PRÁCTICA No. 2 ANÁLISIS MICROBIOLÓGICO DE LECHE FRESCA OBJETIVO.

El alumno aplicará los conocimientos básicos adquiridos para la determinación de microorganismos presentes en una muestra de leche bronca y una de leche pasteurizada. INTRODUCCIÓN. La leche constituye un excelente medio de cultivo para el desarrollo de microorganismos. Estos, pueden proliferar rápidamente en ella y provocar transformaciones deseables e indeseables. La acción de bacterias lácticas se aprovecha en la obtención de mantequilla, crema ácida, leches fermentadas y quesos. En una leche fresca el número de microorganismos aumenta por: contacto con el aire, utensilios de la ordeña, higiene de las manos del ordeñador. Las bacterias más frecuentes de la leche y sus productos derivados son: a) Bacterias lácticas b) Coliforrmes c) Proteolíticas d) Propiónicas e) Butíricas f) Mesofílicos g) Patógenas La tecnología moderna diseña gran número de equipos y procesos, produce detergentes, germicidas, etc; que al utilizarlos correctamente aseguran la obtención de la leche y sus derivados en condiciones higiénicas que garantizan la salud de quien la consuma. Los elementos imprescindibles para lograr este objetivo son:

1. 1. REACTIVOS Colorantes. Realizar diluciones: 10-1 . (el cual deberá estar a 45°C aproximadamente) agar estándar. la pasteurizada deberá contener un máximo de 30. De la dilución 10-2 y 10-4 agregar 1 ml. Preparar 4 tubos de ensaye con 9 ml.. en cada una de las cajas. 10-3 y 10-4 II. Determinación de Mesofílicos Aerobios (por vaciado en placa). de solución salina estéril. 2. .Sistema de inspección y control de laboratorio eficientes. MATERIAL 1 Mechero Fisher. 4 Portaobjetos Franela Gradilla APARATO: Microscopio Autoclave. Agar de bilis rojo violeta. 2. Leche bronca. 50 ml. DESARROLLO: I. de cada dilución en 2 cajas de petrí estériles respectivamente. del medio de cultivo.000 mesofílicos aerobios por mililitro y menos de 10 organismos coliformes por mililitro. 10-2 .9% Agar para métodos estándar. 4Tubos de ensaye de 15 x 150 2 Pipetas de 10 mL.Personal responsable y capacitado.1.. Solución salina 0. De acuerdo al reglamento para el control sanitario de la leche. Agregar 20 ml. 2. Preparación de diluciones. 4 Pipetas de 1 mL 4 Cajas de petri.

4. ¿Cuáles son las bacterias que componen el grupo de coliformes totales? 3. ¿Qué otros métodos se pueden utilizar para determinar la carga microbiana en la leche? C O N C L U S I O N E S. ¿Cuáles son las bacterias que componen el grupo de mesofílicos aerobios? 2. ¿Cuál es el efecto de la pasteurización en los microorganismos y cómo se les llama a aquellos microorganismos que no son destruidos por este proceso térmico? 5. Dejar solidificar e incubar a 37°C de 24 a 48 horas. Dejar solidificar e incubar a 37° C de 24 a 48 horas. RESULTADOS. De la dilución 10-2 y 10-4. 1. Reportar el número de mesofílicos aerobios y el número de coliformes totales por mililitro de muestra. en cada una de las cajas. III. agregar 1 ml en 2 cajas de petri estériles. Con base en los resultados obtenidos y en la referencia bibliográfica. . ¿Cuáles son los microorganismos patógenos que se pueden encontrar en la leche? 4. obtener las conclusiones correspondientes. CUESTIONARIO: 1. con ayuda del cuenta colonias. 3. Homogeneizar la muestra con el medio de cultivo.3. 4. Contar el número de colonias (UFC) que aparecen en las placas. . 2. Agregar 20 mL de medio de cultivo (el cual deberá estar a 45°C aproximadamente) agar bilis rojo violeta. Determinación de Coliformes (por vaciado en placa). Homogeneizar la muestra con el medio de cultivo en forma circular.

B I B L I O G R A F Í A. El alumno consultará un mínimo de tres referencias bibliográficas .

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