“Año del Bicentenario del Perú: 200 años de

Independencia”

Universidad Norbert Wiener

FACULTAD DE CIENCIAS DE LA SALUD

ESCUELA ACADÉMICO PROFESIONAL DE MEDICINA HUMANA
Pruebas bioquímicas para la identificación de la bacteria y los
agares que participan en las búsquedas de Enterobacterias.

Apellido y Nombre: Kianman Guillermo Nagai

Curso: Noxas y Respuestas I
Sección: MD4M4
Docente: Alza, Pedro Antonio
Ciclo: 4to

2021
1. Fundamentos de las pruebas bioquímicas para la identificación de
la bacteria.
EnteroSystem 24R para identificación de enterobacterias. Es un panel
que incluye 24 pruebas bioquímicas desecadas en pocillos para
identificar Enterobacteriaceae gramnegativas y oxidasas negativas.
Liofilchem ha desarrollado EnteroSystem 24R como evolución del panel
EnteroSystem 18R que ofrecía hasta ahora, para responder a la
necesidad de nuestros clientes de ampliar la especificidad del abanico
de identificación de enterobacterias.
A. Liofilchem, su especialista en la identificación microbiológica
Están principalmente clasificados en dos categorías, microbiología
clínica e industrial. Produce paneles de identificación microbiana y
antibiogramas, tiras MIC y discos de antibióticos en cartuchos,
medios de cultivo deshidratados, suplementos selectivos, medios de
cultivo listos para usar en placas o en tubos, botellas, paneles de
utilidad en microbiología de alimentos e indicadores biológicos para
el control de procesos de esterilización. Y también desarrolla
productos personalizados acordes a las especificaciones del cliente o
para otras empresas del sector de la microbiología.
B. EnteroSystem 24R, un paso más respecto al EnteroSystem 18R
Como hemos señalado más arriba, este nuevo sistema es la
evolución del EnteroSystem 18R que ofrecía hasta ahora Liofilchem,
que incluye 18 pruebas bioquímicas desecadas en pocillos para la
identificación de enterobacterias. El 24R contiene 6 tests análiticos
más (rammosa, melosa, lactosa, trehalosa, xilosa y dulcitol), además
de los 18 que conforman el 18R. Si quiere conocer las
especificaciones concretas del panel EnteroSystem 18R le
adjuntamos la hoja técnica y el folleto para descarga.
C. Identificación de enterobacterias Gram-negativas y oxidasas
negativas
EnteroSystem 24R es un sistema con 24 pocillos que contiene
sustratos bioquímicos deshidratados para la identificación de
bacterias Gram-negativas pertenecientes a la familia de las
Enterobacteriaceae. Funciona de manera muy sencilla: el panel debe
inocularse con la suspensión del microorganismo a analizar, tomado
de una colonia pura, y posteriormente incubarse en estufa. Después
de 24h, se valora el cambio de color en los diferentes pocillos. El
patrón resultante de reacciones positivas y negativas se traduce a un
código numérico que será utilizado sucesivamente para la
identificación.
2. Fundamentos de los agares que participan en las búsquedas de
Enterobacterias.
 TSI (Triple Sugar Iron):
 Los sutratos principales son la lactosa, sacarosa y glucosa
(la proporción en el medio de lactosa y sacarosa es de
10:1 con la glucosa).
 Los sutratos secundarios son tiosulfato sódico, peptona,
citrato férrico amoniacal y extractos.
 Se siembre por picadura profunda con aguja y luego se
siembra por estrías en el pico.
 En el medio de cultivo, el extracto de carne y la
pluripeptona, aportan los nutrientes adecuados para el
desarrollo bacteriano.
 La lactosa, sacarosa y glucosa son los hidratos de carbono
fermentables. El tiosulfato de sodio es el sustrato necesario
para la producción de ácido sulfhídrico, el sulfato de hierro
y amonio, es la
 fuente de iones Fe3+ , los cuales se combinan con el ácido
sulfhídrico y producen sulfuro de hierro, de color negro. El
rojo de fenol es el indicador de pH, y el cloruro de sodio
mantiene el balance osmótico. El agar es el agente
solidificante.
 Por fermentación de azúcares, se producen ácidos, que se
detectan por medio del indicador rojo de fenol, el cual vira
al color amarillo en medio ácido. El tiosulfato de sodio se
reduce a sulfuro de hidrógeno que reacciona luego con una
sal de hierro proporcionando el típico sulfuro de hierro de
color negro.

 Lia (Lysine Iron Agar)

 Los sutratos principales son lisina, u glucosa.
 Los sutratos secundarios son la peptona, tiosulfato de
sodio y el extracto de levaduras.
 Se siembra por picadura profunda con aguja y luego por
estrías en el pico.
 En el medio de cultivo, la peptona y el extracto de levadura
aportan los nutrientes para el desarrollo bacteriano. La
glucosa es el hidrato de carbono fermentable y la lisina es
el sustrato utilizado para detectar la presencia de las
enzimas decarboxilasa y deaminasa.
 El citrato de hierro y amonio y el tiosulfato de sodio son los
indicadores de la producción de ácido sulfhídrico. El
 purpura de bromocresol, es el indicador de pH (su color es
amarillo a pH igual o menor a 5.2 y violeta a pH igual o
mayor a 6.8) y el agar es el agente solidificante.
 Los microorganismos fermentadores de glucosa acidifican
el medio y provocan el viraje del color púrpura al amarillo.
 El ambiente ácido favorece la actividad enzimática
decarboxilasa y se metaboliza la lisina a cadaverina
elevando el pH del medio de cultivo y tornándolo al color
púrpura o violeta

 Citrato de Siomns
 Los sutratos principales es el citrato de sodio
 Los sutratos secundarios son el fosfato dipotásico, cloruro
de sodio, el sulfato de magnesio y el fosfato monoamónico
 Se siembra por picadura profunda con aguja y luego por
estrías en el pico
 Este medio nos permite comprobar la capacidad de la
bacteria de utilizar el citrato como fuente exclusiva de
carbono.
 La degradación del citrato conlleva a la alcanización del
medio y el viraje del indicador azul de bromotimol del
medio y verde a azul Prusia.
1. Citrato positivo: La bacteria consume el citrato como fuente
exclusiva de carbono.
2. Citrato negativo: La bacteria no consume el citrato como
fuente de carbono.

 Urea
 En este medio se observa la capacidad de la bacteria de
degradar la urea por medio de la enzima ureasa formando
amoniaco y carbonato de amonio.
 El medio de urea de Rustigian y Stuart es particularmente
adecuado para la diferenciación de la especie Proteus de
otros bacilos entéricos gram negativos capaces de utiliza
urea.
 Cuando los organismos utilizan la urea, se produce
amoniaco durante la incubación, lo que hace la reacción de
dichos medios alcalina y genera un color rosa rojo. En
consecuencia, la producción de ureasa puede detectarse
mediante el cambio en el indicador rojo fenol.

 MIO (Motilidad – Indol- Ornitina)

 Los sutratos principales son la ornitina y la glucosa
 Los sutratos secundarios son la peptona, la triptona y
extractos
 Se siembra por picadura profunda
 Este medio se usa para la identificación de enterobacterias
en base a su movilidad, producción de indol y actividad de
ornitina descarboxilasa.
 El Medio de Motilidad – Indol – Ornitina (M.I.O.) es un
medio de cultivo ampliamente utilizado para la
diferenciación de bacilos Gram negativos entericos, sobre
la base de la producción de Indol, la actividad de la enzima
Ornitina decarboxilasa y la capacidad de motilidad.
 Las peptonas y el extracto de levadura aportan
aminoácidos y nutrientes esenciales, la dextrosa constituye
una fuente de energía. El agar actúa como agente
gelificante
 Los cambios en el pH se verifican gracias al contenido de
púrpura de bromocresol. La actividad de la ornitina
decarboxilasa se observa como un viraje hacia el color
púrpura, en tanto que la ausencia de la enzima produce un
viraje hacia el color amarillo. La motilidad se observa como
un desplazamiento del desarrollo microbiano desde el
inóculo.