EXTRACCION DE ADN VEGETAL

INTRODUCCIÓN

La extracción de ADN tiene como objetivo principal obtener la mayor cantidad

posible del ADN de alto peso molecular, libre de proteínas, carbohidratos y
otros inhibidores de enzimas.
Diferentes métodos de extracción han sido descritos para el aislamiento de
ácidos nucleicos, aquí se trabajara específicamente con la extracción de AND
vegetal, la presencia de algunos metabolitos secundarios y como interfieren
estos en el aislamiento del ADN.
En plantas y hongos la pared celular es la primera barreras para la extracción,
es necesario degradarla empleando métodos físicos o químicos. Los métodos
físicos son los más empleados, especialmente la congelación y la maceración.
Para bacterias y células desprovistas de pared, se emplean soluciones ricas
en detergentes o enzimas, para destruir las membranas celulares.
Una vez se ha destruido la membrana celular debe emplearse detergentes y
soluciones de alta (o baja) fuerza iónica para permitir que el ADN se libere en
el buffer.
La inhibición de nucleasas es un factor critico, esta se alcanza empleando
buffer1 con pHs poco óptimos para acción de estas enzimas y adicionando
agentes quelantes de iones como el EDTA (Ethylen diamin tetre acetato).
Posteriormente se utilizan sustancias que desnaturalicen y separen las
proteínas del ADN como fenol y cloroformo. Finalmente en ADN es
precipitado con alcohol y centrifugación. El ADN libre de proteínas y otros
compuestos celulares se disuelve en un buffer2 .
Algunos tejidos pueden poseer altas concentraciones de polisacáridos, para
separarlos de los ácidos nucleicos se puede emplear mayor cantidad de buffer
extracción o sustancias como CTAB ( cetil trimethyammonium) que colabora
en la precipitación del ADN.
El pH durante el proceso de extracción debe ser óptimo, que evite la acción de
enzimas degradativas del ácido nucleico. La mayoría de los procedimientos
de extracción de ADN emplean soluciones taponadas con pH 7.0-9.0.
Para cuantificación del ADN se hace uso de la espectrofotometría
(absorbancia a una longitud de honda de 260nm), o la observación directa con
fluorescencia después de teñir el gel de extracción con bromuro de
etidio.(método de saram wrap, método del plato de agarosa, método del minigel) o por
fluorometria.
OBJETIVOS

-Comprender los procedimientos necesarios para extraer ADN de buena calidad y alta
pureza.
-Identificar la composición de los diferentes reactivos usados durante la practica, los cuales
tienen funciones especiales en la extracción del ADN vegetal.
-Reconocer el ADN extraído luego del procedimiento aplicado a las arvejas.
-Extraer y analizar el ADN de embriones de arvejas.
-Reconocer y comprender la importancia de las membranas que protegen las células
eucariontes.
-Observar la estructura fibrilar del ADN.
-Analizar los procesos necesarios para la extracción del ADN de una arveja logrando así
determinar la importancia de cada proceso.
DATOS
A partir de arvejas se obtiene el ADN vegetal; se observa el ADN el cual presenta las
siguientes características:

ADN de arvejas
Color Blanco
Aspecto Largos hilos que forman una red. Esponjado. El ADN es una
larga y pegajosa molécula a la que le gusta formar grumos.
ANALISIS DE RESULTADOS
Así como en cualquier organización la célula presenta un lugar de control que coordina las
diversas actividades que se realizan en su interior. En la célula eucarionte este lugar de
control es el núcleo el cual está separado del resto de la célula por una doble membrana;
en el interior del núcleo se encuentra la cromatina que es una masa densa de material, esta
“masa” durante la división se condensa formando cromosomas.

Estos “cromosomas” constan de proteínas y de una molécula muy importante que controla
la actividad que tiene la célula y contiene el material hereditario, el “ADN”.

El ADN (ácido desoxirribonucleico) es un polímero formado por nucleótidos cada nucleótido

consta de un azúcar de cinco carbonos (desoxirribosa) y una base nitrogenada. Al unirse
los nucleótidos mediantes enlaces puentes de hidrógeno forman los ácidos nucleicos.

Este Polímero se encuentra presente en todos los seres vivos, y su funcionalidad en el ser
vivo es de vital importancia ya que de él dependen todas las funciones de nuestro
organismo, tiene la función de codificar todo lo que somos.

El ADN no tiene la capacidad de salir a través de la doble membrana que lo cubre es por
ello que para algunas de sus funciones este debe de transcribirse de una doble cadena a
una cadena ARN (ácido ribonucleico), una vez transcrito tiene la capacidad de salir
libremente de esta doble membrana (carioteca) y con ello llevar a cabo sus funciones entre
las cuales destaca la síntesis de proteínas.

CONCLUSIONES
-El ácido desoxirribonucleico, frecuentemente abreviado como ADN, es un tipo de ácido
nucleico, una macromolécula que forma parte de todas las células. Contiene la información
genética usada en el desarrollo y el funcionamiento de los organismos vivos conocidos y
de algunos virus, y es responsable de su transmisión hereditaria.
-Se observa el ADN vegetal obtenido a partir de la alverja, el cual posee ciertas
características singulares.
-Se conocieron los materiales y reactivos que se necesitan para realizar una extracción de
ADN, además se comprendió el procedimiento paso a paso para poder llegar a un buen
resultado.
-Se concluye que para llevar a cabo una extracción de ADN se puede utilizar cualquier
material (que posea célula) y con los implementos necesarios para cumplir con el
procedimiento.
BIBLIOGRAFÍA.

-CARLSON, S. (1998). Deshilando el tejido de la vida. Investigación y Ciencia. 266, 84-85.

-Universidad de Utah. “Cómo extraer ADN de cualquier cosa viviente”. Disponible en:
http://learn.genetics.utah.edu/es/extraction/
-Extraccion de ADN. Disponible en:
http://www.jpimentel.com/ciencias_experimentales/pagwebciencias/pagweb/la_ciencia_a_
tu_alcance_II/quimica/Experiencias_quimica_extraccion_de_adn.htm
-Manual de laboratorio de Biotecnología. Practica N 12. “Extraccion de ADN vegetal”.