Practica 3: Repaso del microscopio y observación en fresco de

microorganismos
Fecha inicio: 9/10/20 Fecha fin: 14/10/20

Objetivos

➢ Repasar el funcionamiento y las partes del microscopio

➢ Repasar como había que ajustar la iluminación en función de las muestras utilizadas
➢ Aprender a realizar la técnica de la gota pendiente y entender las ventajas
➢ Aprender a identificar bacterias, protozoos, algas en el agua de charca
➢ Aprender a identificar bacterias y levaduras en muestras en fresco

Materiales:

➢ Microscopio
➢ Agua destilada
➢ Portaobjetos excavado
➢ Cubreobjetos
➢ Asa de siembra
➢ Pipeta Pasteur
➢ Parafina/ vaselina
➢ Asa de siembra
➢ Microscopio

Procedimientos

Procedimiento 1: Agua de charca

- Coger portaobjetos excavado, y colocar una gota de la muestra ayudándonos de la pipeta

Pasteur
- Colocar el cubreobjetos encima
- Observar al microscopio

Procedimiento 2: técnica de la gota pendiente

- Colocar en el cubreobjetos una capa de parafina en los cuatro bordes

- Colocar la muestra en el cubreobjetos
- Poner encima el portaobjetos
- Observar al microscopio
Resultados

Agua de charca

En la imagen se pueden observar polen, algas de color

verde de diversos tamaños. También pudimos observar
organismos unicelulares(protozoos) y alguna bacteria

Levadura

Levadura

La levadura es Hanaella luteola, se pueden ver que su

morfología es ovoide, se encuentran a veces
agrupadas y otras dispersas a lo largo de todo el
campo.

Bacteria

Se observan bacterias con forma de cocos,

que están dispersas a lo largo de todo el
campo microscópico. Aunque también a
veces se observaban estructuras con forma
de bacilos.

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CONCLUSIONES

En esta práctica primero hemos estado recordando como había que colocar el condensador y el
condensador en función de la muestra que fuésemos a observar al microscopio. Para las muestras
no teñidas, es decir, en fresco, debemos aumentar el contraste para maximizar la observación, por
lo que debemos cerrar el diafragma y el condensador debe de estar abajo. En cambio, para muestras
que estén teñidas, debemos maximizar el poder de resolución, el condensador debe de estar arriba
y el diafragma debe estar abierto.

También hemos estado observando el agua de charca que trajo una compañera, y hemos podido ver
al microscopio protozoos, bacterias en las que se podía ver como se desplazaban, polen, algas
verdes.

En las muestras en fresco, es importante mirar al microscopio rápidamente, ya que se seca

rápidamente y eso nos impediría observarlo, y aumentar el contraste. En la técnica de la gota
pendiente, el tiempo de secado de la gota es mas lento por lo que podremos observar la muestra
durante un tiempo más largo. Además, a la hora de poner la parafina en los bordes del cubreobjetos
hay que tener cuidado de no manchar el centro ya que es donde se colocara la gota y la muestra.

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Practica 4: Tinción simple
Fecha inicio: 22/10/20 Fecha fin: 22/10/20

Objetivos:

➢ Aprender el procedimiento para realizar una tinción simple

➢ Aprender a realizar frotis de levaduras y bacterias
➢ Identificar las bacterias y levaduras al microscopio
Materiales:

➢ Papel de filtro
➢ Portaobjetos
➢ Asa de siembra
➢ Agua destilada
➢ Mechero Bunsen
➢ Cristalizador y puente de tinción
➢ Azul de metileno
➢ Tubos con levaduras y bacterias
➢ Microscopio

Procedimiento

RESULTADOS

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Podemos observar que es
Pseudomonas fluorescens, con el
objetivo de 100x es una bacteria con
forma de bacilos cortos, que son
delgados, se ven azules porque han
sido teñidos con azul de metileno. No
están agrupados en forma de colonia,
más bien en parejas

Esta foto esta agrandada, para poder

observarlo mejor.

Es una levadura, Hanaella luteola, con el

objetivo de 100x, se puede observar que
tienen una forma ovoide, se encuentran
dispersas en grupos. Ha sido teñida con azul
de metileno.

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CONCLUSIONES

A esta tinción se la denomina tinción simple ya que solo utilizamos un colorante para teñir a los
microorganismos. Es un procedimiento fácil y rápido, que nos permite observar la morfología y el
tamaño de la bacteria, y también podemos observar su agrupamiento. Sin embargo, no permite
diferenciar las estructuras dentro del microorganismos.

En esta práctica, nos ayudará a trabajar mejor en el laboratorio si tenemos en cuenta unos consejos.
A la hora de realizar el frotis, intentar echar la gota de agua lo más pequeña posible, y en vez de
colocarla con una pipeta Pasteur, colocarla con un asa de siembra, ya que controlaremos mejor el
tamaño de la gota y tardara menos en secarse. Si hemos colocado una gota muy extensa y tarda
mucho tiempo en secarse, podremos colocarnos a una altura considerada del mechero Bunsen y
poner el portaobjetos, para que se seque más rápido, pero tenemos que cerciorarnos de que no le
llegue mucho calor o estropearíamos la muestra.

También será más cómodo repartirnos el colorante por mesas y poner un tubo con mesa. En el
cristalizador añadir previamente agua con lejía para que sea fácilmente quitar el colorante. Además,
tener cuidado a la hora de manejar este colorante ya que es difícil de quitar con las superficies.

En el microscopio, observamos una muestra de las levaduras, Hanaella luteola, que tienen forma de
ovoide y se disponen la mayoría de las veces en grupos grandes o en parejas, y también las
bacterias, Pseudomonas fluorescens con forma de bacilo cortos. Se tiñeron con azul de metileno,
destacando que la Hanaella luteola adquiere un color azul mas intenso que la Pseudomonas
fluorescens