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Modelo conservativo
Modelo dispersivo
Modelo semiconservativo
CONSERVATIVO
DISPERSIVO
SEMICONSERVATIVO
RESULTADOS DEL
EXPERIMENTO
1 generacin
2 generacin
Descarta el modelo
conservativo
Cultivo con
15N
3 generacin
Descarta el modelo
dispersivo
1 generacin
2 generacin
REPLICACIN ADN
Las enzimas que llevan a cabo la sntesis de
cidos nucleicos SLO son capaces de hacerlo
en sentido 53
La replicacin es un proceso muy complejo pero
se desarrolla con gran fidelidad.
La copia de secuencias de millones de pares de
bases se realiza con una tasa de errores
prcticamente insignificante.
DNA Polimerasas
Enzimas que pueden sintetizar una nueva cadena de DNA
a partir de otra de referencia.
Solamente pocas DNA polimerasas participan en la
replicacin del DNA: Replicasas
La mayor parte de las DNA polimerasas se ven
involucradas en la reparacin de DNA.
La sntesis de DNA no depende de una sola enzima sino
de un complejo enzimtico multimrico.
La actividad replicativa es tan solo una de las funciones
asociadas al replisoma.
DNA polA
GENES
Existen tres DNA polimerasas procariotas muy bien estudiadas (de 5 en total):
DNA polimerasa I codificada por DNA polA = reparacin de DNA daado y de manera
secundaria en la replicacin semiconservadora del DNA.
DNA polimerasa II, tambin involucrada en reparacin de dao.
DNA polimerasa III, protena multimrica, principal replicasa involucrada en la sntesis de
novo de DNA.
Actividad de DNA pol I es muy superior a las otras dos.
Primera en ser
descubierta
Para poder estudiar a la principal replicasa es necesario crear mutantes para DNA pol I.
DNA Polimerasas
Todas las DNA polimerasas conocidas (tanto eucariotas como
procariotas) poseen una caracterstica fundamental:
extienden la cadena de DNA aadiendo nucletidos aislados
uno a la vez a partir de un hidroxilo terminal 3 y en Direccin
5' 3' (sntesis), la lectura de la cadena de referencia se da
en sentido 3' 5'.
La seleccin del nucletido a aadir no depende de la
polimerasa sino de la cadena empleada como referencia
(resultado de complementariedad).
La fidelidad del proceso replicativo depende de la
especificidad del apareamiento de bases.
No obstante, el apareamiento de bases per s debera tener
una tasa de error de aproximadamente 1:1000 nucletidos.
DNA Polimerasas
Sabemos que la tasa de error en bacterias no es tan elevada, en realidad de 1:100'000,000 o
1:10,000'000,000
Equivalente a menos de una 1 base equivocada por genoma.
Esto sugiere que existe un mecanismo especficamente dedicado a monitorear y corregir los
errores de escritura de la polimerasa.
2. REPLICACIN ADN
FASES REPLICACIN PROCARIOTAS
1)
INICIACIN
2)
ELONGACIN
3)
TERMINACIN
REPLICACIN ADN
2) ELONGACIN
- La ADN Polimerasa III acta en ambas cadenas.
- Se forman la cadena contnua y fragmentos de Okazaki discontnuos.
2. REPLICACIN ADN
REPLICACIN ADN
3) TERMINACIN
- La ADN Polimerasa I degrada los cebadores y los reemplaza por ADN
complementario.
- La ADN ligasa une todos los fragmentos de ADN de Okazaki.
ENZIMA
FUNCIN
ADN Pol
ADN Pol
ADN Pol
ADN Pol
ADN Pol
PROCARIOTAS.
EUCARIOTAS.