PRÁCTICA No. 2 ANÁLISIS MICROBIOLÓGICO DE LECHE FRESCA OBJETIVO.

El alumno aplicará los conocimientos básicos adquiridos para la determinación de microorganismos presentes en una muestra de leche bronca y una de leche pasteurizada. INTRODUCCIÓN. La leche constituye un excelente medio de cultivo para el desarrollo de microorganismos. Estos, pueden proliferar rápidamente en ella y provocar transformaciones deseables e indeseables. La acción de bacterias lácticas se aprovecha en la obtención de mantequilla, crema ácida, leches fermentadas y quesos. En una leche fresca el número de microorganismos aumenta por: contacto con el aire, utensilios de la ordeña, higiene de las manos del ordeñador. Las bacterias más frecuentes de la leche y sus productos derivados son: a) Bacterias lácticas b) Coliforrmes c) Proteolíticas d) Propiónicas e) Butíricas f) Mesofílicos g) Patógenas La tecnología moderna diseña gran número de equipos y procesos, produce detergentes, germicidas, etc; que al utilizarlos correctamente aseguran la obtención de la leche y sus derivados en condiciones higiénicas que garantizan la salud de quien la consuma. Los elementos imprescindibles para lograr este objetivo son:

REACTIVOS Colorantes.000 mesofílicos aerobios por mililitro y menos de 10 organismos coliformes por mililitro.. MATERIAL 1 Mechero Fisher. (el cual deberá estar a 45°C aproximadamente) agar estándar.1. Agar de bilis rojo violeta. en cada una de las cajas. DESARROLLO: I. 50 ml. Preparar 4 tubos de ensaye con 9 ml. 4 Portaobjetos Franela Gradilla APARATO: Microscopio Autoclave. de solución salina estéril. del medio de cultivo. De acuerdo al reglamento para el control sanitario de la leche. 2. Determinación de Mesofílicos Aerobios (por vaciado en placa). de cada dilución en 2 cajas de petrí estériles respectivamente. 2. 4 Pipetas de 1 mL 4 Cajas de petri. Solución salina 0. 2. De la dilución 10-2 y 10-4 agregar 1 ml. 4Tubos de ensaye de 15 x 150 2 Pipetas de 10 mL.Personal responsable y capacitado. 1. 1. Leche bronca. 10-3 y 10-4 II. 10-2 . Agregar 20 ml.9% Agar para métodos estándar.. Preparación de diluciones. Realizar diluciones: 10-1 . la pasteurizada deberá contener un máximo de 30. .Sistema de inspección y control de laboratorio eficientes.

De la dilución 10-2 y 10-4. ¿Cuál es el efecto de la pasteurización en los microorganismos y cómo se les llama a aquellos microorganismos que no son destruidos por este proceso térmico? 5. Agregar 20 mL de medio de cultivo (el cual deberá estar a 45°C aproximadamente) agar bilis rojo violeta. Contar el número de colonias (UFC) que aparecen en las placas. ¿Cuáles son los microorganismos patógenos que se pueden encontrar en la leche? 4. RESULTADOS. 3. Homogeneizar la muestra con el medio de cultivo. 4. 1. Determinación de Coliformes (por vaciado en placa). Dejar solidificar e incubar a 37°C de 24 a 48 horas. en cada una de las cajas. . Reportar el número de mesofílicos aerobios y el número de coliformes totales por mililitro de muestra. ¿Cuáles son las bacterias que componen el grupo de coliformes totales? 3. CUESTIONARIO: 1. ¿Qué otros métodos se pueden utilizar para determinar la carga microbiana en la leche? C O N C L U S I O N E S. ¿Cuáles son las bacterias que componen el grupo de mesofílicos aerobios? 2. obtener las conclusiones correspondientes. Homogeneizar la muestra con el medio de cultivo en forma circular. Con base en los resultados obtenidos y en la referencia bibliográfica. 4. 2.3. III. Dejar solidificar e incubar a 37° C de 24 a 48 horas. . con ayuda del cuenta colonias. agregar 1 ml en 2 cajas de petri estériles.

El alumno consultará un mínimo de tres referencias bibliográficas .B I B L I O G R A F Í A.