• TEMAS:

1. CULTIVOS CONTINUOS Y SINCRÓNICOS

2. CRECIMIENTO Y CONTROL MICROBIANO
3. CONDICIONES ÓTIMAS PARA EL
CRECIMIENTO Y CONTROL
CULTIVOS CONTINUOS Y DISCONTINUOS

CULTIVOS

DISCONTINUO CONTINUO
CLASIFICACION DE CULTIVOS CONTINUOS

CULTIVOS
CONTINUOS

QUIMIOSTATO TURBIDOSTATO
QUIMIOSTATO
 VELOCIDAD DE DILUCIÓN
• VELOCIDAD A LA QUE EL MEDIO FLUYE EN EL RECIPIENTE DE
CULTIVO RESPECTO AL VOLUMEN DEL MISMO ( D ).

• VELOCIDAD DE FLUJO ( F = mL/ h )

• VOLUMEN DEL RECIPIENTE ( V = mL )

• D=f / V
• “D” elevada aumenta la velocidad del crecimiento.

• “D” máx. termina con el cultivo.

• La concentración de nutriente limitante es mayor a

velocidades de dilución elevadas .

• La concentración de nutriente limitante es menor a

velocidades de dilución bajas.
Velocidad dilución y crecimiento microbiano en un
quimiostato. Efectos del cambio en la velocidad de dilución
en un quimiostato.
 TURBIDOSTATO
• Tiene una fotocélula que mide la absorbancia o turbidez .

• La velocidad de un turbidostato es variable.

• No tiene un factor limitante

• Funciona mejor a velocidades elevadas.

 CULTIVO SINCRÓNICO
• Todas la células se encuentran simultáneamente en la misma
fase crecimiento celular.

• Son muy difíciles de mantener .

• Las bacterias del suelo tienen una cierta sincronización y se

comportan relativamente como sincrónicas.
CRECIMIENTO EQUILIBRADO Y
DESEQUILIBRADO
• Crecimiento equilibrado
Shift-up

• Crecimiento desequilibrado
Shift-down
Crecimiento Y Control
Microbiano
 Factores de crecimiento

Microorganismos auto o heterotrófos pueden requerir

pequeñas cantidades de ciertos compuestos orgánicos que
no pueden sintetizar y deben incorporarse en los medios

* bases púricas y pirimídicas ADN, ARN

* aminoácidos esenciales síntesis proteica
* vitaminas coenzimas
 Condiciones para el crecimiento microbiano
agua
Medios de cultivo fuente de energía
fuentes de C, N, otros
Nutrientes elementos
micronutrientes, factores de
Crecimiento crecimiento

temperatura
pH

Condiciones luz
aireación
de cultivo
actividad de agua
potencial redox
 Aislamiento

Aislar: Es separar un tipo de microorganismo a partir de una población

mixta. En habitats naturales, raramente encontramos a los
microorganismos en cultivo puro

Aislamiento directo:se logra directamente a partir de una muestra

cuando el o los microorganismos están en una proporción adecuada.,
se realiza por estrías (agotamiento) con o sin dilución previa de la
muestra (suelo, alimentos), en medio sólido

Aislamiento por enriquecimiento:Cuando el microorganismo que se

desea aislar e identificar se encuentra en baja proporción en la
muestra, se incluye una primera etapa que consiste en sembrar la
muestra en medio líquido. Luego de varios pasajes se aisla por el
método de estrías.
 Cultivo puro
• Las colonias se describen por examen macroscópico en función del tamaño, la
forma, el borde, la elevación, la transparencia y el color. Esto resulta a veces muy
útil en la identificación

• A partir de colonias aisladas en medio de cultivo se realiza un examen

microscópico que debe mostrar células razonablemente semejantes respecto al
Gram y a la morfología.

• Las colonias aisladas deben aislarse nuevamente en medio no selectivo por el

método de estrías. Esto se conoce como reaislamiento.
División celular: fisión binaria

Gemación,
ej.
levaduras
Crecimiento de un microorganismo en medio
de cultivo líquido

1- Fase de latencia
2- Fase exponencial
3- Fase estacionaria
4- Fase de muerte
Crecimiento en un volumen fijo de medio o cultivo cerrado (batch)

Luego de la adición de bacterias al medio líquido fresco se observa la siguiente cinética de

crecimiento

• Fase lag - las células se adaptan al nuevo ambiente, aun no se dividen

• Fase exponencial (log) - velocidad máxima de crecimiento bajo
condiciones particulares, tiempo de generación mínimo
• Fase estacionaria - sin crecimiento neto, vc=0 ó estadísticamente = 0
cuando: vc=vm (vel. crecimiento es igual a la de muerte)
– nutrientes limitantes, pero suficientes para mantener actividad
– acumulación de desechos, inhibición del crecimiento
• Fase de muerte - velocidad de muerte celular > velocidad de división
celular
Control De Microorganismos
 HUMEDO AUTOCLAVES

Por calor
.-ESTUFAS
SECO .-HORNO PASTEUR
.-FLAMEADO
FACTORES, REQUERIMIENTOS
Y CONDICIONES ÓPTIMAS
PARA EL CRECIMIENTO
MICROBIANO Y SU CONTROL
 FACTORES PARA EL CRECIMIENTO
MICROBIANO ÓPTIMO

• Permite controlar el crecimiento.

• Permite conocer la distribución
ecológica de los microorganismos.
 Factores

Aumento de la concentración osmótica bacteriana

1.
SOLUTOS Y
ACTIVIDAD DEL
AGUA
Síntesis y captación de Colina. Bateína, Prolina, ácido Glutámico, y otros
aminoácidos
La cantidad de agua disponibles para los
microorganismos se reduce por interacciones
con moléculas de soluto y adsorción.

ACTIVIDAD DEL AGUA (aw)

aw= P sol/P agua
 La capacidad de adaptarse de los
microorganismos a una actividad de agua baja
es enorme:
A ESTOS M.O. SE LES
DENOMINA:
OSMOTOLERANTES

Staphylococus
aureus
Los HALÓFILOS requieren niveles elevados de
NaCl para crecer; pueden requerir condiciones
salinas de hasta 6.2 M.

HALOBACTERIUM
 2. pH
• Crecimiento microbiano entre 0
ACIDÓFILOS a 5.5

• Crecimiento entre 5.5 a 8.0

NEUTRÓFILOS

• Crecimiento microbiano entre 8.5

ALCALÓFILOS y 11.5
• Ejemplo:

Las cianydium Caldarium y Salfolobus

acidcaldarius
Habitan comúnmente en aguas termales; ambas
crecen a un pH de 1 a 3.
 3. TEMPERATURA
Es un factor importante para el
crecimiento, gracias a que la
mayoría de los organismos son
poiquilotérmicos

Se da debido a la
sensibilidad de las
reacciones catalizadas por
enzimas.
EN CONDICIONES DE BAJA TEMPERATURA, UN
AUMENTO EN LA TEMPERATURA ELEVA LA
VELOCIDAD DE CRECIMIENTO YA QUE LA
REACCIÓN CATALIZADA POR ENZIMAS SE
INCREMENTARÁ 10 °C
 Óptima
Máxim
Mínima
a

Temperaturas
Cardinales
• El crecimiento microbiano óptimo va de –
20°C a 100°C.
• Existen bacterias resistentes a rangos de
temperatura largos y cortos:

ESTENOTÉRMICO EURITÉRMICO
(Neisseria (Enterococcus
gonorrhoeae) faecalis)
 CATEGORÍAS DE ACUERDO A LA
TEMPERATURA

PSICRÓFILOS 0°c-20°c 15 °c

PSICRÓFILOS 20°c-
FACULTATIVOS 0°c-35°c
25°c

MESÓFILOS
15°c- 20°c-
45°c 45°c
 45°c-
TERMÓFILOS 55 °c
65°c

55°c-
HIPERTERMÓFILOS 80 °c
113°c
 4. OXÍGENO
• AEROBIOS
• ANAEROBIOS
• AEROBIOS OBLIGADOS
• ANAEROBIOS FACULTATIVOS
• ANAEROBIOS AEROTOLERANTES
• ANAEROBIOS ESTRICTOS
• MICROAERÓFILOS
SISTEMA ANAEROBIO GAS-PACK
 5. PRESIÓN
• Existen bacterias capaces de sobrevivir a
presiones muy elevadas: 600 1100 atm y a
temperaturas de 2 a 3 °C.

BAROTOLERANTES
 6. RADIACIÓN
• Altos niveles de radiación iónica (rayos X y
gamma) pueden provocar la muerte de
microorganismos o inhibir su crecimiento.
• Existen algunas bacterias y endosporas que
resisten a este tipo de radiación de alta
energía:
• Ejemplo:
Deinococcus radiodurans
FIN DE LA EXP.