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UMSNH

ESCUELA DE QUIMICOFARMACOBIOLOGÍA

MICROBIOLOGÍA
= CRECIMIENTOIY MUERTE DE
MICROORGANISMOS =

CABALLERO PRADO CINDY JOANNA

SECCIÓN 01 SEMESTRE 5TO

TEMARIO
Concepto y medida de
crecimiento
Crecimiento exponencial
Curva de crecimiento
Conservación de células en fase
exponencial
Crecimiento sincronizado
Definición y medida de muerte
Agentes antimicrobianos y
mecanismos de acción

. INTRODUCCIÓN • Durante el desarrollo del tema de crecimiento y muerte de microorganismos. por ello es importante comprenderlas ya que nos ayudan a determinar su viabilidad y muerte. desarrollo y muerte de un microorganismo. podrá diferenciar las múltiples etapas de vida que presentan los microorganismos. las cuales varían en su tiempo de generación según el microorganismo estudiado. el alumno será capaz de comprender y distinguir los conceptos de crecimiento.

• Podrá entender la importancia del crecimiento sincronizado de un microorganismo. donde se mantiene a los microorganismos en una misma fase de su desarrollo. . de igual manera aprenderá métodos matemáticos para la interpretación del crecimiento y la muerte de poblaciones microbianas. así como la utilidad de los diferentes agentes antimicrobianos y su sitios de acción en los microorganismos. utilizado en las diversas áreas de producción industrial.

. Conocer los principios generales del crecimiento microbiano  Describir los ciclos de crecimiento de las poblaciones microbianas  Consideraremos los medios disponibles para medir el crecimiento  Conocer instrumentos especiales para la medición de los m.o.

¿QUÉ ? QUÉ ES EL CRECIMIENTO Se define como: El Incremento ordenado de todos los constituyentes celulares. El crecimiento ocasiona un aumento del número de células cuando los microorganismos se duplican. .

PROCESOS DE DUPLICACIÓN

•G E M A C I Ó N
•F I S I Ó N B I N A R I A

GEMACIÓN
Es un sistema de duplicación de
organismos unicelulares donde
por evaginación se forma una
yema que recibe uno de los
núcleos mitóticos y una porción
de citoplasma. Uno de los
organismos formados es de
menor tamaño que el otro.

FISIÓN BINARIA
Los organismos celulares más simples se reproducen por un proceso conocido como
fisión o escisión.
La célula madre se fragmenta en dos o más células hijas, perdiendo su identidad original.

• transversal (se produce a lo ancho del organismo)
• longitudinal (a lo largo del organismo)

a) (CORTE TRANSVERSAL) ANTES DE QUE SE HAYA COPIADO SU DNA b) LA REPLICACIÒN COMIENZA Y SE REALIZA A LO LARGO DE LA MOLÉCULA DE DNA c) LA COPIA DE DNA SE UNE A UN PUNTO CERCANO AL PUNTO DE UNIÓN DE LA MOLÉCULA DE DNA d) EL CRECIMIENTO DE LA MEMBRANA CELULAR ENTRE LOS DOS PUNTOS DE UNIÓN Y SE SEPARAN LAS DOS MOLÉCULAS DE DNA e) EN LA ZONA CENTRAL DE LA CÉLULA COMIENZA A CRECER NUEVO MATERIAL DE MEMBRANA Y PARED f) LA MEMBRANA Y LA PARED DEPOSITADAS EN LA ZONA CENTRAL DIVIDEN EL CITOPLASMA EN DOS .

CRECIMIENTO INDIVIDUAL POBLACIONAL incremento en el número de Es el incremento en células como una consecuencia del el tamaño y peso crecimiento y división celular. c) Tiempo de a) Tasa de crecimiento b) Generación generación .

•No cambia hasta que se agotan los nutrientes o se acumulan productos metabólicos tóxicos. TIEMPO DE GENERACIÓN También llamado tiempo de duplicación. •Aproximadamente el mismo para las células de una determinada población. dividirse y dar lugar a dos nuevas células. duplicación es el periodo que requieren las células para: •Crecer. .

en un medio de laboratorio rico.EJEMPLO: TIEMPO DE DUPLICACIÓN DE E. COLI Alrededor de 18 min. Tracto intestinal de los vertebrados (los nutrientes son menos abundantes) tiempo de duplicación es de 12 horas TD ELEVADO TD BAJO CRECIMIENTO CRECIMIENTO LENTO RAPIDO El valor del tiempo de duplicación nos indica la rapidez con que esta creciendo la población. . pero la relación es inversa.

la tasa de crecimiento de un cultivo de E. coli Tiempo de Duplicación de 18 minutos Será de 3.3 (60/18) generaciones por hora. Así. . TASA DE CRECIMIENTO Tiempo de duplicación por hora • Elevada para las poblaciones de crecimiento rápido y baja para las de crecimiento lento.

FACTORES QUE INFLUYEN EN EL CRECIMIENTO O2 E S Capacidad R S T O N O C O 2 metabólica A C R F TE EX pH Aw ES R S O T NO C R FA TE IN T° .

éstospuedenverseafectadosporcambiosenla concentraciónosmóticadel medio. FACTORES EXTERNOS SOLUTOS Y Aw Lamembranaplasmáticaselectivamentepermeableseparaalosmodesu ambiente. porello. algasyhongosposeenunaparedcelularrígida. . Lamayoríadelasbacterias.

Estos solutos son compatibles •Metabolismo •El crecimiento En concentraciones intracelulares elevadas .Solutos compatibles. Una molécula que se acumula en el citoplasma para ajustar la aw y que no inhibe los procesos bioquímicos.

glicerol y manitol. también participan. ácido glutámico y otros aa. prolina. las algas y los hongos utilizan sacarosa y alcoholes de azúcares. cantidades elevadas de ion K. EJEMPLO La mayoría de las bacterias eleva su conc. Por los mismos motivos. en cierto grado. Osmótica interna. arabitol. por ejemplo. betaína. NO ALTERAN LA ESTRUCTURA Y FUNCIÓN DE LAS ENZIMAS . mediante la síntesis o captación de colina.

. arrugándose el citoplasma y desprendiéndose la membrana plasmática de la pared celular. **PLASMOLISIS** proceso por el cual una célula pierde su contenido de agua. ¿QUE PASA? Deshidrata la célula y puede dañar la membrana plasmática. La célula se inactiva metabólicamente y deja de CRECER. Consecuencia.

La cantidad de agua disponible por los mo se puede reducir: Mediante interacciones con moléculas de soluto (Efecto osmótico). Por tal motivo es de gran utilidad poder expresar cuantitativamente el º de disponibilidad del agua. O por la adsorción a las superficies de sólidos (Efecto matricial). .

85 Salami Staphylococcus Saccharomyces rouxii (en sal) 0.75 Lagos salados Halobacterium Aspergillus Dunaliella Pescado salado Actinospora 0. frutos secos 0. Mucor Bacillus Rhizopus Levaduras ascomicetales 0. carne.60 Chocolate Sacchamyces rouxii (en azúcares) Miel Leche deshidratada Xeromyces bisporus .80 Conservas Penicillum 0. verduras. Fusarium.95 pan La mayoría de los bacilos Basidiomycetes La mayoría grampositivos 0. dulces.90 Jamón La mayoría de los cocos.70 Cereales. LÍMITES INFERIORES APROXIMADOS DE aw PARA EL CRECIMIENTO MICROBIANO Actividad Ambiente Bacterias Hongos Algas Del agua 1.00-agua pura Sangre La mayoría de las gramnegativas no halófilas Plantas marchitas. fruta Agua de mar 0.

. . pH El pH es una medida de la actividad de los iones de hidrógeno de una solución. que se define como el logaritmo negativo de la pH=De conc.log H = + iones delog (1/ H ) + hidrógeno (expresada en moles).

5-11.5-8 ALCALÓFILOS ENTRE 8.5 NEUTRÓFILOS entre 5. entre 0-5.5 ALCALÓFILOS EXTREMOS ENTRE 10 O MÁS . Efecto de pH en el crecimiento mo Cada especie tiene un rango definido de pH para su crecimiento y un pH óptimo de ACIDÓFILOS crecimiento.

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TEMPERATURA La temperatura ambiental afecta intensamente a los mo TEMPERATURAS CARDINALES FACTOR QUE MÁS mínima INFLUYE “LA SENSIBILIDAD DE LAS REACCIONES Óptima CATALIZADAS POR ENZIMAS” máxima Las temperaturas cardinales varían ampliamente entre .

Aunque la forma de la curva de dependencia de la temperatura puede variar. dependen de otros factores ambientales. la óptima está siempre más próxima a la máxima que a la mínima. cardinales no son invariables. Las tem. como: • pH • nutrientes disponibles .

aa. A no ser que se añadan metales. vitaminas y lípidos .EJEMPLO Crithidia fasciculata Protozoo flagelado Habita en el intestino de los mosquitos Crecerá en un medio simple entre 22 y 27ºC SIN EMBARGO No puede cultivarse a temperaturas de entre 33 y 34ºC.

La temperatura de crecimiento de un mo determinado abarca normalmente un margen de 30º. óptimas se encuentran normalmente en un rango de 0ºC hasta un valor tan alto como 75ºC El crecimiento de mo se produce en un rango de -20ºC hasta más de 100ºC. Temp. .

• HIPERTERMÓFILOS mo que tienen una temperatura óptima de crecimiento de 80ºC o mayor. aunque su temperatura óptima sea 20 a 30ºC. • MESÓFILOS organismos que crecen a temperaturas entre 20 y 45ºC • TERMÓFILOS pueden crecer a temperaturas de 55ºC o superiores. . GLOSARIO • ESTENOTÉRMICOS especies que tienen un rango pequeño de temperaturas. • EURITÉRMICOS crecen en un amplio rango de temperaturas • PSICRÓFILOS organismos con temperatura optima de crecimiento de 15ºC o inferior y una máxima inferior a 20ºC. La temperatura mínima es normalmente de 45ºC y la óptima de 55 a 65ºC. • PSICROTROFOS Crecen a 0ºC.

.

es decir. ANAEROBIO La mayoría de los organismos superiores dependen totalmente de O2 atmosférico para su crecimiento. son AEROBIOS OBLIGADOS. OBLIGADOS . CONCENTRACIÓN DEL OXÍGENO Un organismo que puede crecer en presencia de O2 atmosférico es AEROBIO. es ANAEROBIO. AEROBIO mientras que otro que puede crecer en ausencia.

AEROTOLERANTES como Enterococcus faecalis pueden crecer bien tanto en su presencia como en su ausencia. • Los ANAEROBIOS AEROTOLERANTES.• Los ANAEROBIOS FACULTATIVOS no precisan O2 para crecer. . pero lo hacen mejor en su presencia.

. MICROAERÓFILOS que son dañados por el nivel de oxígeno atmosférico (20%). sus niveles de crecimiento son del 2 al 10%. como Campylobacter. ej. Methanococcus) no toleran en absoluto el O2 y mueren en su presencia. denominados MICROAERÓFILOS. Los ANAEROBIOS ESTRICTOS u OBLIGADOS ( p. Existen unos pocos mo aerobios. Clostridium pasteurianum. Fusobacterium.Bacteroides. .

.

diferentes con el O2 se deben a varios factores: La inactivación de las proteínas El efecto de los derivados tóxicos de O2 .

y se reduce fácilmente porque sus e. Las flavoproteínas. REDUCCIÓN DEL OXÍGENO El O2 acepta e. .de los orbitales externos no están apareados. otros constituyentes celulares y la radiación promueven la reducción del O2.

O2-. + e.+ H+ H2O + OH.+ 2H+ H2O2 peróxido de hidrógeno H2O2 + e. radical hidroxilo Son extremadamente tóxicos y tienen un gran poder de oxidación. . radical superóxido O2-. El resultado suele ser una combinación de los productos de reacción del oxígeno: O2 + e.

.¿CÓMO SE PROTEGEN LOS MO? Muchos mo poseen ENZIMAS que ofrecen protección frente a productos tóxicos del O2.

+ 2H+ O2 + H2 O Superóxido dismutasa 2 2H2O2 catalasa 2H2O + O2 . 2O2-.Los aerobios obligados y los anaerobios facultativos contienen normalmente las enzimas superóxido dismutasa y catalasa. que catalizan la destrucción de los radicales superóxido y peróxido de hidrógeno. respectivamente.

aerotolerante. utiliza iones de Mn. pero casi siempre tienen superóxido dismutasa. .• Los mo aerotolerantes pueden carecer de catalasa. en lugar de superóxido dismutasa. EJEMPLO: Lactobacillus plantarum. para eliminar el radical superóxido.

por ello. . • Todos los anaerobios estrictos carecen de ambas enzimas o las poseen en concentraciones muy bajas y. NO pueden tolerar el O2.

RELACIÓN DE LAS BACTERIAS CON EL OXÍGENO .

MEDIDA DEL CRECIMIENTO MICROBIANO CONTEO DE RECUENTO Medida CÉLULAS VIABLES DIRECTO de la masa de células Medida Medida Medida del de de número de parámet activida ros d partículas bioquími metaból cos ica .

Se usan unos portaobjetos especiales graduado con 25 cuadrados cuyo volumen y área es conocido denominados cámaras de Petroff-Hausser. . -No es muy sensible. .No distinguen células vivas de muertas. se necesitan al menos 106 bact/ml para que sean observadas al microscopio. LIMITACIONES: -Es muy tedioso. -. no es práctico para un gran número de muestras. RECUENTO DIRECTO -Consiste en la observación al microscopio de volúmenes muy pequeños de suspensiones de bacterias.

La rejilla se encuentra en el centro del portaobjetos. •Vista superior de la cámara. •Vista aumentada de la . mostrando el cubreobjetos y el espacio entre ambos. que ocupa una suspensión bacteriana. CAMARA DE RECUENTO DE PETROFF-HAUSSER • Imagen lateral de la cámara.

Embudo 2. SISTEMA DE FILTRO DE MEMBRANA MILLIPORE • Partes del conjunto del filtro. Filtro de membrana 3. Recipiente • Sistema completo de filtración. . Base y soporte del filtro 4. Algunos de los componentes más importantes son: 1.

b) Medio para coliformes fecales que forman colonias azules. d) Agar de extracto de malta para cultivar levaduras y mohos.a) Medio estándar de nutrientes para un recuento bacteriano total. Un indicador colorea las colonias de rojo para facilitar el recuento. c) Agar m-Endo para detectar E. coli y otros coliformes que producen colonias de color verde brillante. .

MEDIDA DE LA MASA DE CÉLULAS midiendo la turbidez células en suspensión se puede estimar dispersan la luz causando la masa la turbidez del cultivo MÁS FÁCIL DE USAR La turbidez depende de la masa en suspensión .

Debe prepararse curva estándar para cada organismo estudiado. El peso seco es por lo general el 20-25 % del peso húmedo. TURBIDIMETRÍA A través de un colorímetro o espectrofotómetro midiendo la turbidez en unidades de absorbancia. .PESO SECO Se determina el peso seco o peso húmedo de una alícuota de la población separada por centrifugación.

expresada en unidades de absorbancia.Mide la turbidez. es decir. la cantidad de luz que transmite un cultivo. .

Para que la medida sea correcta desde el punto de vista estadístico. ¿ en que consiste ? consiste en sembrar un volumen determinado de cultivo o muestra sobre el medio de cultivo sólido adecuado para estimar el número de viables contando el número de colonias que se forman. es necesario contar más de 300 células. .CONTEO DE CÉLULAS VIABLES Una célula viable es definida como aquélla que es capaz de dividirse y formar una colonia en el medio de cultivo.

El conteo en placas •Método de vaciado en placa Siembra por extensión Siembra por vertido en placa . contando el número de colonias uno puede calcular el número de células viables en la muestra. • Diseminación en placa (siembra en placa por extensión) Se asume que cada colonia surgió de una simple célula.

- .Método de vaciado en placa.

.

.

Estos sistemas no nos indican si las partículas corresponden a células vivas o . Medida del número de partículas usando contadores electrónicos de partículas.

D E ADN ID A S E D RO M E T S Á M C O A R M I P QUÍ BI O PROTEÍNAS ARN PEPTIDOGLICANO .

para medir indirectamente la cantidad de células microbianas: •La tasa de formación de productos metabólicos •La tasa de utilización de un substrato •La tasa de reducción . Medida de actividad metabólica La actividad metabólica puede utilizarse. mediante varios procedimientos.

.

° CRECIMIENTO EXPONENCIAL ° .

expo ¿ durante cada tiempo de ? Que significa duplicación. r io d o de t e u n pe n Dura n l i c a c i ó d e d up tiemp o p o b l a ción t e . el número de células de la población se INCREMENTA en un factor de . u n a ra on s t an n c u e n t c a s ee i a n microb i m i e n to en crec n e n c i al.

.Tiempo (hr) Número total de células 0 1 0.5 8 2 16 2. . . 10 1048576 .5 2 1 4 1.5 512 5 1024 5.5 2048 6 4096 .5 128 4 256 4.5 32 3 64 3.

. el número de células se doblan cada cierto período de tiempo y se le conoce como CRECIMIENTO EXPONENCIAL.En este ejemplo se incremento la población.

1000 Logarítmica Número de Número de células células (escala 500 (escala aritmética) logarítmica) Aritmética 100 0 1 2 3 4 5 6 TIEMPO (Hr) .

exponencialmente . • La escala logarítmica (base 10) es un inmediato indicador de que las células están creciendo exponencialmente. • No podemos obtener mucha información sobre la velocidad de crecimiento a partir de la curva aritmética.

16 células (24). y dicho exponente es el número de generaciones que han transcurrido desde que la población comenzó a aumentar. ocho células (23). una población que comienza como una célula (20). luego a cuatro células (22). y así sucesivamente.el número total de células es igual a dos elevado a un exponente. se incrementa a dos células (21). Así. .

o min. .La fórmula general es: N = N0 2 n Donde: • N número final de células • N0 número inicial de células • n número de generaciones • g tiempo de generación = t/n t= hrs.

301 .log N0 = n log 2 n=Log N . Para expresar la ecuación N=N02n en términos de n son necesarias las siguientes transformaciones: N=N02n Log N= log N0 + n log 2 Log N .log N 0 = Log N .log N 0 log 2 0.

301 0. EJEMPLO: N=10 .69 n= = 0.301 n= . N0 = 5*10 8 7 y t=2 log 108 – log (5*107) 8 – 7.

el tiempo 6*107 n=1 de generación g = t/n g=t/n= 2hr = 2/1 = 2 hrs. Células/m l 1*108 t=2 por lo tanto. como Tiempo (hr) pendiente 0. 4*107 el tiempo de 3*107 generación g puede 2*107 calcularse también de la pendiente de una 1*107 2 hr grafica semilogarítmica 0 1 2 3 4 5 de crecimiento exponencial. se puede calcular g para diferentes microorganismos exponencialmente bajo diferentes condiciones de crecimiento. .301/g con el conocimiento de n y t.

D E V A T U R I E N C IM RE C C O .

Si analizamos el crecimiento microbiano en el tiempo. Fases de Crecimiento Fase de Latencia Fase exponencial o Fase Lag log Fase Fase estacionaria de muerte . éste describe una típica curva de crecimiento que puede ser dividida en fases.

La división celular no se produce inmediatamente No hay incremento neto en la masa La célula está sintetizando nuevos componentes . normalmente no se produce un aumento inmediato del número de células o de masa. A) FASE LAG O DE LATENCIA Cuando se introducen mo en un medio de cultivo fresco.

. • Puede ser bastante larga si el inóculo procede de un inóculo viejo o de uno que haya sido refrigerado.• La duración varía considerablemente según la condición de los mo y la naturaleza del medio.

B) FASE EXPONENCIAL O LOG mo crecen y se dividen hasta el nivel máximo posible. química y fisiológicamente. . el tipo de medio y las condiciones en que crecen. La población es más uniforme. la velocidad de crecimiento es constante c/célula se divide y duplica en número de intervalos regulares. en función de su potencial genético. Se utilizan normalmente en estudios bioquímicos y fisiológicos.

T°. 30 min. composición del medio de cultivo. afectan a la velocidad de crecimiento exponencial así como las características del microorganismo. . Por ejemplo: • Salmonella typhi • Mycobacterium crece muy tuberculosis crece rápidamente en muy lentamente. La velocidad de crecimiento exponencial varía mucho de un organismo a otro. con un tiempo duplicaciones por de generación de 20 – día. Las condiciones ambientales. con sólo una o dos cultivo.

C) FASE ESTACIONARIA El crecimiento de la población cesa y la curva de crecimiento se vuelve horizontal. El tamaño final de la población depende: Disponibilidad de nutrientes y otros factores El tipo de mo que se cultive El número total de mo viables permanece constante El equilibrio entre la división y la muerte de las células .

POBLACIONES MICROBIANAS EN FASE ESTACIONARIA •Limitación de nutrientes EJEMPLO: Los mo AEROBIOS están limitados a menudo por la disponibilidad de O2. •Acumulación de residuos tóxicos .

. Los cultivos de esté mo pueden también entrar en fase estacionaria debido a la reducción de suministro de azúcar. Estreptococos puede producir tanto ácido láctico y otros ácidos orgánicos a partir de la fermentación de azúcares que acidifican su medio.EJEMPLO: Los mo ANAEROBIOS son limitados en su crecimiento por este factor.

D) FASE DE MUERTE Cambios ambientales perjudiciales. MUERTE . originan la disminución del número de células viables. hecho que caracteriza la FASE DE MUERTE. como la privación de nutrientes y acumulación de residuos tóxicos.

es normalmente logarítmica (es decir. una cantidad constante de células muere c/hora).• La muerte de una población microbiana. . al igual que su crecimiento durante la fase exponencial.

En algunos casos. . dando lugar a una disminución del conteo de viabilidad. la muerte se acompaña por lisis celular.

La cepa de Lactobacillus casei ha demostrado
tener efecto sobre los problemas
gastrointestinales de niños de corta edad,
demostrando la disminución de la presencia y
frecuencia de diarrea, además de parásitos
intestinales patógenos como la Giardia lamblia
sobre la flora intestinal.

Esto se logró hallando una concentración celular
mediante bioensayos de laboratorio, a
determinados periodos de tiempo y con
características semejantes, por duplicado para
optimizar cada uno de los procesos.

Se realizó a nivel de laboratorio, mediante
recuentos en cámara de Newbauer,
realizando esto en tratamiento por
duplicado de lo cual se obtuvieron los
resultados de fermentar la bebida por 4
horas a una temperatura de 40 °C y sin
agitación.( Propagación de células del
Lactobacillus casei a escala de
laboratorio para la elaboración de una
bebida multifuncional probiótica, con el
fin de evaluarla en el tratamiento y
prevención de enfermedades
gastrointestinales.)

Bioensayo para estudiar el comportamiento del inóculo de 3 y 2
horas de incubación, sin aplicar agitación.

BIOCONVERSIÓN ESCALA DE LABORATORIO (2 L)

Acidez inicial: 19 °D Inóculo: 3%,
Temperatura empleada: 40 °C. r.p.m. No se
Recuento del inóculo: presenta
Volumen del inóculo: 1,0 – 2,0 * 109 cell / ml
Volumen de trabajo: 60 ml.
Tiempo de proceso: 2000 ml.
Tiempo de incubación 6 horas
del
inóculo: 3 y 2 horas.

Resultados del crecimiento celular para el inóculo de 3 y 2 horas de incubación. sin aplicar agitación .

Resultados del crecimiento celular para el inóculo de 3 y 2 horas de incubación sin aplicar agitación . Gráfico .

por lo tanto cuando las bacterias tienen 2 horas de haber sido cultivadas es cuando se da el mayor consumo de nutrientes que les permite incrementar su velocidad de crecimiento para infectar al objetivo. . • LA FASE EXPONENCIAL dura 2 horas.•LA FASE LAG O DE LATENCIA es relativamente larga (1 hora) si se compara con organismos que se reproducen en sólo 20 o 30 minutos.

•EN LA FASE ESTACIONARIA ya no hay ni multiplicación ni infección. .

CONSERVACIÓ N DE CÉLULAS EN FASE EXPONENCIAL .

SISTEMA DE CULTIVO CONTINUO Es posible cultivar mo en un sistema abierto • Se mantengan las condiciones ambientales constantes a través de un suministro continuo de nutrientes y de la retirada de los residuos. .

Mayoritariamente se utilizan dos clases de cultivo continuo: .

.

• Bomba peristáltica •Un reservorio •Un recipiente de cultivo .

•El cultivo crece lo suficientemente rápido para reemplazar las células que se pierden a través del sistema de desagüe. .En estas condiciones: •El número de células en el vaso de cultivo no cambia.

• D= velocidad de dilución • f= velocidad de reflujo (mL/h) • V= volumen del recipiente (mL) POR EJEMPLO si f es 30 mL/h y V 100 mL.30 h-1 . la velocidad de dilución será 0. .

.

. aunque los mo son su centro de atención.USOS TRADICIONALES DE LOS MO El término Biotecnología se aplica a todos los usos de los organismos con fines prácticos.

. • Quesos y otros derivados lácteos Con excepción de algunos estreptococos. láctico son inocuas para la especie humana y sus productos metabólicos tienen un sabor agradable. • col fermentada • Ensilados BACTERIAS DEL ÁCIDO • Aceitunas de LÁCTICO mesa Fermentan los azúcares. las bacterias del a.

. produciendo CO2 y etanol Se utilizan cepas de Saccharomyces Los vinos de Sauternes y otros vinos dulces se obtienen: • a partir de uvas infectadas por el hongo Botrytis cinerea. LEVADURAS Fermentan los azúcares.

SACARIFICACIÓN GLUCOSA I DÓN M AL GRANO DE CEREAL . LA CERVEZA Y EL WISKY Se elaboran por fermentación de cereal Saccharomyces carlsbergensis y Scerevisie son la levaduras más utilizadas.

acético y agua PAN FERMENTADO: Se elaboró inicialmente utilizando la levadura de la cerveza. un subproducto de la industria de obtención de la cerveza. . Después utilizan Acetobacter spp para oxidar el etanol de forma incompleta hasta a.VINAGRE: La levadura Saccharomyces cerevisiae. en la actualidad se utilizan cepas seleccionadas de la levadura Saccharomyces cerevisiae para la panificación. cerevisiae fermentan el azúcar del zumo de frutas hasta etanol.

thuringiensis se producen de manera comercial como bioinsecticida denominado Bt. forman cuerpos paraesporales (cristales de proteínas). popilliae producen Bp. que son letales para los insectos. para controlar las orugas y otros insectos. Algunas especies de Bacillus son patógenas de insectos. Las endosporas de B. . LOS MO COMO INSECTICIDAS 1. que matan los escarabajos. Las endosporas de B.

El protozoo Nosema locustae se usa como cebo para matar saltamontes y langostas. . A diferencia de los insecticidas químicos.2. los bioinsecticidas son seguros desde un punto de vista ECOLÓGICO. Los baculovirus se están estudiando también como bioinsecticida.

UN QUIMIOSTATO ANDANTE El rumen de la vaca funciona como un quimiostato .

CRECIMIENTO SINCRONIZADO .

. El crecimiento sincronizado puede ser obtenido mediante la alteración del ambiente (temperatura o nutrientes). Crecimiento sincronizado Son poblaciones de células que están en la misma etapa de crecimiento. Se pierde la sincronía debido a que las diferentes poblaciones no envejecen igual.

DEFINICIÓN Y MEDIDA DE MUERTE .

MUERTE • La pérdida irreversible de la capacidad para reproducirse (crecer y dividirse). .

MEDICIÓN DE LA MEDIDA DE MUERTE El número de células que mueren en cada periodo es una función del número de sobrevivientes que se encuentren presentes. de tal manera que la muerte de una población prosigue como un proceso exponencial de acuerdo con la fórmula general: .

. S = So e –kt Donde: So...número de sobrevivientes en cualquier tiempo posterior -k.es el número de sobrevivientes en el tiempo cero S.representa la tasa de mortalidad exponencial cuando la fracciona In (S/So) se grafica como función del tiempo .

MINUTOS •Debe dañarse . CURVA DE UN SOLO GOLPE Log 10 número de células sobrevivientes/ml 6 •Cinética de 5 inactivación. 4 • Es suficiente 3 un solo golpe 2 del agente 1 inactivante 0 para matar a la 10 20 30 40 50 60 célula.

º CURVA DE MULTIGOLP eº •Célula que contiene varias copias del blanco. .

AGENTES ANTIMICROBIAN OS Y SITIOS DE ACCIÓN .

Para que el antibiótico ejerza su acción es necesario que llegue al foco infeccioso. penetre en las bacterias (por difusión o transporte activo) y alcance intracelularmente la concentración necesaria. MODO DE ACCION DE LOS ANTIBIOTICOS Los antibióticos deben su toxicidad selectiva a las diferencias entre las células eucariotas y procariotas. para la célula eucariota o procariota. . Su eficacia tóxica es la consecuencia de su capacidad de inhibir una reacción bioquímica específica y esencial.

En general. cloranfenicol. . o bactericida si tiene un efecto letal. tetraciclinas. Antibióticos bactericidas: betalactámicos. cada grupo de antibióticos actúa preferentemente de una forma u otra. Antibióticos bacteriostáticos: macrólidos. aminoglicósidos.Una vez dentro de la célula el antibiótico puede ser bacteriostático si inhibe la multiplicación de forma reversible. polipeptídicos. polienos.

. 3.Inhibición de la síntesis de la pared celular.Alteración sobre la membrana citoplásmica. 4.Bloqueo de la síntesis ..LOS ANTIBIÓTICOS DE USO EN CLÍNICA PUEDEN EJERCER SU ACCIÓN EN UNA DE LAS SIGUIENTES ESTRUCTURAS O FUNCIONES: 1..Inhibición de la síntesis proteíca. 2..

INHIBICIÓN DE LA SÍNTESIS DE LA PARED CELULAR La pared celular de las bacterias está compuesta por peptidoglicano. no hiperosmótico puesto que las bacterias tienen una gran presión osmótica interna (G+: 20 atmósferas..1. FUNCION • Protege a la célula de su destrucción por estallido en un medio normal. . G-: 5 atmósferas).

Las células, debido a su crecimiento, están
continuamente sintetizando nuevo peptidoglicano
y transportándolo a su sitio adecuado en la pared
celular.

Varios antibióticos reaccionan con una o
varias de las enzimas que se requieren para
completar este proceso originando que la
célula desarrolle puntos frágiles en su
pared celular debido a la síntesis de
peptidoglicano deficiente, lo que origina
que sea osmóticamente frágil.

Los antibióticos que producen este efecto se
consideran bactericidas ya que la célula
debilitada está sujeta a lisis.
La mayor parte de estos antibióticos son activos
frente a células en crecimiento ya que las células
viejas no sintetizan peptidoglicano.

Bloquea el transporte de las subunidades de peptidoglicano a su posición en la pared celular. Inhiben la síntesis de la pared celular en su última fase interfiriendo la transpeptidación. •Algunas penicilinas son menos efectivas frente a bacterias G-excepto penicilinas sintéticas y cefalosporinas. Betalactámicos.Antibióticos que bloquean la síntesis de la pared celular: Bacitracina. .

Alteración sobre la membrana citoplásmica Una célula con la membrana dañada muere invariablemente. insufiencia metabólica lisis .. 2.

permiten la salida de iones K y macromoléculas como los ácidos nucleicos y causan un efecto lítico.PROPIEDAD PRINCIPAL Actuar como barrera de permeabilidad selectiva Las sustancias que alteran esta estructura modifican la permeabilidad. la mayor parte de estos antibióticos son tóxicos para los humanos. DESAFORTUNADAMENTE. .

Antibióticos que alteran la membrana citoplásmica: POLIMIXINAS. hidrofílicos. POLIENOS. . anfotericina B) B son desorganizándolos y aumentando activos frente a hongos su permeabilidad originando formando complejos con los pérdida de metabolitos esteroles de las membranas de esenciales y muerte bacteriana células fúngicas originando poros como resultado final. Interaccionan con los fosfolípidos Los antibióticos poliénicos de las membranas (nistatina. lo que modifica la Las bacterias más susceptibles permeabilidad de la membrana. son las (G-).

3. . Los ribosomas de los eucariotas son diferentes en tamaño y estructura de los ribosomas de los procariotas (80sy 70s) por lo que estos antimicrobianos tienen una acción selectiva frente a bacterias.INHIBICIÓN DE LA SÍNTESIS PROTEICA La mayor parte de los inhibidores de la síntesis proteica reaccionan con el complejo ribosoma-mRNA..

Antibióticos que inhiben la síntesis proteica: •Aminoglicósidos (estreptomicina. gentamicina) •Tetraciclinas •Cloranfenicol •Macrólidos (eritromicina) .

provocando la incorporación de un aminoácido distinto al codificado. distorsiona el codon del locus A. GENTAMICINA) Actúan uniéndose específicamente y de forma irreversible a un receptor proteico de la subunidad 30s de los ribosomas (en el caso de la estreptomicina. el bloqueo de la actividad normal del complejo de iniciación. Esta unión causa. AMINOGLICÓSIDOS (ESTREPTOMICINA. De esta manera se forman proteínas anómalas . con lo que se detiene la síntesis proteica y. la proteína P10).

. TETRACICLINAS • Se unen a la subunidad 30s de los ribosomas bloqueando la fijación del aminoacil-tRNA al locus A parando la síntesis de proteínas.

Cloranfenicol • Se une a la subunidad 50s de los ribosomas impidiendo la transpeptidación. .

. impidiendo la translocación ( paso del peptidil-tRNA del locus A al locus P. previa liberación del tRNA). Macrólidos (eritromicina) • Actúan sobre la subunidad 50s de los ribosomas.

susceptible de romperse en diferentes puntos. .Bloqueo de la síntesis de los ácidos nucléicos La biosíntesis de moléculas de RNA y DNA es una larga serie de reacciones catalizadas por enzimas..4. Los antibióticos que interfieren en la síntesis de ácidos nucléicos actúan bloqueando la síntesis de sus componentes. inhibiendo la replicación o parando la transcripción.

Compuestos que bloquean la síntesis de ácidos nucléicos: • Sulfamidas (quimioterápicos sintéticos) .

Se denominan antimetabolitos debido a que interfieren un proceso metabólico esencial en las bacterias. Las sulfamidas son análogos estructurales de un compuesto metabólico natural. el PABA (ácido para-aminobenzoico) necesario para que las bacterias puedan sintetizar ácido fólico. .

su metabolismo no puede ser inhibido por las sulfamidas. Ya que los humanos carecen de este sistema enzimático especial para incorporar el PABA al ácido fólico. Aunque los humanos requieren ácido fólico en la síntesis de ácidos nucléicos. los humanos no pueden sintetizar ácido fólico. éste es un nutriente esencial (vitamina) que se obtiene exógenamente a través de la dieta. .

““““ •vancomicina Arnycolatopsis orientalis ““““ •viomicina Streptomyces griseus ““““ Antifúngicos •anfotericina B Streptomyces nodosus interfiere con función de membrana •Griseofulvina PeniciIIium griseofulvum daña la membrana celular •lipopéptidos •iturina A BaciIIus subtilis interfiere con función de membrana •Surfactina BaciIIus subtilis ““““ •nistatina Streptomyces noursei daña la membrana celular . Productos metabólicos microbianos que actúan como antibióticos Antibacterianos Producido por Modo de acción •aminoglucósidos •estreptomicina Streptomyces griseus induce síntesis anormal de proteínas •neomicina Streptomyces fradiae ““““ •cefalosporinas Acremonium cephalosporium inhiben síntesis de pared celular •cloranfenicol Streptomyces venezuelae ““““ •eritromicina Saccharopolyspora erythraea interfiere con síntesis de proteínas •lincomicina Streptomyces lincolnensis ““““ •penicilinas Penicillium chrysogenum inhiben síntesis de pared celular •polipéptidos •Polimixinas BaciIIus polymyxa deterioro de membrana celular •bacitracina BaciIIus subtilis inhibe formación de pared celular •rifamicinas Amycolatopsis mediterranei interfiere con síntesis de proteínas •tetraciclinas Streptomyces spp.

Prescott. MacGraw-Hill. Ingraham. Interamericana • Introducción a la Microbiología. BIBLIOGRAFIA • Microbiología médica de Jawetz. • Microbiología . . Lansing M. Editorial Reverté. John L. • Biología de los Microorganismos. Editorial el manual moderno. Melnick y Adelber. Brock.