ENZIMAS

MSc. MARÍA EUGENIA DORIA

RODRÍGUEZ
 Introducción

• En los diversos compartimientos celulares transcurre

un gran número de reacciones químicas que
proporcionan a la célula energía y los componentes
necesarios para su mantenimiento.

• La vida depende de la existencia de catalizadores

poderosos y específicos
 ENZIMAS

Proteínas que funcionan como

catalizadores biológicos

Ribozimas son moléculas de

RNA que funcionan como
catalizadores biológicos
 Estructura de las enzimas
Varias cadenas peptídicas:
estructura cuaternaria)
Puede estar formada por:

Una cadena peptídica

(estructura terciaria)
 El sitio activo es el sitio unión del sustrato a la enzima y donde
se lleva a cabo la catalisis
Características generales de las enzimas
•No sufren modificación al final de la reacción.

•No cambian la constante de equilibrio de una

reacción química.

•Son muy específicas.

•Aceleran varios ordenes de magnitud mayor con

respecto a la reacción no catalizada.

•Actúan en condiciones moderadas de presión y

temperatura.
 Incrementos de velocidad
producidos por enzimas

Anhidrasa carbónica 107

Carboxipeptidasa A 1011
Fosfoglucomutasa 1012
Ureasa 1014
 Representación de una reacción química:
Ke

A B
Representación de la reacción química catalizada por
una enzima:
S+E  P+E
Ke

S representa el (los) reactante(s)

(llamado sustrato)

P representa el (los)
producto(s)

Reacciones químicas son reversibles,sin embargo las

enzimas pueden catalizar una reacción de manera
reversible o irreversible
Ejemplo de reacción catalizada de manera reversible
por una enzima

LDH

LDH
Ejemplo de reacción catalizada de manera irreversible por una enzima
 Isoenzimas

• Las isoenzimas o isozimas son enzimas que

difieren en la secuencia de aminoácidos, pero que
catalizan la misma reacción química. Estas enzimas
suelen mostrar diferentes parámetros cinéticos , o
propiedades de regulación diferentes.
• Ejemplo: Creatínfosfoquinasa o CPK (M, B).
• Lactato deshidrogenasa ó LDH
• Es una enzima tetramérica que contiene solo dos
subunidades distintas: las designadas H ,
del corazón (miocardio) y las M del músculo.
Muchas enzimas requieren cofactores para su
actividad:
Pueden ser de naturaleza.
•Inorgánica
•Orgánica (coenzimas)
•Coenzimas

•Adenosine Triphosphate (ATP)

• Coenzyme A (CoA)

•Nicotinamide Adenine
•Nicotinamide Adenine
•Dinucleotide (NAD+)
Dinucleotide Phosphate (NADP+) •Flavin Adenine Dinucleotide (FAD)
Enzimas que requieren elementos
inorgánicos
Citocromo oxidasa Fe2+, Fe+,
Catalasa, peroxidasa
Citocromo oxidasa Cu2+
DNA polimerasa
Anhídrasa carbónica Zn2+
Alcohol deshidrogensa
Hexoquinasa Mg2+
Glucosa 6-fosfatasa
Arginasa Mn2+
Piruvato quinasa K+, Mg2+
Ureasa Ni2+
Nitrato reductasa Mo2+
 Términos relacionados con la acción enzimática

• Apoenzima:
Referido solo a la parte proteica de la enzima

• Holoenzima:
Es la proteína unido a una coenzima y/o ión metálico

• Grupo Prostético:
Componente orgánico unido fuertemente (covalentemente) a la
apoenzima. Es frecuente la confusión entre cofactor y grupo
prostético, pero la diferencia radica en la fuerza de su unión a la
enzima
Términos relacionados con la acción enzimática

Cofactor:
Son moléculas orgánicas ó inorgánicas, cuya presencia es
necesaria para que la enzima sea activa.

a) Iones inorgánicos
Fe2+, Mg2+, Mn2+, Zn2+ etc.
b) Complejos orgánicos (Coenzimas)
Vitaminas hidrosolubles
 Nomenclatura

• Nombre Trivial: sufijo –asa (ej. Ureasa, Hexoquinasa)

• Nombre Sistemático: El número de clasificación es

una serie de 4 dígitos que designan la clase,
subclase,sub-subclase y número de orden de la
enzima dentro de la clasificación internacional que va
precedido por las siglas EC
CLASIFICACIÓN DE LAS ENZIMAS
1. Oxido-Reductasas
 1. Oxido-Reductasas

Peroxidasa.- Utilizan como oxidante H2O en lugar de oxígeno.

Ejm NADH Peroxidasa, citocromo oxidasa
NADH+H+ + H2O2 --------- NAD+ + 2H2O

Catalasa.- Transforma dos moléculas de H2O2 en dos moléculas de

agua con desprendimiento de oxígeno.
H2O2 + H2O2 ----------2H2O + O2
 2. Transferasas
Transfieren grupos funcionales de un donante a un aceptor,
estos grupos funcionales pueden ser un carbono, grupos
aldehídos o cetónicos, fosfatos, aminos etc.

a) Aminotransferasas.- Transfieren grupos aminos de un

aminoácido a un alpha ceto ácido.

b) Quinasas.- Transferencia de un grupo fosforilo del ATP a

una molécula sustrato.

c) Glucosiltransferasa.- Transferencia de glucosa activada

(UDP-Glucosa) a la cadena creciente de glucogeno.
2. Transferasas
 3. Hidrolasas
Catalizan reacciones de hidrólisis
 4. Liasas
• Enzimas que remueven o agregan los elementos del agua,
amonio o CO2. Ejm descarboxilasas, deshidratasas etc.
 5. isomerasas
• Catalizan isomerización de varios tipos que incluyen:

a) Epimerasas: Catalizan la inversión a nivel del carbono

asimétrico.

b) Mutasas: Hacen la transferencia intramolecular de un grupo

funcional.

c) Interconversion Aldosa-Cetosa

d) Interconversión de Cis-Trans
5. isomerasas
 6. Ligasas
• Formación de enlaces con ruptura de enlaces de alta energía
(ATP)
 Nomenclature Committee of the
International Union of Biochemistry and Molecular
Biology (NC-IUBMB)

http://www.chem.qmul.ac.uk/iubmb/enzyme/

EC 1 OXIDOREDUCTASE
EC 1.4 Acting on the CH-NH2 group of donors
EC 1.4.1 With NAD+ or NADP+ as acceptor

Examples:

EC 1.4.1.1 alanine dehydrogenase

EC 1.4.1.2 glutamate dehydrogenase
EC 1.4.1.3 glutamate dehydrogenase [NAD(P)+]
EC 1.4.1.4 glutamate dehydrogenase (NADP+)
EC 1.4.1.5 L-amino-acid dehydrogenase
EC 1.4.1.6 deleted, included in EC 1.4.4.1
EC 1.4.1.7 serine 2-dehydrogenase
EC 1.4.1.8 valine dehydrogenase (NADP+)
EC 1.4.1.9 leucine dehydrogenase
.
II.CINÉTICA ENZIMÁTICA

Estudia la velocidad de las reacciones

catalizadas enzimáticamente

Los principios generales de las

reacciones químicas se aplican
también a las reacciones enzimáticas
 Modelo Cinético de
Michaelis - Menten

Desarrollaron la ecuación de la velocidad de

una reacción catalizada por enzima
Factores que afectan la velocidad de
una reacción enzimática

1. Concentración de Enzima
2. Concentración de sustrato
3. pH
4. Temperatura
5. Presencia de Inhibidores
Definición de la velocidad de reacción
2. Concentración de sustrato
Factores que afectan la velocidad de
una reacción enzimática

1. Concentración de Enzima
s
s
¿Por qué determinar Km?

Km es una medida de la afinidad de la enzima por

el sustrato

Km establece un valor aprox. para el valor

intracelular de sustrato

Km es constante para una enzima dada, permite

comparar enzimas de diferentes organismos o
tejidos o entre distintas proteínas

Un cambio en el valor de Km es un modo de

regular la enzima
Ecuación de la velocidad de una reacción enzimática
Plot de Lineweaber-Burk
Tomando las inversas de la ecuación de velocidad, tenemos:
 •Estructura
globular

 Hervir con HCl

 Tripsina
 Temperatura elevada
 pH extremo

•Funcionalidad •Inactiva
3. pH del medio
 3. Efecto del pH del medio

El sitio activo de la enzima esta frecuentemente

compuesto de grupos ionizables que deben estar en
la forma iónica adecuada para mantener la
conformación, unir los sustratos o catalizar la
reacción.
La actividad de la enzima debe ser medida al pH
óptimo
• Enzima pH óptimo
•Pepsina 1.5

•Tripsina 7.7

•Catalasa 7.6

•Arginasa 9.7

•Fumarasa 7.8

•Ribonucleasa 7.8
 4. Temperatura
A medida que aumenta la temperatura por lo
general aumenta la actividad catalitica dentro del
margen de estabilidad de la enzima

• Enzima Temp. Ópt.

• (oC)
•Mamíferos 37

•Bacterias y algas aprox. 100

•Bacterias Árticas aprox. 0

4. Efecto de la Temperatura