TINCIÓN DE GRAM

Fundamento Es definida como una tinción diferencial. Los principios de la tinción están basados e
pared celular de las bacterias, la cual le confiere propiedades determinantes a cada
celular de las bacterias Gram negativas está constituida por una capa fina de peptid
celular externa, mientras que las bacterias Gram positivas poseen una pared celu
peptidoglicano, pero no cuentan con membrana celular externa; así pues, la composic
de peptidoglicano en la pared celular de las bacterias Gram negativas y Gram positiv
características tintoriales

Procedimiento Se basa en colocar como colorante primario cristal violeta, el cual tiene afinidad co
pared bacteriana. Posteriormente, se coloca lugol, el cual sirve como mordiente e i
violeta por la formación de un complejo cristal violeta-yodo que satura los espacio
pared bacteriana. En seguida, se coloca una mezcla de alcohol-acetona, la cual desh
y cierra los poros de la misma, también destruye la membrana externa de las bacteri
a que ésta es soluble a la acción de solventes orgánicos, como la mezcla de alcoh
coloca safranina, la cual funciona como un colorante secundario o de contratinc
bacterias que no pudieron retener el complejo cristal violeta-yodo.
Gram (+) Las bacterias Gram positivas se observan de color azul obscuro a morado

Gram (-) Las Gram negativas se observan de color rosa a rojo

ENFERMEFADES CAUSADAS POR P. Mirabilis

Infecciones Infección en cualquier parte del sistema urinario, los riñones, la vejiga o la
urinarias uretra. Una infección en la vejiga puede causar dolor pélvico, necesidad
urgente de orinar, dolor mientras se orina y sangre en la orina. Una
infección en los riñones puede causar dolor de espalda, náuseas,
vómitos y fiebre.
Pielonefritis Inflamación renal ocasionada por una infección bacteriana.
La inflamación del riñón se debe a un tipo específico de infección del
tracto urinario (ITU). La ITU suele comenzar en la uretra o la vejiga, y se
extiende a los riñones.
Los síntomas incluyen fiebre, micción frecuente y dolor en la espalda, los
laterales o la ingle.

Fiebre La fiebre es el aumento temporal en la temperatura del cuerpo en

respuesta a alguna enfermedad o padecimiento. suele ser de 37 °C
 (98.6 °F).
Bacteriemia La bacteriemia es la presencia de bacterias en el torrente sanguíneo,
suele ser asintomática, aunque puede causar fiebre.
Cálculos vesicales Se desarrollan cuando los minerales en la orina concentrada se
o renales cristalizan y forman cálculos. Esto suele suceder cuando tienes
problemas para vaciar completamente la vejiga. Los cálculos
vesicales pequeños pueden pasar sin tratamiento, pero a veces
necesitan medicamentos o cirugía.

Tinción de flagelos
Fundamento Los flagelos bacterianos son estructuras de locomoción demasiado
finas para visualizarlos con el microscopio óptico sin tinción. Para lograr
su coloración se trata de engrosarlos aplicando soluciones coloidales de
ácido tánico, que se depositan sobre estas estructuras engrosando el
diámetro aparente de los mismos, de tal manera que se hacen visibles
al microscopio óptico con una tinción con fucsina básica. En la
coloración de flagelos requiere mucho cuidado la fijación de la bacteria
en la confección del preparado, dado la facilidad con que pueden
desprenderse los flagelos por daños mecánicos.
Procedimiento 1.- Se fija químicamente la suspensión bacteriana, mediante formol, y
se hace la extensión en un portaobjetos.
2.- Se deja secar al aire, sin calentamiento alguno.
3.- Se cubre la preparación con una mezcla de ácido tánico y el
colorante rosanilina, de preparación extemporánea. El ácido tánico
engruesa los flagelos y la rosanilina los tiñe.
4.- Se retira el exceso de colorante con agua.
5.- Por último, se deja secar al aire, antes de su observación al
microscopio. 
Interpretación Los flagelos aparecen teñidos de color azul.

McConkey
Medio de Selectivo y diferencial
cultivo
Fundamento En el medio de cultivo, las peptonas aportan los nutrientes necesarios
para el desarrollo bacteriano, la lactosa es el hidrato de carbono
fermentable, y la mezcla de sales biliares y el cristal violeta son los
agentes selectivos que inhiben el desarrollo de gran parte de la flora
Gram positiva. El agar es el agente solidificante. Por fermentación de
la lactosa, disminuye el pH alrededor de la colonia. Esto produce un
viraje del color del indicador de pH (rojo neutro), la absorción en las
colonias, y la precipitación de las sales biliares. Los microorganismos
no fermentadores de lactosa producen colonias incoloras
Utilidad Este medio se utiliza para el aislamiento de bacilos Gram negativos de
fácil desarrollo, aerobios y anaerobios facultativos a partir de muestras
clínicas, aguas y alimentos. Todas las especies de la familia
Enterobacteriaceae se desarrollan en el mismo.
Interpretación Microorganismos fermentadores de lactosa: colonias rosadas-rojizas.
Puede observarse halo de precipitación biliar. Microorganismos no
fermentadores de lactosa: colonias del color del medio, incoloras.

Agar Sangre
Medio de Enriquecido y diferencial
cultivo
Fundamento La infusión de músculo corazón y la peptona, otorgan al medio
un alto nivel nutritivo, que permite el crecimiento de una gran
variedad de microorganismos. Al ser suplementado con sangre
ovina, permite el crecimiento de microorganismos
nutricionalmente exigentes y la clara visualización de reacciones
de hemólisis
Interpretació Hemólisis alfa: Se observa un halo de color verdoso al rededor
n de la colonia de estudio
Hemólisis beta: Se observa un halo claro alrededor de la colonia
de estudio
Hemólisis gamma: No presenta modificaciones de color
alrededor de la colonia de estudio

IMVIC. ROJO DE METILO

Fundamento Si el microorganismo consume el hidrato de carbono del medio
(glucosa) habrá producción de ácido, y esto se pondrá de
manifiesto mediante el indicador Rojo de Metilo.
Reactivos Rojo de Metilo (indicador de pH).
Reacción

Resultado Positivo (+): Rojo

Negativo (-): Amarillo/naranja

IMVIC. VOGES - PROSKAUER

Fundamento Esta prueba se realiza para determinar la capacidad de un
microorganismo de fermentar la glucosa con producción de ácido
por la vía ácido mixta o con producción de un producto final neutro
(acetoína) por la vía butanodiólica.
Reactivos α-Naftol al 5%.
Hidróxido de potasio (KOH) al 40% (o NaOH al 40%).
Interpretació Positivo (+): Color rosado constituye indicadora de la presencia de
n acetoína, producto de la fermentación de la glucosa.
Negativo(-): Amarillo. No hay presencia de acetoina
Resultado Positivo: +
Negativo: -

IMVIC. CITRATO
Fundamento El Agar Citrato de Simmons es un medio diferencial utilizado para
el estudio de bacilos Gram negativos, sobre la base de la
utilización del Citrato como una fuente de carbono, y la utilización
de sales de amonio inorgánico como única fuente de nitrógeno.
Estas reacciones metabólicas son dependientes del aporte
oxígeno.
Reacción

Interpretació Resultado positivo: Solamente los microorganismos que pueden

n utilizar el citrato como fuente de carbono presentaran desarrollo.
El medio de cultivo cambiará de verde a azul.
Resultado negativo: no se observará desarrollo ni cambios en el
pH.
Resultado Positivo: +
Negativo: -
 MIO
Fundamento El indol es incoloro, por tanto su presencia se revela al agregar
cinco gotas del reactivo de Ehrlich o de Kovacs, ambos con p-
dimetilaminobenzaldehído. El grupo aldehído de este compuesto
reacciona con el indol, generando un producto de color rojo
fucsia en forma de anillo en la superficie del agar

La descarboxilación es el proceso por el cual las bacterias que

poseen enzimas descarboxilasas específicas atacan los
aminoácidos en su carboxilo terminal para formar una amina o
una diamina y dióxido de carbono

Reactivos Reactivo de Kovacs o Reactivo de Ehrlich

Reacción Ornitina

Interpretació Indol.
n Positivo: Formación de un anillo color rojo fucsia al agregar las
gotas del reactivo Kovacs
Negativo: No hay formación de anillo

Movilidad.
Positivo: Se observa un medio turbio o si hay una línea gruesa
de crecimiento que se expande alrededor de la inoculación inicial
Negativo: Se observa una línea delgada de crecimiento, y todo
alrededor estará sin crecimiento

Ornitina
Positivo: color amarillo o con fondo amarillo
Negativo: medio completamente morado
Resultados Movilidad (+)
Indol (-)
Descarboxilación de ornitina (+)
 SIM
Fundamento La proteólisis de las proteínas produce aminoácidos individuales;
ciertas bacterias heterotróficas pueden liberar enzimáticamente
el azufre de los diversos aminoácidos azufrados (-SH),
produciendo H2S gaseoso. Peptona, cistina, metionina y
tiosulfato son las principales fuentes de azufre, pero diferentes
especies usan diferentes compuestos o aminoácidos azufrados
para producir H2S. Las enzimas responsables de esta actividad
son la cisteína desulfhidrasa y el tiosulfato reductasa. Existen
diferentes medios que contienen plomo o hierro para detectar la
producción de H2S. Cuando el H2S (gas incoloro) entra en
contacto con estos metales, forma un precipitado negro insoluble
(sulfuro de plomo o hierro)
Reactivos Reactivo de Kovacs o Reactivo de Ehrlich.
Reacción

Interpretació Movilidad
n Positivo: Presencia de turbidez más allá de la línea de siembra
Negativo: Crecimiento en la línea de siembra
Indol
Positivo: Color rojo
Negativo: Incoloro/anarillento
SH2
Positivo: Ennegrecimiento a lo largo de la línea de siembra o en
todo el medio
Negativo: Sin cambio de color
Resultados Movilidad: +
Indol: -
SH2:+
 UREA DE CHRISTENSEN
Fundamento Las bacterias hidrolizan la urea por medio de la enzima ureasa,
liberan amoniaco y dióxido de carbono. Estos productos
alcalinizan el medio haciendo virar el indicador rojo de fenol de
color amarillo al rojo.
Interpretació Hidrolizan urea: Color rosado-rojizo
n No hidrolizan urea: Color amarillo
Resultados Positivo, hidroliza urea: Color rosado-rojizo

AGAR DE FENILALANINA
Fundamento El aminoácido fenilalanina es sometido a desanimación oxidativa
catalizada por la enzima fenilalanina desaminasa, para producir
ácido fenilpirúvico y amoniaco. La presencia del ácido
fenilpirúvico se demuestra con el agregado de cloruro férrico en
medio acido, con el cual se forma un quelato de color verdoso
entre el ácido fenilpirúvico y los iones Fe3+
Reactivo Cloruro férrico en solución acuosa (FeCl3), al 10%.
Resultado Positivo: +
Interpretació Positivo: Color verde pálido a intenso en el pico de la flauta y en
n el líquido de condensación
Negativo: Sin cambio de color. Permanece amarillo.

IMVIC.
Fundamento
IMVIC.
Fundamento

IMVIC.
Fundamento