MODULO V

LIOFILIZACIN

Mercedes Fernndez Arvalo

LIOFILIZACIN:
La ciencia del freeze-drying.
PROCESO DE DESECACIN DONDE EL
SOLVENTE (AGUA) ES CONGELADO Y
ELIMINADO POSTERIORMENTE POR
SUBLIMACIN EN AMBIENTE DE VACIO.

Freeze-drying es la eliminacin completa del agua

de un material sin producir ningn cambio ni en su
estructura bsica ni en su composicin.

LIOFILIZACIN: un poco de historia

LIOFILIZACIN DE PATATAS
Incas en Peru (y actualmente):
Eliminan la mayor cantidad de agua
posible hasta obtener una pasta muy
concentrada.
Almacenan la pasta en lo ms alto de
las montaas. Aqu, las bajsimas
temperaturas congelan el alimento y
el agua del interior se evapora muy
despacio a las bajas presiones del
aire en esas altitudes.
El producto obtenido (CHUNO), es un polvo fino
que se puede almacenar durante ms de 4 aos.

LIOFILIZACIN: un poco de historia

Freeze-drying se desarroll
comercialmente durante la
II Guerra Mundial para
preservar el plasma
sanguneo y la penicilina.

Desde los 60, la industria

utiliza prcticamente la misma
tecnologa para producir todo
tipo de productos.

LIOFILIZACIN: un poco de historia

Sublimacion vs. Fusion

LIOFILIZACIN

VENTAJAS
INCONVENIENTES

LIOFILIZACIN
VENTAJAS
EMPLEO DE TEMPERATURAS MUY BAJAS,
circunstancia que permite aumentar la estabilidad
del producto y disminuir la prdida de sustancias
voltiles
PRODUCTO FINAL LIOFILIZADO,
es decir, con alta porosidad, solubilidad rpida y
completa y condiciones estriles
CONTENIDO FINAL DE HUMEDAD < 0.5 %
EMPLEO DE VACO:
no existe oxidacin

LIOFILIZACIN
INCONVENIENTES
COSTE ELEVADO DE LOS EQUIPO (X3)
CONSUME ENERGTICO ELEVADO (X2)
PROCESO LARGO (24 h)

LIOFILIZACIN: algunas aplicaciones ...

... en el campo farmaceutico

Ciertos antibiticos, vacunas, plasma,

hemoderivados, sueros, vitaminas, extractos,
leche materna, etc., son mucho ms estables
durante su almacenamiento en formulaciones
liofilizadas que en su estado natural.

LIOFILIZACIN: algunas aplicaciones ...

... en el campo farmaceutico
La vacuna del sarampin es un ejemplo de
vacuna liofilizada ampliamente utilizada.

LIOFILIZACIN: algunas aplicaciones ...

... en el campo farmacutico

Ratones genticamente modificados por la

insercin de una porcin extra de DNA,
utilizados en investigacin biomdica
ACTUALMENTE ESTAN LIOFILIZADOS

LIOFILIZACIN: algunas aplicaciones ...

... en el campo farmacutico
Proyecto Genoma: pptidos, protenas, DNA,
... (estabilidad)

Biofrmacos: frmacos de origen biolgico

Muchas protenas y ptidos presentan
inestabilidad qumica y fsica,
desnaturalizndose rpidadmente incluso a
temperatura ambiente.
Muchos de los frmacos basados en este tipo
de biomolculas pueden estabilizarse por
liofilizacin.

LIOFILIZACIN: algunas aplicaciones ...

... en el campo farmaceutico
Adems de los cometados, existen otro tipo de molculas que
para su uso como frmaco requieren de una previa liofilizacin:
Ej.: agentes quimioteraputicos cisplatino y doxorubicina.

LIOFILIZACIN: algunas aplicaciones

... en el campo farmaceutico
La liofilizacin de microorganismos se hace actualmente
de forma rutinaria; muchos de ellos se mantienen en
medios de cultivos para almacenarse y distribuirse en
forma liofilizada.

LIOFILIZACIN: algunas aplicaciones

... en el campo alimentario
Mantienen intactas todas sus cualidades:
forma, gusto, sabor, color y valores
nutricionales, libre de aditivos y conservantes.
Tienen larga vida til.
No necesitan demasiados cuidados de
almacenamiento, solo requieren ser
almacenados en un lugar fresco y seco.
De fcil aplicacin.
Rehidratacin instantnea.
Excelente microbiologa.

LIOFILIZACIN: algunas aplicaciones

... en el campo alimentario
YOGOURT EN POLVOS
FRUTAS: Manzana, Damasco, Banana, Mora, Zarzamora,
Arndano, Meln Cantaloupe, Cerezas, Limn, Mango,
Naranja, Papaya, Anan, Frambuesa, ...
VEGETALES: Esprrago, Maz, Zanahoria, Brcoli, Coliflor,
Apio, Patata, Hongos, Aceituna, Espinaca, Pimientos, ...
USOS:
Mezclas secas (sopas deshidratadas, postres, comidas para
microondas, etc); Snacks; Mezclas con cereales; Industrias de
confitera, chocolates y golosinas (barras de cereal, galletitas,
cremas, mousses, postres, etc)

LIOFILIZACIN: algunas aplicaciones

... en el campo alimentario
VIDA UTIL
Para frutas y verduras 12 meses en un lugar fresco y seco,
aunque puede extenderse a 24 meses si son refrigerados.
El resto de los productos tienen una vida til de
aproximadamente 6 meses en su envase original.

PRESENTACION:
Polvo, Grnulos, Cubos, Slices, o Enteros

LIOFILIZACIN: algunas aplicaciones

... en otros campos
INVESTIGACIN:
Ej.: Microscopa de muestras
hmedas, pueden distorsionarse
debido a un secado por
evaporacin en condiciones
normales. Estas distorsiones son
debidas a las fuerzas de tensin
superficial generadas durante todo
el tiempo que dure la evaporacin.
Si la muestra es previamente
liofilizada, la distorsin se reduce
enormemente, generando
resultados ms fiables.

LIOFILIZACIN: algunas aplicaciones

... en otros campos
Especialmente importante en
SEM:
en este caso, las muestras
tiene que desecarse
previamente y ser conductoras,
porque la imagen se forma a
travs del uso de electrones y
no de la luz. La liofilizacin ha
permitido usar esta tecnologa
en campos de actuacin muy
mplios.

LIOFILIZACIN
CARACTERSTICAS DE LOS
PRODUCTOS A LIOFILIZAR

Productos inestables

Sustancias termolbiles

Cuando se requieran condiciones de asepsia

Resolucin rpida y completa

Productos de elevado coste

LIOFILIZACIN
TIPOS DE PRODUCTOS A LIOFILIZAR

Materiales no vivientes tales como plasma

sanguneo, suero, soluciones de hormonas,
productos farmacuticos y alimentos ...

Transplantes quirrgicos de especies tales como

arterias, piel y huesos

Clulas vivas destinadas a permanecer en ese

estado por largos perodos de tiempo. Ejemplos
incluyen bacterias, virus y levaduras

LIOFILIZACIN: Descripcin del

proceso
CONGELACIN

DESECACIN PRIMARIA

DESECACIN SECUNDARIA

LIOFILIZACIN: Descripcin del

proceso
Diagrama de
estado fsico de
agua

En los puntos de
cada curva, el agua
est en equilibrio
en las dos fases.

P.T.

En el punto triple
coexisten las tres
fases.

4.6 mm

- 0.008 C

LIOFILIZACIN: Descripcin del

proceso
Diagrama de estado fsico de agua

P
CONGELAR POR
DEBAJO DEL
PUNTO TRIPLE

P.T
.

ES ESTO
SUFICIENTE?

4.6 mm

- 0.008 C

LIOFILIZACIN: Descripcin del

proceso
T

T
Solucin de NaCl

0 C

Sal slida +
Solucin

Hielo +
Solucin

-21.5 C
100 % W
0 % NaCl

Hielo + sal slida

23 % NaCl

100 % NaCl
0%W

PUNTO
EUTCTICO

Temperatura
mnima a la que
congelan todos los
componentes

LIOFILIZACIN: Descripcin del

proceso
T

Solucin
de NaCl

0 C

Hielo +
Solucin
-21.5 C
100 % W
0 % NaCl

Sal slida +
Solucin

ENFRIAR POR
DEBAJO DEL
PUNTO
EUTCTICO

Hielo + sal slida

100 % NaCl
0%W
23 % NaCl

Resistividad,
A.T.D.

ESQUEMA GENERAL DE UN LIOFILIZADOR

CMARA DE
LIOFILIZACIN

COMPRESOR

CONDENSADOR

T liof. > T cond.

Pv(s-g) > P liof.

BANDEJAS CALENTADAS

SERPENTN
REFRIGERADO BOMBA DE
VACO

P liof. > P cond. > Pv (T liof.)

LIOFILIZACIN: Etapas del proceso.

DISPOSICIN DEL MATERIAL:
1. GRANEL: Bandejas de acero inoxidable
Fondo plano
Capas finas (1.5 - 2 cm)
2. DOSIS UNITARIAS: Viales, ampollas,
frascos
(hemoderivados)

LIOFILIZACIN: Etapas del proceso.

CONGELACIN:
En congeladores independientes o en el propio
liofilizador
OPERACIN CRTICA (cualidades producto final)
1. ESTTICA: Bandejas, viales
2. ROTACIN: Frascos grandes (EN BANDA)
TEMPERATURA CONGELACIN (- 40 C - - 50 C)
VELOCIDAD DE CONGELACIN

OBJETIVO: Congelar el agua libre del producto

VELOCIDAD DE CONGELACIN
Condiciona la estructura de la matriz congelada.
LENTA
CRISTALES
MAYORES

RPIDA
CRISTALES
PEQUEOS

VELOCIDAD DE CONGELACIN
Condiciona la estructura de la matriz congelada.

CRISTALES MAYORES
Estructura porosa mayor
Menor resistencia al flujo
del vapor de agua

CRISTALES PEQUEOS

Menor duracin de la
desecacin primaria

Estructura porosa ms fina

Estructura menos
resistente

Mayor resistencia al flujo del

vapor de agua
Mayor duracin de la
desecacin primaria
Estructura ms resistente

LIOFILIZACIN: Etapas del proceso.

DESECACIN PRIMARIA: SUBLIMACIN
HIELO

VAPOR (PRESIN MUY REDUCIDA)

BOMBA DE VACO
APORTE DE CALOR (Resistencias elctricas
Fluido caliente)

Velocidad de secado
Velocidad de calentamiento

LIOFILIZACIN: Etapas del proceso.

DESECACIN PRIMARIA: SUBLIMACIN
P liof. > P cond. > Pv (T liof.)

Es necesario reducir la
presin en el interior de la
cmara y aplicar calor al
producto (no subir la
temperatura) para que se
produzca la sublimacin
(proceso endotrmico).

El vapor de agua que se origina

se recoge en la superficie del
CONDENSADOR. El
condensador ha de tener
suficiente superficie y capacidad
de enfriamiento para condensar
todo el agua que sublima a una
temperatura inferior a la del
producto. (Si la temperatura del
condensador es superior a la del
producto, el vapor de agua
tender hacia ste y se parar el
proceso de secado).

T liof. > T cond.

DIAGRAMA DE CONTROL
T (C)

Temperatura de las bandejas

P (mm Hg)

40

500

Temperatura
del producto

20

300

20

Presin

40
CONGELACIN

DESECACIN
PRIMARIA

DESECACIN
SECUNDARIA

100

LIOFILIZACIN: Etapas del proceso.

DESECACIN PRIMARIA: SUBLIMACIN
CONTROLES
CONTROL de la velocidad de secado:
Si es demasiado rpido, el producto seco fluir hacia el
condensador escapando junto al vapor de agua.
PRDIDA DE PRODUCTO POR ARRASTRE
SUSTANCIAS DE CARGAS (sacarosa, manitol,
glicina)

LIOFILIZACIN: Etapas del proceso.

DESECACIN PRIMARIA: SUBLIMACIN
CONTROLES
CONTROL de la velocidad de calentamiento
de las bandejas:
Si se calienta demasiado rpidamente, el producto
fundir y a esas bajas presiones se producir una
ebullicin (PUFFING).
Consecuencia: cambios en las caractersticas fsicas
del producto, visualmente inaceptable y mucho ms
difcil de reconstituir.
MIENTRAS EXISTA AGUA LIBRE CONGELADA, LA
TEMPERATURA DEL PRODUCTO DEBE ESTAR POR
DEBAJO DE SU PUNTO EUTCTICO.

DIAGRAMA DE CONTROL
T (C)

Temperatura de las bandejas

P (m Hg)

40

500

Temperatura
del producto

20

300

20

Presin

40
CONGELACIN

DESECACIN
PRIMARIA

DESECACIN
SECUNDARIA

100

LIOFILIZACIN: Etapas del proceso.

DESECACIN PRIMARIA: SUBLIMACIN
CONTROLES
T (C)

Temperatura de
las bandejas

P (m Hg)

Temperatura
del producto
Presin
CONGELACIN DESECACIN
PRIMARIA

DESECACIN
SECUNDARIA

Mientras dure la
sublimacin del agua
congelada, el producto se
mantendr fro.
Por lo tanto, durante esta
fase la T del producto
deber estar por debajo
de la T de las bandejas,
que est proporcionando
el calor de sublimacin.

LIOFILIZACIN: Etapas del proceso.

DESECACIN PRIMARIA: SUBLIMACIN
CONTROLES
T (C)

Temperatura de
las bandejas

P (m Hg)

Temperatura
del producto
Presin
CONGELACIN DESECACIN
PRIMARIA

DESECACIN
SECUNDARIA

Al finalizar la
desecacin primaria, la
T del producto subir
asintticamente hacia
la T de las bandejas.
Esto (y otros mtodos)
permite detectar el
punto final de esta
etapa.

LIOFILIZACIN: Etapas del proceso.

DESECACIN SECUNDARIA:
DESORCIN (30 %)
AGUA LIGADA
(no congelable)

VAPOR

Productos cristalinos: % muy bajo

Productos amorfos: % muy elevado

DURACIN de
esta etapa

HUMEDAD FINAL: << 1%

LIOFILIZACIN: Etapas del proceso.

DESECACIN SECUNDARIA:
DESORCIN (30 %)
Como en este punto no
existe agua libre, la T
de las bandejas puede
subir sin riesgo de que
se produzca fusin.

T (C)

Temperatura de
las bandejas

P (m Hg)

Temperatura
del producto
Presin
CONGELACIN DESECACIN
PRIMARIA

DESECACIN
SECUNDARIA

La T se aumenta para producir la desorcin del agua ligada (ej., de

cristalizacin) hasta que la humedad residual del producto baje
hasta los lmites exigidos para garantizar su estabilidad.
Normalmente se realiza a la mxima capacidad de vaco que el
desecador pueda alcanzar.

LIOFILIZACIN: Etapas del proceso.

DESECACIN SECUNDARIA:
DESORCIN (30 %)

T (C)

HUMEDAD FINAL: << 1%

Temperatura de
las bandejas

P (m Hg)

Temperatura
del producto
Presin

CONGELACIN DESECACIN
PRIMARIA

DESECACIN
SECUNDARIA

CONTROL FINAL DEL CONTENIDO DE HUMEDAD

Ej.: protenas y pptidos requiren de un contenido de
humedad determinado para mantener sus estructuras
secundarias y terciarias y, por tanto, su actividad.

Lyophilization equipment has improved over the years,

and, with the advent of automated, sophisticated
control mechanisms, has become much easier to use.
The complexity of the controls, however, has made
validation efforts more complicated and usually quite
time consuming.
In addition to cooling, heating, and vacuum control
functions already discussed, many freeze dryers will
also incorporate clean in place (CIP), sterilize in place
(SIP), computerized cycle control, and cycle monitoring
functions. The reliable reproducible performance of all
these functions must be validated rigorously to insure
consistent product quality.

Quik-Dry Flasks
When a product is frozen in a thin layer on the inner wall
surface of a large-diameter flask using a shell freezer, the
overall sublimation rate significantly increases as compared to
the product frozen as a plug in the bottom of a similar flask.
Quik-Dry flasks feature a special shape to achieve a thin layer
of product when shell-freezing a horizontally placed flask.
Multi-Tainers
Rugged, stainless steel Multi-Tainers are used for freezedrying bulky materials or products which have already been
frozen in Petri dishes, serum vials, or similar containers.

Acid Filters
Acid filters protect vacuum pumps when freeze drying
acidic or organic solvents. Models are available for
manifold freeze-dryers with a vapor stream or in-line
design. Replacement cartridges are also available.

FREEZE-DRYERS BENCHTOP ACCESSORIES

http://www.tradar.com.ar/Castellano/Productos/Liofilizados/Alimentos%
20liofilizados.htm
https://www2.seguridad.com/edelweiss/secure/cat2/cocina/alimen/liofil.htm
http://www.agrotecnica.net/espanol/marcospductos.html
http://home.howstuffworks.com/freeze-drying2.htm
http://www.ftssystems.com/