60-70 % de los pacientes en la 1º
semana de MI y en un 80-90 % en la 3-4º semana IgM anti-VCA Su detección evidencia
Son transitorios, desaparecen entre 3-12 meses infección primaria reciente
15-20 % de los pacientes con MI son negativos
En general son del isotipo IgM
Se determinan mediante una PRUEBA DE Se detectan mediante IFI o ELISA
AGLUTINACIÓN de GLÓBULOS ROJOS EN PLACA,
denominada Monotest, Monoslide o Monospot

IgG anti-VCA Persisten toda la vida,

IgG anti-EBNA su detección evidencia
infección pasada
MONONUCLEOSIS INFECCIOSA SEROLOGÍA

Anticuerpos Exposición a Ag Heterófilos:

Heterófilos Ag presentes en una gran variedad de fuentes naturales
Respuesta Presentan semejanza estructural
Inmunitaria Dan reacciones cruzadas entre sí

La infección con VEB y desarrollo de MI genera la producción de Ac Muy común

heterófilos denominados AC HETERÓFILOS DEPENDIENTES DE MI o frecuente
Estos Ac no tienen relación con los Ag de Forssman

Ag de Forssman
El suero humano puede contener una POBLACIÓN de Ac heterófilos
con capacidad para reaccionar contra Ag presentes en la superficie Glucolipido
de los glóbulos rojos de otras especies (conejo, carnero, caballo, de bajo PM
etc), produciendo “in vitro” REACCIONES DE AGLUTINACIÓN

Animales
(eritrocitos)
Bacterias
Hongos
MONONUCLEOSIS INFECCIOSA REACCIÓN DE PAUL-BUNELL DAVIDSOHN

Paul y Bunnell observaron que el suero de pacientes con MI generalmente contiene

un alto título de Ac heterófilos, capaces de aglutinar glóbulos rojos de carnero o de
caballo
Estos Ac pueden no ser exclusivos de MI, ya que en el suero de individuos sanos
pueden existir Ac anti-GR de carnero con títulos de 1/28 a 1/56, observándose títulos
≥ de 1/112 en diversas infecciones y otras estimulaciones antigénicas (Ac de
Forssman)
Tales hechos indican que la evidencia de altos títulos de anticuerpos heterófilos
sólo tiene valor presuntivo en el diagnóstico de MI
Davidsohn introdujo la adsorción diferencial con extracto de riñón de cobayo (capaz
de adsorber los Ac heterófilos no-MI dependientes o Ac de Forssman), aumentando
así la sensibilidad y especificidad de la prueba
La prueba de aglutinación de GR de caballo en placa de Paul-Bunell Davidsohn
(MONOTEST, MONOSLIDE o MONOSPOT), es la más empleada para diagnosticar MI
en pacientes con la sintomatología y hemograma típico
MONONUCLEOSIS INFECCIOSA REACCIÓN DE PAUL-BUNELL DAVIDSOHN

REACCIÓN DE
PAUL-BUNELL

Ac de Forssman
(Ac heterófilo
NO asociado a MI)

REACCIÓN DE
PAUL-BUNELL DAVIDSOHN
Ac heterófilo
MI dependiente
MONONUCLEOSIS INFECCIOSA REACCIÓN DE PAUL-BUNELL DAVIDSOHN

FUNDAMENTO

Los anticuerpos heterófilos asociados a la Mononucleosis Infecciosa se detectan por su

capacidad de aglutinar los eritrocitos de caballo.
Simultáneamente los anticuerpos no asociados a mononucleosis (Ac de Forssman) son
neutralizados con extracto de riñón de cobayo.
La aglutinación se visualiza macroscópicamente y se confirma mirando al microscopio.

Negativo Positivo
MONONUCLEOSIS INFECCIOSA REACCIÓN DE PAUL-BUNELL DAVIDSOHN
MONONUCLEOSIS INFECCIOSA Links de Interés

https://www.youtube.com/watch?v=XcCdmprvnXA

https://www.youtube.com/watch?v=Ax-adlhQMVc