INTRODUCCIÓN

Las pruebas bioquímicas consisten en identificar

distintos microorganismos presentes.

OBJETIVOS

• Poder identificar mediante cuadros

comparativos a las bacterias mediante las
Pruebas IMViC.
• Conocer las pruebas de urea, catalasa, almidón
y motilidad.
PRUEBAS BIOQUÍMICAS IMViC

Son un conjunto de cuatro reacciones útiles, que se

emplean comúnmente en la identificación de
miembros de familia de las enterobacterias.

Estas pruebas se fundamentan en demostrar si el

microorganismo es capaz de fermentar azúcares, la
presencia de enzimas, la degradación de compuestos, la
producción de compuestos coloreados, etc.
 PRUEBA DEL INDOL

Detecta si las bacterias tienen la

capacidad de sintetizar la enzima
triptofanasa.

Medio líquido:

Agua Peptonada

Reactivo de
Kovacs

Aparición de un anillo de
POSITIVO
color rojo en la superficie.

NEGATIVO Anillo de color amarillo.

 PRUEBA DE ROJO DE METILO

Determina la capacidad de los microorganismos

de producir y mantener estables los productos
terminales ácidos de la fermentación de la
glucosa.
Medio de Cultivo

MR - VP

Reactivo Solución de rojo de metilo.

POSITIVO Superficie del medio rojo.

NEGATIVO Superficie del medio color amarillo.

PRUEBA DE VOGES – PROSKAUR (ACETONICA):

Permite detectar la producción de acetil – metilcabinol

procedente del metabolismo del ácido pirúvico.

REACTIVO

VP1 ------ 0,2 ml

VP2 ------ 0,6 ml

POSITIVO

Color rojo.

NEGATIVO

Coloración pardo – amarillenta.

 PRUEBA DEL CITRATO

Determina si las bacterias son capaces de

utilizar el citrato como una única fuente de
carbono.

MEDIO

Agar Citrato de Simmons

POSITIVO Color azul intenso.

NEGATIVO No aparece cambio de color

en el agar ni existe
crecimiento.
RESULTADOS DE LA IDENTIFICACIÓN DE LOS MICROORGANISMOS PERTENECIENTES AL GÉNERO ESCHERICHIA COLI

MEDIANTE ENSAYOS IMVIC.

Especies Indol MR VP Citrato

E. coli + + -   -  
 KLEBSIELLA
PNEUMONIAE
 ---------------- ------------------------------
La bacteria no es capaz de
sintetizar la enzima triptofanasa.

Coloración amarilla
PRUEBA DE CITRATO POSITIVO Color azul.

Utiliza el carbono del citrato como

fuente de carbono. NEGATIVO Color verde.

POSITIVO
RESULTADOS DE LA IDENTIFICACIÓN DE LOS MICROORGANISMOS PERTENECIENTES AL

GÉNERO KLEBSIELLA PNEUMONIAE MEDIANTE ENSAYOS IMVIC.

Especies Indol MR VP Citrato

-   -   + +
Klebsiella
pneumoniae
ENTEROBACTER
AEROGENES
 Utiliza el carbono del citrato como fuente de carbono,
PRUEBA DE CITRATO
entonces al utilizarlo origina compuestos de amonio que
se convierten en amoniaco.

POSITIVO

Medio de cultivo aparece de color

azul.
 RESULTADOS DE LA IDENTIFICACIÓN DE LOS MICROORGANISMOS
PERTENECIENTES AL GÉNERO ENTEROBACTER AEROGENES MEDIANTE
ENSAYOS IMVIC.

Especies Indol MR VP Citrato

Enterobacter -   - + +
aerogenes
CITROBACTER
KOSERI
 PRUEBA DE INDOL
Tiene a la enzima triptofanasa,
quiere decir que la bacteria es
capaz de sintetizar la enzima
triptofanasa.
POSITIVO
Color rojo o rojo-violeta en la
superficie de la capa de alcohol en
el cultivo.
PRUEBA DE VOGES –
PROSKAUR
No utiliza a la glucosa por la vía
butilén-glicólica entonces no originara
un compuesto que es la acetoína.
NEGATIVO
Coloración rojo
Color amarillo pálido
PRUEBA DE CITRATO

POSITIVO

Medio de cultivo aparece de

color azul.
 RESULTADOS DE LA IDENTIFICACIÓN DE LOS MICROORGANISMOS
PERTENECIENTES AL GÉNERO CITROBACTER KOSERI MEDIANTE ENSAYOS
IMVIC.

Especies Indol MR VP Citrato

Citrobacter + + -   +
koseri
SALMONELLA
No tiene a la enzima triptofanasa,
quiere decir que la bacteria no es
capaz de sintetizar la enzima
triptofanasa.

NEGATIVO POSITIVO

Se muestra amarillo.
Utiliza el carbono del citrato como
fuente de carbono, entonces al utilizarlo
origina compuestos de amonio que se
convierten en amoniaco.
 RESULTADOS DE LA IDENTIFICACIÓN DE LOS MICROORGANISMOS
PERTENECIENTES AL GÉNERO SALMONELLA MEDIANTE ENSAYOS IMVIC.

Especies Indol MR VP Citrato

Salmonella -   + -   +
 PRUEBA DE LA UREASA

Determina la capacidad de un organismo de desdoblar la

urea formando una molécula de dióxido de carbono y dos
moléculas de amoniaco por acción de la enzima ureasa.

Medio de Cultivo Revelado

Las bacterias que hidrolizan
Agar urea de la urea hacen que el medio
de cultivo tome color fucsia.
Christensen

CARACTERÍSTICAS
COLOR: Rosado
INDICADOR: Rojo fenol.
INHIBIDOR: No tiene.
SUSTRATO PRINCIPAL: Urea.
SUSTRATO SECUNDARIO: extracto de
levadura, fosfato monopotasico y fosfato
dipotasico
 PRUEBA DE LA MOTILIDAD

Sirve para determinar si un organismo es móvil o inmóvil.

Medio de Cultivo

Manitol movilidad

CARACTERISTICAS

COLOR: Crema.
INDICADOR: No tiene.
INHIBIDOR: No tiene.
SUSTRATO PRINCIPAL: Peptona.
SUSTRATO SECUNDARIO: Tiosulfato sódico,
hierro y amonio.
 PRUEBA DE CATALASA

Comprueba la presencia de la enzima catalasa que

se puede encontrar en gran cantidad en las
bacterias aerobias y también en las anaerobias
facultativas que contienen citocromo.

PROCEDIMIENTO

AGAR SANGRE

FALSO RESULTADO
POSITIVO.
 PRUEBA DE LA HIDRÓLISIS DEL ALMIDÓN

Determina la capacidad que presenta un microorganismo de

hidrolizar el almidón por medios enzimáticos.

Medio de cultivo Interpretación

Caldo
 Cultivo de caldo Placas/ tubos pico de flauta
 Agar en placas o en pico de flauta. POSITIVO: Leve tinte amarillo
POSITIVO: Color púrpura azul
NEGATIVO: Color azul
REACTIVOS

Yodo acuoso de Gram

• Yodo en cristales, yoduro de potasio y agua
destilada.

Yodo acuoso de Lugol

• Cristales de yodo en polvo, yoduro de potasio
y agua destilada.
 CONCLUSIONES

Se llegó a la conclusión de que las pruebas bioquímicas son las

que determinan la actividad metabólica de una cepa pura así
como la identificación y clasificación de las bacterias y hongos.
 ESPECIES INDOL MR VP CITRATO

Escherichia Coli
+ + -  - 
Klebsiella
pneumoniae -  -  + +
Enterobacter
aerogenes -  -  + +
Citrobacter
Koseri + + -  +
Salmonella
-  + -  +
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